肌钙蛋白I测试标准操作流程

肌钙蛋白I测试标准操作流程
一实验组成
1 实验仪器及器具：
Mini VIDAS全自动分析仪一台、洁净工作台、低速离心机、20~200µl加样器
2 试剂盒组成：
TNIU试剂条说明：试剂条上有 10 个孔，用贴有标签的铝箔密封
二实验原理
一步免疫夹心法和酶联荧光分析 (ELFA)
仪器将样本滴入包含被碱性磷酸酶标记的抗心肌肌钙蛋白 I 抗体(结合)的孔中。

样本/偶联物被SPR多次吸取，使肌钙蛋白I结合固定在SPR的内壁的免疫球蛋白，偶联形成三明治。

未结合部分在清洗步骤被除去。

然后相继执行两个检测步骤，在每步中，底物 (磷酸4-甲基伞形酮) 循环进出 SPR。

酶将底物水解为荧光物质 (4-甲基伞形酮)，在 450 nm 处可被测
出。

荧光的强度和样本中抗原的浓度成正比，结果由 VIDAS 根据储存在存储器中的对应两检测步骤的两条校准曲线自动计算。

荧光的阈值决定用于每个样本的校准曲线。

三标本
1 检测样本：
200µl血清或血浆 (肝素锂)
2 影响因素
没有发现下列因素对分析有显著影响：
（1）溶血 (在样本中加血色素达 300umol/L 或2178mg/dL)
（2）脂血症(在样本中加入脂类达 30g/L 甘油三酯或同等物)
（3）胆血症(在样本中加入胆红素达 510 umol/L 或29mg/dL)
但无论如何,建议不要使用明显溶血、脂血症、胆血症的样本，如可能的话，重新收集样本。

四操作程序
1 标准曲线条码(MLE)输入
在每使用新一批试剂前，必须用每一试剂盒中都有的MLE卡（规格单）将规格（或工厂主校正曲线数据）输入仪器。

步骤如下：
（1）按Master Lot Menu
（2）放入MLE卡片
（3）按Read Master Lot
（4）按A或B
读取完成后，仪器会自动打印相应信息
2 校准曲线
当新一批试剂开启时，在主批次数据 (MLE卡片)输入后，应用试剂盒中的两种校准液执行校准，然后每 28 天应重新校正一次。

（1）按说明书溶解标准品S1,S2和质控品C1，C2
（2）按Status Screen ，选择A或B
（3）键盘输入位置1，按 S，再键入1，回车（自动跳到下一位置）
（4）按s，键入1，回车
（5）重复以上步骤依次输入S2，S2，C1，C2后，回车
（6）屏幕显示S1，S1，S2，S2，C1，C2
（7）在机器中放入相应试剂条和SPR，并且加入上述校准品
（8）开始测试
测试大约需要20min，结束后机器将自动计算结果并打印
3 标本测试
（1）按Status Screen，选择A或B
（2）键盘输入位置1，按sample id，再键入标本编号，回车（自动跳到下一位置）（3）重复以上步骤
（4）输入完成后，按返回键
（5）屏幕显示已输入的标号
（6）在机器中放入相应试剂条和SPR，并且加入对于待测标本
（7）开始测试
测试大约需要20min，结束后机器将自动计算结果并打印
五结果判读
1 性能
分析范围 0.01 - 30 µ g/l
检测限 < 0.01 µ g/l
第99百分比 < 0.01 µ g/l
批内重复性 0.58 µ g/l 为1.28%，3.55 µ g/l为1.56%
批间重复性 0.58 µ g/l 为3.44%，3.55 µ g/l 为3.44%
2 结果解释
（1）结果 > 0.11 µ g/l (10% CV) ，急性冠状动态综合征（ACS）
（2）结果 > 0.01 且 < 0. 11µg/l ，可指征存在心肌损伤。

因此，推荐对肌钙蛋白水
平> 0.01µg/l 的病人进行监测。

（3）结果 < 0.01µg/l，6小时后用第二次检测确认。