克感利咽口服液评价性质量标准研究

克感利咽口服液评价性质量标准研究
摘要】目的研究制定克感利咽口服液的质量标准，并对其现行质量标准进行评
价性研究。

方法对金银花的薄层色谱鉴别进行修订；采用高效液相法增加连翘
的含量测定。

结果薄层色谱鉴别分离度好，专属性强，方法可行；连翘苷：在
7.42 ～474.88μg之间呈良好的线性关系，回归方程为Y=6.235x＋23.497，
R2=0.9998（n=7），平均回收率为99.90%，RSD=1.95%（n=6）。

结论本方法准确、专属性强，为提高克感利咽口服液质量标准提供合理依据。

【关键词】克感利咽口服液金银花连翘薄层色谱法高效液相法
【中图分类号】R927.11 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）12-0098-02
Evaluative Study on Quality Standard of Keganliyankoufuye
Song Lili（Guangzhou Wanglaoji Pharmaceutical Company Limited , Guangzhou Guangdong 510450 ）
【Abstract】Objective To study and establish a quality standard for Keganliyankoufuye and do evaluative study on the current quality standard. Method We revise the TLC identification method for the Lonierae Japonicae Flos and add a content determination of the Forsythiae Fructus by HPLC method. Results: The TLC identification method is good resolving 、specific and feasible. For the Phillyrin ,it shows a good linear relationship in the range of 7.42～474.88μg and the r egression equation is Y=6.235x＋23.497，R2=0.9998（n=7）,with an average recovery
of 99.90%, RSD=1.95% (n = 6). Conclusion Methods we use are accurate and specific. They can be used to be a reasonable basis for the improvement of the quality standard of Keganliyankoufuye
【Key words】Keganliyankoufuye Lonierae Japonicae Flos Phillyrin TLC HPLC 克感利咽口服液由金银花、连翘等14味药材组成的复方制剂。

具有疏风清热，解毒利咽的功能。

用于感冒属风热外侵，邪热内扰证者，可见：发热、微恶风，
头痛，咽痛，鼻塞流涕，咳嗽痰粘，口渴溲黄等症状。

是我公司独家生产的中药
保护品种之一，1999年正式投产上市。

其质量标准由于当时的检测条件等因素，
曾有文献报道[1-2]对其工艺和检验方法进行改革。

随着现代制剂提取工艺和检验
方法的飞速发展。

本实验将在原质量标准基础上,以化学评价指标,将原质量标准
对比研究,力求科学、客观地评价新质量标准的可行性和适用性。

1 仪器、试剂与药品
Agilent 1200高效液相色谱仪；电子天秤：Sartorius-CPA225D，十万分之一；CMAG REPROSTARⅡ型号成像系统；硅胶G板（青岛海洋化工厂）；乙腈（色谱纯），水（超纯水）；其余试剂均为分析纯；金银花对照药材（中国药品生物制
品检定所，批号：121060-200605供鉴别用），绿原酸和连翘苷对照品（中国药
品生物制品检定所，批号：110753-200413、120908-200613供含量测定用）；克
感利咽口服液和缺金银花、连翘阴性样品（由我公司提供）。

2 实验方法与结果
2.1 金银花薄层色谱鉴别：取本品10ml，加稀盐酸调节pH值为1～2，置水
浴中加热10分钟，加水20ml，搅匀，用乙酸乙酯萃取2次，每次20ml，合并乙
酸乙酯液，用水20ml洗涤，乙酸乙酯液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，通过D-101型大孔吸附树脂柱（内径1.5cm，长度15cm），用水50ml洗脱，弃去水溶液，再用20％乙醇50ml洗脱，收集20％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使
溶解，作为供试品溶液。

同法制成缺金银花的阴性对照溶液。

取金银花对照药材
1g，加水20ml，置水浴中加热回流30分钟，取出，加入稀盐酸1ml，摇匀，放冷，离心取水溶液，自“用乙酸乙酯萃取2次……”起，同法制成对照药材溶液。

另取绿原酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法 (《中国药典》一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述四种溶液各6μl，分别条带状点样于同一硅胶H薄层板上，以醋酸丁酯－甲酸－水（7∶2.5∶2.5）的上层溶
液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液，热风吹至斑点清晰。

供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性无
干扰。

并对修订前金银花薄层色谱图与修订后的薄层色谱图对比。

结果见附图
1～2。

图1：修订前金银花薄层色谱图图2：修订后金银花薄层色谱图
1 2 3 4 6 1 2 3 4 5 6
1、2、3、克感利咽口服液（批号：100901、100902、100903）
4、金银花药材对照
5、绿原酸对照品
6、阴性对照溶液
2.2 连翘含量测定
2.2.1 色谱条件及系统适应性试验：色谱柱：Diamonsil-C18（250mm×4.6mm×5μm），流
动相；乙腈—水(25∶75)，流速：1ml/min，柱温：35℃，检测波长为300nm。

理论板数以连
翘苷计算应不低于3000。

连翘苷与相邻峰之间的分离度均＞1.5[3]。

对照品、样品溶液和阴
性对照溶液色谱图见图3。

图3：从上至下为：对照品溶液、样品溶液和阴性对照溶液色谱图
2.2.2 检测波长的确定：Agilent1200高效液相色谱仪，DAD检测器，对连翘苷对照溶液
进行光谱扫描，波长范围为200～400nm，结果连翘苷在278nm处有最大吸收，故确定连翘
苷测定波长为278nm。

结果见图4。

图4：连翘苷光谱扫描图
2.2.3 溶液配制
2.2.
3.1 对照品溶液的配制：取连翘苷对照品适量，精密称定，加甲醇配制成每1ml含
60μg的溶液，即得。

2.2.
3.2 供试品溶液的配制：精密量取本品2ml，加在中性氧化铝柱（100～120目，9g，
内径为1～1.5cm）上。

用70%乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣加50%甲醇适
量溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。

2.2.
3.3 阴性对照溶液的制备：取缺连翘药材的阴性样品，同法制成阴性对照溶液。

2.2.4 线性关系考察：取连翘苷对照品适量，分别配制成每ml各含7.42μg，14.84μg，29.68μg，59.36μg，118.72μg，237.44μg，474.88μg，进样量为10μl。

以对照品量（μg）为横
坐标（x），峰面积为纵坐标（y），绘制标准曲线；连翘苷的线性方程：Y = 6.235x ＋ 23.497，R2 = 0.9998。

结果连翘苷在7.42～474.88μg范围内呈良好的线性关系。

2.2.5 重复性试验：精密称取同一批号样品，按供试品溶液制备方法平行制备6份，并测定，计算。

连翘苷含量的RSD为1.83%。

2.2.6 稳定性试验：取同一供试品溶液，在0、3、9、12、15、18、48h分别进样，测定
峰面积值，结果连翘苷含量的RSD为1.75%。

说明制备的供试品溶液至少在48h内稳定。

2.2.7 加样回收率考察：取样品1ml（已知含量），精密称定，分别精密加入一定量的连
翘苷对照品，测定，并计算回收率，结果见表1。

表1：加样回收率考察结果
取样量(ml) 样品含量(mg) 加入量(mg) 测得量(mg) 回收率(%) 平均(%) RSD(%)
1 1 0.1366 0.1187 0.2507 96.10
2 1 0.1366 0.1187 0.2527 97.83
3 1 0.1366 0.1187 0.2508 96.17 99.90 1.95
4 1 0.1366 0.1187 0.2540 98.89
5 1 0.136
6 0.118
7 0.2521 97.30
6 1 0.1366 0.118
7 0.2567 101.15
2.2.8 样品测定：取三个批号的克感利咽口服液，进行含量测定分析，结果见表2。

表3：样品测定结果
批号克感利咽口服液中连翘苷含量（mg/ml）
121103 0.1366
121203 0.1278
130202 0.1307
3 讨论
3.1 克感利咽口服液对于病毒性感冒有着良好的作用，曾有文献报道该产品的工艺改革、
药效毒理、临床研究等课题的基础研究工作[4-5]，现本文只对质量标准进行对比性评价研究。

为以上基础研究工作提供合理依据。

3.2 重点介绍修订金银花的薄层色谱鉴别，修订前的鉴别杂质多，使整个薄层板上体现出
斑点多，分离度差，阴性有干扰。

修订后的鉴别斑点清晰，分离度好，阴性无干扰。

并在原
有的基础上增加了金银花药材对照。

加强了对金银花的鉴别效果。

3.3 增加了连翘药材的含量测定。

在连翘苷作为含量指标考察时，对其提取过程中采用中
性氧化铝柱过柱时，分别用中性氧化铝柱（100～120目）6g和9g装柱，结果含量相差并不大，但相对中性氧化铝6g上柱所检测的样品杂质峰较多，离分效果较差。

而中性氧化铝9g
上柱所检测的样品杂质峰较少，离分效果较差，最终确定用中性氧化铝柱（100～120目，9g，内径为1～1.5cm）装柱。

参考文献
[1] 丁金龙施少斌秦春梅冯冲冼健民：克感利咽口服液中挥发油的超临界萃取工艺研究,
《中草药》[J]，2006.9（37）1325-1328
[2] 秦春梅廖晓嘉: 克感利咽口服液的超声提取工艺研究，《中草药》[J] ,2010.5（41）735-738.
[3] 国家药典委员会.中国药典（2010年版）一部[S].北京：化学工业出版社，2010：P611、附
录Ⅵ B、Ⅵ D
[4] 顾丽贞李多娇张百舜等：克感利咽口服液解热、镇痛作用的实验研究，《中国中医药科技》[J] ,1998.5（5）305.
[5] 顾丽贞李多娇张百舜等：克感利咽口服液抗炎、免疫作用的实验研究，《中国中医药科技》[J] ,1998.5（5）307.。