甘珀酸增强RSL3对耐顺铂睾丸癌细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用

睾丸癌是20~34岁男性最常见的实体肿瘤［1］，且近
几十年来全球发病率稳步上升［2］。

顺铂是临床上广泛
使用治疗睾丸癌的一线化疗药物［3］
，虽然睾丸癌患者对以顺铂为基础的治疗效果好，但仍有一小部分年轻男性由于内在的或获得性耐药表现出对传统的治疗方式无
效，最终死于进展性疾病［4］。

因此，寻找新的药物或靶点提升睾丸癌患者治愈率具有重要研究意义。

铁死亡是一类以铁依赖的、脂质过氧化物积累为特
Carbenoxolone enhances inhibitory effect of RSL3against cisplatin-resistant testicular cancer cells by promoting ferroptosis
DU Jiaru,LI Bin,ZHU Chenlu,HAN Jiale,TONG Xuhui
School of Pharmacy,Bengbu Medical College,Anhui Provincial Engineering Research Center for Biochemical Pharmaceuticals,Bengbu 233030,China
摘要：目的探讨铁死亡诱导剂RSL3对耐顺铂睾丸癌细胞（I-10/DDP ）增殖、侵袭和迁移能力的影响以及甘珀酸对RSL3抗耐药
睾丸癌活性的作用。

方法MTT 法检测不同浓度RSL3（0、1、2、4、8、16、32μmol/L ）及合用甘珀酸（100μmol/L ）作用后I-10/DDP 细胞的存活率、铁死亡抑制剂Fer-1（2μmol/L ）的作用下RSL3（4μmol/L ）及甘珀酸（100μmol/L ）合用RSL3（4μmol/L ）处理后I-10/DDP 细胞的存活率。

后续实验分为Control 组、甘珀酸（100μmol/L ）组、RSL3（2μmol/L ）组、甘珀酸（100μmol/L ）合用RSL3（2μmol/L ）组，采用集落克隆实验检测细胞增殖能力、划痕实验和Transwell 实验检测细胞侵袭与迁移能力。

Western blot 检测GPX4水平、C11BODIPY 581/591荧光探针检测lipid 活性氧（ROS ）水平、FerroOrange 荧光探针检测Fe 2+水平。

结果RSL3呈浓度依赖性降低I-10/DDP 细胞存活率，且在RSL3浓度2、4、8μmol/L 时，合用甘珀酸后细胞存活率显著降低（P <0.05）；与Control 组相比，RSL3处理后I-10/DDP 细胞的集落形成数减少、划痕愈合率减小（P =0.012）、侵袭和迁移细胞数减少（P <0.001）；与单用RSL3相比，甘珀酸合用RSL3处理后I-10/DDP 细胞的集落形成数显著减少、划痕愈合率显著减小（P =0.005）、侵袭和迁移细胞数显著减少（P =0.001，P =0.002）。

Fer-1降低单用RSL3、甘珀酸合用RSL3对I-10/DDP 细胞增殖的抑制率（P <0.01）；与
Control 组相比，RSL3作用后细胞内GPX4水平降低（P =0.001）、lipid ROS 水平（P =0.001）和Fe 2+
水平升高；且与单用RSL3相比，甘珀酸合用RSL3处理后细胞内GPX4水平明显降低（P =0.01）、lipid ROS 水平（P =0.001）和Fe 2+水平明显升高。

结论RSL3可诱导耐顺铂睾丸癌细胞发生铁死亡，并能抑制细胞增殖、侵袭和迁移能力；甘珀酸通过促进RSL3诱导的铁死亡从而增强RSL3的抑制作用。

关键词：睾丸癌；RSL3；甘珀酸；增殖；侵袭；迁移；铁死亡
Abstract:Objective To investigate the inhibitory effect of RSL3on the proliferation,invasion and migration of cisplatin-resistant testicular cancer cells (I-10/DDP)and the effect of carbenoxolone on the activity of RSL3against testicular cancer.Methods MTT assay was used to evaluate the survival rate of I-10/DDP cells following treatment with RSL3(1,2,4,8,16or 32μmol/L)alone or in combination with carbenoxolone (100μmol/L)or after treatment with Fer-1(2μmol/L),RSL3(4μmol/L),RSL3+Fer-1,RSL3+carbenoxolone (100μmol/L),or RSL3+Fer-1+carbenoxolone.Colony formation assay was used to assess the proliferation ability of the treated cells;wounding-healing assay and Transwell assay were used to assess the invasion and migration ability of the cells.The expression of GPX4was detected using Western blotting,the levels of lipid ROS were detected using C11BODIPY 581/591fluorescent probe,and the levels of Fe 2+were determined with FerroOrange fluorescent probe.Results RSL3dose-dependently decreased the survival rate of I-10/DDP cells,and the combined treatment with 2,4,or 8μmol/L RSL3with carbenoxolone,as compared with RSL3treatment alone,resulted in significant reduction of the cell survival rate.The combination with carbenoxolone significantly enhanced the inhibitory effect of RSL3on colony formation,wound healing rate (P =0.005),invasion and migration of the cells (P <0.001).Fer-1obviously attenuated the inhibitory effects of RSL3alone and its combination with carbenoxolone on I-10/DDP cells (P <0.01).RSL3treatment significantly decreased GPX4expression (P =0.001)and increased lipid ROS level (P =0.001)and Fe 2+level in the cells,and these effects were further enhanced by the combined treatment with carbenoxolone (P <0.01).Conclusion Carbenoxolone enhances the inhibitory effect of RSL3on the proliferation,invasion and migration of cisplatin-resistant testicular cancer cells by promoting RSL3-induced ferroptosis.Keywords:testicular cancer;RSL3;carbenoxolone;proliferation;invasion;migration;ferroptosis
收稿日期：2022-01-07
基金项目：安徽省自然科学基金（2008085MH275）；蚌埠医学院512人才培育计划（BY51201210）；蚌埠医学院研究生科研创新训练项目（Byycx21029）；蚌埠医学院大学生创新训练项目（202110367064）作者简介：杜家如，在读硕士研究生，E-mail:*****************通信作者：童旭辉，教授，硕士生导师，E-mail:***************
J South Med Univ,2022,42(3):405-410doi 10.12122/j.issn.1673-4254.2022.03.13
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征的死亡形式［5］。

RAS 选择性致死化合物3（RSL3）是常用的铁死亡诱导剂之一，其作用机制是通过抑制谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）造成细胞脂质过氧化物堆积
而导致铁死亡的发生［6］。

研究表明，铁死亡诱导剂在多种癌症类型的模型中显示出很好的抗肿瘤活性，包括非小细胞肺癌［7］、结直肠癌［8］、胶质瘤细胞［9］。

急性白血病MOLM13耐药细胞株较非耐药细胞株对RSL3的抑制
作用更加敏感，更容易被诱导发生铁死亡［10］。

铁死亡诱导剂对肿瘤细胞铁死亡的诱导，为肿瘤治疗提供了新的思路。

然而，铁死亡诱导剂RSL3对耐顺铂睾丸癌的作用尚不明确。

甘珀酸（CBX ）是一种半合成药物，源自天然三萜化合物甘草次酸，能够诱导多种癌细胞凋亡和生长抑制［11］，并且甘珀酸可以提高神经母细胞瘤对依托泊苷
和阿霉素的敏感性［12］。

本课题组前期研究发现，甘珀酸可以影响睾丸癌敏感株I-10对顺铂的敏感性［13］。

然而甘珀酸是否可以影响睾丸癌耐药株I-10/DDP 对RSL3的敏感性尚未有相关研究。

为此，本文旨在研究RSL3是否可以诱导耐药睾丸癌细胞（I-10/DDP ）发生铁死亡以及是否影响耐顺铂睾丸癌细胞增殖、侵袭和迁移能力，并探讨甘珀酸对RSL3抗耐药睾丸癌活性的影响及其作用机制，为铁死亡诱导剂在睾丸癌治疗中的应用提供实验依据。

1材料和方法
1.1细胞株与细胞培养
耐顺铂睾丸癌细胞株（I-10/DDP ）［14］
采用浓度递增法诱导耐药，后续通过检测耐药指数（RI=耐药细胞系IC 50/亲本细胞系IC 50）>3确定其耐药性。

细胞在含5%CO 2的细胞培养箱中培养。

1.2主要试剂
RPMI 1640培养基（Biosharp ）；顺铂（DDP ）（Gibco ）；胎牛血清（杭州四季青）；RSL3、四甲基偶氮唑蓝（MTT ）、二甲基亚砜（DMSO ）、甘珀酸（Sigma-Aldrich ）；GSH 试剂盒（南京建成）；GPX4抗体（Abcam ）；C11BODIPY 581/591荧光探针（赛默飞）；FerroOrange 荧光探针（DOjindo ）；GAPDH （Proteintech ）；胰酶、细胞裂解液（上海碧云天）；其他常用试剂均为国产分析级。

1.3细胞活力测定-MTT
取对数生长期细胞（I-10/DDP ），以5×104cells/mL 密度接种于96孔板，待细胞长至约60%后，更换含药培养液；对于甘珀酸与RSL3的联合实验，实验分为单用RSL3组和甘珀酸合用组，RSL3浓度分别为0、1、2、4、8、16、32μmol/L ，甘珀酸浓度为100μmol/L ；对于铁死亡抑制剂ferrostatin-1（Fer-1）联合RSL3以及甘珀酸合用
RSL3实验，实验分为：Control 组、Fer-1（2μmol/L ）组、RSL3（4μmol/L ）组、RSL3+Fer-1组、甘珀酸（100μmol/L ）合用RSL3组、甘珀酸+RSL3+Fer-1组继续培养24h 后，添加5mg/mL MTT 溶液（10µl/孔），在37℃的黑暗条件下孵育4h 。

弃去培养液后每孔加入100μL DMSO 置于37℃烘箱中孵育30min ，酶标仪检测A 490值。

样品检测全程避光操作。

根据公式计算细胞存活率。

Cell viability (%)=A tr e atm ent –A
blank A con tr ol –A blank
×100%
1.4集落克隆实验
将细胞以1500个/孔接种于六孔板，待细胞紧贴壁以后，用含药培养液培养9d ，药物分组为：Control 组、甘珀酸（100μmol/L ）、RSL3（2μmol/L ）组、甘珀酸合用RSL3组；显微镜下观察集落数大于50，弃培养液，用PBS 清洗2遍，4%多聚甲醛固定30min 后，再用0.1%结晶紫染色30min ，并拍照。

1.5划痕实验
将细胞以2×105/孔铺种于6孔板，待细胞生长至80%汇合时，用200μL 枪头沿孔板中央划一条直线，用PBS 清洗去除漂浮细胞，每孔加入2mL 含药无血清培养基继续培养，药物分组为：Control 组、甘珀酸（100μmol/L ）组、RSL3（2μmol/L ）组、甘珀酸合用RSL3组；分别在培养0h 、24h 用显微镜拍照。

划痕愈合率=（0~24h 的划痕宽度/0h 的划痕宽度）×100%。

1.6Transwell 侵袭实验
在Transwell 上室内加入50µL 基质胶，置于37℃恒温箱中孵育30min ，待胶凝固。

收集I-10/DDP 细胞，用无血清RPMI 1640培养基调整为含药的细胞悬液（2×105/mL ），药物分组为：Control 组、甘珀酸（100μmol/L ）组、RSL3（2μmol/L ）组、甘珀酸合用RSL3组；分别取100µL 加入上室，下室加入含10%胎牛血清的培养液600µL 。

每组设置2个复孔，实验重复3次；培养48h 后取出Transwell 小室；用4%多聚甲醛室温固定30min ，结晶紫室温染色30min 。

采用光学倒置显微镜（×200）下计数侵袭至微孔膜下层的细胞，每个样本观察5个视野。

1.7Transwell 迁移实验
无需在Transwell 上室内铺基质胶，其余步骤同1.6。

1.8FerroOrange 荧光探针—检测细胞内Fe 2+水平
取对数生长期细胞以1×105/mL 的密度接种于12孔板中，培养至细胞密度为60%左右，药物处理24h ，药物分组为：Control 组、RSL3（2μmol/L ）组、甘珀酸（100μmol/L ）合用RSL3组；将旧培养液倒掉，用不含血清的培养液清洗细胞2次，再加入用无血清培养液配制的1μmol/L 的FerroOrange 荧光探针工作液，避光的条件下在37℃细胞培养箱中孵育30min 。

将12孔板转移到活细胞工作站下观察细胞荧光强度，并每组随机选择视野进行拍照。

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1.9Lipid ROS 检测
将细胞以2×105/mL 的密度接种于六孔板，待细胞长至60%左右，药物处理24h 后，药物分组为：Control 组、RSL3（2μmol/L ）组、甘珀酸（100μmol/L ）合用RSL3组；加入浓度为5μmol/L 的C11BODIPY 581/591荧光探针避光染色。

在37℃细胞培养箱中孵育30min 后，用无EDTA 的胰酶消化细胞并收集至10mL 离心管中，1200r/min 离心8min ，再用PBS 离心清洗2次。

在细胞沉淀中加入300μL PBS 让细胞重悬，转移至流式管中在激发光为488nm 检测氧化态细胞数量，收集数据并保存文件，使用Flowjo 进行数据分析。

1.10Western blot 检测
收集细胞，加适量增强型RIPA ，冰上裂解1h 后，离心收集蛋白并定量。

配制12%SDS-PAGE 凝胶。

将定量样品上样，电泳，转膜，封闭，一抗（GPX4）4℃孵育过夜，二抗（GAPDH ）于室温孵育2h ，TPBS 洗膜；ECT 发光试剂盒暗室发光，显影；Bio-Rad 凝胶成像系统采集图像，Bio Imaging system （Gene Genius ）扫描灰度值定量分析。

1.11统计学分析
使用SPSS 20.0进行统计分析，数据表示为均数±标准差，两组之间均数比较采用两样t 检验，两组以上均数比较采用单因素方差分析。

统计图采用Graphpad Prism 5.0绘制，P <0.05为差异具有统计学意义。

2结果
2.1甘珀酸增强RSL3抑制I-10/DDP 细胞生长增殖的作用
MTT 法检测发现甘珀酸浓度为100μmol/L 时对细胞存活率无影响，RSL3呈浓度依赖性降低细胞存活率，且在RSL3浓度2、4、8μmol/L 时，甘珀酸（100μmol/L ）合用RSL3组的细胞存活率明显低于单用RSL3组（P <0.05图1A ）。

根据MTT 结果，为了保证进行侵袭、迁移实验时细胞存活率90%以上，实验中选用低浓度RSL3（2μmol/L ），后续实验包括集落以及铁死亡相关指标检测也是选用RSL3（2μmol/L ）。

在甘珀酸（100μmol/L ）、RSL3（2μmol/L ）或甘珀酸合用RSL3处理后，集落克隆实验检测发现单用RSL3组集落形成数明显低于Control 组；与单用RSL3组相比，甘珀酸合用RSL3组集落形成数显著进一步下降（图1B ）。

RSL3
CBX+RSL3
120
100
806040200
C e l l v i a b i l i t y (%)
*
##
&&
1
248
16
32
RSL3(μmol)
图1甘珀酸对RSL3抑制I-10/DDP 细胞增殖的影响
Fig.1Effect of carbenoxolone (CBX)on inhibitory effect of RSL3on proliferation of I-10/DDP cells.A :Cell viability assessed by MTT assay.B :Colony formation assay of I-10/DDP cells at 9days of culture.*P <0.05vs RSL3(2μmol/L),##P <0.01vs RSL3(4μmol/L),&&
P <0.01vs RSL3(8μmol/L).
A B
Control CBX RSL3CBX+RSL3
2.2甘珀酸增强RSL3抑制I-10/DDP 细胞侵袭、迁移能力的作用
I-10/DDP 细胞在甘珀酸（100μmol/L ）、RSL3（2μmol/L ）或甘珀酸合用RSL3处理后，划痕实验和Transwell 迁移实验发现，与Control 组相比，RSL3组划痕愈合率减小、穿膜细胞数减少（P =0.012，图2A ；P <0.001，图2B ）；与单用RSL3组相比，甘珀酸合用RSL3组划痕愈合率进一步减小、穿膜细胞数进一步减少（P =0.005，图2A ；P =0.001，图2B ）。

Transwell 侵袭实验发现，与Control 组相比，RSL3组穿膜细胞数减少（P <0.001，图2C ）；与单用RSL3组相比，甘珀酸合用RSL3组穿膜细胞数进一步减少（P =0.002，图2C ）。

2.3甘珀酸促进RSL3诱导I-10/DDP 细胞的铁死亡
本实验选用较高浓度RSL3（4μmol/L ），MTT 法观察发现铁死亡抑制剂ferrostatin-1（Fer-1）可以逆转RSL3（4μmol/L ）、甘珀酸（100μmol/L ）合用RSL3对I-10/DDP 细胞的增殖抑制作用（P =0.001,P <0.001，图3A ）。

I-10/DDP 细胞经单用RSL3（2μmol/L ）、甘珀酸（100μmol/L ）合用RSL3处理24h 后，Western blot 检测出，与Control 组相比，单用RSL3组GPX4的表达水平下降，而与单用RSL3组相比，甘珀酸合用RSL3组GPX4的表达水平明显下降（P =0.001,P =0.01，图3B ）；C11BODIPY 581/591荧光探针处理细胞后，使用流式细胞术检测发现，相比于Control 组，单用RSL3组细胞
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中lipid ROS 的表达水平增加，而与单用RSL3组相比，甘珀酸合用RSL3组细胞中lipid ROS 水平明显增加（P =0.001,P =0.001，图3C ）；FerroOrange 荧光探针检测细胞内Fe 2+水平，橙色荧光越强代表Fe 2+水平越高，相比于Control 组，单用RSL3组荧光强度增强，而与单用RSL3组相比，甘珀酸联合RSL3处理后细胞释放出更强的荧光（图3D ）。

3讨论
睾丸癌是男性最常见的恶性肿瘤之一，20世纪70
年代在临床治疗中引入了顺铂［15］
，使睾丸癌患者的生存率得到了提高，但目前仍然存在限制顺铂治疗的两个主要因素为药物引起的包括肾毒性、耳毒性和肝毒性在内的不良反应［16］，以及肿瘤耐药性的发生。

因此，探索新
的治疗方案对睾丸癌患者至关重要。

Control
CBX
RSL3
CBX+RSL3
Control
CBX
RSL3CBX+RSL3
806040200
P e r c e n t w o u n d c l o s u r e (%)
0h
24h
*
##
A
Control
CBX RSL3CBX+RSL3
###
***
P e r c e n t a g e o f m i g r a t i o n (%)
120100806040200
***
##
Control
CBX RSL3CBX+RSL3
P e r c e n t a g e o f i n v a t i o n (%)
120100806040200
Control RSL3
CBX
CBX+RSL3
Control RSL3
CBX
CBX+RSL3
B
C
图2甘珀酸对RSL3抑制I-10/DDP 细胞侵袭、迁移能力的影响
Fig.2Effect of carbenoxolone (CBX)on inhibitory effects of RSL3I-10/DDP cell invasion and migration.A :Wounding-healing assay.B :Transwell assay for assessing migration of I-10/DDP cells.C :Transwell assay for assessing invasion ability of I-10/DDP cells.*P <0.05,***P <0.001;##P <0.01,###P <0.001.
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铁死亡是新近发现的一种程序性死亡形式，与凋亡、坏死、自噬等死亡程序不同，典型的形态学表现为细胞容积皱缩、线粒体嵴减少等［17］。

最近的研究表明，激活铁死亡能有效地阻止肿瘤的进展，并能提高靶向治疗
和化疗的疗效［18］。

然而，睾丸癌与铁死亡的关系尚不明了。

深入研究铁死亡与睾丸癌之间的作用关系可能为治疗睾丸癌提供一种全新的思路。

RSL3是铁死亡最常用的诱导剂之一，目前研究表明其可以在多种肿瘤中诱导铁死亡并抑制肿瘤细胞的生长，包括肾癌［19］、结直肠癌［20］、前列腺癌［21］等。

RSL3是否可以诱导耐药睾丸癌I-10/DDP 细胞发生铁死亡以及是否可以抑制I-10/DDP 细胞增殖、侵袭和迁移能力尚未有研究报道。

我们采用RSL3处理I-10/DDP 后，结果发现，细胞增殖能力、侵袭和迁移能力显著降低，这表明RSL3可以抑制睾丸癌耐药株I-10/DDP 细胞活力。

同时，为了验证RSL3致I-10/DDP 细胞死亡的模式为铁死亡，我们将铁死亡抑制
剂Fer-1与RSL3联用，观察RSL3对细胞的抑制作用是
否能被逆转。

Fer-1是一种铁死亡强效抑制剂，可以通过抑制脂质活性氧的生成而抑制铁死亡的发生［22］。

结果显示Fer-1能逆转RSL3降低细胞存活率的作用，证明RSL3诱导的细胞死亡模式为铁死亡。

铁死亡的发生与Fe 2+水平以及脂质活性氧的生成密不可分。

细胞内游离的Fe 2+在芬顿反应中与过氧化氢结合产生过多的羟基自由基和ROS ，从而导致多不饱和脂肪酸被氧化，产生
过多的脂质过氧化物从而导致铁死亡［23］。

GPX4是铁死
亡的主要调节因子之一［24］
，其利用谷胱甘肽将有毒的脂质过氧化物转化为无毒的脂质醇，减少脂质过氧化物积
累从而负性调控铁死亡［25］。

本实验在铁死亡指标中，与Control 组相比，RSL3可使I-10/DDP 细胞内GPX4表达下降、Lipid ROS 和Fe 2+水平升高，以上结果更进一步说明RSL3可以诱导I-10/DDP 发生铁死亡。

上述结果提示铁死亡诱导剂在睾丸癌患者的临床治疗上具有一定前景。

C e l l v i a b i l i t y (%)
120
100806040200
##
&&&
1
2
3
4
5
6
Control RSL3CBX+RSL3
GPX4GAPDH
Control
RSL3CBX+RSL3
**
#
G P X 4/G A P D H
1.21.00.80.60.40.20
A B
Sample name CBX+RSL3.fcs
RSL3.fcs Control.fcs N o r m a l i z e d t o m o d e
10080
6040200
102
103104
105
C11BODIPY
Control
RSL3
CBX+RSL3
L i p i d R O S (%o f c o n t r o l )
400350300250200150100500
##
**
C
图3甘珀酸对RSL3诱导I-10/DDP 细胞铁死亡的影响
Fig.3Effect of carbenoxolone on ferroptosis of I-10/DDP cells induced by RSL3.A :Cell viability evaluated by MTT assay.1:Control;2:Fer-1;3:RSL3;4:RSL3+Fer-1;5:CBX+RSL3;6:CBX+RSL3+Fer-1.B :Western blotting for detecting the expression of GPX4.C :Cellular lipid ROS level analyzed with flow cytometry.D :Cellular Fe 2+level determined using FerroOrange.**P <0.01,#P<0.05,##P <0.01,&&&P <0.001.
D
Control RSL3CBX+RSL3
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甘珀酸是一种盐皮质激素激动剂，它已被临床批准
用于治疗食管溃疡［26］。

除了抗炎作用外，甘珀酸也存在抗肿瘤作用。

甘珀酸通过抑制细胞凋亡抑制蛋白BIRC5/survivin ，从而在K562白血病细胞中引发细胞凋亡，并且可以增强TRAIL 诱导的人神经胶质瘤细胞凋亡［27］。

甘珀酸还可以提高神经母细胞瘤对依托泊苷和阿霉素的敏感性。

而甘珀酸是否参与铁死亡进程以及是否也可以增加I-10/DDP 细胞对RSL3敏感性尚未有研究。

我们采用甘珀酸联合RSL3共同处理I-10/DDP 细胞，结果显示，甘珀酸合用RSL3组与单用RSL3组相比，I-10/DDP 细胞的增殖、侵袭和迁移能力明显进一步下降，这表明甘珀酸可以增强RSL3的抗肿瘤活性。

为了进一步探究甘珀酸是否是通过促进RSL3诱导的铁死亡从而增敏RSL3，本实验检测Fer-1能逆转甘珀酸合用RSL3降低细胞存活率的作用；同时检测铁死亡相关指标，甘珀酸合用RSL3组与单用RSL3组相比，I-10/DDP 细胞内GPX4蛋白表达水平降低、lipid ROS 水平升高、Fe 2+水平升高，得出甘珀酸促进RSL3诱导的铁死亡。

综上所述，RSL3能够诱导耐药睾丸癌细胞发生铁死亡，并可以抑制耐顺铂睾丸癌细胞增殖、侵袭和迁移能力；甘珀酸通过促进RSL3诱导的铁死亡从而增强RSL3的抑制作用。

单用RSL3或者合用甘珀酸可能是一种有前景的治疗睾丸癌策略。

甘珀酸是否通过抑制Pannexins 通道增加RSL3诱导的铁死亡水平，课题组后期将对此具体机制进行深入研究，从而为睾丸癌的临床治疗提供理论依据。

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（编辑：孙昌朋）
J South Med Univ,2022,42(3):405-410
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