浙贝母素乙和黄芪抗大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的疗效比较

浙贝母素乙和黄芪抗大鼠卡氏肺孢子虫
肺炎的疗效比较
（作者： _________ 单位：___________ 邮编： ___________ ）
作者：秦茜，梁韶辉，黄慧聪，潘长旺
【摘要】目的：比较浙贝母素乙和黄芪治疗实验大鼠卡式肺孢子虫肺炎（PCP的效果。

方法：取65只清洁级SD大鼠，15只皮下注射生理盐水，为正常对照组，50只用盐酸地塞米松皮下注射，连续8 周，每周两次，建立大鼠PCP莫型，再随机分成四组，其中两组分别用浙贝母素乙、黄芪治疗实验大鼠，另两组一组用复方磺胺甲基异恶唑治疗为治疗对照组，一组不用任何药物治疗，设为感染对照组。

通过体重、肺部卡式肺孢子虫包囊感染数量及大鼠肺病理学观察等指标考核疗效。

结果：浙贝母素乙及黄芪治疗组实验大鼠体重与感染对照组相比，明显回升；各治疗组的包囊减少率均高于70%病理学结果显示治疗后肺泡间渗液吸收，炎性细胞浸润减少，两治疗组中以浙贝母素乙治疗组更优。

结论：浙贝母素乙及黄芪对大鼠卡氏肺孢子虫肺炎均具有良好疗效，浙贝母素乙效果略佳。

【关键词】卡氏肺孢子虫；卡氏肺孢子虫肺炎；浙贝母素乙；黄芪Comparis on of the therapeutic effect of pei minine and
astragalus on pneumocystis carinii pneumonia in rats QIN Qian, LIANGShao-hui , HUANGHui-cong , PANChang-wang. Department of Parasitology , Wenzhou Medical College , Wenzhou, 325035 Abstract: Objective: To compare the therapeutic effect of Peimi nine and Astragalus on Pn eumocystis cari nii pn eum onia (PCP) in immuno suppressed experime ntal rats. Methods: PCP animal models were established by hypodermic injection of Dexamethasone in rats , twice a week for 8 weeks. The PCPrats were treated with Peimi nine and Astragalus. Positive con trol was admi nistered orally with SMZ. All rats were eutha ni zed at the end of 8th week. The evaluation of drug efficacy was decided on the base of in creased body weight and mean cyst nu mber per field in lung print smear. Results:The in crease of body weight treated with Peiminine , Astragalus and SMZ was more than that of immuno suppressed rats in con trol group, respectively. The decreased rates of cyst in the treated group were more than 70% especially the result of the group treated with Peiminine was best. It was an obvious repairment in the slice of lung of the treatme nt group. Con clusi on: The therapeutic effects of
Peimi nine and Astragalus on rat Pn eumocytstis cari nii peneumonia are active , and the Peiminine is the better.
Key words: Pn eumocystis cari nii ; Pn eumocystis cari nii pneumonia; Peiminine ; Astragalus
卡氏肺孢子虫肺炎（Pneumocystis carinii pneumonia, PCP是一种机会性致病的感染性疾病，好发于免疫功能低下或缺陷人群，特别是近年来糖尿病晚期患者、肿瘤化疗者以及艾滋病患者等高危人群的扩大，使本病成为此类人群的重要死亡原因［1］。

目前治疗本病常用的药物为喷他脒、复方磺胺甲基异恶唑和三甲曲沙等，但均因存在发热、骨髓抑制、粒细胞减少、肝损害等毒副作用，使其应用受到了限制［2］。

国内学者杜娈英等［3］探用中药黄芪医治本病，起到一定的治疗效果。

我们建立PCP大鼠模型后，使用浙贝母素乙及黄芪治疗，并与复方磺胺甲基异恶唑进行对比，比较两种药物之间疗效的优劣，具体如下。

1材料和方法
1.1 PCP模型的建立选用65只清洁级SD大鼠，体重180〜220 g（温州医学院实验动物中心购置），置敞式鼠笼中用普通颗粒饲料喂养。

随机抽取15只大鼠，无菌状态下皮下注射生理盐水0.5 mL/只，作为正常对照组。

其余无菌状态下于大鼠腹股沟处皮下注射地塞米松磷酸钠（DXM 1 mg/只，2次/周。

实验组和对照组老鼠饮水中均加入 1 g/L的盐酸四环素，预防继发细菌感染。

随时观察大鼠变化，包括进食、饮水量和体重变化、毛色改变及活动情况。

持续诱导8周后，随机无菌剖杀实验鼠2只、正常对照鼠2只。

以肺切面印于洁净载玻片制成肺组织印片，固定干燥后，采用六亚甲基四胺银（GMS快速染色法染色［4］，油镜下观察，对照组无异常，实验组找到大量卡氏肺孢子虫包囊，证实PCP大鼠模型建立成功。

1.2药物及试剂浙贝母素乙粉，购于成都普思生物科技有限公司；浙贝母素乙注射液配制：称取25 mg贝母素乙溶于稀盐酸后，再用稀NaOH 溶液调节至中性，液体总量调节至25 mL,即浓度为1 mg/mL, 0.25卩m 滤器过滤除菌后分装，4 C冰箱储存备用；黄芪注射液，成都地奥九泓制药厂生产（批号：080403,规格20 g/10 mL ）; DXM 湖北天药药业股份有限公司（批号：080504）;四环素片，成都天台山制药有限公司生产（批号070403）;复方磺胺甲基异恶唑片，昆明制药集团股份有限公司生产（批号：070602）。

1.3实验大鼠分组及治疗模型建立成功后停止注射DXM而实验大鼠诱发过程中自然死亡4只，将患PCF大鼠44只随机分为4组，每组11只，取正常对照组健康阴性大鼠11只，分笼饲养。

A组为正常对照组，无菌状态下皮下注射生理盐水0.5 mL/只，连续10 d ; B组为感染对照组，不予任何药物治疗；C组为浙贝母素乙注射液治疗组， 2 mL/只（2 mg），腹腔内注射，2次/日，连续10 d ; D组为黄芪注射液治疗组，0.4 mL/M（800 mg,腹腔内注射，2次/日，连续10 d; E组为复方磺胺甲基异恶唑，复方磺胺甲基异恶唑制成悬液，1片复
方磺胺甲基异恶唑溶于20 mL NS中，1 mL •次-1 • d-1灌胃，治疗10 d，停药观察1周后全部剖杀，无菌取肺。

1.4疗效评价
1.4.1 体重：每2周称体重，实验结束时计算体重回升率。

体重回升率计算公式：体重回升率=（治疗结束时体重-PCP大鼠模型建立结束时体重）/PCP大鼠模型建立结束时体重X 100%
142 肺印片及病理切片的观察：实验结束后，每组随机抽取3只大鼠取肺，置于10%畐尔马林固定，取肺作肺组织印片，GMS染色，检查PC 包囊并记数。

包囊记数方法：每张印片均编号检查，观察全部视野并记录每视野下PC包囊数，以包囊数最高的10个视野计数相加计算每视野包囊均数，据此再计算各组包囊均数及包囊减少率：包囊减少率=（对照组包囊数-各治疗组包囊数”对照组包囊数X 100%其余肺组织按常规方法制作病理切片，HE染色观察。

1.5统计学处理方法采用单因素方差分析。

2结果
2.1体重的变化实验大鼠在连续8周注射地塞米松后，制成PCP模
型，经相应的中药治疗后，观察各组大鼠的体重变化。

A组大鼠体重明显升高，B组大鼠体重下降快，回升慢，回升率仅为 2.96%。

经过药物治疗后，C组体重回升率为8.85%, D组体重回升率为6.56%, E 组体重回升率为8.58%。

三组的体重回升率从高到低依次为C、E和D 组。

五组大鼠的体重回升率在统计上的差异见表1。

2.2大鼠的肺孢子虫感染程度卡氏肺孢子虫肺炎大鼠模型建立后，经相应的中西药治疗，无菌操作下剖杀取肺，观察各组大鼠的肺组织印片中感染卡氏肺孢子虫的包囊数目。

我们发现A组内未发现PC包囊；B组大鼠的肺组织印片中PC感染率非常高；而经药物治疗后，C D 和E三组的肺组织印片中感染卡氏肺孢子的程度变化从高到低依次为D C和E组（见图1），各药物治疗组包囊平均数见表2, C组包囊平均减
少率为74.59%, D组包囊平均减少率为68.58%, E组包囊平均减少率为80.34%。

2.3 病理学观察
2.3.1 对照组：A组肺组织正常，肺泡空隙明显，肺泡间质未见充
血、增宽，肺泡内无渗出和炎性细胞浸润。

B组重度间质性肺炎，肉
眼观肺部大量充血，质地较实，表面偶然可见脓肿灶，大量炎性细胞
(见图3)。

2.3.2 治疗组：药物治疗组均表现为轻度间质性肺炎(见图4)。

①C组:肺泡壁充血明显减少，肺泡中大量的浆液性渗出物已基本上被吸收，肺泡间质中炎性细胞减少。

② D组:肺泡壁充血略减少，肺泡中浆液性渗出物较少，肺泡间质中炎性细胞浸润。

③E组:肺泡壁充
血减少最明显，肺泡中渗出物明显消失，仅少部分肺泡中见有少量的的浆液性渗出物和炎性细胞浸润。

3讨论
浙贝母(Fritillariae thunbergii Miq)和黄芪(Astragalus )均为
我国传统中药，其中浙贝母为著名的“浙八味”之一，在国内外享有盛誉。

两种药物在许多疾病的防治过程中有较为明显的效果，其本身对人体基本无毒副作用。

浙贝母具有清肺化痰、清肝解毒等作用，用途较为广泛，成分中的贝母素乙治疗效果尤佳。

黄芪具有明显的抗低氧、抗炎、镇痛和调节免疫的功能。

黄芪注射液对特异性免疫、体液免疫、细胞免疫均有明显增强作用，可明显提高T细胞增殖能力，促
使巨噬细胞活化［5］。

据此，本课题组用两种药物分别治疗自行建立的卡氏肺孢子虫肺炎大鼠模型，通过体重回升率、肺印片GM5染色包
囊计数、治疗后包囊减少率及治疗前后肺组织病理切片HE染色几个方面与复方磺胺甲基异恶唑比较。

结果发现，大鼠免疫抑制后，逐渐出现毛发枯萎，无光泽，摄食及活动减少，消瘦明显，免疫抑制后3周即有大鼠死于细菌感染，8周后肺印片中均可见PC包囊。

经药物治疗后大鼠状态明显好转，体重回升明显，以浙贝母素乙治疗组效果最明显，大鼠摄食及活动明显增加，毛发明显顺畅有光泽。

肺印片中PC包囊明显减少，各治疗组大鼠包囊减少率及体重回升率明显高于模型对照组，且差异有显著性，其中浙贝母素乙优于黄芪治疗组，提示浙贝母素乙对卡氏肺孢子虫具有一定的杀伤效果，但其杀虫机制有
待于进一步研究。

病理切片显示阳性对照组大鼠肺泡腔内含大量炎性渗出液，间质水肿，有单核细胞、中性粒细胞浸润；而治疗组大鼠肺部炎症明显好转，肺实变及肺泡壁充血减轻，炎性渗出物显著减少，整个肺部呈现恢复期表现，表明浙贝母素乙和黄芪均可减轻PCP大鼠的肺部炎症，提示浙贝母素乙和黄芪有望成为抗卡氏肺孢子虫的新药。

【参考文献】
[1] Cui Y,Qing YH,Li Q,et al.Experimental studies on the
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[2] Sidhu GS, Cassai ND, Pei Z. Pneumocystis carinii: An update
[J].UItrastruct Pathol,2003,27(2):115-122.
[3] 杜娈英，赵蕾,纪正春,等黄芪注射液治疗大鼠卡氏肺孢子虫
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[4] 杨艳宏.卡氏肺孢子虫肺炎研究若干进展[J].杭州医学高等专
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[5] 梁洪会，季文峰.黄芪在难治性肺结核治疗中作用分析[J].河
北中医药学报,1999,14(3):29.。