PCR问题交流报告

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PCR常见问题、原因分析及其对策

镁离子浓度不当
总结词
镁离子是PCR反应的重要成分，对PCR的效率和产物质量有重要影响。
详细描述
镁离子浓度过高可能导致非特异性扩增和产物稳定性下降；镁离子浓度过低则可能影响DNA聚合酶的活性，导致PCR失败或扩增效率低下。因此，需要根据实验条件和试剂盒推荐，选择合适的镁离子浓度。
03
pcr问题对策
详细描述
模板质量的好坏直接影响到pcr的扩增效果，因此需要确保模板的纯度和浓度，避免使用降解严重的模板，以提高pcr的产量和特异性。
优化pcr循环参数
总结词
pcr循环参数的优化可以显著提高pcr的效率和特异性。
详细描述
通过调整变性、退火、延伸等温度和时间，可以优化pcr循环参数，提高pcr的效率和特异性。同时，合理设置预变性时间和循环数，可以有效避免非特异性扩增和产物积累。
优化引物设计
总结词
引物设计是pcr反应的关键，优化引物设计可以显著提高pcr的特异性和效率。
详细描述
引物设计时需考虑特异性、长度、GC含量、引物二聚体和发夹结构等因素，通过合理设计引物，可以避免非特异性扩增和引物二聚体形成，提高pcr的特异性。
提高模板质量
总结词
模板质量对pcr结果的影响不容忽视，提高模板质量可以提高pcr的产量和特异性。
模板质量差
总结词
模板质量的好坏直接影响到PCR的效率和产物质量。
详细描述
模板中可能含有抑制剂、DNA聚合酶抑制剂或DNA聚合酶竞争性抑制剂等物质，这些物质会影响DNA聚合酶的活性，导致PCR失败或扩增效率低下。此外，模板的浓度过低或过高也可能影响PCR结果。
pcr循环参数不当
总结词
PCR循环参数包括变性、退火、延伸等步骤，这些步骤的温度和时间设置对PCR结果有重要影响。

PCR扩增过程中常见的问题及解决方法

PCR技术具有高度的特异性、选择性、灵敏性，而且快速、简便、易于自动化，因此在临床医学工作中受到广泛的重视及合理的应用。

目前在我国许多基层医疗单位均已相继开展P CR研究用应用工作。

PCR技术很简单，原理也很清楚，因此有条件的单位都能较顺利地上马，但毕竟PCR技术是一种新生事物，受到许多条件因素的影响，所以要做得好也不容易。

在PCR技术应用过程中会遇到这样或那样的问题，更甚至会得到与事实完成相反的结果。

为了使我们能够顺利地开展PCR工作，更好地发挥PCR技术的工具作用，我们根据多年来PCR工作总结的经验，对PCR扩增过程中经常出现的一些问题进行简要的总结，提供给广大科研工作者作为参考，抛砖引玉，不足之处欢迎指正。

一、假阳性扩增在实验过程中有时会碰到所检验的样本全部阳性，而且扩增产物电泳条带亮度均一，这是扩增系统受到污染时最典型的一种表现，需仔细检查，排除污染源，一般应从以下步骤着手：⒈试剂污染：厂方提供的试剂或其中的某种组分在出厂或运输、贮存过程中受到污染。

检测方法，可按试剂盒说明书将试剂分装好，直接置于PCR仪中扩增（不加阴性对照，可加适量蒸馏水），便可简单而有效地判断试剂是否已受到污染。

⒉实验室污染：这是最常见的污染源，由于PCR技术可以在几个小时内将模板中某些特异性序列扩增到数百万倍以上，扩弗产物可能在电泳等过程中污染移液器、操作台或随着蒸发所形成气溶胶而污染整个实验室。

扩增产物又是最有效的模板，一旦出现产物污染其污染程度都较严重。

判断方法：可以将实验中最关键步骤如试剂分装、样品处理等转移到一个新的环境中或转移到超净工作台中完成。

当然，所用的移液器、吸咀管（离心管）都应彻底更换。

解决方法：实验室污染是PCR扩增过程中最易出现的现象，而且一旦出现污染，消除污染源又极其困难，往往需对整个实验室及实验器材彻底清洗处理，所以应该以预防为主，实验过程中严格遵守实验基本要求，样品处理与扩增产物及电泳应尽量分开，最好能在两个房间进行。

PCR扩增DNA实验报告讨论

PCR扩增DNA实验报告讨论简介PCR（聚合酶链式反应）是一种常用的分子生物学技术，可以在体外迅速扩增DNA 片段。

本实验旨在通过PCR扩增DNA的方法，探索其应用于分子生物学研究的潜力。

实验步骤1.DNA模板制备：从适当的来源（比如细胞提取物、血液样本等）提取DNA，并进行纯化处理，以保证所需DNA的质量和纯度。

2.PCR反应体系设置：根据实验需求，配置PCR反应液，包括DNA模板、引物、聚合酶、缓冲液和dNTPs等。

3.PCR扩增条件选择：根据所扩增片段的长度和GC含量，确定适当的退火温度、延伸温度和循环次数，以提高扩增效率和特异性。

4.PCR扩增过程：将PCR反应液装入热循环仪，按照设定的温度和时间程序进行循环加热，分别进行变性、退火和延伸。

5.PCR产物分析：通过电泳方法，将PCR产物分离并可视化，以验证目标DNA片段是否成功扩增。

结果与讨论PCR扩增效果评估通过电泳分离PCR产物，观察可见的DNA条带，可以初步评估PCR扩增效果。

明显的单一条带表示扩增成功，而多个或模糊的条带可能存在非特异性扩增或污染。

扩增产物验证方法为确保PCR产物的特异性，可以采用以下方法进行进一步验证：1.限制性酶切：使用适当的限制性酶对PCR产物进行切割，观察切割产物的条带模式与预期是否一致。

2.DNA测序分析：将PCR产物进行测序，通过比对测序结果与目标序列比对，确认扩增片段的准确性。

3.引物设计验证：重新设计引物，分别将其与目标序列和非目标序列进行PCR扩增，观察产物特异性，以排除非特异性扩增影响。

PCR扩增优化探讨1.引物设计：合理设计引物，包括序列特异性与互补性、GC含量、长度等因素。

引物的优化会对PCR扩增效果产生重要影响。

2.温度参数调整：通过温度梯度法等方法，寻找PCR反应的最佳温度，能够提高扩增效率和特异性。

3.PCR反应体系优化：调整反应液中各组分的浓度和配比，以达到最佳效果。

实验应用PCR扩增技术在分子生物学研究中有着广泛的应用，包括：1.基因克隆：PCR扩增可以快速获得目标基因片段的大量DNA，供后续克隆和表达研究使用。

pcr实验报告结论与心得

pcr实验报告结论与心得PCR（聚合酶链反应）是一种基因分析技术，可以在试管中扩增DNA序列，从而提供大量的DNA样本进行分析。

在进行PCR实验后，我得出了以下结论和心得体会。

结论：1. PCR技术可以有效扩增DNA序列，使得小样本量的DNA得以被扩增，从而可以进行更加精细的分析。

2. PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度对PCR反应效果有重要影响，因此需要精细的操作技巧和实验设计。

3. PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，以便及时对反应条件进行调整，从而获得更好的PCR扩增效果。

4. 在PCR反应过程中，需要防止样本的污染和交叉感染，以免影响PCR反应的准确性和可靠性。

心得：1. PCR实验需要精细的操作和实验设计，因此需要提前充分准备和规划，以确保实验顺利进行。

2. 在PCR反应过程中，实时监测PCR产物的扩增情况可以及时调整反应条件，从而获得更好的PCR扩增效果。

3. 在进行PCR实验时，需要防止样本的污染和交叉感染，尽量避免使用已被污染的试剂和工具，以确保PCR反应结果的可靠性。

4. 在进行PCR实验时，需要仔细阅读实验操作手册和相关文献，了解PCR反应的基本原理和应用技巧。

5. PCR技术在生命科学研究中具有广泛的应用前景，如基因诊断、病原体检测和种群遗传学研究等方面，因此具有重要的科学意义和实际应用价值。

总之，PCR实验是一项高精度的基因分析技术，可以为生命科学研究提供精细的DNA分析和检测手段。

在进行PCR实验时，需要认真掌握PCR反应的基本原理和应用技巧，避免样本污染和交叉感染，并及时调整反应条件，以获得更好的PCR扩增效果。

通过PCR实验的学习和实践，我对PCR技术的原理和应用有了更深入的了解和认识，以及更加实际的操作技巧和经验。

PCR实验常见问题、原因分析及其解决方案!

PCR实验常见问题、原因分析及其解决方案！PCR产物的电泳检测时间，一般为48h以内，有些最好于当日进行检查，大于48h后带型不规章甚至消逝。

但有时仍会与到这样那样的问题，影响检测结果的推断，详细归类为以下常见的4点，描述如下：问题一：无扩增产物现象：正对比有条带，而样品则无。

缘由：1、模板:含有抑制物，含量低。

2、Buffer对样品不合适。

3、引物设计不当或者发生降解。

4、反应条件：退火温度太高，延长时间太短。

对策：1、纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量。

2、更换Buffer或调整浓度。

3、重新设计引物（避开链间二聚体和链内二级结构）或者换一管新引物。

4、降低退火温度、延长延长时间。

问题二：非特异性扩增现象：条带与估计的大小不全都或者非特异性扩增带。

缘由：1、引物特异性差。

2、模板或引物浓度过高。

3、酶量过多。

4、Mg2+浓度偏高。

5、退火温度偏低。

6、循环次数过多。

对策：1、重新设计引物或者使用巢式PCR。

2、适当降低模板或引物浓度。

3、适当削减酶量。

4、降低镁离子浓度。

5、适当提高退火温度或使用二阶段温度法。

6、削减循环次数。

问题三：拖尾现象：产物在凝胶上呈Smear状态。

缘由：1、模板不纯。

2、Buffer不合适。

3、退火温度偏低。

4、酶量过多。

5、dNTP、Mg 2+浓度偏高。

6、循环次数过多。

对策：1、纯化模板。

2、更换Buffer。

3、适当提高退火温度。

4、适量用酶。

5、适当降低dNTP和镁离子的浓度。

6、削减循环次数。

问题四：假阳性现象：空白对比消失目的扩增产物。

缘由：靶序列或扩增产物的交叉污染。

对策：1、操作时应当心轻柔，防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外。

2、除酶及不能耐高温的物质外，全部试剂或器材均应高压消毒。

所用离心管及加样枪头等均应一次性使用。

3、各种试剂最好先进行分装，然后低温贮存。

PCR training问题交流报告

目标日期 Date
断点Breakpoint:
结果Status
4. 验证方法和目标 Verification Method and Results:
•更新文件Updated document: SOS/JIS
PFMEA
控制计划Control Plan
_________
__________
• 跟踪记录Tracking Records.从From _______ 到to _______
Problem Description 问题描述
6 5 4
1 2 3
Problem Definition 问题定义
Cause Investigation 调查原因
Locate Point of Cause 确定原因所在
SGM CONFIDENTIAL
Issue Date: 2003年2月16日
p.29
Grasp the Situation 掌握情况
SGM CONFIDENTIAL
Issue Date: 2003年2月16日
p.31
实际问题解决 Practical Problem Solving
Example 范例
1 Problem Description: 揟he seatbelt is an obstacle!? 问题描述：“安全带障碍了？”
Steps of Problem Solving 解决问题的步骤
Problem Description问题描述
1
Problem Definition问题定义
Grasp the Situation 掌握情况
2
Locate Point of Cause 确定原因所在

质量问题交流报告 PCR

故障数F比率 Rate目标Target 日期date 故障率failure 合格判定Pass or not日期date 故障率failure rate 合格判定Pass or not发现问题，无措施发现问题，有临时措施发现问题，有永久措施永久措施有效，问题关闭发行日期Date：签发部门Issue Dept：提出部门Source：发生工位Station：问题描述 Prob. Description根本原因（5个为什么）Root Reason (5 Why's)记录编号：质量问题交流报告（PCR）车型 ModelPCR报告进度管理PCR Prog.Status初步原因分析Analysis：故障照片Pic：关闭确认签名：审核：Closed by : Reviewed by:解决方法 Corrective Actions顺序号：措施实施情况及交付物确认How Corrective Actions work and Confirm. Of Deliverables：第1个为什么（直接原因）1st Why (Direct Reason)：第2个为什么 2nd Why:实施时间Time of Implementation措施实施者Responsible因果分析Cause-Effect Analysis：责任部门Resp.Dept ：外检科主管部长Resp Dept Mng ：主任/科长Sec Mng：验证结果 Validation分析鱼骨图原因Anal. Of Fishbone验证方法Validation Method 第3个为什么3rd Why：完成时间Due Date结论Conclusio n 临时措施S-T 线长/主管Line Leader：班组长/科员Team Leader：确认人Person to Confirm临时措施S-T永久措施L-T责任单位质量部长确认签名Sign. Of Q Manager from Resp. Dept：永久措施L-T第4个为什么4th Why：第5个为什么（根本原因）（必须填写）5th Why (Root Reason) (must)：验证人 Resp.Person审定：关闭日期：Confirmed by: Closing Date:果Effect ：机Machine ：人Man ：料Material ：法Method ：。

PCR报告模版

发布者：发布部门：工程师班次A B 发布日期：项目经理班组长问题编号：部门经理车间主任目标日期责任人完成状态YN Y N 3、是否使用正确的零件?2、是否遵循正确的工具?4、是否符合零件图纸?6a、验证方法：（责任人填写）6b、验证结果（验证人填写）：2、当场控制方法断点：1、是否遵循正确的工艺?注：上述四项必须按照顺序全部填写，如果有NO,则进入3b，填写5个W，查找Root-Cause；然后进入第五个步骤，如果全为YES，则直接进入4a核查：长期措施（永久）：第五个为什么？根本原因：3b、根本原因产生分析（5个why）第一个为什么？直接原因：第二个为什么？原因：第三个为什么？原因：第四个为什么？原因：5、解决办法责任人断点状态短期措施（临时）：跟踪记录：从________到________发现不符合数量________合格率________。

更新文件：SOS ____ JES ____ PFMEA _________控制计划Control Plan_____防错Error Proofing _________分层审核Layered Audit ___________ 经验教训__________结案日期：发出者签名：部门批准车间批准质量问题交流报告(PCR)PROBLEM COMMUNICATION REPORT 责任部门：责任人：部经理审批： 3a、过程和零件检查A、差异分析B、分析差异产生的原因C、根本原因验证测试4b、复杂问题根本原因产生分析根本原因产生验证方法4a、复杂问题根本原因查找1、问题描述：潜在影响范围/数量(遏制表单)：外协库：供应商：车间：成品库：中转库：客户端：。

pcr报告

pcr报告PCR (聚合酶链反应) 是一种用于扩增 DNA 片段的技术，它在生物学和医学研究中被广泛应用。

本报告将介绍使用 PCR 技术进行研究的实验过程、结果和讨论。

实验过程以检测人类基因BRCA1 的特定序列作为目标。

首先，从参与者的血液样本中提取 DNA。

然后，将提取的 DNA 加入反应管中，并混合与 BRCA1 特定序列互补的引物。

引物的选择是基于之前的文献调研和序列分析。

接下来，加入 DNA聚合酶和核苷酸混合物，包括四种碱基（腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶）。

反应混合物经过一系列温度循环，包括变性、退火和延伸步骤，以在每个循环中扩增目标 DNA 片段。

实验结果显示出了成功的扩增。

通过琼脂糖凝胶电泳分离和可见的 DNA 杂交带，我们可以观察到扩增的目标 DNA 片段。

根据标准品的大小，我们可以确定扩增的 DNA 片段的长度。

结果分析表明，参与者的 DNA 中存在 BRCA1 特定序列。

这是很重要的，因为 BRCA1 基因在乳腺和卵巢癌等许多癌症类型的发展中起着关键作用。

通过检测BRCA1 特定序列的存在，我们可以评估个体的癌症风险。

然而，在本实验中仅检测到 BRCA1 特定序列的存在，并未对其突变进行分析。

突变对 BRCA1 基因功能和癌症风险的影响巨大。

进一步的研究需要对 BRCA1 基因的突变进行分析，以评估个体的癌症风险。

此外，PCR 技术还可用于种群遗传学研究、疾病诊断和治疗、基因工程等领域。

虽然 PCR 技术有一些限制，例如需要目标序列的已知信息和可能的污染风险，但它仍然是一种高效、敏感和广泛应用的技术。

总结而言，本实验通过 PCR 技术成功扩增了 BRCA1 特定序列，并证实参与者的 DNA 中存在这一基因。

这为进一步研究个体癌症风险和遗传突变提供了基础。

同时，本实验也展示了PCR 技术在生物学和医学研究中的重要性和广泛应用。

PCR常见问题分析及对策

PCR常见问题分析及对策(无扩增产物、非特异性扩增、拖尾、假阳性)问题1：无扩增产物现象：正对照有条带，而样品则无原因:1.模板:含有抑制物，含量低2.Buffer对样品不合适3.引物设计不当或者发生降解4.反应条件：退火温度太高，延伸时间太短对策:1.纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量2.更换Buffer或调整浓度3.重新设计引物（避免链间二聚体和链内二级结构）或者换一管新引物4.降低退火温度、延长延伸时间问题2：非特异性扩增现象：条带与预计的大小不一致或者非特异性扩增带原因：1.引物特异性差2.模板或引物浓度过高3.酶量过多4.Mg2+浓度偏高5.退火温度偏低6.循环次数过多对策：1.重新设计引物或者使用巢式PCR2.适当降低模板或引物浓度3.适当减少酶量4.降低镁离子浓度5.适当提高退火温度或使用二阶段温度法6.减少循环次数问题3：拖尾现象：产物在凝胶上呈Smear状态。

原因：1.模板不纯2.Buffer不合适3.退火温度偏低4.酶量过多5.dNTP、Mg2+浓度偏高6.循环次数过多对策：1.纯化模板2.更换Buffer3.适当提高退火温度4.适量用酶5.适当降低dNTP和镁离子的浓度6.减少循环次数问题4：假阳性现象：空白对照出现目的扩增产物原因：靶序列或扩增产物的交*污染对策：1.操作时应小心轻柔，防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外；2.除酶及不能耐高温的物质外，所有试剂或器材均应高压消毒。

所用离心管及加样枪头等均应一次性使用。

3.各种试剂最好先进行分装，然后低温贮存PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。

假阴性，不出现扩增条带PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及，④PCR循环条件。

寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。

模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。

PCR技术实验报告讨论

PCR技术实验报告讨论引言聚合酶链反应（PCR）是一种被广泛应用于分子生物学领域的技术。

通过PCR，我们可以从少量的DNA样本中扩增指定的片段，从而使其可以被进一步研究和分析。

本实验旨在探讨PCR技术的原理和应用，并对PCR实验中的一些关键操作进行讨论。

PCR技术原理PCR技术基于DNA的复制过程，通过反复进行循环扩增三个基本步骤：变性、退火和延伸。

每个循环都包含这三个步骤，从而使目标DNA序列得以扩增。

首先，变性步骤会使双链DNA分离，产生两条单链DNA。

这一步骤通常在高温下进行，使DNA解链。

接下来的退火步骤会使引物结合到目标DNA上。

对于每一对引物，一个是正向引物，一个是反向引物。

这两个引物的选择是根据目标DNA序列来确定的。

在低温下，引物与目标DNA序列互补结合。

然后，延伸步骤会利用聚合酶将新的DNA链合成。

聚合酶从引物的3’端开始合成新的DNA链，直到达到该片段的末端。

这个过程会在适当的温度下进行，以确保最佳反应条件。

PCR通过反复进行这三个基本步骤，每一轮循环都会使目标DNA序列指数级增加。

通常，PCR的循环数在20到40次之间，以充分扩增目标序列。

PCR技术应用PCR技术在许多领域中都有广泛的应用。

以下是一些常见的应用情景：1.基因测序：PCR技术可以扩增特定的基因区域，从而进行测序。

这对于研究基因功能和遗传变异非常重要。

2.突变检测：PCR技术可以用来检测基因中的突变。

通过比较健康和患病个体的PCR产物，可以确定可能的致病突变。

3.DNA克隆：PCR技术可以用来扩增特定的DNA片段，以进行进一步的克隆。

这对于构建基因工程载体和表达重组蛋白非常有用。

4.种属鉴定：PCR技术可以通过扩增和分析特定的DNA序列，用于鉴定生物种属。

这对于环境监测和物种保护至关重要。

PCR实验中的关键操作PCR实验中有一些关键的操作需要注意，以确保实验的准确性和可靠性。

1.引物设计：引物的设计对PCR反应的特异性和效率至关重要。

PCR实验室核酸检测的常见问题及异常结果分析

PCR实验室核酸检测的常见问题及异常结果分析来源：医学检验沙龙综合整理部分内容来源：检验星空、二院检验之窗编辑：小龙这3年来，检验的工作日常一定是离不开核酸检测的，毕竟检验人员是核酸检测工作的主力军，我们不但要保证检测结果的有效性，还时刻面临着被感染的风险。

本文为大家讲解《PCR实验室新冠核酸检测操作注意事项》，重点从新冠病毒生理特性、荧光PCR原理、PCR实验室筹备规范、样本检测环节操作、实验室数据分析、常见问题解析等几个方面讨论学习。

1、传染源目前所见传染源主要是新型冠状病毒感染的患者。

无症状感染者也可能成为传染源。

2、传播途径经呼吸道飞沫和密切接触传播是主要的传播途径。

在相对封闭的环境中长时间暴露于高浓度气溶胶情况下存在经气溶胶传播的可能。

由于在粪便及尿中可分离到新型冠状病毒，应注意粪便及尿对环境污染造成气溶胶或接触传播。

3、荧光PCR原理重复进行“变性- 退火- 延伸”三个过程，模板DNA的量就会呈指数倍增加，理论上讲经过n 个循环之后，模板量就会达到2的n 次方。

4、常见问题解析①新冠试剂出现翘尾，怎么处理？答：如果是个别单一通道翘尾，不管是FAM还是VIC通道，首先按照要求复查，复查建议重新采样，如果不方便重新采样建议对原有样本进行重新提取核酸验证，如果复查阴性判读阴性，如果复查还是同一通道翘尾，就要对结果仔细审核，一是要排除实验室污染，二是要对病人信息了解清楚，从临床症状及接触史排查，如果没法确认，建议必须重新采样复查，如有必要可以采用另一家试剂来验证。

如果出现大量的弱阳性扩增翘尾，首要原因是考虑实验室污染，可以通过做环境样本和阴性对照做验证排除。

②N基因和1ab基因是新冠病毒的特有基因吗，灵敏度哪个更高？是否会和其他冠状病毒片段重叠？答：N基因跟1ab都是特异的，不会跟其他呼吸道病原体交叉反应。

设计时候，两个基因的序列不一样，导致灵敏度不一样，N基因的灵敏度比1ab灵敏度高。

③新冠检测结果和临床诊断不符合，怎么解读？答：新冠病毒由于是RNA病毒，容易降解，另外检测结果也和取样，核酸提取以及样本本身的核酸浓度有关，需要逐一分析，同时可以结合临床症状判读。

PCR程序

1. 目的:为规范上海通用东岳动力总成有限公司质量问题解决的流程（包括问题的记录、定义、分配、紧急措施、原因分析、长期对策及效果验证等方面），制定本程序。

2. 编制和适用范围:2. 1本程序由上海通用东岳动力总成有限公司质量部编制。

2. 2该程序适用于本公司所有部门。

PCR表格是用于问题解决及交流的通用工具。

3. 术语:PCR ：问题交流报告。

4.责任:4. 1质量部负责PCR表格的编制和总体维护，负责提供关于如何正确使用并跟踪相关的PCR的培训。

4. 2各部门经理负责确保本部门所有员工都经过正确使用PCR的相关培训。

4. 3 各部门经理负责本部门内的问题解决状态，应定义问题责任人并确保PCR按时完成。

部门可授权其部门内PCR协调员确定问题责任人。

当PCR从一个部门发往另一个部门，部门经理需在PCR上签字确认。

1.PurposeTo provide a tool to document and communicate a problem. The PCR is the documented comprehensive summary of a problem stating all related activities surrounding the problem, including problem identification, assignment, short-term containment, root-cause analysis, long-term countermeasures, and final verification of problem resolution.2. Preparation and applicability2.1 This procedure is initiated by Quality Assurance of SGM-DYPT.2.2 This procedure is applicable to all depts. The PCR form is used as the common tool to communicate problem resolution status.3. TermsPCR – Problem Communication Report4. Responsibility4.1QD will champion the development of PCR formand it’s overall maintenance, and provide relatedtraining as required on proper usage and how totrack PCRs.4.2The Director of each dept. is responsible forensuring that the employees are trained on how toproperly use PCR form.4.3The Director of each dept. is responsible for the4. 4 责任部门、责任人牵头问题解决活动，负责填写PCR并跟踪其状态直至问题关闭。

PCR问题交流报告

作图
4a.1复杂问题根本原因查找: 4a.2复杂问题根本原因产生分析 :
A.差异分析 :
根本原因分析
验证方法
分析差异产生的原因 :
C.根本原因验证确认测试:
责任人
目标日期
状态
5.缺陷探测度原因分析（根据3b.1与3b.2中FMEA控制计划、标准规范中未明确的填写以下内容）
零件名
2 .当场控制办法立即停止加工、筛选所有孔的加工直径是否正确，并打标识
第五个为什么？根本原因加工工具的标识有缺陷，未做检查，造成不良产品溢出。
3b. 2问题产生原因分析(5个为什么 ): 第一个为什么？直接原因螺钉孔孔径加工错误
第二个为什么？间接原因螺钉安装后不牢固。
7a. 验证方法(责任人填写): 8b. 验证结果(验证人填写 ):
跟踪记录.从 ______ 到 _______ 发现不符合项数量 _______
断点
3a. 过程和零件检查 : 以下概括说明 :
1.是否遵循正确的流程？ Is correct process followed? 2.是否使用正确的工具？ Is correct tool being used?
YN √
√
3.是否使用正确的零件？ Is correct part being used?
防错Error proofing______工程更改EWO______分层审核Layed Audit______过程能力CPK____Lessons learn____
.已结案 Closed 日期Date:
签名Signature: _______________
xx
2016/11/5
xx
2016/11/7

BIQ竞赛题(制造质量)

BIQ制造质量必答题1、PCR的中文含义是什么？答案：问题交流报告2、线上员工发现（不合格）可疑物料时该怎么办？答案：按照可疑物料处理流程：标识，隔离，通知班组长3、在GMS五大原则中，什么是制造质量的先决条件？ A、人员参与 B、标准化 C、缩短制造周期 D、持续改进答案：B4、质量检验的依据是什么？答案：产品质量标准5.防错的类型有哪两类？答案：设计防错和过程防错6.线上员工什么时候要做一分钟质量检查？答案：员工在完成当班的第一个标准化操作和最后一个标准化操作时7.质量边界样本分为哪两类？答案：质量边界样本可分为图示样本和实物样本两种。

8.质量确认站是通过什么载体将发现的问题传递给车间？A.质量信息跟踪卡 B.质量信息卡Infor-card C.质量信息反馈看板卡答案：C9、什么是质量边界样本？答案：允许通过（或能够接受）的最低限度的产品质量标准。

10、质量缺陷按严重程度分为A、B、C三级，其中C级质量缺陷的定义是什么？答案：用户能够接受但是需要持续改进的缺陷。

11、在7钻流程中，用于分析第七钻(极端复杂的问题)的质量工具是什么？答案：Red-X（红叉）12、在7钻流程中，第四钻的分析主要由谁负责？A．员工 B.车间质量工程师 C.供应商质量工程师 D产品工程师答案：C共答1、QCOS的中文含义是什么？它的作用是什么？答案：QCOS即质量控制操作表，是用来记录、评估工序风险质量控制和确保工序内质量的一种工具。

2、在操作过程中的质量检查方法，除了“看”还有哪些？列举其中的三个。

答案：按压、触摸、听、计数、推-拉、看、工具3、在总装车间开展的5×2×5检查中，每个5代表什么含义？答案：5——每班抽查5次、5——每次抽检2台、5——出现频次最多的5个质量问题4、GMS制造质量包括哪5大要素答案：⑴产品质量标准；⑵制造程序认证；⑶过程控制和验证；⑷质量反馈/前馈；⑸质量系统管理。

PCR质量问题交流报告

记录编号:QR-DXC-201-52
问题名称
跟踪号发布部门发布源自间延期申请部门延期申请时间
延期后完成时间
1.问题描述：
2.问题解决措施描述：
3.措施的有效性说明：
4.延期原因说明：
5.是否需制定新措施：是：□否：□
新措施描述：
措施制定人：措施执行人：计划完成时间：
延期申请人：部门长审核：分管副总批准：
5.短期措施（牵头负责部门）：
措施
措施制定人
措施执行人
计划完成日期
实施检查
7.长期措施（牵头负责部门）：
措施
措施制定人
措施执行人
计划完成日期
实施检查
长期措施执行情况（牵头负责部门）：
部门长审核：
短期措施执行情况（牵头负责部门）：
部门长审核：
8.问题验证关闭（问题发现部门/质量推进室/质量管理部）：
质量问题交流报告（PCR）延期申请报告
问题交流报告（PCR）
问题名称：
跟踪号：
记录编号:QR-DXC-201-23
车型：
零件名称：
发生地点：
6.分析问题产生的根本原因（牵头负责部门）：
反馈日期：
频次/数量：
范围/时间段：
提出部门：
提出人：
部门长审核：
1.问题描述：
2.问题定义：
标准：
偏差：
3.缺陷类别：□设计缺陷□制造缺陷□来料缺陷
4.改善目标要求：

pcr实验报告结论与心得

pcr实验报告结论与心得
PCR实验报告结论与心得
PCR是分子生物学中非常重要的一项技术，能够在短时间内扩增
目标DNA片段，是很多研究的基础。

在这次实验中，我们学习了PCR
技术的基本原理和实验操作，并通过实验体验了PCR扩增技术的优越性。

一、实验步骤
1.组织细胞诱捕DNA提取
2.PCR扩增反应体系的配置
3.PCR反应程序设定
4.PCR产物分析
二、实验结果
1.获得组织细胞DNA
2.成功扩增目标基因片段
3.得到目标产物，通过凝胶电泳进行分析，并确定所扩增片段的大小。

三、实验结论
1.成功获得组织细胞DNA。

2.通过PCR技术成功扩增目标片段，证明PCR技术的可靠性。

3.凝胶电泳分析结果显示，所扩增片段大小符合预期，且PCR产物的
纯度良好。

4.因此，我们可以得出结论，在本次PCR实验中，我们成功地扩增了
目标片段，并获得了目标产物。

四、实验心得
PCR技术是现代生物学中一项十分重要的技术，它可以在较短时
间内用非常高的灵敏度检测到极低浓度的DNA序列，是分子生物学中
最具实用性的技术之一。

在本次实验中，我们对PCR技术的原理有了
更深入的了解，并且通过实验操作，更真正地认识到PCR技术的优越性。

同时，对PCR实验操作的注意点和技巧也有了更深刻的认识和理
解，这将对今后的科研和实验工作有着重要的参考价值。

总之，本次PCR实验是非常有意义的一次实践活动，能够更好地促进我们对PCR技术的学习和理解，使我们在今后的实验研究中更加得心应手，获得更好的实验结果。

(PCR)质量问题交流报告

年月日编号责任部门重要度班组长段长技术员科长主任部长责任回执人发报提报人发报提报单位问题描述
（PCR）质量问题交流报告
记录编号：
顺序号：
发现日期：
年月日
编号
责任部门
重要度
班组长
段长
技术员
科长（主任）
部长
责任（回执）人
发报（提报）人
发报（提报）单位
问题描述：（附相关图片等材料）
潜在影响范围/数量：
2.根据4M鱼骨图评审潜在原因
潜在原因
验证方法
验证日期
状态
5.验证方法和结果：
更新文件（产品文件、工艺文件）、实施计划等材料作为验证的依据
跟踪记录：从到发现不符合项数量:_______
项目关闭情况:◇Y◆N
日期：年月日
签名：
注：①严格按照要求填写，由涉及人员签字确认，主管领导审批，要求24小时之内回复，否则每延期一天考核10元；②责任人在Audit评审会/质量门例会上汇报进展情况，直到交流报告质量问题关闭为止；③跟踪记录发现的不符合项数量均要进行处理。
3.根本原因（5W）
（1W）直接原因：
（2W）间接原因：
（3W）间接原因：
（4W）间接原因：
（5W）间接原因：
车型：发动机：变速箱：
工位
班组
物料零件号和名称
4
Байду номын сангаас解决办法
负责人
完成时间
状态
断点车号
内饰
a
短期措施（临时）：（可附材料）
现场控制办法：
断点——首台车号：
b
长期措施（永久）：（可附材料）
1.因果分析（头脑风暴）：（可后附材料）

PCR常见问题、原因分析及其对策

化学修饰
•
•
Roche : FastStart Taq Abgene: Thermo-start® DNA Polymerase Stratagene: SureStart™ Taq
•大大提高PCR
反应的特异性
抗体抑制
Invitrogen： AccuPrimeTM Taq Platinum® Taq • TaKaRa： ExTaqTM HotStart Version
PCR试剂盒复杂模板扩增、大规模基因检测
特异性
－热启动 Taq酶
原理
• 蜡封 • 抗体抑制 • 化学修饰
特点
用途
• 避免非特异性扩增 • 提高PCR反应的特异性 • 基因组扩增
• RT-PCR
特异性
产品类型
－热启动 Taq酶
产品名称
• 天为时代: HotStart Taq
•
产品性能
策略之四
• 使用PCR增强剂
甲酰胺，DMSO，甘油，甜菜碱等都可充当PCR的增强剂。其可能的机理是降低熔解温度，从而有助于引物退火并辅助DNA聚合酶延伸通过二级结构区。

增强剂浓度要适当
北京天为时代科技有限公司
http//
免费咨询：800－810－2177
PCR常见问题之三
• 拖尾

现象：产物在凝胶上呈Smear状态。
M 1 2
PCR常见问题之三
• 拖尾
原因
1.
2. 3. 4. 5. 6.
模板不纯 Buffer不合适退火温度偏低酶量过多 dNTP、Mg2+浓度偏高循环次数过多
1.
2.
对策
3. 4. 5.

质量问题交流报告(PCR)管理办法(D版)

1.目的1.1及时传递需要重点关注的质量信息；1.2规范需要重点关注的质量信息的传递渠道和方式；1.3为需要重点关注的质量问题的解决提供一个较为有效的平台和工具。

2.定义术语2.1 PCR:即问题交流报告（见附件1），基于解决问题的标准化一页纸报告；3.适用范围:3.1本办法适用于与东风小康全质量链上各业务板块间有关产品质量问题交流与处理的管理，以及关重、疑难质量问题的解决管理,含但不限于生产现场出现的疑难产品质量问题、产品储运及发运点检过程中出现的产品质量问题、销售商和服务商及用户反馈的产品质量问题.3.2 PCR应用于:3.2。

1 三包旧件退赔前20位，以及三包旧件退赔在20位以外但涉及安全、性能的质量问题；3。

2。

2 VES评审过程中发现的连续(重复）出现2次以上及影响安全、性能的质量问题;3。

2。

3 三大车间下线质量确认站的每月前10位缺陷及影响安全、性能的质量问题；3。

2.4 整车在检测线至终检的检验过程中每月前10位缺陷及影响安全的质量问题；3.2。

5 发运点检每月前5位及在检验过程中发现影响安全、性能的质量问题；3。

2.6 市场反馈信息中售时每月前10位、售后每月前20位质量问题及影响安全、性能的质量问题；3。

2。

7客户抱怨的重大质量问题；3.2.8第5钻以上的质量问题；3.2.9 公司领导特别强调或反复强调要求重点整改的质量问题.4.职责4.1质管部：4。

1。

1负责检查各部门提交PCR的符合性并编写跟踪号；4。

1.2负责按照PCR的缺陷类别递交各责任部门，组织疑难PCR协调会;4。

1。

3负责在技术质量例会上，通报PCR的运行情况；4.1。

4负责提交发运点检每月前5位质量问题及涉及安全、性能质量问题的PCR，并对所提交的PCR进行验证关闭；4。

1.5 负责第5钻以上的质量问题PCR、研发中心和采购中心牵头负责PCR的跟进与关闭；4。

1。

6负责PCR的归口管理，负责PCR的跟踪、督察、督办、考核。