E4CPG_COA_21093_MedChemExpress
四苯基乙烯衍生物的合成与生物成像研究
中文摘要四苯基乙烯衍生物的合成与生物成像研究生物成像已成为当今生物研究中的有力工具，因为它提供了一种独特的方法来可视化细胞的形态细节。
荧光成像是实时，非侵入性监测生物分子的最强大的生物成像技术之一。
在过去几十年中，荧光探针的发展已促进细胞生物学的重大进展。
各种荧光探针，如半导体量子点，荧光碳点，Ln离子掺杂纳米材料，光致发光硅纳米颗粒，金属纳米团簇，有机小分子和有机荧光纳米颗粒已被合成并广泛研究用于生物应用。
聚集诱导发光（AIE）材料由于其优异的光学性质在生物成像领域得到了广泛的研究。
本论文基于四苯基乙烯（TPE），合成了一系列具有聚集诱导发光性质的荧光材料，并利用这些材料制备的纳米粒子进行生物成像。
具体研究内容如下：1.以四苯基乙烯为核，通过选择电子供体（D）和受体（A）的适当组合来设计和合成AIE红光分子。
通过将二甲胺和氰基部分引入TPE中，合成了具有不同AIE特性的四种新的红光化合物1,2,3和4。
四种化合物在固态下的最高量子产率可达到40％。
该化合物可以容易地制造成均一稳定的荧光纳米粒子。
并且化合物1负载的Pluronic F127 纳米粒子的发射主峰位在650nm处，并且高荧光量子产率为15.2％。
化合物1和2的纳米粒子对A549肺癌细胞的生物学成像表明这些化合物是癌细胞的有效荧光探针。
2.基于四苯基乙烯，合成出一种新型有机荧光染料TPE-2NH2。
这种材料发绿光，在NO存在下能与其发生反应生成的产物发红光，因此这种材料具有检测NO的性质。
由于材料的疏水性，我们将此染料负载到二氧化硅介孔纳米粒子中，制备了的纳米粒子均一，稳定，具有120nm的平均粒径，良好的生物相容性，较高的灵敏度。
将此纳米粒子与MCF-7细胞共培养，在细胞质中发现红光信号。
因此，此探针在细胞内检测到NO，表现出良好的应用价值。
关键词：聚集诱导发光，四苯基乙烯，生物成像1AbstractSynthesis and Bioimaging Application of TetraphenyletheneDerivativesBiological imaging (bioimaging) has become a powerful tool in biological research today because it offers a unique approach to visualize the morphological details of cells. Fluorescence imaging is one of the most powerful bioimaging techniques for real-time, non-invasive monitoring of biomolecules of interest in their native environments with high spatial and temporal resolution, and is instrumental for revealing fundamental insights into the production, localization, trafficking, and biological roles of biomolecules in complex living systems. The development of fluorescent probes has facilitated the recent significant advances in cell biology and medical diagnostic imaging. Over the past few decades, a variety of fluorescent probes, such as semiconductor quantum dots, fluorescent carbon dots, Ln ion doped nanomaterials, photo-luminescent silicon nanoparticles, metallic nanoclusters, organic small molecules and organic fluorescent nanoparticles have been synthesized and extensively investigated for biological applications. Aggregation Induce Emision (AIE) materials have been extensively studied in the field of biomimetic imaging due to their excellent optical properties. In this paper, based on tetraphenyl ethylene (TPE), a series of fluorescent materials with aggregation induced luminescent properties were synthesized and biologically imaged using the nanoparticles prepared by these materials. The specific research contents are as follows:1. Organic fluorescent probes play an important role in modernbiomedical research, such as biological sensing and imaging. However, the development of organic fluorophores with efficient aggregate state emissions expanded to the red to near-infrared region is still challenging. Here, we present a series of highly efficient Far Red/Near-Infrared (FR/NIR)2fluorescent compounds with aggregation-induced emission (AIE) properties by attaching electron donor and accepter to tetraphenylethene (TPE) moieties through a simple synthesis method. These compounds exhibit the pronounced fluorescence enhancement in aggregate state, the red to near infrared emission, and facile fabrication into uniform compouds-loaded Pluronic F127 NPs. The emission maximum of the NPs fabricated by the self assembly method is in the range of 550nm-850nm and the highest fluorescent quantum yield is 15.2%. The biological imaging of NPs of compound 1 and 2 for A549 lung cancer cell indicates that these compounds are effective fluorescent probes for cancer cell with high specificity, high photostability and good fluorescence contrast.2. Based on tetraphenylethylene, a novel organic fluorescent dye TPE-2NH2 was synthesized. This material is green emision, it can be reacted and the product generated red emision the presence of NO, so this material has the nature of the detection of NO. Due to the hydrophobicity of the material, we loaded the dye into the silica mesoporous nanoparticles. The prepared nanoparticles were homogeneous and stable, with an average particle size of 120 nm, good biocompatibility and high sensitivity. The nanoparticles were co-cultured with MCF-7 cells, and red light was found in the cytoplasm. Therefore, this probe in the cell to detect NO, showing a good application value.Keywords：Aggregation-induced emission，Tetraphenylethene，bioimaging3目录第1章前言 (1)1.1引言 (1)1.2具有AIE性质的化合物 (3)1.3AIE小分子生物探针的制备及其应用 (16)1.4负载AIE化合物的荧光纳米粒子的制备及其应用 (28)1.5本论文设计思想和主要内容 (32)1.6参考文献 (33)第2章具有AIE性质的高效红光分子的合成及细胞成像 (45)2.1引言 (45)2.2实验部分 (46)2.3结果与讨论 (49)2.4本章小结 (57)2.5参考文献 (60)第3章基于AIE染料的RNS荧光探针的合成及性质研究 (62)3.1引言 (62)3.2实验部分 (63)3.3结果与讨论 (65)3.4本章小结 (70)3.5参考文献 (71)第4章结论 (74)作者简介 (83)致谢 (84)41第1章 前言1.1引言人们在分子水平上理解基本的发光过程已经取得了显著的成就。
3_种常用碳青霉烯类抗生素血药浓度UPLC-MS
3种常用碳青霉烯类抗生素血药浓度UPLC-MS/MS检测方法的建立Δ秦怡1＊，张瑞霞2，吕雅瑶2，翁莉莉1，张弋2 #（1.天津医科大学一中心临床学院，天津 300192；2.天津市第一中心医院药学部，天津 300192）中图分类号 R917；R978.1文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2024）03-0343-05DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2024.03.14摘要目的建立3种临床常用碳青霉烯类抗生素——厄他培南（ETP）、亚胺培南（IPM）、美罗培南（MEM）血药浓度检测的超高效液相色谱-质谱联用（UPLC-MS/MS）法。
方法血浆样品经甲醇沉淀蛋白后，以3种抗生素的稳定性同位素（ETP-D4、IPM-D4、MEM-D6）为内标，采用ACQUITY UPLC BEH C18（2.1 mm×50 mm，1.7μm）色谱柱分离；流动相为98%乙腈+2%水+0.1%甲酸和98%水+2%乙腈+0.1%甲酸，梯度洗脱；流速为0.3 mL/min；柱温为40 ℃；采用正离子、多反应监测模式进行扫描分析。
结果该方法专属性良好，在ETP、IPM、MEM 0.2～200、0.1～100、0.1～100μg/mL范围内线性良好（r2≥0.993），批内、批间精密度和准确度良好（RE均≤5.14%，RSD均≤11.15%），基质效应、提取回收率较一致（RSD≤12.99%）。
结论本实验建立了一种可以同时定量ETP、IPM、MEM血药浓度的UPLC-MS/MS法，该方法样品前处理简单、检测时间短、所需样品量少，可满足临床需求。
关键词碳青霉烯类抗生素；超高效液相色谱-质谱联用；血药浓度；厄他培南；亚胺培南；美罗培南Establishment of UPLC-MS/MS method for the determination of plasma concentration of three common carbapenem antibioticsQIN Yi1，ZHANG Ruixia2，LYU Yayao2，WENG Lili1，ZHANG Yi2（1. First Central Clinical College of Tianjin Medical University，Tianjin 300192，China；2. Dept. of Pharmacy，Tianjin First Central Clinical Hospital，Tianjin 300192， China）ABSTRACT OBJECTIVE To establish a UPLC-MS/MS method for the determination of plasma concentration of three carbapenem antibiotics，i.e. ertapenem （ETP），imipenem （IPM）and meropenem （MEM）.METHODS After protein precipitation with methanol，the plasma samples were separated by ACQUITY UPLC BEH C18column （2.1mm×50mm，1.7μm）using stable isotopes of three antibiotics （ETP-D4，IPM-D4，MEM-D6）as the internal standard. The mobile phases were 98%acetonitrile +2% water +0.1%formic acid and 98%water +2%acetonitrile +0.1%formic acid，by gradient elution. The flow rate was 0.3mL/min and the column temperature was 40 ℃. Scanning analysis was performed in the positive ion and multiple reaction monitoring mode. RESULTS The method had good specificity，good linearity （r2≥0.993）in the range of 0.2-200，0.1-100and 0.1-100μg/mL of ETP，IPM and MEM，and good intra-batch and inter-batch precision and accuracy （all RE≤5.14%，all RSD≤11.15%），the matrix effect and extraction recovery were consistent （RSD≤12.99%）. CONCLUSIONS This study establishes the UPLC-MS/MS method to simultaneously quantify the plasma concentration of ETP，IPM and MEM. The method has the advantages of simple pretreatment， short detection time and small sample quantity to meet clinical requirement.KEYWORDS carbapenem antibiotics； UPLC-MS/MS； plasma concentration； ertapenem； imipenem； meropenem碳青霉烯类抗生素具有抗菌谱广、抗菌活性强、耐药率低的特点，已成为治疗重症感染的主要选择。
Gelucire-14-44-SDS-MedChemExpress
Inhibitors, Agonists, Screening LibrariesSafety Data Sheet Revision Date:Nov.-23-2018Print Date:Nov.-23-20181. PRODUCT AND COMPANY IDENTIFICATION1.1 Product identifierProduct name :Gelucire 14/44Catalog No. :HY-Y1892CAS No. :121548-04-71.2 Relevant identified uses of the substance or mixture and uses advised againstIdentified uses :Laboratory chemicals, manufacture of substances.1.3 Details of the supplier of the safety data sheetCompany:MedChemExpress USATel:609-228-6898Fax:609-228-5909E-mail:sales@1.4 Emergency telephone numberEmergency Phone #:609-228-68982. HAZARDS IDENTIFICATION2.1 Classification of the substance or mixtureNot a hazardous substance or mixture.2.2 GHS Label elements, including precautionary statementsNot a hazardous substance or mixture.2.3 Other hazardsNone.3. COMPOSITION/INFORMATION ON INGREDIENTS3.1 SubstancesSynonyms:NoneFormula:N/AMolecular Weight:N/ACAS No. :121548-04-74. FIRST AID MEASURES4.1 Description of first aid measuresEye contactRemove any contact lenses, locate eye-wash station, and flush eyes immediately with large amounts of water. Separate eyelids with fingers to ensure adequate flushing. Promptly call a physician.Skin contactRinse skin thoroughly with large amounts of water. Remove contaminated clothing and shoes and call a physician.InhalationImmediately relocate self or casualty to fresh air. If breathing is difficult, give cardiopulmonary resuscitation (CPR). Avoid mouth-to-mouth resuscitation.IngestionWash out mouth with water; Do NOT induce vomiting; call a physician.4.2 Most important symptoms and effects, both acute and delayedThe most important known symptoms and effects are described in the labelling (see section 2.2).4.3 Indication of any immediate medical attention and special treatment neededTreat symptomatically.5. FIRE FIGHTING MEASURES5.1 Extinguishing mediaSuitable extinguishing mediaUse water spray, dry chemical, foam, and carbon dioxide fire extinguisher.5.2 Special hazards arising from the substance or mixtureDuring combustion, may emit irritant fumes.5.3 Advice for firefightersWear self-contained breathing apparatus and protective clothing.6. ACCIDENTAL RELEASE MEASURES6.1 Personal precautions, protective equipment and emergency proceduresUse full personal protective equipment. Avoid breathing vapors, mist, dust or gas. Ensure adequate ventilation. Evacuate personnel to safe areas.Refer to protective measures listed in sections 8.6.2 Environmental precautionsTry to prevent further leakage or spillage. Keep the product away from drains or water courses.6.3 Methods and materials for containment and cleaning upAbsorb solutions with finely-powdered liquid-binding material (diatomite, universal binders); Decontaminate surfaces and equipment by scrubbing with alcohol; Dispose of contaminated material according to Section 13.7. HANDLING AND STORAGE7.1 Precautions for safe handlingAvoid inhalation, contact with eyes and skin. Avoid dust and aerosol formation. Use only in areas with appropriate exhaust ventilation.7.2 Conditions for safe storage, including any incompatibilitiesKeep container tightly sealed in cool, well-ventilated area. Keep away from direct sunlight and sources of ignition.Recommended storage temperature:Pure form-20°C 3 years4°C 2 yearsIn solvent-80°C 6 months-20°C 1 monthShipping at room temperature if less than 2 weeks.7.3 Specific end use(s)No data available.8. EXPOSURE CONTROLS/PERSONAL PROTECTION8.1 Control parametersComponents with workplace control parametersThis product contains no substances with occupational exposure limit values.8.2 Exposure controlsEngineering controlsEnsure adequate ventilation. Provide accessible safety shower and eye wash station.Personal protective equipmentEye protection Safety goggles with side-shields.Hand protection Protective gloves.Skin and body protection Impervious clothing.Respiratory protection Suitable respirator.Environmental exposure controls Keep the product away from drains, water courses or the soil. Cleanspillages in a safe way as soon as possible.9. PHYSICAL AND CHEMICAL PROPERTIES9.1 Information on basic physical and chemical propertiesAppearance White to off-white (Oil)Odor No data availableOdor threshold No data availablepH No data availableMelting/freezing point No data availableBoiling point/range No data availableFlash point No data availableEvaporation rate No data availableFlammability (solid, gas)No data availableUpper/lower flammability or explosive limits No data availableVapor pressure No data availableVapor density No data availableRelative density No data availableWater Solubility No data availablePartition coefficient No data availableAuto-ignition temperature No data availableDecomposition temperature No data availableViscosity No data availableExplosive properties No data availableOxidizing properties No data available9.2 Other safety informationNo data available.10. STABILITY AND REACTIVITY10.1 ReactivityNo data available.10.2 Chemical stabilityStable under recommended storage conditions.10.3 Possibility of hazardous reactionsNo data available.10.4 Conditions to avoidNo data available.10.5 Incompatible materialsStrong acids/alkalis, strong oxidising/reducing agents.10.6 Hazardous decomposition productsUnder fire conditions, may decompose and emit toxic fumes.Other decomposition products - no data available.11.TOXICOLOGICAL INFORMATION11.1 Information on toxicological effectsAcute toxicityClassified based on available data. For more details, see section 2Skin corrosion/irritationClassified based on available data. For more details, see section 2Serious eye damage/irritationClassified based on available data. For more details, see section 2Respiratory or skin sensitizationClassified based on available data. For more details, see section 2Germ cell mutagenicityClassified based on available data. For more details, see section 2CarcinogenicityIARC: No component of this product present at a level equal to or greater than 0.1% is identified as probable, possible or confirmed human carcinogen by IARC.ACGIH: No component of this product present at a level equal to or greater than 0.1% is identified as a potential or confirmed carcinogen by ACGIH.NTP: No component of this product present at a level equal to or greater than 0.1% is identified as a anticipated or confirmed carcinogen by NTP.OSHA: No component of this product present at a level equal to or greater than 0.1% is identified as a potential or confirmed carcinogen by OSHA.Reproductive toxicityClassified based on available data. For more details, see section 2Specific target organ toxicity - single exposureClassified based on available data. For more details, see section 2Specific target organ toxicity - repeated exposureClassified based on available data. For more details, see section 2Aspiration hazardClassified based on available data. For more details, see section 212. ECOLOGICAL INFORMATION12.1 ToxicityNo data available.12.2 Persistence and degradabilityNo data available.12.3 Bioaccumlative potentialNo data available.12.4 Mobility in soilNo data available.12.5 Results of PBT and vPvB assessmentPBT/vPvB assessment unavailable as chemical safety assessment not required or not conducted.12.6 Other adverse effectsNo data available.13. DISPOSAL CONSIDERATIONS13.1 Waste treatment methodsProductDispose substance in accordance with prevailing country, federal, state and local regulations.Contaminated packagingConduct recycling or disposal in accordance with prevailing country, federal, state and local regulations.14. TRANSPORT INFORMATIONDOT (US)This substance is considered to be non-hazardous for transport.IMDGThis substance is considered to be non-hazardous for transport.IATAThis substance is considered to be non-hazardous for transport.15. REGULATORY INFORMATIONSARA 302 Components:No chemicals in this material are subject to the reporting requirements of SARA Title III, Section 302.SARA 313 Components:This material does not contain any chemical components with known CAS numbers that exceed the threshold (De Minimis) reporting levels established by SARA Title III, Section 313.SARA 311/312 Hazards:No SARA Hazards.Massachusetts Right To Know Components:No components are subject to the Massachusetts Right to Know Act.Pennsylvania Right To Know Components:No components are subject to the Pennsylvania Right to Know Act.New Jersey Right To Know Components:No components are subject to the New Jersey Right to Know Act.California Prop. 65 Components:This product does not contain any chemicals known to State of California to cause cancer, birth defects, or anyother reproductive harm.16. OTHER INFORMATIONCopyright 2018 MedChemExpress. The above information is correct to the best of our present knowledge but does not purport to be all inclusive and should be used only as a guide. The product is for research use only and for experienced personnel. It must only be handled by suitably qualified experienced scientists in appropriately equipped and authorized facilities. The burden of safe use of this material rests entirely with the user. MedChemExpress disclaims all liability for any damage resulting from handling or from contact with this product.Caution: Product has not been fully validated for medical applications. For research use only.Tel: 609-228-6898 Fax: 609-228-5909 E-mail: tech@Address: 1 Deer Park Dr, Suite Q, Monmouth Junction, NJ 08852, USA。
CAS号413611-93-5_10074-G5_MedBio_物理性质
1、产品物理参数：
常用名
10074-G5
英文名
10074-G5
CAS号
413611-93-5
分子量
332.313
密度
1.4±0.1 g/cm3
沸点
538.6±60.0 °C at 760 mmHg
分子式
C18H12N4O3
熔点
无资料
闪点
279.5±32.9 °C
2、技术资料：
体外研究
10074-G5抑制Daudi Burkitt淋巴瘤细胞的生长并破坏c-Myc / Max二聚化。针对Daudi和HL-60细胞的IC50值分别为15.6和13.5μM[1]。10074-G5在区域Arg363-Ile381中结合Myc肽Myc353-437，Kd值为2.8μM。10074-G5结合在由诱导螺旋结构域（Leu370-Arg378）的N末端的扭结（Asp379-Ile381）产生的空腔中[3]。
≥98%
品牌
货号
中文名称
英文名称
CAS
包装
纯度
MedBio
MED11457
CDK inhibitor II
CDK inhibitor II
1269815-17-9
50mg
≥98%
品牌
货号
中文名称
英文名称
CAS
包装
纯度
MedBio
MED11591
(S)-CCG-1423
(S)-CCG-1423
None
体内研究
静脉注射20 mg / kg小鼠的血浆半衰期为10074-G5，为37分钟，血药浓度峰值为58μM，比肿瘤峰值浓度高10倍[1]。
3、同类产品列表：
一甲基澳瑞他汀 e 化学结构-概述说明以及解释
一甲基澳瑞他汀e 化学结构-概述说明以及解释1. 引言1.1 概述一甲基澳瑞他汀（Simvastatin）是一种广泛应用于临床治疗高胆固醇血症和心血管疾病的药物。
它属于被称为他汀类药物的一员，是一种竞争性抑制HMG-CoA还原酶的药物，通过降低胆固醇的合成来达到降低血浆胆固醇的效果。
随着现代生活方式的改变和不良饮食习惯的普遍存在，高胆固醇血症在全球范围内变得越来越普遍。
该疾病不仅与心血管疾病的发展密切相关，还可能导致其他严重的健康问题，如动脉粥样硬化和心肌梗死等。
一甲基澳瑞他汀由黄曲霉属真菌产生，即通过天然发酵法生产得到。
然而，为了提高其药代动力学性质和治疗效果，科学家们通过改进和优化合成方法，合成了合成一甲基澳瑞他汀。
现在，一甲基澳瑞他汀已经成为一种被广泛研究和临床使用的药物。
在本篇文章中，我们将介绍一甲基澳瑞他汀的化学结构、合成方法、性质与用途等方面的内容。
通过深入了解一甲基澳瑞他汀，我们可以更好地理解它在治疗高胆固醇血症和心血管疾病方面的作用机制，并有望对该药物的未来发展提供一定的启示。
在接下来的章节中，我们将详细介绍一甲基澳瑞他汀的化学结构、合成方法以及它在临床上的广泛用途。
最后，我们将总结这篇文章的主要观点，并对一甲基澳瑞他汀的未来进行展望。
通过本文的阅读，读者将能够全面了解一甲基澳瑞他汀，为今后的相关研究和临床实践提供有益的指导与参考。
文章结构部分的内容如下：1.2 文章结构本文主要包含以下几个部分：引言、正文和结论。
引言部分通过概述一甲基澳瑞他汀的化学结构和合成方法，介绍背景知识和研究意义。
此外，本部分还会明确文章的目的，即对一甲基澳瑞他汀进行全面的分析和探讨。
正文部分将围绕一甲基澳瑞他汀展开讨论。
首先，我们将介绍一甲基澳瑞他汀的化学结构，包括其分子式、分子量等信息，并通过图表等形式直观地展示其结构。
其次，我们将详细介绍一甲基澳瑞他汀的合成方法，包括起始原料的选择、反应步骤和条件等。
超高效液相色谱-串联质谱法测定猪尿中9种β-受体激动剂残留
Ａｃ ｕｔ Ｌ ｑ ｉ ＵＰ Ｃ超 高效 液相 色谱 仪 ， ｔｒ ｙ Ｗａｅｓ公
司 ； ｉｒ ｍａ ｓＱｕ ｔｒ ｅ ｅ Ｍ ｃｏ ｓ ａ ｔｏ Ｐｒｍｉｒ ＸＥ 三 重 四 级 杆 串
联质 谱仪 配有 电喷雾 离子 源 （ Ｓ ） Ｗａｅｓ 司 ； Ｅ Ｉ ， ｔｒ 公 旋 转浓 缩仪 ， Ｙ Ｌ 公 司 ； １ Ｅ Ｅ Ａ Ｍ．卜Ｑ 超 纯水 设 备 ， 卜 ｌ Ｍｉ ｌ ｏｅ公 司 ； 涡 混 合 器 ，ＫＡ 公 司 ； ＨＡ— 恒 温 ｉ ｒ ｐ 漩 Ｉ Ｓ Ｃ 水浴 振荡器 ， 峰仪器 公 司 ； Ｔ一 ５ 华 Ｃ １ ＲＴ低 温 高速 离
摘要
采 用 超 高 效 液 相 色 谱 一串联 质 谱 （ Ｉ — ／ ） 术 ， 测 了猪 尿 中 ９种 Ｇ 受 体 激 动 剂 的 残 留 。样 ＵＰ ＭＳ ＭＳ 技 Ｃ 检
品加 入 乙酸 铵 溶 液 后 经 ８ 盐 酸 葡 萄糖 醛 苷 酶 ／ 基 硫 酸 酯 酶 酶 解 ， 氢 氧 化 钠 溶 液 调 ｐ 分 别 用 乙 酸 乙 酯 和 甲 基 一 芳 用 Ｈ，
效期 ３个 月） 工作液用 水 由储 备液稀 释 ， ； 现用 现配 。
１ ２ 色 谱 条 件 ．
色谱 一 串联 质谱 法 （ Ｌ — ／ ） 合 电喷雾 离 ＵＰ Ｃ ＭＳ ＭＳ 结
子源 （ Ｓ ＋ ） 超 高 压 液 相 色 谱 柱 Ａｃ ｕｔ ＥＨ Ｅ Ｉ 和 ｑｉ Ｂ ｙ Ｃ８２１ 】（ ． ｍｍ×５ ｍｍ，． ， 时分析 猪 尿 中 ９ ０ １ ７ ｍ） 同 种
３ ６
分 析 仪 器
２１ 年第３ ０２ 期
超 高效 液 相 色谱 一 串联 质谱 法 测 定 猪 尿 中 ９种 Ｉ 受体 激 动 剂 残 留 ３ 一
四氢嘧啶基因簇在假单胞菌基因组中的分布研究
科技与创新┃Science and Technology&Innovation2020年第12期文章编号：2095－6835（2020）12－0132－02四氢嘧啶基因簇在假单胞菌基因组中的分布研究李向阳1，2，何兰1（1.凯里学院大健康学院，贵州黔东南苗族侗族自治州556011；2.复旦大学环境科学与工程系，上海200433）摘要：四氢嘧啶（Ectoine）是由细菌产生的一种次级代谢产物，赋予细菌抵御高渗透压环境的一种相容性溶质。
研究显示许多细菌具有四氢嘧啶基因簇（ectABCD-ask），然而关于该基因簇在假单胞菌属（Pseudomonas）中的分布还没有系统报道。
鉴于此，以公共数据库中已测序的9548株假单胞菌属菌株全基因组序列为数据，采用深度生物信息学分析方法探究假单胞菌中的四氢嘧啶基因簇分布及其组成共线性特征。
结果显示165株假单胞菌携带有四氢嘧啶基因簇，占假单胞菌株总数的1.78%，归属于32个不同的种，超过一半的菌株属于施氏假单胞菌（P.stutzeri）；同一种内菌株间，ectABCD-ask及其侧翼基因高度保守，共线性水平程度高。
系统地揭示了假单胞菌基因组中四氢嘧啶基因簇分布规律，将为开展生物合成四氢嘧啶提供重要菌种资源信息。
关键词：假单胞菌；基因组；四氢嘧啶；四氢嘧啶合成基因簇中图分类号：S476文献标识码：A DOI：10.15913/ki.kjycx.2020.12.058四氢嘧啶（1，4，5，6-四氢-2-甲基-4-嘧啶羧酸）是由某些嗜盐和耐盐微生物生物合成的相容性溶质，能够赋予细菌抵御胞外高渗透压环境压力[1]。
由于这些相容性溶质对蛋白质、细胞膜、核酸，甚至整个细胞都具有良好的稳定性能，因此在皮肤护理、食品加工、农业以及生物技术等领域具有广泛应用价值[1-2]。
假单胞菌（Pseudomonas）是一类革兰氏阴性菌，广泛分布于空气、土壤、水中等各种环境中，假单胞菌属种类繁多，约200余种[3-4]，其中不乏有对人体造成危害的种类，例如铜绿假单胞菌可引起慢性感染[5]。
4-羟基苯乙胺丹磺酰氯衍生化质谱
4-羟基苯乙胺丹磺酰氯衍生化质谱4-羟基苯乙胺丹磺酰氯（4-hydroxyphenethylamine sulfonyl chloride, HPEA-SC）是一种化合物，具有广泛的应用价值。
它是一种重要的有机合成中间体，常用于药物合成、染料合成和农药合成等领域。
本文将介绍4-羟基苯乙胺丹磺酰氯的质谱分析方法及其应用。
首先，让我们来了解一下4-羟基苯乙胺丹磺酰氯的化学结构。
它的分子式为C8H9NO3S，分子量为195.23 g/mol。
其结构中含有一个苯环和一个乙胺基团，以及一个丹磺酰氯基团。
由于丹磺酰氯是一种易于水解的衍生化合物，因此在实验室中常常选择使用4-羟基苯乙胺丹磺酰氯作为丹磺酰氯的模型化合物进行研究。
接下来，我们将介绍4-羟基苯乙胺丹磺酰氯的质谱分析方法。
质谱分析是一种常用的化学分析技术，可以用于确定化合物的结构、分子量和组成等信息。
对于4-羟基苯乙胺丹磺酰氯，常用的质谱分析方法包括质子核磁共振（1H NMR）、碳-13核磁共振（13C NMR）、质谱（MS）和红外光谱（IR）等。
在质谱分析中，质谱（MS）是一种非常有效的分析技术，可以用来确定化合物的分子量和结构。
通过MS技术，可以得到化合物的质谱图谱，从而确定其中所含有的各种基团和原子。
对于4-羟基苯乙胺丹磺酰氯，MS技术可以用来确定其分子量以及丹磺酰氯基团的离子峰。
此外，质子核磁共振（1H NMR）和碳-13核磁共振（13C NMR）可以提供关于化合物结构的更多信息，如化学位移、耦合常数和原子环境等。
红外光谱（IR）可以用来确定化合物中所含有的官能团，从而帮助确认其结构。
除了质谱分析方法，4-羟基苯乙胺丹磺酰氯在药物合成、染料合成和农药合成等领域中还具有重要的应用价值。
在药物合成中，它可以作为药物活性成分的合成中间体，用于制备抗癌药物、抗生素和消炎药等药物。
在染料合成中，它可以作为染料分子的合成前体，用于制备各种颜色的染料。
在农药合成中，它可以用来制备杀虫剂、杀菌剂和除草剂等农药。
顶空进样-毛细管气相色谱法检测饮料用焦糖色素中的4-甲基咪唑
准 确 度 高
，
。
毛
。
将 混 合 至 半 干 的 硅 藻 土 与 试 样 液 的 混 合 物 装
x
峰 形 尖 锐
，
柱 效 高
大 大 提 高 了
，
入 的 层 析 柱 (2 5
2 5 0
m
m
)
。
打开 层 析 柱 的 活 塞 关 闭活 塞
， ，
，
分 离 效果
，
采 用 自动 化 程 度 较 高 的 顶 空 进 样 技 术
，
测 浓 度 为
2 4
．
o 0 1 斗 g Cm l
．
。
甲基 咪 唑 达 到 基 线 分 离
。
方
精密 度试 验
取 对 照 品溶 液共
6
法 学各项试 验得 到满 意结果 份
，
分 别 按
“
2
．
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一种高通量检测方法评估多种杀虫剂协同作用于蜜蜂的毒性风险
５６APICULTURE OF CHINA蜜蜂几乎总是暴露在杀虫剂之中。
最近，我们进行了一项检测蜂巢蜡质中杀虫剂残留的研究，受检对象是纽约198名养蜂人的蜂巢蜡质，结果显示197名养蜂人的蜂巢蜡质有杀虫剂残留，蜂巢蜡质平均含有6种杀虫剂。
而这不算糟糕，研究仅是证明蜜蜂通常暴露于低剂量的杀虫剂。
2019年，我们进行一项蜂箱饲料中杀虫剂残留的研究，受检对象是纽约苹果园授粉蜜蜂的蜂箱饲料，结果显示蜂箱饲料平均含有14种杀虫剂，而且一些蜂箱饲料最多含有23种杀虫剂。
多种杀虫剂毒作用蜜蜂的现状给美国环境保护署（EPA）等环境监管机构进行杀虫剂风险评估提出一个重要问题：如何确定特定环境下杀虫剂的使用剂量，以及如何限制其毒作用风险的使用剂量。
然而，美国环境保护署和其他环境监管机构仅考虑如何评估杀虫剂单独使用的毒性风险，没有考虑如何评估多种杀虫剂联合使用的毒性风险。
为此，我们草拟了一个不算完整的杀虫剂毒作用风险图例：首先，蜜蜂在饲养过程中不可避免地接触杀虫剂；其次，一些杀虫剂通过相互作用（即协同作用）大大增加了自身的毒性，比单一杀虫剂具有更大的毒作用。
当蜜蜂同时暴露于数百种杀虫剂时，我们该如何评估多种杀虫剂联合作用于蜜蜂的毒性风险呢？简单的数学计算方法是，如果1只蜜蜂同时暴露于100种杀虫剂，那么想评估2种杀虫剂组合暴露对蜜蜂的毒作用，就需要组织4950次实验才能进行总的风险评估；想评估3种杀虫剂组合暴露对蜜蜂的毒作用，就需要组织161700次实验才能进行总的风险评估。
以此类推，该如何评估14种杀虫剂组合暴露对蜜蜂的毒作用？也就是说，需要组织多少次实验才能获得上述纽约苹果园授粉蜜蜂的蜂箱饲料检测结果呢？答案非常令人吃惊，是44186942677323600次实验。
如果要解决这个重要问题，需要开发一种快速而有效的筛选方法，以明确蜜蜂是否面临多种杀虫剂协同作用的毒性风险。
为了回答这个问题，我们实验室提出第39个研究课题：蜜蜂细胞色素P450酶用于分一种高通量检测方法评估多种杀虫剂协同作用于蜜蜂的毒性风险刘玉玲 李兴安 王志 陈东海 牛庆生│编译吉林省养蜂科学研究所，吉林132108国外养蜂科技2021年12月 蜂业研究基金项目：吉林省科技发展计划项目（20140204057NY）；财政部和农业农村部：国家现代农业产业技术体系专项（CARS-44-SYZ4）通讯作者：牛庆生，E-mail:*****************；陈东海，E-mail:****************图1 荧光扫描384微孔板检测杀虫剂干扰蜜蜂CYP9Q3解毒酶催化BCF底物生成基-4-三氟甲基香豆素（HC）产物的技术原理５７国外养蜂科技2021年12月 蜂业研究子检测杀虫剂毒作用的风险评估指标。
Keap1
非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)发病率占据肺癌的75%~80%。
肿瘤细胞进展快且易扩散转移，临床常采用手术、放化疗等进行治疗，但5年生存率低于60%[1-2]。
氧化应激是由活性氧(ROS)生成量增加所致，ROS积累可诱导肺癌细胞凋亡，清除ROS 可阻止癌细胞凋亡，即肺癌细胞存活依赖于癌细胞自身抗氧化能力[3]。
Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1 (kelch-like epichlorohydrin-associated protein-1，Keap1)/核因子E2相关因子2(nuclear factor E2related factor 2，Nrf2)信号通路在癌症中发挥重要调控作用，氧化应激可激活Keap1，促使Keap1-Nrf2复合物裂解，Nrf2转移至细胞核内，可激活下游靶基因表达，参与肺癌发生发展过程[4]。
Nrf2可维持氧化还原稳态，ROS侵袭细胞时，Nrf2可进入细胞核，结合抗氧化反应元件(ARE)转录编码各种抗氧化蛋白、代谢酶基因，抑制氧化应激反应[5-6]。
目前氧化应激、Keap1/Nrf2信号通路在NSCLC发生过程中的机制尚未明确。
基于此，本研究尝试分析Keap1/Nrf2信号通路与临床病理参数、氧化应激指标的相关性，探讨其在NSCLC氧化应激机制中的作用，为临床研制新药提供参考依据。
1资料与方法1.1一般资料选取2017年4月至2020年4月郑州市第三人民医院收治的100例NSCLC患者为研究对象。
纳入标准：符合NSCLC诊断标准[7]；术前未接受放化疗、免疫治疗者；预计生存期≥6个月；符合手术适应证、禁忌证；Karnofsky功能状态评分≥70分；签署知情同意书。
排除标准：合并凝血功能障碍、肝肾功能障碍、其他恶性肿瘤者；伴有急/慢性感染者；伴有精神疾病者；既往腹部相关外科手术史者。
所有患者均行肺癌根治性切除术，术中收集癌组织、癌旁组织(距离癌组织5cm范围内正常组织)，其中男性63例，女性37例；年龄46~67岁，平均(56.32±3.16)岁；体质量指数(BMI)17~30kg/m2，平均(23.16±2.03)kg/m2；病理类型：鳞癌58例、腺癌42例；病理分级[8]：Ⅰ~Ⅱ级51例、Ⅲ级49例；T分期[9]：T1~T253例、T3~T447例；N分期：N055例、N1~N245例。
AZD7545_SDS_MedChemExpress
Inhibitors, Agonists, Screening LibrariesSafety Data Sheet Revision Date:May-24-2017Print Date:May-24-20171. PRODUCT AND COMPANY IDENTIFICATION1.1 Product identifierProduct name :AZD7545Catalog No. :HY-16082CAS No. :252017-04-21.2 Relevant identified uses of the substance or mixture and uses advised againstIdentified uses :Laboratory chemicals, manufacture of substances.1.3 Details of the supplier of the safety data sheetCompany:MedChemExpress USATel:609-228-6898Fax:609-228-5909E-mail:sales@1.4 Emergency telephone numberEmergency Phone #:609-228-68982. HAZARDS IDENTIFICATION2.1 Classification of the substance or mixtureGHS Classification in accordance with 29 CFR 1910 (OSHA HCS)Acute toxicity, Oral (Category 4),H302Acute aquatic toxicity (Category 1),H400Chronic aquatic toxicity (Category 1),H4102.2 GHS Label elements, including precautionary statementsPictogramSignal word WarningHazard statement(s)H302 Harmful if swallowed.H410 Very toxic to aquatic life with long lasting effects.Precautionary statement(s)P264 Wash skin thoroughly after handling.P270 Do not eat, drink or smoke when using this product.P273 Avoid release to the environment.P301 + P312 IF SWALLOWED: Call a POISON CENTER or doctor/ physician if you feel unwell.P330 Rinse mouth.P391 Collect spillage.P501 Dispose of contents/ container to an approved waste disposal plant.2.3 Other hazardsNone.3. COMPOSITION/INFORMATION ON INGREDIENTS3.1 SubstancesSynonyms:AZD 7545; AZD⁻7545Formula:C19H18ClF3N2O5SMolecular Weight:478.87CAS No. :252017-04-24. FIRST AID MEASURES4.1 Description of first aid measuresEye contactRemove any contact lenses, locate eye-wash station, and flush eyes immediately with large amounts of water. Separate eyelids with fingers to ensure adequate flushing. Promptly call a physician.Skin contactRinse skin thoroughly with large amounts of water. Remove contaminated clothing and shoes and call a physician.InhalationImmediately relocate self or casualty to fresh air. If breathing is difficult, give cardiopulmonary resuscitation (CPR). Avoid mouth-to-mouth resuscitation.IngestionWash out mouth with water; Do NOT induce vomiting; call a physician.4.2 Most important symptoms and effects, both acute and delayedThe most important known symptoms and effects are described in the labelling (see section 2.2).4.3 Indication of any immediate medical attention and special treatment neededTreat symptomatically.5. FIRE FIGHTING MEASURES5.1 Extinguishing mediaSuitable extinguishing mediaUse water spray, dry chemical, foam, and carbon dioxide fire extinguisher.5.2 Special hazards arising from the substance or mixtureDuring combustion, may emit irritant fumes.5.3 Advice for firefightersWear self-contained breathing apparatus and protective clothing.6. ACCIDENTAL RELEASE MEASURES6.1 Personal precautions, protective equipment and emergency proceduresUse full personal protective equipment. Avoid breathing vapors, mist, dust or gas. Ensure adequate ventilation. Evacuate personnel to safe areas.Refer to protective measures listed in sections 8.6.2 Environmental precautionsTry to prevent further leakage or spillage. Keep the product away from drains or water courses.6.3 Methods and materials for containment and cleaning upAbsorb solutions with finely-powdered liquid-binding material (diatomite, universal binders); Decontaminate surfaces and equipment by scrubbing with alcohol; Dispose of contaminated material according to Section 13.7. HANDLING AND STORAGE7.1 Precautions for safe handlingAvoid inhalation, contact with eyes and skin. Avoid dust and aerosol formation. Use only in areas with appropriate exhaust ventilation.7.2 Conditions for safe storage, including any incompatibilitiesKeep container tightly sealed in cool, well-ventilated area. Keep away from direct sunlight and sources of ignition.Recommended storage temperature:Powder-20°C 3 years4°C 2 yearsIn solvent-80°C 6 months-20°C 1 monthShipping at room temperature if less than 2 weeks.7.3 Specific end use(s)No data available.8. EXPOSURE CONTROLS/PERSONAL PROTECTION8.1 Control parametersComponents with workplace control parametersThis product contains no substances with occupational exposure limit values.8.2 Exposure controlsEngineering controlsEnsure adequate ventilation. Provide accessible safety shower and eye wash station.Personal protective equipmentEye protection Safety goggles with side-shields.Hand protection Protective gloves.Skin and body protection Impervious clothing.Respiratory protection Suitable respirator.Environmental exposure controls Keep the product away from drains, water courses or the soil. Cleanspillages in a safe way as soon as possible.9. PHYSICAL AND CHEMICAL PROPERTIES9.1 Information on basic physical and chemical propertiesAppearance White to off-white (Solid)Odor No data availableOdor threshold No data availablepH No data availableMelting/freezing point No data availableBoiling point/range No data availableFlash point No data availableEvaporation rate No data availableFlammability (solid, gas)No data availableUpper/lower flammability or explosive limits No data availableVapor pressure No data availableVapor density No data availableRelative density No data availableWater Solubility No data availablePartition coefficient No data availableAuto-ignition temperature No data availableDecomposition temperature No data availableViscosity No data availableExplosive properties No data availableOxidizing properties No data available9.2 Other safety informationNo data available.10. STABILITY AND REACTIVITY10.1 ReactivityNo data available.10.2 Chemical stabilityStable under recommended storage conditions.10.3 Possibility of hazardous reactionsNo data available.10.4 Conditions to avoidNo data available.10.5 Incompatible materialsStrong acids/alkalis, strong oxidising/reducing agents.10.6 Hazardous decomposition productsUnder fire conditions, may decompose and emit toxic fumes.Other decomposition products - no data available.11.TOXICOLOGICAL INFORMATION11.1 Information on toxicological effectsAcute toxicityClassified based on available data. For more details, see section 2Skin corrosion/irritationClassified based on available data. For more details, see section 2Serious eye damage/irritationClassified based on available data. For more details, see section 2Respiratory or skin sensitizationClassified based on available data. For more details, see section 2Germ cell mutagenicityClassified based on available data. For more details, see section 2CarcinogenicityIARC: No component of this product present at a level equal to or greater than 0.1% is identified as probable, possible or confirmed human carcinogen by IARC.ACGIH: No component of this product present at a level equal to or greater than 0.1% is identified as a potential or confirmed carcinogen by ACGIH.NTP: No component of this product present at a level equal to or greater than 0.1% is identified as a anticipated or confirmed carcinogen by NTP.OSHA: No component of this product present at a level equal to or greater than 0.1% is identified as a potential or confirmed carcinogen by OSHA.Reproductive toxicityClassified based on available data. For more details, see section 2Specific target organ toxicity - single exposureClassified based on available data. For more details, see section 2Specific target organ toxicity - repeated exposureClassified based on available data. For more details, see section 2Aspiration hazardClassified based on available data. For more details, see section 212. ECOLOGICAL INFORMATION12.1 ToxicityNo data available.12.2 Persistence and degradabilityNo data available.12.3 Bioaccumlative potentialNo data available.12.4 Mobility in soilNo data available.12.5 Results of PBT and vPvB assessmentPBT/vPvB assessment unavailable as chemical safety assessment not required or not conducted.12.6 Other adverse effectsNo data available.13. DISPOSAL CONSIDERATIONS13.1 Waste treatment methodsProductDispose substance in accordance with prevailing country, federal, state and local regulations.Contaminated packagingConduct recycling or disposal in accordance with prevailing country, federal, state and local regulations.14. TRANSPORT INFORMATIONDOT (US)This substance is considered to be non-hazardous for transport.IMDGUN number: 3077Class: 9Packing group: IIIEMS-No: F-A, S-FProper shipping name: ENVIRONMENTALLY HAZARDOUS SUBSTANCE, SOLID, N.O.S.Marine pollutant: Marine pollutantIATAUN number: 3077Class: 9Packing group: IIIProper shipping name: Environmentally hazardous substance, solid, n.o.s.15. REGULATORY INFORMATIONSARA 302 Components:No chemicals in this material are subject to the reporting requirements of SARA Title III, Section 302.SARA 313 Components:This material does not contain any chemical components with known CAS numbers that exceed the threshold (De Minimis) reporting levels established by SARA Title III, Section 313.SARA 311/312 Hazards:No SARA Hazards.Massachusetts Right To Know Components:No components are subject to the Massachusetts Right to Know Act.Pennsylvania Right To Know Components:No components are subject to the Pennsylvania Right to Know Act.New Jersey Right To Know Components:No components are subject to the New Jersey Right to Know Act.California Prop. 65 Components:This product does not contain any chemicals known to State of California to cause cancer, birth defects, or anyother reproductive harm.16. OTHER INFORMATIONCopyright 2017 MedChemExpress. The above information is correct to the best of our present knowledge but does not purport to be all inclusive and should be used only as a guide. The product is for research use only and for experienced personnel. It must only be handled by suitably qualified experienced scientists in appropriately equipped and authorized facilities. The burden of safe use of this material rests entirely with the user. MedChemExpress disclaims all liability for any damage resulting from handling or from contact with this product.Caution: Product has not been fully validated for medical applications. For research use only.Tel: 609-228-6898 Fax: 609-228-5909 E-mail: tech@Address: 1 Deer Park Dr, Suite Q, Monmouth Junction, NJ 08852, USA。
高效液相色谱法测定升血小板胶囊中靛玉红的含量
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多穗柯4-香豆酸辅酶A连接酶基因的克隆和表达分析
17第37卷经济林研究的热点[3]。
根皮苷生物合成的前体物质为丙二酸单酰辅酶A（malonyl-CoA）和p-香豆酰辅酶A （p-coumaroyl-CoA）[4]。
苯丙氨酸在苯丙氨酸解胺酶（phenylalanine ammonia-lyase，PAL）的作用下生成肉桂酸，肉桂酸经肉桂酸-4-羟基化酶（cinnamate 4-hydroxylase, C4H）和4-香豆酸辅酶A连接酶（4-coumarate-CoA ligase, 4CL）作用生成p-香豆酰辅酶A，p-香豆酰辅酶A在查尔酮合成酶（chalcone synthase, CHS）作用下生成根皮素，进而在非特异性糖基转移酶的作用下转化为根皮苷[5-6]。
4CL作为黄酮类物质次生代谢途径的关键酶之一[7]，目前已经从青稞[8]、芒果[9]、枇杷[10]、棉花[11]等植物中得以克隆，但有关多穗柯4CL基因的克隆尚未见诸报道。
本研究以多穗柯转录组测序结果为基础，克隆多穗柯4CL基因cDNA全长，并对其进行了生物信息学分析，探究4CL基因表达与根皮苷含量间的关系，从而为多穗柯黄酮类物质的次生代谢研究提供参考依据。
1 材料与方法1.1 供试材料与仪器试剂供试样本为采自广西壮族自治区巴马瑶族自治县的野生多穗柯，经华北理工大学生命科学学院邢朝斌教授鉴定，其为壳斗科石柯属植物多穗柯L. polystachyus Rehd。
取其叶片、叶柄、茎和根，清水洗净，保存至-86 ℃的冰箱中，备作提取总RNA及含量测定的材料。
台式高速冷冻离心机（Thermo公司），-86 ℃直立式超低温保存箱（Thermo公司），ProFlexTM PCR仪（Life Technologies公司），Azure c200电泳凝胶成像系统（Azure Biosystems 公司），JY1000C通用型电泳仪（北京市六一仪器厂），超高效液相色谱仪（Waters公司），超微量蛋白核酸测定仪（Thermo公司）。
生化分析-蛋白质荧光探针
生化分析蛋白质荧光探针化基地徐周毅 2010001111362013/6/7生化分析蛋白质荧光探针徐周毅【香豆素类】中文名称:香豆素中文别名:氧杂茶邻酮;香豆内脂;邻氧萘酮;2H-1-苯并吡喃-2-酮;1,2-苯并吡喃酮英文名称:Coumarin英文别名:2H-1-Benzopyran-2-one; COUMARINE; 1-Benzopyran-2-one; 1,2-Benzopyrone; Chromen-2-one; O-Oxy-Cinnamic Lactone ; 2H-chromen-2-one1. 4-羟基香豆素及其衍生物（1）简介：4-羟基香豆素及其衍生物是很多具有生理活性的天然产物的重要组成部分，还是很多合成工业产品包过抗凝剂、除草剂、抗癌剂和HIV蛋白酶抑制剂等有用的中间体。
(2)光谱分析生化分析蛋白质荧光探针徐周毅如下图所示，以4c为例，其λex = 340 nm，λem = 408 nm2. 香豆素类过氧化氢荧光探针（1）简介：过氧化氢是一个重要的活性氧（ROS）因子，存在活的生物体的器官中，其稳态可以有不同的生理和病理的结果，过氧化氢和其他活性氧氧化剂之间的平衡与许多疾病有关病比如癌症心血管的混乱和阿尔茨海默氏症及相关的神经退行性疾病。
另一方面，有新的证据显示过氧化氢可能在细胞信号转换过程中作为第二信使。
Nobuaki Soh等设计了香豆素类的H2O2探针，该探针受其他活性氧因子干扰少，专一性强，准确度高。
生化分析蛋白质荧光探针徐周毅Du Lu-pei等利用Click修饰设计了香豆素类H2O2探针Scheme7该探针巧妙的利用了Click反应修饰了香豆素基团,使其荧光强度更强,并且使其激发波长增加了70 nm,大大增加了Stoke位移。
更加有利于观察和检测，准确度更高。
该探针同样具有很好的选择性，且合成材料相对便宜，方法相对简单，有很好的应用价值。
(2) 光谱分析香豆素类H2O2探针Scheme7的λex = 400 nm，λem = 475 nm3. 香豆素类单胺氧化酶(MAO)的荧光探针（1）简介：单胺氧化酶Monoamine oxidase, MAO是机体内参与胺类物质代谢的主要酶类，位于线粒体外膜质，分为MAO-A和MAO-B两种类型。
超高效液相色谱-串联质谱法测定纺织品中9种酚类化合物
超高效液相色谱-串联质谱法测定纺织品中9种酚类化合物温裕云;陈志华;陈婷;欧延【摘要】建立了超高效液相色谱串联质谱法(UHPLC MS/MS)同时测定纺织品中2,4二氯苯酚(2,4 DCP)、2,4,6三氯苯酚(2,4,6 TriCP)、2,3,4,6四氯苯酚(2,3,4,6 TeCP)、五氯苯酚(PCP)、辛基苯酚(OP)、壬基苯酚(NP)、邻苯基苯酚(OPP)、双酚A(BPA)、四溴双酚A(TBBPA)9种酚类化合物的方法.样品在密闭萃取瓶中于60℃C用甲醇超声萃取1h后,待测酚类化合物用Zorbax XDB-C18色谱柱分离,电喷雾负离子模式(ESI)电离、多重反应监测(MRM)模式测定,外标法定量.方法优化了超声萃取条件、色谱分离条件及质谱碎裂电压、碰撞能量等质谱测定条件.在优化实验条件下,方法相对标准偏差(RSD)为5.1％(PCP)～9.7％(2,3,4,6 TeCP)(n=7),对9种酚类化合物3个浓度水平的加标回收率在82％(2,3,4,6 TeCP)～120％ (OP)之间,方法定量限(LOQs)在0.03 mg/kg (PCP)～1.5 mg/kg (TBBPA)之间,线性范围为0.05～10 mg/L.该方法具有样品处理步骤简捷、分析速度快、选择性好、灵敏度高等特点,能同时完成纺织品中9种酚类化合物的定性与定量分析.【期刊名称】《厦门大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2014(053)004【总页数】6页(P555-560)【关键词】纺织品;超高效液相色谱串联质谱(UHPLC-MS/MS);酚类化合物【作者】温裕云;陈志华;陈婷;欧延【作者单位】厦门大学海洋与地球学院,福建厦门361102;福建远东技术服务有限公司,福建泉州362006;福建远东技术服务有限公司,福建泉州362006;厦门大学海洋与地球学院,福建厦门361102;福建远东技术服务有限公司,福建泉州362006【正文语种】中文【中图分类】X131.2含氯苯酚如五氯苯酚（pentachlorophenol，PCP）、四氯苯酚（tetrachlorophenol，TeCP）、三氯苯酚（trichlorophenol，TriCP）、二氯苯酚（dichlorophenol，DCP）以及邻苯基苯酚（o－phenyl phenol，OPP）常用做纺织与皮革的防腐、防霉、防蛀剂，但由于其对人体具有较强毒性，国内外法律法规已对其禁用或限用［1－2］；壬基苯酚（nonylphenol，NP）、辛基苯酚（4－tert－octylphenol，OP）、双酚 A（bisphenol A，BPA）等烷基酚类化合物具有良好的表面活性，常用做纺织和皮革工业的清洗剂、乳化剂、处理剂等，因其化学结构与雌性激素相似，属典型的内分泌干扰物，对人类健康、环境安全产生的潜在风险广受关注［3－5］，欧盟法规明确对其限用［1－2］；四溴双酚 A （tetrabromobisphenol A，TBBPA）则是纺织品、塑料、橡胶、纤维和纸张工业中大量使用的溴代阻燃剂，因其用量巨大而引起的环境问题已经受到关注［6－7］，挪威于2007年提出的《消费性产品中禁用特定有害物质》法案（即PoHS法案）［8］明确禁用TBBPA，欧盟未来的RoHS 2.0指令也可能将其列入禁用范围.因此，准确、快速检测纺织品中上述9种酚类化合物对产品质量安全、环境健康具有重要的现实意义及应用需求.尽管上述9种酚类化合物的测定已有国家／国际标准和相关的研究报道［9－19］，如气相色谱法（GCECD）测定纺织品或皮革中的 PCP［9－10］、气相色谱－质谱联用法（GC－MS）测定纺织品中的多种含氯苯酚［11－13］、高效液相色谱法（HPLC－DAD）测定纺织品或皮革中的含氯苯酚［14－15］以及液相色谱－质谱联用法（HPLC－MS）测定纺织品中的含氯苯酚和烷基酚［16－19］.但上述方法基本都是针对一种或几种物质的测定，要得到符合法规要求的多个酚类组分的含量［1－2］，须采用多个不同的检测方法，并且这些方法的测定流程比较繁琐，花费时间长，测定成本高.为满足严格的法规要求及纺织产品质量控制的实际需要，本工作利用超高效液相色谱－串联质谱（UHPLC－MS／MS）定性能力强、检测灵敏度高、定量准确等优点，建立了同时测定纺织品中2，4－DCP、2，4，6－TriCP、2，3，4，6－TeCP、PCP、OPP、NP、OP、BPA、TBBPA 9种酚类化合物的方法.1 实验部分1.1 仪器及试剂Agilent 1290液相色谱仪；Agilent 6460三重串联四极杆质谱仪，系统配置：Agilent JetStream Technologies（AJS）电喷雾离子源（ESI）接口，MassHunter工作站软件；超声波振荡器（KQ－400KDE型高功率数控超声波，昆山市超声仪器有限公司）.甲醇（LC－MS级，德国 Merck公司）；氨水（LCMS级，美国Sigma公司）；Mili－Q超纯水；一次性过滤膜（聚四氟乙烯，0.22μm）.标准品：NP购自Aldrich公司（工业级），为含不同支链壬基部分的异构体混合物；OP购自Dr.Ehrenstorfer GmbH公司，为含不同支链辛基部分的异构体混合物；其他酚类化合物均购自Dr.Ehrenstorfer GmbH公司，纯度均大于99.5%，各待测组分的信息如表1所示.1.2 标准溶液的配制标准储备液：分别称取10mg表1中的标准品于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，配制成质量浓度为1.0mg／mL的标准储备液.使用时将标准储备液用流动相（V（甲醇）∶V（水）＝30∶70）稀释至所需浓度.1.3 样品前处理取样品3～5g，将其剪碎至约5mm×5mm，混匀.准确称取样品0.500g于具塞样品瓶中，加入5 mL甲醇并于60℃、功率280W下，超声萃取60min.冷却至室温，取约1mL萃取液过0.22μm聚四氟乙烯滤膜，待测定.1.4 UHPLC－MS／MS分析条件色谱分离使用 Zorbax Eclipse XDB－C18Extended RRHD （2.1mm×100mm，1.8μm）色谱柱，柱温40℃，流动相A为含0.075%（体积分数，下同）氨水的水溶液（pH＝10.5）、B为甲醇，流速0.4mL／min，梯度洗脱程序为：0～2.5min，30%～40%B；2.5～4.5min，40%～95%B.进样量1.0μL.MS检测条件：电喷雾负离子模式（ESI－）；干燥气温度：350℃；干燥气流速：8.0L／min；雾化器压力：241kPa；鞘气温度：380℃；鞘气流速：8.0L／min；毛细管电压：2 000V；喷嘴电压：500V.定性和定量采用多重反应监测（MRM）模式，具体参数见表1，采用外标法定量.2 结果与讨论2.1 色谱分离及MS测定条件优化酚类物质为弱酸性物质，易在ESI－模式下形成［M－H］－母离子，通过实验发现在流动相A（水相）中加入少量氨水可以促进酚类物质的电离，使待测组分的MS信号强度得到显著提高，因此采用能耐受更宽pH 值范围的 Zorbax Eclipse XDB－C18Extended RRHD（2.1mm×100mm，1.8μm，2.0 ＜pH＜11.5）色谱柱进行实验，并且考察了流动相A中加入不同浓度氨水（氨水的体积分数为0，0.01%，0.05%，0.075%，0.10%，0.15%）对灵敏度的影响.结果表明，所有组分的MS信号响应随着氨水浓度增大而提高，并在大于0.10%时趋于平稳，待测组分2，4－DCP、TBBPA的保留时间随着氨水浓度增大而增加，其他组分的保留时间基本不受氨水浓度的影响.因此综合考虑MS信号响应、分离度、色谱柱在高pH下的寿命，最终采用的流动相A为含0.075%氨水的水溶液（pH＝10.5）.优化实验条件下，各组分的分离情况如图1，对应的保留时间见表1.表1 目标组分的MRM分析参数Tab.1 MRM parameters for target compounds注：＊为定量子离子（quantitative ion）.?为了获得最佳的定性定量MRM参数，分别对2 mg／L的单组分标准溶液进样，并采用仪器自带的优化软件Optimizer对碎裂电压（fragmentor）、碰撞能量（collision energy）、定性与定量 MRM离子对进行优化，得到最佳MRM采集参数，见表1.此外，实验还优化了干燥气温度、干燥气流速、雾化气压力、鞘气温度、鞘气流速、毛细管电压、喷嘴电压等离子源参数，以使大多数组分得到最佳的灵敏度，最终采用的离子源参数见1.4中的MS检测条件.2.2 样品前处理条件的优化纺织品中酚类测定的提取方法主要有水蒸汽蒸馏法［9］、超声萃取法［10－13］、加速溶剂萃取法［14－16］.萃取溶剂主要有碳酸钾水溶液［9，11］、甲醇［10，12－13，17－18］、丙酮［19］等.据文献［10，12－13，17－18］报道，甲醇为萃取溶剂进行超声提取时萃取效果较好，可得到较高的回收率.因此，本文采用甲醇为萃取溶剂，对待测的9种酚类化合物进行超声萃取，并使用自制的阳性样品，对超声萃取时间、萃取功率、萃取温度等条件进行优化.实验结果表明，温度60℃、功率280W、时间为60 min时，各待测组分的萃取效率较高，各组分的加标回收率在82%～120%之间.2.3 基质效应尽管UHPLC－MS／MS测定待测酚类化合物时，母离子和子离子一一对应的MRM模式可以很大程度上去除基体杂质的干扰，但复杂样品共提取基质成分和试样前处理引入的杂质可能抑制或增强待测物在ESI源的离子化效率，进而影响方法的灵敏度，以及分析结果的准确度.实验中发现各待测组分的基质效应差异较大，即使采用某几种稳定同位素标记的组分作为内标，也无法有效地消除或降低其他组分的基质效应，并且实际分析工作中对每个组分采用稳定同位素标记的内标进行定量，分析成本较高，所以本实验采用萃取不同样品基质（棉布、涤纶布）后的萃取液，来配制标准溶液，考察其基质效应，结果表明在加标质量浓度较低（2，4，6－TriCP 、2，4－DCP、TBBPA 质量浓度为1.0 mg／L，其他组分为0.05～0.2mg／L）时，回收率较低，大多数组分的回收率小于50%，基质对目标化合物的影响较显著；当加标质量浓度较高时（2，4，6－TriCP、2，4－DCP、TBBPA质量浓度为5.0mg／L，其他组分为0.25～2.0mg／L），它们的回收率在80%～120%之间，表明在此质量浓度范围内基质对目标化合物的影响并不显著，因此要实现样品中低质量浓度目标组分的准确测定，最好采用基质匹配（即采用萃取液配制标准溶液）的工作曲线进行定量.2.4 方法的精密度及加标回收率称取7份样品前处理优化时自制的阳性样品，分别进行7次平行实验，计算方法的精密度，结果见表2～3，各组分的相对标准偏差（RSD）在5.1%～9.7%之间. 图1 9种酚类化合物的MRM色谱图Fig.1 MRM chromatogram of 9phenols 表2 高浓度组加标回收率及精密度Tab.2 The recoveries of standard addition and precision of high concentration group注：10，20，50mg／kg为加标浓度，＊n＝7.?表3 低浓度组加标回收率及精密度Tab.3 The recoveries of standard addition and precision of low concentration group注：1.0，2.0，5.0mg／kg为加标浓度，＊n＝7.?由于不同组分灵敏度差异较大，因此根据不同浓度水平分成两组进行加标回收实验.以空白纺织样品为基质，在10，20，50mg／kg（2，4，6－TriCP、2，4－DCP、TBBPA）和 1.0，2.0，5.0mg／kg（2，3，4，6－TeCP、PCP、BPA、OPP、OP、NP）的添加水平下进行样品加标回收实验，所得结果见表2～3，可以看出不同浓度的加标回收率在82%～120%之间.表4 方法的LOQ和线性关系Tab.4 The LOQ and linearity of method?2.5 方法的定量限（LOQ）与线性范围方法的LOQ采用标准添加法进行测定，即在空白样品中添加不同浓度的待测目标组分，前处理后按浓度由高至低检测，直到获得信噪比等于10（S／N＝10）的浓度，确定其为方法的LOQ，结果见表4.用含30%（体积分数）甲醇的水溶液配制一系列标准溶液，其中2，4－DCP、2，4，6－TriCP、TBBPA 质量浓度均为 0.5，1.0，2.0，5.0，10.0mg／L，2，3，4，6－TeCP、PCP、BPA、OPP、OP、NP质量浓度均为0.05，0.1，0.2，0.5，1.0mg／L；在优化的色谱与 MS条件下进行测定，以标准工作溶液中目标组分的质量浓度（x，mg／L）为横坐标，目标组分的定量离子对峰面积（y）为纵坐标绘制标准曲线，结果见表4，表明9种酚类化合物在各自的质量浓度范围内有良好的线性关系，相关系数均大于0.998 5.2.6 实际样品测定用建立的方法对可能含有待测酚类化合物的纺织品样品进行测定，并与本实验室采用GC－MS测定的结果进行比较，如表5所示.结果表明，在含有酚类化合物的阳性样品中，2种方法都能给出准确的定性、定量结果，计算2种方法所得结果的En值［20］均小于1，表明2种测定方法的结果基本一致.图2为空白天然纤维（棉布）样品中添加9种酚类化合物的MRM色谱图，加标浓度为2.0mg／kg.表5 实际样品测定结果Tab.5 The results of sample analysis mg／kg?图2 天然纤维（棉布）中添加9种酚类化合物的MRM色谱图Fig.2 MRMchromatograms of natural sample（cotton）spiked with 9phenols3 结论建立了UHPLC－MS／MS同时测定纺织品中多个禁用酚类物质的方法，具有样品前处理步骤简捷、仪器分析速度快、灵敏度好、能较有效去除基体杂质干扰等优点，满足欧盟法规或国内外纺织品生态标准限量的测定要求，也可以作为GC－MS测定时阳性样品的确证方法.【相关文献】［1］International Association for Research and Testing in the Field of Textile Ecology （OEKO－TEX®）.OEKO－TEX®Standard 100［S］.Switzerland：［s.n.］，2012.［2］全国纺织品标准化技术委员会基础标准分会.GB／T 18885—2009生态纺织品技术要求［S］.北京：中国标准出版社，2009.［3］Ying G，Williams B，Kookana R.Environmental fate of alkylphenols and alkylphenol ethoxylates：a review［J］.Environment International，2002，28（3）：215－226.［4］Gallart－Ayala H，Moyano E，Galceran M T.Recent advances in mass spectrometry analysis of phenolic endocrine disruptors and related compounds［J］.Mass Spectrometry Reviews，2010，29（5）：776－805.［5］Asimakopoulos A G，Thomaidis N S，Koupparis M A.Recent trends in biomonitoring of bisphenol A，4－t－octylphe－nol，and 4－nonylphenol［J］.Toxicology Letters，2012，210（2）：141－154.［6］Legler J.New insights into the endocrine disrupting effects of brominated flame 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