mk突变检验原理
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mk突变检验原理
MK突变检测(MultiplexPCR-LDR)是一种遗传检测新技术,它利用多重PCR和长度分离技术高效率地实现对多个特定基因突变位
点的检测。
它以PCR-LDR(Ligase Detection Reaction)技术作为检测核心,采用三个或三个以上的引物相互联合,在同一反应系统内对多聚体进行多重扩增,形成特定序列的多个PCR产物,并利用特殊合成的探针片段实现一步检测,从而解决了传统基因检测中大量检测位点的检测难度。
二、原理简介
MK突变检测原理是使用多重PCR-LDR技术。
该技术利用特定的探针与之对应的特定序列,采用三个或三个以上的引物相互联合,在同一反应系统内对多聚体进行多次扩增,形成特定序列的多个PCR产物。
探针会与相应的PCR产物结合形成特异的检测反应体。
在这一步,PCR反应结合探针,以聚合酶依赖性捕获的方式发生连接,实现突变的快速检出。
三、优点
1、检测灵敏度高:MK突变检测能够检出低拷贝数量的野生型突变体,检出率达99%以上;
2、检测速度快:MK突变检测所需的时间仅为传统检测的2/3;
3、多检测感受度高:可在单个反应系统内同时检测多个突变位点,且检测灵敏度更高;
4、节省成本:由于MK突变检测可以在一次反应中检测多个突变
位点,因此可以有效降低样本处理与检测成本;
5、容易操作:MK突变检测采用嵌合体检测方式,流程简单、可操作性强,操作过程也比较简单;
6、重复性好:本实验的结果具有良好的重复性,可靠性高。
四、应用
1、MK突变检测可以用于临床诊断基因突变检测;
2、MK突变检测也可以用于科学研究突变细胞的分子检测;
3、MK突变检测可以用于病毒感染检测;
4、MK突变检测可以用于精准医学对患者基因信息的分析与研究。