黄酮含量测定

一、黄酮含量的测定方法
1、样品的处理
取材料地上部分洗净，晾晒至表面无水分，置于干燥箱中，80℃下干燥至恒重，磨成粉末，过筛待用。

2、标准曲线的绘制
准确称取芦丁对照品20mg，置于100ml容量瓶中，加体积分数70%乙醇溶解至刻度，摇匀得ml的对照品溶液。

然后，分别吸取0、、、、、、，分别置于7支试管中，加水补齐至，分别加入5%亚硝酸钠，摇匀，放置6min。

再加入10%硝酸铝溶液，摇匀，放置6min。

加入%氢氧化钠溶液4ml，然后分别加水，摇匀，放置15min。

以空白试剂为参比，用紫外分光光度计在500nm波长处测定吸光度。

3、黄酮的提取（微波提取法）
准确称取干燥至横重的野生马齿苋粉末3份，每份1g，分别置于锥形瓶中，喷洒适量蒸馏水润湿，用中高火微波处理90s。

加入一定量体积分数为70%的乙醇溶液，于80℃恒温水浴加热提取，趁热过滤，洗涤残渣，用70%乙醇定容于50ml容量瓶中，摇匀，得黄酮提取液。

4、黄酮含量的计算
吸取分别黄酮提取液1ml，加蒸馏水，摇匀，加入5%亚硝酸钠，摇匀，放置6min。

再加10%硝酸铝溶液，摇匀，放置6min。

加入%氢氧化钠溶液4ml。

加入蒸馏水，摇匀放置15min。

以蒸馏水代替黄酮提取液的空白试剂为参比，用紫外分光光度计在500nm波长出测定吸光度。

带入标准曲线中，计算黄酮含量。

总黄酮含量（mg/g）= c*v/m
式中：c为1ml样品中测得的黄酮含量（mg）；
v为提取液总体积（ml）；
m为叶片干重。

二、矿质元素的测定
每份需。