MTA1和VEGF蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

MTA1和VEGF蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及意义
目的探讨MTA1和VEGF蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达情况及临床意义。

方法选择石蜡组织标本68例甲状腺乳头状癌及31例正常甲状腺组织，免疫组织化学EnVision法检测MTA1和VEGF蛋白在组织中的表达情况。

结果MTA1蛋白在正常甲状腺组织和癌组织中阳性率分别为6.5%和42.6%，二者比较有统计学意义（P＜0.05），VEGF蛋白在癌组织中阳性率为67.6%，与正常组织阳性率（9.7%）比较，有显著性差异（P＜0.05），无论是单侧还是双侧发生的癌，与正常组织比较，MTA1和VEGF蛋白表达均有统计学意义（P＜0.05）；MTA1和VEGF蛋白表达与淋巴结有无转移及临床分期有关（P＜0.05），与患者年龄、性别比较均无显著性差异（P>0.05）；MTA1和VEGF蛋白在甲状腺癌中的表达存在显著正相关（P＜0.05）。

结论MTA1和VEGF蛋白与甲状腺癌的侵袭转移及患者的预后相关，二者在甲状腺癌的进展过程中可能起了一定的协同作用。

标签：甲状腺乳头状癌；MTA1；VEGF；转移
甲状腺乳头状癌是甲状腺滤泡上皮发生的恶性肿瘤，是甲状腺癌中最常见的类型，在外科门诊和治疗中已经发现该病年龄趋于年轻化，且常发生颈部淋巴结转移。

肿瘤转移抑制基因MTA1是MTA家族重要的成员之一，在恶性肿瘤的侵袭转移过程中发挥着重要的作用[1]。

VEGF是肿瘤生长所必须的血管内皮生长因子，是刺激血管内皮细胞增生的重要因子之一，本文通过检测甲状腺乳头状癌中MTA1和VEGF蛋白的表达情况，探讨二者与甲状腺癌侵袭转移的关系及临床意义，为外科治疗甲状腺癌及术后预防提供一定的帮助。

材料与方法
1. 资料来源：收集2008年至2012年间在省肿瘤医院存档的甲状腺癌标本73例，所有病例均重新石蜡包埋切片，经两位高级职称医师阅片，其中1例滤泡状癌，2例未分化癌和2例髓样癌除外，选取68例发生甲状腺乳头状癌的病例，其中双侧为癌者25例，其余43例为单侧乳头状癌，挑取单侧乳头状癌切除对侧部分正常甲状腺组织（正常对照）的病例31例。

2.方法：采用免疫组织化学染色EnVision二步法，实验步骤按试剂说明书进行。

3.试剂与抗体：MTA1多克隆抗体购自美国Santa Cruz公司，VEGF单克隆抗体及DAB显色试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司，MTA1为浓缩液，稀释浓度为1：100-150，用已知阳性切片作阳性对照，PBS液代替一抗作阴性对照。

4.结果判断：MTA1以胞核和胞浆出现棕黄色颗粒为阳性，VEGF以细胞浆呈棕黄色颗粒为阳性，阳性细胞数评分：高倍镜（×400）下随机选取10个视野，每个视野计数50个细胞，取平均数为阳性细胞百分数，阴性为0分，51%-75%
为3分；>76%为4分。

染色强度为0-3分，浅黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分。

两者相乘所得>4分为阳性，0.05），但二者单侧和双侧阳性率与正常组织分别比较，均有显著性差异（P＜0.05），见表1。

讨论
由于甲状腺癌发病较为隐匿，多数患者要么是在体检时发现，要么是在颈部发现肿块或者引起颈部不适才去就诊，这就给颈部淋巴结转移创造了时间，而且研究认为甲状腺微小癌是甲状腺发病率提高的主要原因，也是淋巴结转移的重要原因[2]，这也是外科手术中常常需要冰冻淋巴结检测是否有转移的重要原因，因为这将决定手术的范围。

肿瘤转移抑制基因MTA1在多种肿瘤中均有表达，在食管癌中MTA1呈过表达，并且认为是患者独立的预后因子；在前列腺癌中MTA1是前列腺癌侵袭进展的主要促进因子，而且可能是其靶向治疗的有效分子标记；在宫颈癌[3]中，MTA1阳性表达率为55.3%，与肿瘤组织学分级、淋巴结转移及肿瘤复发密切相关，是肿瘤进展和转移的重要因子，也可能是未来宫颈癌靶向治疗的靶点。

在我们的研究中发现，MTA1在甲状腺乳头状癌中的表达率为42.6%，明显高于正常组织，无论是单侧还是双侧发生的癌与正常组织比较均有显著性差别，可见MTA1在甲状腺癌的发生发展过程中起了一定的作用。

MTA1表达与患者的年龄和性别无关，与肿瘤发生淋巴结转移和临床分期有关，发生淋巴结转移的仅有1例为阴性，临床分期Ⅰ、Ⅱ期表达明显低于Ⅲ、Ⅳ期，可见MTA1在甲状腺癌的进展过程中参与了肿瘤的侵袭转移，表明MTA1表达可能与患者的预后有关。

在鼻咽癌和胃癌中，作者也认为MTA1表达与肿瘤的侵袭转移有关，是评估肿瘤预后的重要参考指标[4]，因此我们建议MTA1阳性表达且高表达的患者注意随访，以防复发或转移。

VEGF是肿瘤血管生成的关键作用因子，在多种肿瘤中均有表达，且其表达增高是评估肿瘤生物学行为的重要指标[5]。

在甲状腺癌中，VEGF是作用于血管内皮细胞最重要的因子，直接参与肿瘤间的血管生成[6]。

研究发现，VEGF在甲状腺癌中呈过表达，在甲状腺癌的发生发展过程中起着重要的作用，并且可能是其预后的标志[7]。

本研究结果显示，VEGF在癌组织中的表达明显高于正常组织，且与淋巴结转移及临床分期密切相关，表明VEGF参与了甲状腺癌的发生发展，且与患者的预后相关。

VEGF不但能够促进肿瘤血管的生成，而且在肿瘤的生長侵袭和转移过程中同样起着一定的诱导作用[8]。

同時，VEGF也受到MTA1的调节作用，在结直肠癌LoV o 和HCT116细胞株中，MTA1与VEGF-C表达之间存在显著正相关，MTA1的过表达能够显著增强VEGF-C蛋白和mRNA的表达，提示MTA1调节VEGF的表达，从而促进肿瘤脉管的生成[9]，可见MTA1和VEGF在肿瘤的生长过程中存在一定的相互作用。

本实验结果发现，MTA1与VEGF存在共表达现象，68例癌组织中有28例为共同阳性病例，且均发生淋巴结转移，表明MTA1与VEGF在甲状腺癌的侵袭转移过程中同样存在一定的协同作用，这些作用是使甲状腺癌患者预后差的主要原因之一。

在外科的诊断治疗中，离不开分子生物学的检测手段，结合这些检测结果，我们可以更好的为患者提供有效的治疗和预防措施，为患者提供更好的服务。

参考文献
[1] Li DQ，Pakala SB，Nair SS，et al. Metastasis-associated protein 1/nucleosome remodeling and histone deacetylase complex in cancer. Cancer Res，2012，72：387-394
[2] Davies L，Welch HG.Increasing incidence of thyroid cancer in the United States，1973-2002. JAMA，2006，295：2164- 2167
[3] Vasileiadis I，Karatzas T，Vasileiadis D，et al. Clinical and pathological characteristics of incidental and nonincidental papillary thyroid microcarcinoma in 339 patients. Head Neck. 2013，18.
[4] Song L，Wang Z，Liu X. MTA1：a prognosis indicator of postoperative patients with esophageal carcinoma. Thorac Cardiovasc Surg，2013，61：479-485.
[5] Li K，Dias SJ，Rimando AM，et al. Pterostilbene acts through metastasis-associated protein 1 to inhibit tumor growth，progression and metastasis in prostate cancer. PLoS One，2013，8：e57542.
[6] Liu T，Yang M，Yang S，et al. Metastasis-associated protein 1 is a novel marker predicting survival and lymph nodes metastasis in cervical cancer. Hum Pathol，2013，44：2275-2281.
[7] Kajdaniuk D，Marek B，Fo？tyn W，et al.Vascular endothelial growth factor （VEGF）in endocrinology and oncology. Endokrynol Pol，2011，3：14-22.
[8] Huang Y，Goel S，Duda DG，et al.Vascular normalization as an emerging strategy to enhance cancer immunotherapy.Cancer Res，2013，73：2943-2948.
[9] Sia D，Alsinet C，Newell P，et al. VEGF Signaling in Cancer Treatment.Curr Pharm Des，2013，12.。