绿叶中色素的提取与分离

方法与步骤 分离色素
注意：层析液一定不要没 及滤液细线（否则，色素
会溶解在层析液中，就不 会在滤纸上扩散开来，层 析就会失败）
防止层析液挥发
叶绿体中的色素
胡黄ab
胡萝卜素 叶黄素 叶绿素a 叶绿素b
最窄 较窄 最宽 较宽
含量：a﹥b﹥黄﹥胡
距离最近的是叶绿素ab；最远的是叶黄素和胡 萝卜素；
3.枫叶变红的原因？
液泡中花青素的颜色
二 光合作用探究历程 18世纪以前，人们 一直认为植物生长 发育所需物质完全 来自土壤。
亚里士多德
1642年，比利时科学家范·赫尔蒙特揭开 了光合作用研究的序幕
赫尔蒙特指出：
植物获得的物质只是来源于水。
你同意赫尔 蒙特的观点 吗？
思考与讨论： 1.赫尔蒙特的实验装置是“完全密封”的吗？
4:本实验还有什么巧妙之处？
用好氧细菌可以确定释放氧气的部位及多少。
20世纪30年代鲁宾(美国)和卡门(美国)
证明光合作用释放的O2全部来自水
C18O2
?O2 CO2
?18O2
光照射下的 小球藻悬液
H2O
H218O
进入20世纪40年代，科学
家开始用放射性同位素14C研究
光合作用中有机物的合成过程。
绿叶中色素的提取与 分离
绿叶中色素提取和分离
一 实验原理：
（一）提取原理：色素都能溶 解于有机溶剂中，如无水乙 醇等。
（二）分离原理：
不同色素在层析液中的溶解 度不同,随层析液在滤纸上的 扩散速度不同。
二 选材
新鲜 浓绿的叶子
幼叶？ 放置过久的绿叶？
方法步骤：
提取绿叶中的色素 称 剪 研 滤
二氧化硅、碳酸钙、无水乙醇的作用？ 制备滤纸条 使研磨充分 防止色素被破坏 溶解提取色素
思考
1:为什么选用水绵做为实验材料？
水绵的叶绿体呈螺旋式带状，便于观察。
2:实验一为什么要在黑暗且没有空气的环境中进行？
排除氧气和光的干扰
3:为什么先用极细光束照射水绵？而后又让水绵完全暴露 在光下的目的是？
在叶绿体上形成光照多和光照少的部位，相当于一组对比实验。 与在黑暗处形成对照，再次验证实验结果
种类
颜色
含量
胡萝卜素 橙黄色
最少
叶黄素
黄色
叶绿素a 蓝绿色
较少 最多
叶绿素b 黄绿色
较多
溶解度 最大 较大 较小 最小
叶绿体色素提取分离实验异常现象分析
①收集到的滤液绿色过浅的原因分析
a．未加石英砂(二氧化硅)，研磨不充分。
b．使用放置数天的菠菜叶，滤液色素(叶 绿素)太少。 下面两条带浅
c．一次加入大量的无水乙醇，提取浓度 太低(正确做法：分次加入少量无水乙醇 提取色素)。
d．未加碳酸钙或加入过少，色素分子被 破坏。 下面两条带浅
②分离到的色素带过浅 a．滤纸条未干燥 b．画滤液细线次数少。 C、层析液触及滤液细线 ③滤纸条色素带重叠： a．层析时间过短。b．滤液线过宽 ④色素带弯曲且部分重叠： 未剪两角 ⑤滤纸条看不见色素带 a．忘记画滤液细线。 b．层析液没过滤液细线，且时间较长，色素全
部溶解到层析液中。
叶绿体色素吸收光谱P99
叶绿素主要吸收_蓝__紫__光__、__红_光_ 类胡萝卜素主要吸收_蓝__紫__光___
叶绿体中的 色素提取液
根据物理知识，什么颜色的物体透过什么颜色的光，吸 收其他颜色的光，白色物体反射各种色光，黑色物体吸 收各种色光。
哪个组的植物长势最好？原因？
思考：1.绿色植物叶子为绿色的原因？ 叶绿素对绿光吸收最少，绿光被反射回来 正常叶子叶绿体中叶绿素：类胡萝卜素=3:1 2.秋天叶子变黄的原因？ 低温破坏叶绿素，抑制合成酶活性
干燥原因？剪去两角，原因？铅笔画线
画Hale Waihona Puke Baidu液细线
防止色素沿边缘扩散过快
重复画几次的目的？干燥后再画的原因？ 分离色素 增加色素含量，使层析效果明显 细、直、齐
不能让滤液细线触及层析液，原因？
观察与记录
色素会溶解在层析液中，就不会在滤纸上扩 散开来，层析就会失败
有几条不同颜色的色带？排序怎样？宽窄
如何？这说明了什么？
1785年，人们发现了空气的组成。 结论：绿叶在光下吸收CO2 ，放出O2。
1845年，德国梅耶根据能量转换和守恒定 律指出：植物在进行光合作用时，把光能转换 成化学能储存起来。
1864年萨克斯的实验
在
光照
暗 处
放 置
2
暗处理
-
3 天
碘蒸汽处理
酒精 脱色
思考与讨论：
1、实验前为什么要对天竺葵先进行暗处理？ 2、为什么让叶片一半曝光，另一半遮光？ 3、用碘液检验光合作用的何种产物？ 4、这个实验说明了什么？
M.Calvi 美国科学家卡尔文等用小球藻做n实验：用 14C标记的14CO2，供小球藻进行光合作用，然 后追踪其放射性，最终探明了CO2中的碳在光 合作用中转化成有机物中碳的途径，这一途 径称为卡尔文循环。
谢谢
2.实验设计中忽略了什么？
1771年，英国普里斯特利的实验
1771年，英国普里斯特利的实验
结论：绿色植物可以更新空气。
有时实验成功
英国普里斯特利的实验
得到相反结论：绿色植物也能使空气变污浊。
有时实验失败
1779年，荷兰英格豪斯重复了普里斯特利
的实验 500多次。
结论：只有在阳光照射下才能成功，只有绿叶才能更 新污浊的空气。
实验步骤
黑暗处理
实验目的
消耗掉叶片原有的淀粉
一半照光、一半遮光
对照实验
酒精脱色
除去绿色色素的干扰
碘液显色
证明被检测叶片含淀粉
结论：植物在光下制造了淀粉。
1880年，德国科学家恩吉尔曼的实验
黑暗中
极 细 光 束
光照下
思考与讨论：
1、恩吉尔曼的实验方法有什么巧妙之处？ 2、恩吉尔曼的实验结论是什么？