GB 4789.16-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 常见产毒霉菌的形态学鉴定
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1
GB 4789.16—2016 养 。 当 刚 长 出 小 菌 落 时 ,取 出 一 个 平 皿 以 无 菌 操 作 ,用 灭 菌 不 锈 钢 小 刀 或 眼 科 手 术 小 刀 将 菌 落 连 同 培 养 基切下1cm×2cm 的小块,置菌落一侧,继续 培 养,于 5d~14d进 行 观 察。此 法 代 替 小 培 养 法,可 观 察子实体着生状态。 4.2 斜面观察:将真菌纯培养物划线接种(曲霉、青霉)或点种(镰刀菌或其菌)于斜面,培养5d~14d, 观 察 菌 落 形 态 ,同 时 还 可 以 直 接 将 试 管 斜 面 置 低 倍 显 微 镜 下 观 察 孢 子 的 形 态 和 排 列 。 4.3 制片:取载玻片加乳酸苯酚液一滴,用接种钩取一小块真菌培养物,置乳酸-苯酚液中,用两支分离 针 将 培 养 物 轻 轻 撕 成 小 块 ,切 忌 涂 抹 ,以 免 破 坏 真 菌 结 构 。 然 后 加 盖 玻 片 ,如 有 气 泡 ,可 在 酒 精 灯 上 加 热 排除。制片时应在生物安全柜或无菌接种罩或接种箱或手套箱内操作以防孢子飞扬。 4.4 镜检:观察真菌菌丝和孢子的形态、特征、孢子的排列等,并记录。 5 检验程序
3 试剂和培养基
3.1 乳酸苯酚液:见 A.1。 3.2 查氏培养基:见 A.2。 3.3 马铃薯-葡萄糖琼脂培养基:见 A.3。 3.4 麦芽汁琼脂培养基:见 A.4。 3.5 无糖马铃薯琼脂培养基:见 A.5。
4 操作步骤
4.1 菌落特征观察:为了培养完整的菌落以供观察记录,可将纯培养物点种于平板上。曲霉、青霉通常 接 种 查 氏 培 养 基 ,镰 刀 菌 通 常 需 要 同 时 接 种 多 种 培 养 基 ,其 他 真 菌 一 般 使 用 马 铃 薯-葡 萄 糖 琼 脂 培 养 基 。 将平板倒转,向上接种一点或三点,每 个 菌 株 接 种 两 个 平 板,正 置 于 25 ℃ ±1 ℃ 恒 温 培 养 箱 中 进 行 培
中华人民共和国国家标准
GB 4789.16—2016
食品安全国家标准 食品微生物学检验 常见产毒霉菌的形态学鉴定
2016-12-23发布
2017-06-23实施
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 国家食品药品监督管理总局
发布
GB 4789.16—2016
前言
本标准代替 GB/T4789.16—2003《食品卫生微生物学检验 常见产毒霉菌的鉴定》 本标准与 GB/T4789.16—2003相比,主要修改如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品微生物学检验 常见产毒霉菌的形态学鉴定”; ——— 增 加 了 检 验 程 序 ; ——— 增 加 了 黑 曲 霉 、炭 黑 曲 霉 、棒 曲 霉 、红 曲 霉 等 产 毒 菌 种 ; ——— 修 改 了 标 准 名 称 ; ——— 修 改 了 设 备 和 材 料 ; ——— 修 改 了 培 养 基 和 试 剂 ; ——— 修 改 了 各 菌 种 形 态 描 述 ; ———修改了附录 A; ——— 删 除 了 黄 绿 青 霉 、岛 青 霉 、皱 褶 青 霉 、产 紫 青 霉 、红 青 霉 等 菌 种 ; ———删除检索表原附录 B、附录 C、附录 D。
常 见 产 毒 霉 菌 的 形 态 学 鉴 定 检 验 程 序 见 图 1。
图1 常见产毒霉菌的形态学鉴定检验程序
6 各属真菌的形态特征及可能产生的真菌毒素 6.1 曲霉属(Aspergillus)
本 属 的 产 毒 真 菌 主 要 包 括 黄 曲 霉 、寄 生 曲 霉 、杂 色 曲 霉 、构 巢 曲 霉 、赭 曲 霉 、黑 曲 霉 、炭 黑 曲 霉 和 棒 曲 霉 等 。 这 些 真 菌 可 能 产 生 黄 曲 霉 毒 素 、赭 曲 霉 毒 素 、伏 马 菌 素 、展 青 霉 素 等 次 生 代 谢 产 物 。
寄生曲霉的菌株都能产生黄曲霉毒素。
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GB 4789.16—2016
图3 寄生曲霉的产孢结构和分生孢子 6.1.3 杂色曲霉 (A.versicolor)
菌落在查氏琼脂上生长局限,25 ℃ 7d直径15mm~17mm,10d~12d达24mm~30mm;质地 为丝绒状或絮状,或两种质地并存或相互镶嵌;菌落不平,稍厚,中央 部 分 隆 起 或 凹 陷,或 呈 不 同 程 度 的 翘曲;颜色差异很大,初 为 白 色,后 呈 不 同 程 度 的 绿 色,近 于 青 豆 绿、阿 福 花 绿 (PoisGreen,Asphodel Green,R.XLI)至 深 葡 萄 绿 (DeepGrapeGreen,R.XLI),有 的 菌 株 呈 孔 雀 绿 (MalachiteGreen,R.XXX Ⅱ ),橄 榄 绿 (OliveGreen,R.Ⅳ )或 暗 橄 榄 褐 色 (Dark OliveBuff,R.XL),间 或 有 不 呈 绿 色 者 ,取 决 于 分 生 孢 子 结 构 的 多 少 ;菌 丝 体 呈 黄 褐 色 、粉 红 色 ,近 于 浅 褐 粉 红 色 (BuffyPink,R.XXLⅢ )或 淡 粉 红 肉 桂 色 (PalePinkishCinnamrn,R.XXIX),因不同菌株 而 异;分 生 孢 子 结 构 有 时 形 成 迟 缓;有 辐 射 状 沟 纹;渗 出 液 有 或 无 ,近 于 无 色 或 呈 淡 褐 色 至 紫 红 色 ,形 成 小 滴 或 聚 成 大 滴 ;无 明 显 气 味 或 稍 具 霉 味 ;菌 落 反 面 颜 色 不 一 ,近 于 无 色 至 淡 黄 褐 色 、粉 红 色 、玫 瑰 紫 色 或 紫 褐 色 ,色 素 扩 散 于 基 质 ;有 的 菌 株 形 成 壳 细 胞 ,老 培 养物中可见聚成淡黄色的团块。分 生 孢 子 头 较 小,初 为 球 形,后 呈 辐 射 形,直 径(25~)75~125μm;分 生 孢 梗 茎 直 接 生 自 基 质 者 (45~ )150~300(~500)μm×4~8μm,生 自 气 生 菌 丝 者 大 都 很 短 ,无 色 或 稍 带 黄 色 ,壁 较 厚 ,光 滑 ;顶 囊 半 球 形 、稍 长 形 或 稍 呈 椭 圆 形 ,直 径 9~20μm,约 3/4 的 表 面 可 育 ,小 顶 囊 仅 分生孢梗茎顶部稍加膨大而不明显;产孢结构双层:梗 基 一 般 5~8μm×2~3μm,瓶 梗6~8μm×1.5 ~2.5μm;分 生 孢 子 球 形 或 近 球 形 ,绿 色 ,直 径 (2~ )2.5~3.5(~4)μm,壁 粗 糙 ,具 小 刺 ;壳 细 胞 球 形 或 近 球 形 ,直 径 11μm~20μm,大 量 形 成 时 聚 成 淡 黄 色 的 团 块 ,见 图 4。
除 微 生 物 实 验 室 常 规 灭 菌 及 培 养 设 备 外 ,其 他 设 备 和 材 料 如 下 : 2.1 冰箱:2 ℃~5 ℃。 2.2 恒温培养箱:25 ℃±1 ℃。 2.3 显微镜:10倍~100倍。 2.4 目镜测微尺。 2.5 物镜测微尺。 2.6 生物安全柜。 2.7 恒温水浴箱。 2.8 接种钩。 2.9 分离针。 2.10 载玻片。 2.11 盖玻片。 2.12 不锈钢小刀或眼科手术小刀。
曲 霉 属 的 菌 丝 体 无 色 透 明 或 呈 明 亮 的 颜 色 ,但 不 呈 暗 污 色 ;可 育 的 分 生 孢 梗 茎 以 大 体 垂 直 的 方 向 从 特化的厚壁的足细胞生出,光滑或粗糙,通常无横隔;顶端膨大形成 顶 囊,具 不 同 形 状,从 其 表 面 形 成 瓶 梗 ,或 先 产 生 梗 基 ,再 从 梗 基 上 形 成 瓶 梗 ,最 后 由 瓶 梗 产 生 分 生 孢 子 。 分 生 孢 子 单 胞 ,具 不 同 形 状 和 各 种 颜色,光滑或具纹饰,连接成不分枝的链。由顶囊到分生孢子链构成 不 同 形 状 的 分 生 孢 子 头,显 现 不 同 颜色。有的种可形成厚壁的壳细胞,形状因种而异;有的种则可形成 菌 核 或 类 菌 核 结 构;还 有 的 种 产 生 有 性 阶 段 ,形 成 闭 囊 壳 ,内 含 子 囊 和 子 囊 孢 子 ,子 囊 孢 子 大 多 透 明 或 具 不 同 颜 色 、形 状 和 纹 饰 。 6.1.1 黄曲霉(A.flavus)
黄 曲 霉 的 某 些 菌 株 可 产 生 黄 曲 霉 毒 素 (Aflatoxins)。
图2 黄曲霉的产孢结构和分生孢子
6.1.2 寄生曲霉 (A.parasiticus) 菌落在查氏琼脂上25 ℃ 7d直径 35 mm,12d~14d50 mm~60 mm;质地丝绒状,偶 有 絮 状 菌
丝 ,边 缘 白 色 ;分 生 孢 子 结 构 多 ,颜 色 为 深 绿 色 ,近 于 雪 松 绿 (CedarGreen,R.VI),老 后 变 暗 近 于 常 春 藤 绿 (IvyGreen,R.XXXI);有 辐 射 状 沟 纹 ,无 渗 出 液 ,菌 落 反 面 呈 淡 褐 色 ,近 于 浅 灰 褐 色 (LightDrab,R. VLVI)。 分 生 孢 子 头 初 为 球 形 ,后 呈 辐 射 形 ,直 径 84μm~210μm;分 生 孢 子 梗 生 自 基 质 ,孢 梗 茎 140~ 420(~800)μm×6~12μm,壁 现 粗 糙,也 有 近 于 光 滑 者;顶 囊 为 杵 形 或 烧 瓶 形,直 径 (13.8~ )17~ 31μm,大部表面 可 育;产 孢 结 构 单 层,瓶 梗 6.2~10.6μm×2.4~4μm,偶 尔 可 观 察 到 较 长 者 可 达 15μm,中间具一隔壁;分生孢子球形或近球形,(3.6~)4.2~5.5(~6.4)μm,壁 稍 粗 糙,具 粗 硫 小 刺;未 见 菌 核 ,见 图 3。
Ⅰ
食品安全国家Biblioteka 准食品微生物学检验 常见产毒霉菌的形态学鉴定
GB 4789.16—2016
1 范围
本标准规定了食品中常见产毒真菌的鉴定方法。 本标准适用于曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)、镰刀菌属(Fusarium)及 其 他 菌 属 中 常 见产毒真菌的鉴定。
2 设备和材料
菌落在查氏琼脂上生长迅速,25 ℃ 7d直径35 mm~40 mm(~70 mm),12d~14d达55 mm~
2
GB 4789.16—2016 70 mm;质地主要为致密丝绒状,有时稍现絮状或中央部分呈絮状,平坦或现辐射状至不规则的沟纹;分 生孢子结构多,颜色为黄绿至草绿色,初期较 淡,老 后 稍 深,大 多 近 于 浅 水 芹 绿 色(LightCressGreen→ CressGreen,R.XXXI),也有呈木犀绿 色 (MignonetteGreen,R.XXXI),暗 草 绿 色 (Kronberg’sGreen, R.XXXI)或翡翠绿色(JadeGreen,R.XXXI)者,有的菌株初期现黄色,近于锶黄(Strontium Yellow,R. XVI),而 后 变 绿 ;一 般 无 渗 出 液 ;有 的 菌 株 形 成 少 量 或 大 量 菌 核 ,大 量 时 ,影 响 菌 落 外 观 ,伴 随 有 渗 出 液 , 无色至淡褐色,菌落反面无色至淡褐色,产生菌核的菌株,在形成菌 核 处 的 反 面 显 现 黑 褐 色 斑 点。分 生 孢 子 头 初 为 球 形 ,后 呈 辐 射 形 ,(80~ )200~500(~800)μm,或 裂 成 几 个 疏 松 的 柱 状 体 ,也 有 少 数 呈 短 柱 状者;分生孢子梗大多生自基质,孢梗茎(200~)400~800(~3000)μm× (4~)9.6~16(~20)μm,壁 厚 ,无 色 ,粗 糙 至 很 粗 糙 ;顶 囊 近 球 形 至 烧 瓶 形 ,直 径 (9~ )23~50(~65)μm,大 部 表 面 可 育 ,小 者 仅 上 部 可育;产孢结构双层:梗基6.2~13.2(19~)×3.2μm×6μm,瓶 梗 6.2~12μm×2.4~4μm,有 的 小 顶 囊只生瓶梗;分生孢子多 为 球 形 或 近 球 形 (2.4~)3.6~4.8(~6.4)μm,少 数 呈 椭 圆 形 3.2~5.2μm× 2.7~4.2μm,壁稍粗糙至具小刺;有的菌株产 生 菌 核,初 为 白 色,老 后 呈 褐 黑 色,球 形 或 近 球 形,大 小 或 数 量 各 异 ,一 般 为 (280~ )420~980μm,见 图 2。
GB 4789.16—2016 养 。 当 刚 长 出 小 菌 落 时 ,取 出 一 个 平 皿 以 无 菌 操 作 ,用 灭 菌 不 锈 钢 小 刀 或 眼 科 手 术 小 刀 将 菌 落 连 同 培 养 基切下1cm×2cm 的小块,置菌落一侧,继续 培 养,于 5d~14d进 行 观 察。此 法 代 替 小 培 养 法,可 观 察子实体着生状态。 4.2 斜面观察:将真菌纯培养物划线接种(曲霉、青霉)或点种(镰刀菌或其菌)于斜面,培养5d~14d, 观 察 菌 落 形 态 ,同 时 还 可 以 直 接 将 试 管 斜 面 置 低 倍 显 微 镜 下 观 察 孢 子 的 形 态 和 排 列 。 4.3 制片:取载玻片加乳酸苯酚液一滴,用接种钩取一小块真菌培养物,置乳酸-苯酚液中,用两支分离 针 将 培 养 物 轻 轻 撕 成 小 块 ,切 忌 涂 抹 ,以 免 破 坏 真 菌 结 构 。 然 后 加 盖 玻 片 ,如 有 气 泡 ,可 在 酒 精 灯 上 加 热 排除。制片时应在生物安全柜或无菌接种罩或接种箱或手套箱内操作以防孢子飞扬。 4.4 镜检:观察真菌菌丝和孢子的形态、特征、孢子的排列等,并记录。 5 检验程序
3 试剂和培养基
3.1 乳酸苯酚液:见 A.1。 3.2 查氏培养基:见 A.2。 3.3 马铃薯-葡萄糖琼脂培养基:见 A.3。 3.4 麦芽汁琼脂培养基:见 A.4。 3.5 无糖马铃薯琼脂培养基:见 A.5。
4 操作步骤
4.1 菌落特征观察:为了培养完整的菌落以供观察记录,可将纯培养物点种于平板上。曲霉、青霉通常 接 种 查 氏 培 养 基 ,镰 刀 菌 通 常 需 要 同 时 接 种 多 种 培 养 基 ,其 他 真 菌 一 般 使 用 马 铃 薯-葡 萄 糖 琼 脂 培 养 基 。 将平板倒转,向上接种一点或三点,每 个 菌 株 接 种 两 个 平 板,正 置 于 25 ℃ ±1 ℃ 恒 温 培 养 箱 中 进 行 培
中华人民共和国国家标准
GB 4789.16—2016
食品安全国家标准 食品微生物学检验 常见产毒霉菌的形态学鉴定
2016-12-23发布
2017-06-23实施
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 国家食品药品监督管理总局
发布
GB 4789.16—2016
前言
本标准代替 GB/T4789.16—2003《食品卫生微生物学检验 常见产毒霉菌的鉴定》 本标准与 GB/T4789.16—2003相比,主要修改如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品微生物学检验 常见产毒霉菌的形态学鉴定”; ——— 增 加 了 检 验 程 序 ; ——— 增 加 了 黑 曲 霉 、炭 黑 曲 霉 、棒 曲 霉 、红 曲 霉 等 产 毒 菌 种 ; ——— 修 改 了 标 准 名 称 ; ——— 修 改 了 设 备 和 材 料 ; ——— 修 改 了 培 养 基 和 试 剂 ; ——— 修 改 了 各 菌 种 形 态 描 述 ; ———修改了附录 A; ——— 删 除 了 黄 绿 青 霉 、岛 青 霉 、皱 褶 青 霉 、产 紫 青 霉 、红 青 霉 等 菌 种 ; ———删除检索表原附录 B、附录 C、附录 D。
常 见 产 毒 霉 菌 的 形 态 学 鉴 定 检 验 程 序 见 图 1。
图1 常见产毒霉菌的形态学鉴定检验程序
6 各属真菌的形态特征及可能产生的真菌毒素 6.1 曲霉属(Aspergillus)
本 属 的 产 毒 真 菌 主 要 包 括 黄 曲 霉 、寄 生 曲 霉 、杂 色 曲 霉 、构 巢 曲 霉 、赭 曲 霉 、黑 曲 霉 、炭 黑 曲 霉 和 棒 曲 霉 等 。 这 些 真 菌 可 能 产 生 黄 曲 霉 毒 素 、赭 曲 霉 毒 素 、伏 马 菌 素 、展 青 霉 素 等 次 生 代 谢 产 物 。
寄生曲霉的菌株都能产生黄曲霉毒素。
3
GB 4789.16—2016
图3 寄生曲霉的产孢结构和分生孢子 6.1.3 杂色曲霉 (A.versicolor)
菌落在查氏琼脂上生长局限,25 ℃ 7d直径15mm~17mm,10d~12d达24mm~30mm;质地 为丝绒状或絮状,或两种质地并存或相互镶嵌;菌落不平,稍厚,中央 部 分 隆 起 或 凹 陷,或 呈 不 同 程 度 的 翘曲;颜色差异很大,初 为 白 色,后 呈 不 同 程 度 的 绿 色,近 于 青 豆 绿、阿 福 花 绿 (PoisGreen,Asphodel Green,R.XLI)至 深 葡 萄 绿 (DeepGrapeGreen,R.XLI),有 的 菌 株 呈 孔 雀 绿 (MalachiteGreen,R.XXX Ⅱ ),橄 榄 绿 (OliveGreen,R.Ⅳ )或 暗 橄 榄 褐 色 (Dark OliveBuff,R.XL),间 或 有 不 呈 绿 色 者 ,取 决 于 分 生 孢 子 结 构 的 多 少 ;菌 丝 体 呈 黄 褐 色 、粉 红 色 ,近 于 浅 褐 粉 红 色 (BuffyPink,R.XXLⅢ )或 淡 粉 红 肉 桂 色 (PalePinkishCinnamrn,R.XXIX),因不同菌株 而 异;分 生 孢 子 结 构 有 时 形 成 迟 缓;有 辐 射 状 沟 纹;渗 出 液 有 或 无 ,近 于 无 色 或 呈 淡 褐 色 至 紫 红 色 ,形 成 小 滴 或 聚 成 大 滴 ;无 明 显 气 味 或 稍 具 霉 味 ;菌 落 反 面 颜 色 不 一 ,近 于 无 色 至 淡 黄 褐 色 、粉 红 色 、玫 瑰 紫 色 或 紫 褐 色 ,色 素 扩 散 于 基 质 ;有 的 菌 株 形 成 壳 细 胞 ,老 培 养物中可见聚成淡黄色的团块。分 生 孢 子 头 较 小,初 为 球 形,后 呈 辐 射 形,直 径(25~)75~125μm;分 生 孢 梗 茎 直 接 生 自 基 质 者 (45~ )150~300(~500)μm×4~8μm,生 自 气 生 菌 丝 者 大 都 很 短 ,无 色 或 稍 带 黄 色 ,壁 较 厚 ,光 滑 ;顶 囊 半 球 形 、稍 长 形 或 稍 呈 椭 圆 形 ,直 径 9~20μm,约 3/4 的 表 面 可 育 ,小 顶 囊 仅 分生孢梗茎顶部稍加膨大而不明显;产孢结构双层:梗 基 一 般 5~8μm×2~3μm,瓶 梗6~8μm×1.5 ~2.5μm;分 生 孢 子 球 形 或 近 球 形 ,绿 色 ,直 径 (2~ )2.5~3.5(~4)μm,壁 粗 糙 ,具 小 刺 ;壳 细 胞 球 形 或 近 球 形 ,直 径 11μm~20μm,大 量 形 成 时 聚 成 淡 黄 色 的 团 块 ,见 图 4。
除 微 生 物 实 验 室 常 规 灭 菌 及 培 养 设 备 外 ,其 他 设 备 和 材 料 如 下 : 2.1 冰箱:2 ℃~5 ℃。 2.2 恒温培养箱:25 ℃±1 ℃。 2.3 显微镜:10倍~100倍。 2.4 目镜测微尺。 2.5 物镜测微尺。 2.6 生物安全柜。 2.7 恒温水浴箱。 2.8 接种钩。 2.9 分离针。 2.10 载玻片。 2.11 盖玻片。 2.12 不锈钢小刀或眼科手术小刀。
曲 霉 属 的 菌 丝 体 无 色 透 明 或 呈 明 亮 的 颜 色 ,但 不 呈 暗 污 色 ;可 育 的 分 生 孢 梗 茎 以 大 体 垂 直 的 方 向 从 特化的厚壁的足细胞生出,光滑或粗糙,通常无横隔;顶端膨大形成 顶 囊,具 不 同 形 状,从 其 表 面 形 成 瓶 梗 ,或 先 产 生 梗 基 ,再 从 梗 基 上 形 成 瓶 梗 ,最 后 由 瓶 梗 产 生 分 生 孢 子 。 分 生 孢 子 单 胞 ,具 不 同 形 状 和 各 种 颜色,光滑或具纹饰,连接成不分枝的链。由顶囊到分生孢子链构成 不 同 形 状 的 分 生 孢 子 头,显 现 不 同 颜色。有的种可形成厚壁的壳细胞,形状因种而异;有的种则可形成 菌 核 或 类 菌 核 结 构;还 有 的 种 产 生 有 性 阶 段 ,形 成 闭 囊 壳 ,内 含 子 囊 和 子 囊 孢 子 ,子 囊 孢 子 大 多 透 明 或 具 不 同 颜 色 、形 状 和 纹 饰 。 6.1.1 黄曲霉(A.flavus)
黄 曲 霉 的 某 些 菌 株 可 产 生 黄 曲 霉 毒 素 (Aflatoxins)。
图2 黄曲霉的产孢结构和分生孢子
6.1.2 寄生曲霉 (A.parasiticus) 菌落在查氏琼脂上25 ℃ 7d直径 35 mm,12d~14d50 mm~60 mm;质地丝绒状,偶 有 絮 状 菌
丝 ,边 缘 白 色 ;分 生 孢 子 结 构 多 ,颜 色 为 深 绿 色 ,近 于 雪 松 绿 (CedarGreen,R.VI),老 后 变 暗 近 于 常 春 藤 绿 (IvyGreen,R.XXXI);有 辐 射 状 沟 纹 ,无 渗 出 液 ,菌 落 反 面 呈 淡 褐 色 ,近 于 浅 灰 褐 色 (LightDrab,R. VLVI)。 分 生 孢 子 头 初 为 球 形 ,后 呈 辐 射 形 ,直 径 84μm~210μm;分 生 孢 子 梗 生 自 基 质 ,孢 梗 茎 140~ 420(~800)μm×6~12μm,壁 现 粗 糙,也 有 近 于 光 滑 者;顶 囊 为 杵 形 或 烧 瓶 形,直 径 (13.8~ )17~ 31μm,大部表面 可 育;产 孢 结 构 单 层,瓶 梗 6.2~10.6μm×2.4~4μm,偶 尔 可 观 察 到 较 长 者 可 达 15μm,中间具一隔壁;分生孢子球形或近球形,(3.6~)4.2~5.5(~6.4)μm,壁 稍 粗 糙,具 粗 硫 小 刺;未 见 菌 核 ,见 图 3。
Ⅰ
食品安全国家Biblioteka 准食品微生物学检验 常见产毒霉菌的形态学鉴定
GB 4789.16—2016
1 范围
本标准规定了食品中常见产毒真菌的鉴定方法。 本标准适用于曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)、镰刀菌属(Fusarium)及 其 他 菌 属 中 常 见产毒真菌的鉴定。
2 设备和材料
菌落在查氏琼脂上生长迅速,25 ℃ 7d直径35 mm~40 mm(~70 mm),12d~14d达55 mm~
2
GB 4789.16—2016 70 mm;质地主要为致密丝绒状,有时稍现絮状或中央部分呈絮状,平坦或现辐射状至不规则的沟纹;分 生孢子结构多,颜色为黄绿至草绿色,初期较 淡,老 后 稍 深,大 多 近 于 浅 水 芹 绿 色(LightCressGreen→ CressGreen,R.XXXI),也有呈木犀绿 色 (MignonetteGreen,R.XXXI),暗 草 绿 色 (Kronberg’sGreen, R.XXXI)或翡翠绿色(JadeGreen,R.XXXI)者,有的菌株初期现黄色,近于锶黄(Strontium Yellow,R. XVI),而 后 变 绿 ;一 般 无 渗 出 液 ;有 的 菌 株 形 成 少 量 或 大 量 菌 核 ,大 量 时 ,影 响 菌 落 外 观 ,伴 随 有 渗 出 液 , 无色至淡褐色,菌落反面无色至淡褐色,产生菌核的菌株,在形成菌 核 处 的 反 面 显 现 黑 褐 色 斑 点。分 生 孢 子 头 初 为 球 形 ,后 呈 辐 射 形 ,(80~ )200~500(~800)μm,或 裂 成 几 个 疏 松 的 柱 状 体 ,也 有 少 数 呈 短 柱 状者;分生孢子梗大多生自基质,孢梗茎(200~)400~800(~3000)μm× (4~)9.6~16(~20)μm,壁 厚 ,无 色 ,粗 糙 至 很 粗 糙 ;顶 囊 近 球 形 至 烧 瓶 形 ,直 径 (9~ )23~50(~65)μm,大 部 表 面 可 育 ,小 者 仅 上 部 可育;产孢结构双层:梗基6.2~13.2(19~)×3.2μm×6μm,瓶 梗 6.2~12μm×2.4~4μm,有 的 小 顶 囊只生瓶梗;分生孢子多 为 球 形 或 近 球 形 (2.4~)3.6~4.8(~6.4)μm,少 数 呈 椭 圆 形 3.2~5.2μm× 2.7~4.2μm,壁稍粗糙至具小刺;有的菌株产 生 菌 核,初 为 白 色,老 后 呈 褐 黑 色,球 形 或 近 球 形,大 小 或 数 量 各 异 ,一 般 为 (280~ )420~980μm,见 图 2。