单纯疱疹病毒1型糖蛋白D主要抗原表位区的表达、纯化及鉴定

单纯疱疹病毒1型糖蛋白D主要抗原表位区的表达、纯化及
鉴定
刘红;刘宾;和骁;赵晓涛
【期刊名称】《基础医学与临床》
【年(卷),期】2013(033)003
【摘要】目的原核表达单纯疱疹病毒1型(HSV-1)糖蛋白D(gD)主要抗原表位区,纯化融合表达蛋白并对其进行鉴定.方法用Lasergene7.0中Protean软件对HSV-1 gD氨基酸序列进行抗原表位预测和分析,筛选出gD主要抗原表位区(gD MED),人工合成该区域cDNA序列,构建原核表达载体pET-GST-gD MED；将重组质粒转化大肠杆菌(E.coli) BL21(DE3) pLysS,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过GST·Bind纯化试剂盒对gDMED融合蛋白进行纯化；Western blot对gD MED融合蛋白的免疫活性进行分析.结果 HSV-1 gD在266～394区域富含抗原表位,人工合成了该区域的cDNA序列,并成功构建了原核表达载体pET-GST-gD MED；gD MED融合蛋白主要以可溶形式表达,分子质量约为45 ku,纯度能达95％；Western blot结果显示,gD MED融合蛋白能与感染HSV-1患者的血清发生特异结合.结论成功表达和纯化了具有良好抗原性的HSV-1 gD MED融合蛋白,为HSV免疫诊断试剂盒和基因工程疫苗的研制提供了依据.【总页数】6页(P350-355)
【作者】刘红;刘宾;和骁;赵晓涛
【作者单位】北京大学人民医院检验科,北京100044;北京大学工学院生物医学工程系,北京100871;北京大学人民医院检验科,北京100044;北京大学人民医院检验科,北京100044
【正文语种】中文
【中图分类】R446;R34
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