基因芯片技术PPT课件
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第三十三页，共55页。
第三十四页，共55页。
第三十五页，共55页。
第四节 基因芯片的杂交及结果分析
4.1 探针的标记 标记的方法通常是在反转录的底物中加
入带有标记基团的寡核苷酸单体，通过反转 录将标记分子渗入cDNA 分子中。
mRNA反转录标记方法直接影响DNA芯 片分析结果的准确性及重现性。
方便等优点，目前在国际上广泛使用。
第十三页，共55页。
2.2 按点样方式分类 1、原位合成芯片（将半导体中的光蚀刻技术运用
到DNA合成化学中，以单核苷酸或其他分子大分 子为底物，在玻璃晶片上原位合成寡核苷酸）
2、微矩阵芯片（目前应用最广泛的基因芯片之一。
具有高密度、制作简便的特点。其是将用PCR或化 学合成等方法得到的DNA或寡核苷酸片段用针点或 喷点的方法直接排列到玻片等载体上，从而制备成 芯片。）
第十页，共55页。
2、基因芯片的缺点
基因芯片技术体系的建立和使用需要较 大的投入。
（但是，相对于传统的表达分析技术而 言，单个基因分析的成本仍是较低的。）
第十一页，共55页。
第十二页，共55页。
第二节 生物芯片的分类
2.1 按载体材料分类 玻璃芯片 硅芯片 陶瓷芯片 玻璃芯片具有易得、荧光背景低、应用基Leabharlann 芯片技术第一页，共55页。
• 生物芯片是八十年代末在生命科学领 域中迅速发展起来的一项高新技术，它 主要是指通过微加工技术和微电子技术 在固体芯片表面构建的微型生物化学分 析系统，以实现对细胞、蛋白质、 DNA以及其他生物组分的准确、快速、 大信息量的检测。
第二页，共55页。
世界著名商业杂志《财富》对基因 生 物 芯 片 领 域 非 常 看 好 ， 它 在 其 1997 年的3月31刊中讲到：“微处理器使我 们的经济发生了根本改变、给人类带来 了巨大的财富、改变了我们的生活方式。 然而，生物芯片给人类带来的影响可能 会更大…...”
第二十三页，共55页。
1、原位合成
光刻DNA合成法（将半导体工业中的光刻技术和
DNA化学合成相结合，把光不稳定保护基团保护的4种 DNA模块固定在玻片上，通过光脱保护，用少量的保护寡 核苷酸和试剂按照设计的序列进行DNA合成。）
优点：合成的密度和精度优于后两种方法。 缺点：需要花费大量的时间去设计和制造价 格很高的照相掩蔽网。
• 基因芯片的核心原理与Southern blot和Northern blot
相同，只是相反将各种探针固化到基质上，用以检 测受检样品中与各种探针互补的核酸物质的变化。
第七页，共55页。
第八页，共55页。
1 样品制备 2 DNA提取 3 荧光标记
4 分子杂交
5 信号检测 6 点阵分析
第九页，共55页。
影响杂交反应的因素：
靶分子浓度、探针浓度、靶分子和探针 的序列组成、盐浓度及杂交温度和时间等。
第四十一页，共55页。
4.3 芯片结果读取与扫描仪
生物芯片的扫读（扫描）是指将与目的DNA （或RNA）杂交后、或与目的抗原、抗体、 或受体等目的靶分子反应结合后的生物芯片 上成千上万个点阵的生物反应结果阅读出来， 转变成为可供计算机处理的数据。
第四十七页，共55页。
一个完整的生物芯片配套软件应该
包括生物芯片扫描仪的硬件控制软件、
生物芯片的图像处理软件和数据提取或
统计分析软件，以及芯片表达基因的国 际互联网上检索和表达基因数据库分析 和积累。
第四十八页，共55页。
第五节 基因芯片的应用
1、基因表达分析 2、基因型及多态性分析 3、杂交测序 4、核酸和蛋白质相互作用的研究 5、疾病的诊断与治疗 6、药物开发 7、在营养与食品卫生领域的应用 8、在环境科学领域中的应用
第二十四页，共55页。
1 通过光刻掩膜曝光
2 去保护区域被激活 3 固相化合成1个碱基
4 通过另一个光刻掩膜曝光
5 引入另一个碱基 6 重复这一步骤
第二十五页，共55页。
2、预合成后点样
（1）接触点样法（将样品直接点在基体上）
优点：仪器结构简单、容易研制，是一 种快速、经济、多功能的仪器。
缺点：每个样品都必须是合成好、经过 纯化、事先保存的。
第三页，共55页。
酵 母 全 基 因 组 基 因 芯 片
第四页，共55页。
第一节 生物芯片简介
1.1 生物芯片的定义 生物芯片是指通过机器人自动印迹或光引导
化学合成技术在硅片、玻璃、凝胶或尼龙膜 上制造的生物分子微阵列，根据分子间的特 异性相互作用的原理，将生命科学领域中不 连续的分析过程集成于芯片表面，以实现对 细胞、蛋白 质、基因及其他生物组分 的准确、快速、大信息量 的检测。
第三十六页，共55页。
第三十七页，共55页。
第三十八页，共55页。
第三十九页，共55页。
4.2 杂交
在一定条件下，分子间氢键的断裂 与恢复是 DNA/DNA、DNA/RNA 分子 间选择性结合的根本动力，这一过程 称之为杂交。
第四十页，共55页。
与经典分子杂交的区别：
1. 杂交时间短，30分钟内完成 2. 可同时平行检测许多基因序列
与接触点样法不同之处在于喷嘴不 与芯片接触。
第二十九页，共55页。
点样法首先按常规方法制备cDNA（或寡核苷酸）探针库， 然后通过特殊的针头和微喷头, 分别把不同的探针溶液，逐 点分配在玻璃、尼龙或者其它固相基底表面上不同位点,并 通过物理和化学的结合使探针被固定于芯片的相应位点。
玻璃基质
第三十页，共55页。
其二、分析速度极快。Mathies研究小组在一个半径仅为8厘米长的园盘上集成了 384个通道的电泳芯片。他们在325秒内检测了384份与血色病连锁的H63D 突 变株（在人HFE基因上）样品，每个样品分析时间不到一秒钟。 其三、高通量。 其四、能耗低，物耗少，污染小。每个分析样品所消耗的试剂仅几微升 至几十个微升，被分析的物质的体积只需纳升级或皮升级。
1.2 基因芯片分析流程 基因芯片分析的过程主要包括样品及其标记处理、
芯片制作、分子杂交、信号的检测和数据处理及分析 等几个步骤。
• 基因芯片的理论基础： • 传统的Southern blot和Northern blot是将受检测的样
本固定在尼龙膜上，再利用特定的已知探针来检测 样本中是否存在互补的DNA序列。
第四十九页，共55页。
基因芯片在医学领域的应用
第二十一页，共55页。
3.1 用于芯片制作的DNA样品的来源 （1）从细胞或组织中的 DNA序列，用PCR 扩增技术或DNA 固相结合技术来获 取人们所期望的各种基因片段；
（2）利用基因组测序数据，经生物信息学分析 得到代表各个基因的数据，在利用PCR 技术或 DNA 固相结合技术来获取人们所期望的各种基因 片段。
1.3 基因芯片技术的特点
1、基因芯片的优点
1）高通量性：可同时并行分析成千上万种分子。 节省时间，并减少系统误差。
2）微型化 3）高度自动化 4）结果重现性和准确性更高（基因芯片能在同
一张芯片上同时对实验组和对照组材料进行杂 交分析，这样就实现了平行化操作，避免了各 种误差，使实验结果具有可比性）
第四十四页，共55页。
高密度微点阵检测扫描系统
基因芯片荧光侦测仪
第四十五页，共55页。
图象分析系统
高密度微点阵分析软件
第四十六页，共55页。
4.4 生物芯片的软件系统与数据处理
当从芯片发出的荧光转换成数字输 出后，数据文件就被定量和翻译，通过 重叠芯片像线栅，软件对芯片上的每个 点计算平均密度值，从而完成定量，通 过对芯片上实验点和对照点的比较，选 出杂交点，并定量。
品制备、生物与化学反应、分离检测等基本操作单位集成或基本集成一 块几平方厘米的芯片上，用以完成不同的生物或化学反应过程，并对其
产物进行分析的一种技术。
第十五页，共55页。
芯片实验室的特点:
其一、集成性。目前一个重要的趋势是：集成的单元部件越来越多，且集成的规模也越
来越大。所涉及到的部件包括：和进样及样品处理有关的透析、膜、固相萃取、净化；用 于流体控制的微阀（包括主动阀和被动阀），微泵（包括机械泵和非机械泵）；微混合器， 微反应器，另外还有微通道和微检测器等。
第二十二页，共55页。
3.2 生物芯片的制作方法
生物芯片微阵列的制作技术按照制作方法 可分为：原位合成和预合成后点样。
原位合成法是由点样系统将探针的组成部 分逐步转移到基体上，同时实现探针合成和 转移的目的。
预合成后点样是指制备芯片微阵列前，要 固定的探针已经合成好，点样系统需要做的 就是把这些合成好的样品涂印或喷涂在基体 上。
第十七页，共55页。
一组寡核苷酸探针
TACGTTAG
ATACGTTA
由杂交位置确定的一组 核酸探针序列
ATACGTTA
TACGTTAG ACGTTAGA CGTTAGAT GTTAGATC
杂交探针组
ACGTTAGA CGTTAGA
T
GTTAGATC
—TATGCAATCTAG
ATACGTTAGATC
第五页，共55页。
• 基因芯片——又称DNA芯片或DNA阵列，是 生物芯片的一种类型，它是将DNA分子固定 于支持物上，并与标记的样品杂交，通过自 动化仪器检测杂交信号的强度来判断样品中 靶分子的数量，进而得知样品中mRNA 的表 达量，也可以进行基因突变体的检测和基因 序列的测定。
第六页，共55页。
其五、廉价，安全。无论是化学反应芯片还是分析芯片由于上述特点随着技术上 的成熟，其价格将会越来越廉价。针对化学反应芯片而言，由于化学反应在微 小的空间中进行，反应体积小，分子数量少，反应产热少，又因反应空间体表 面积大，传质和传热的过程很快，所以比常规化学反应更安全。
第十六页，共55页。
2.4 按芯片使用功能分类 （1）测序芯片 （2）表达谱芯片 （3）基因差异表达分析芯片
TATGCAATCTAG
重组的互补序列 靶序列
测序芯片
第十八页，共55页。
基因表达谱芯片
第十九页，共55页。
基 因 差 异 表 达 分 析 芯 片
第二十页，共55页。
第三节 基因芯片的制作
固相介质 硅片、二氧化硅、玻璃、尼龙膜、塑料等。 靶片段 DNA、寡核苷酸、RNA等。 探针 mRNA，或是以mRNA为模板合成的cDNA。 标记物 常采用荧光剂（如Cy3、Cy5）；同位素等。
3、电定位芯片（利用静电吸附的原理将DNA快速
定位在硅基质、导电玻璃上。）
第十四页，共55页。
2.3 按芯片固定的生物分子类型分类 （1）基因芯片或DNA芯片 （2）蛋白质芯片 （3）芯片实验室（lab-on-chip）
将一个实验的各个步骤微缩于一个芯片上
芯片实验室（Lab-on-a-chip）或称微全分析系统（Miniaturized Total Analysis System,µ-TAS）是指把生物和化学等领域中所涉及的样
荧光标记的生物芯片扫描仪按其原理与结构 可以分为激光系统扫描仪和CCD系统扫描仪。
第四十二页，共55页。
• 基因芯片杂交结果要用专用的扫描系统读 取。
D
B
E
A
B
放大器
数模转
C
换器
计算机
A:激光器 B:滤光片 C:二色镜 D:反光镜 E:关栅
第四十三页，共55页。
基因芯片扫描结果
不同的颜色代表一个探针点杂交上的带荧光标记的核 酸分子数的差异。红〉黄〉绿〉兰〉紫
基因芯片 微点阵
制备系统
第三十一页，共55页。
3.3 DNA分子在刚性表面的固定 ➢ 制作生物芯片的载体材料必须符合下列要
求： （1）载体表面必须适应透射或反射光的测
量； （2）使单位载体上结合的生物分子达到最
佳容量； （3）载体应当是惰性的和有足够的稳定性。
第三十二页，共55页。
• 基因芯片制作的关键就是如何将大量的探针 分子固定于支持物上，并保持探针分子的构 像处于自然状态，使探针 DNA 分子能自由 地与样品分子进行杂交。
第二十六页，共55页。
2202芯片点样仪
• 生产商 Bio-Rad • 性能介绍
分辨率：1.25um(x，y轴)和0.25um(Z轴) ， 重复性：3um 球面精确性：l0um。 一次制成芯片数：126块芯片 每块玻片点样量>82,000个点
第二十七页，共55页。
第二十八页，共55页。
（2）喷墨法（通过压电晶体或其他推进式从 很小的喷嘴内把生物样品喷射到玻璃载体 上。） 该法所需的样品都必须是合成好的纯样 品（cDNA、染色体DNA和抗体）。
第三十四页，共55页。
第三十五页，共55页。
第四节 基因芯片的杂交及结果分析
4.1 探针的标记 标记的方法通常是在反转录的底物中加
入带有标记基团的寡核苷酸单体，通过反转 录将标记分子渗入cDNA 分子中。
mRNA反转录标记方法直接影响DNA芯 片分析结果的准确性及重现性。
方便等优点，目前在国际上广泛使用。
第十三页，共55页。
2.2 按点样方式分类 1、原位合成芯片（将半导体中的光蚀刻技术运用
到DNA合成化学中，以单核苷酸或其他分子大分 子为底物，在玻璃晶片上原位合成寡核苷酸）
2、微矩阵芯片（目前应用最广泛的基因芯片之一。
具有高密度、制作简便的特点。其是将用PCR或化 学合成等方法得到的DNA或寡核苷酸片段用针点或 喷点的方法直接排列到玻片等载体上，从而制备成 芯片。）
第十页，共55页。
2、基因芯片的缺点
基因芯片技术体系的建立和使用需要较 大的投入。
（但是，相对于传统的表达分析技术而 言，单个基因分析的成本仍是较低的。）
第十一页，共55页。
第十二页，共55页。
第二节 生物芯片的分类
2.1 按载体材料分类 玻璃芯片 硅芯片 陶瓷芯片 玻璃芯片具有易得、荧光背景低、应用基Leabharlann 芯片技术第一页，共55页。
• 生物芯片是八十年代末在生命科学领 域中迅速发展起来的一项高新技术，它 主要是指通过微加工技术和微电子技术 在固体芯片表面构建的微型生物化学分 析系统，以实现对细胞、蛋白质、 DNA以及其他生物组分的准确、快速、 大信息量的检测。
第二页，共55页。
世界著名商业杂志《财富》对基因 生 物 芯 片 领 域 非 常 看 好 ， 它 在 其 1997 年的3月31刊中讲到：“微处理器使我 们的经济发生了根本改变、给人类带来 了巨大的财富、改变了我们的生活方式。 然而，生物芯片给人类带来的影响可能 会更大…...”
第二十三页，共55页。
1、原位合成
光刻DNA合成法（将半导体工业中的光刻技术和
DNA化学合成相结合，把光不稳定保护基团保护的4种 DNA模块固定在玻片上，通过光脱保护，用少量的保护寡 核苷酸和试剂按照设计的序列进行DNA合成。）
优点：合成的密度和精度优于后两种方法。 缺点：需要花费大量的时间去设计和制造价 格很高的照相掩蔽网。
• 基因芯片的核心原理与Southern blot和Northern blot
相同，只是相反将各种探针固化到基质上，用以检 测受检样品中与各种探针互补的核酸物质的变化。
第七页，共55页。
第八页，共55页。
1 样品制备 2 DNA提取 3 荧光标记
4 分子杂交
5 信号检测 6 点阵分析
第九页，共55页。
影响杂交反应的因素：
靶分子浓度、探针浓度、靶分子和探针 的序列组成、盐浓度及杂交温度和时间等。
第四十一页，共55页。
4.3 芯片结果读取与扫描仪
生物芯片的扫读（扫描）是指将与目的DNA （或RNA）杂交后、或与目的抗原、抗体、 或受体等目的靶分子反应结合后的生物芯片 上成千上万个点阵的生物反应结果阅读出来， 转变成为可供计算机处理的数据。
第四十七页，共55页。
一个完整的生物芯片配套软件应该
包括生物芯片扫描仪的硬件控制软件、
生物芯片的图像处理软件和数据提取或
统计分析软件，以及芯片表达基因的国 际互联网上检索和表达基因数据库分析 和积累。
第四十八页，共55页。
第五节 基因芯片的应用
1、基因表达分析 2、基因型及多态性分析 3、杂交测序 4、核酸和蛋白质相互作用的研究 5、疾病的诊断与治疗 6、药物开发 7、在营养与食品卫生领域的应用 8、在环境科学领域中的应用
第二十四页，共55页。
1 通过光刻掩膜曝光
2 去保护区域被激活 3 固相化合成1个碱基
4 通过另一个光刻掩膜曝光
5 引入另一个碱基 6 重复这一步骤
第二十五页，共55页。
2、预合成后点样
（1）接触点样法（将样品直接点在基体上）
优点：仪器结构简单、容易研制，是一 种快速、经济、多功能的仪器。
缺点：每个样品都必须是合成好、经过 纯化、事先保存的。
第三页，共55页。
酵 母 全 基 因 组 基 因 芯 片
第四页，共55页。
第一节 生物芯片简介
1.1 生物芯片的定义 生物芯片是指通过机器人自动印迹或光引导
化学合成技术在硅片、玻璃、凝胶或尼龙膜 上制造的生物分子微阵列，根据分子间的特 异性相互作用的原理，将生命科学领域中不 连续的分析过程集成于芯片表面，以实现对 细胞、蛋白 质、基因及其他生物组分 的准确、快速、大信息量 的检测。
第三十六页，共55页。
第三十七页，共55页。
第三十八页，共55页。
第三十九页，共55页。
4.2 杂交
在一定条件下，分子间氢键的断裂 与恢复是 DNA/DNA、DNA/RNA 分子 间选择性结合的根本动力，这一过程 称之为杂交。
第四十页，共55页。
与经典分子杂交的区别：
1. 杂交时间短，30分钟内完成 2. 可同时平行检测许多基因序列
与接触点样法不同之处在于喷嘴不 与芯片接触。
第二十九页，共55页。
点样法首先按常规方法制备cDNA（或寡核苷酸）探针库， 然后通过特殊的针头和微喷头, 分别把不同的探针溶液，逐 点分配在玻璃、尼龙或者其它固相基底表面上不同位点,并 通过物理和化学的结合使探针被固定于芯片的相应位点。
玻璃基质
第三十页，共55页。
其二、分析速度极快。Mathies研究小组在一个半径仅为8厘米长的园盘上集成了 384个通道的电泳芯片。他们在325秒内检测了384份与血色病连锁的H63D 突 变株（在人HFE基因上）样品，每个样品分析时间不到一秒钟。 其三、高通量。 其四、能耗低，物耗少，污染小。每个分析样品所消耗的试剂仅几微升 至几十个微升，被分析的物质的体积只需纳升级或皮升级。
1.2 基因芯片分析流程 基因芯片分析的过程主要包括样品及其标记处理、
芯片制作、分子杂交、信号的检测和数据处理及分析 等几个步骤。
• 基因芯片的理论基础： • 传统的Southern blot和Northern blot是将受检测的样
本固定在尼龙膜上，再利用特定的已知探针来检测 样本中是否存在互补的DNA序列。
第四十九页，共55页。
基因芯片在医学领域的应用
第二十一页，共55页。
3.1 用于芯片制作的DNA样品的来源 （1）从细胞或组织中的 DNA序列，用PCR 扩增技术或DNA 固相结合技术来获 取人们所期望的各种基因片段；
（2）利用基因组测序数据，经生物信息学分析 得到代表各个基因的数据，在利用PCR 技术或 DNA 固相结合技术来获取人们所期望的各种基因 片段。
1.3 基因芯片技术的特点
1、基因芯片的优点
1）高通量性：可同时并行分析成千上万种分子。 节省时间，并减少系统误差。
2）微型化 3）高度自动化 4）结果重现性和准确性更高（基因芯片能在同
一张芯片上同时对实验组和对照组材料进行杂 交分析，这样就实现了平行化操作，避免了各 种误差，使实验结果具有可比性）
第四十四页，共55页。
高密度微点阵检测扫描系统
基因芯片荧光侦测仪
第四十五页，共55页。
图象分析系统
高密度微点阵分析软件
第四十六页，共55页。
4.4 生物芯片的软件系统与数据处理
当从芯片发出的荧光转换成数字输 出后，数据文件就被定量和翻译，通过 重叠芯片像线栅，软件对芯片上的每个 点计算平均密度值，从而完成定量，通 过对芯片上实验点和对照点的比较，选 出杂交点，并定量。
品制备、生物与化学反应、分离检测等基本操作单位集成或基本集成一 块几平方厘米的芯片上，用以完成不同的生物或化学反应过程，并对其
产物进行分析的一种技术。
第十五页，共55页。
芯片实验室的特点:
其一、集成性。目前一个重要的趋势是：集成的单元部件越来越多，且集成的规模也越
来越大。所涉及到的部件包括：和进样及样品处理有关的透析、膜、固相萃取、净化；用 于流体控制的微阀（包括主动阀和被动阀），微泵（包括机械泵和非机械泵）；微混合器， 微反应器，另外还有微通道和微检测器等。
第二十二页，共55页。
3.2 生物芯片的制作方法
生物芯片微阵列的制作技术按照制作方法 可分为：原位合成和预合成后点样。
原位合成法是由点样系统将探针的组成部 分逐步转移到基体上，同时实现探针合成和 转移的目的。
预合成后点样是指制备芯片微阵列前，要 固定的探针已经合成好，点样系统需要做的 就是把这些合成好的样品涂印或喷涂在基体 上。
第十七页，共55页。
一组寡核苷酸探针
TACGTTAG
ATACGTTA
由杂交位置确定的一组 核酸探针序列
ATACGTTA
TACGTTAG ACGTTAGA CGTTAGAT GTTAGATC
杂交探针组
ACGTTAGA CGTTAGA
T
GTTAGATC
—TATGCAATCTAG
ATACGTTAGATC
第五页，共55页。
• 基因芯片——又称DNA芯片或DNA阵列，是 生物芯片的一种类型，它是将DNA分子固定 于支持物上，并与标记的样品杂交，通过自 动化仪器检测杂交信号的强度来判断样品中 靶分子的数量，进而得知样品中mRNA 的表 达量，也可以进行基因突变体的检测和基因 序列的测定。
第六页，共55页。
其五、廉价，安全。无论是化学反应芯片还是分析芯片由于上述特点随着技术上 的成熟，其价格将会越来越廉价。针对化学反应芯片而言，由于化学反应在微 小的空间中进行，反应体积小，分子数量少，反应产热少，又因反应空间体表 面积大，传质和传热的过程很快，所以比常规化学反应更安全。
第十六页，共55页。
2.4 按芯片使用功能分类 （1）测序芯片 （2）表达谱芯片 （3）基因差异表达分析芯片
TATGCAATCTAG
重组的互补序列 靶序列
测序芯片
第十八页，共55页。
基因表达谱芯片
第十九页，共55页。
基 因 差 异 表 达 分 析 芯 片
第二十页，共55页。
第三节 基因芯片的制作
固相介质 硅片、二氧化硅、玻璃、尼龙膜、塑料等。 靶片段 DNA、寡核苷酸、RNA等。 探针 mRNA，或是以mRNA为模板合成的cDNA。 标记物 常采用荧光剂（如Cy3、Cy5）；同位素等。
3、电定位芯片（利用静电吸附的原理将DNA快速
定位在硅基质、导电玻璃上。）
第十四页，共55页。
2.3 按芯片固定的生物分子类型分类 （1）基因芯片或DNA芯片 （2）蛋白质芯片 （3）芯片实验室（lab-on-chip）
将一个实验的各个步骤微缩于一个芯片上
芯片实验室（Lab-on-a-chip）或称微全分析系统（Miniaturized Total Analysis System,µ-TAS）是指把生物和化学等领域中所涉及的样
荧光标记的生物芯片扫描仪按其原理与结构 可以分为激光系统扫描仪和CCD系统扫描仪。
第四十二页，共55页。
• 基因芯片杂交结果要用专用的扫描系统读 取。
D
B
E
A
B
放大器
数模转
C
换器
计算机
A:激光器 B:滤光片 C:二色镜 D:反光镜 E:关栅
第四十三页，共55页。
基因芯片扫描结果
不同的颜色代表一个探针点杂交上的带荧光标记的核 酸分子数的差异。红〉黄〉绿〉兰〉紫
基因芯片 微点阵
制备系统
第三十一页，共55页。
3.3 DNA分子在刚性表面的固定 ➢ 制作生物芯片的载体材料必须符合下列要
求： （1）载体表面必须适应透射或反射光的测
量； （2）使单位载体上结合的生物分子达到最
佳容量； （3）载体应当是惰性的和有足够的稳定性。
第三十二页，共55页。
• 基因芯片制作的关键就是如何将大量的探针 分子固定于支持物上，并保持探针分子的构 像处于自然状态，使探针 DNA 分子能自由 地与样品分子进行杂交。
第二十六页，共55页。
2202芯片点样仪
• 生产商 Bio-Rad • 性能介绍
分辨率：1.25um(x，y轴)和0.25um(Z轴) ， 重复性：3um 球面精确性：l0um。 一次制成芯片数：126块芯片 每块玻片点样量>82,000个点
第二十七页，共55页。
第二十八页，共55页。
（2）喷墨法（通过压电晶体或其他推进式从 很小的喷嘴内把生物样品喷射到玻璃载体 上。） 该法所需的样品都必须是合成好的纯样 品（cDNA、染色体DNA和抗体）。