诺西肽产生菌的菌种选育

奉作 为一 种新的 自由基 清除剂 ，有 “ 自由基清道 夫”之称 ，在脑 缺血
方面 ，其细胞保 护作用可能是通过抗脂质过 氧化 ，清 除 自由基 及相关
神经 递质起 到细胞保护 作用 。本研 究还表明 ，依达拉 奉并不 影响血
流 、降低细胞 代谢及氧 消耗等机 制使 突触后神 经元处于保 护性 抑制状
加快 其 生长 。国 外于２ 世 纪８ 年代 末批 准上 市 ， 目前 日本和 法 国 已 ０ ０
１． ．２展开剂 ４
氯仿 ：甲醇 ：醋酸 ＝８ ：１ ：２ （ 比） ６ ２ 体积
２实 验方 法 ２ ． １紫外线诱变 取２ ｌ ｍ 单孢 子悬液 于培养 皿 中，置于紫 外灯箱 中 ，在轻 微震荡 下 照射不 同时 间，立 即避光 培养１ ，经稀释后涂布培养 。 ｈ
诺 西 肽 （ ｈ Ｐ ｄ ）是 由 活 跃 链 霉 菌 （ ｔｅ ｔ ｍｙ ｓ ＮＯ ｉ ｅ ｉ ｅ Ｓ Ｓ ｒｐ ｏ ｃ ｅ
ａ ｕｏｓ ｔ ｕ） 产 生 的 一 种 含 硫 多 肽 类 抗 生 素 ， 分 子 式 为 ｃ Ｃ ４ １ ３ ３ ２６ ５ Ｎｌ Ｓ ，属 硫 链 丝菌 素 （ｈｏ ｔ ｐｏ ）类 …。它 在体 内能 Ｈ Ｏｌ ｔｉｓｒ ｔｎ ｅ 有效 抑 制革 兰 氏 阳性 细 菌 的活性 。诺 西肽 目前 主要 作为 饲料 添 加 剂 ，优 点是 不被 畜禽 吸收 、在 体 内无残 留 ，微量加 入饲 料 中就 可以
２ Ｔ 诱 变 ．Ｎ Ｇ ２
将其 列为 法定饲 料添 加剂 。 １ 实验 材料
１ ． １菌种
出发菌 ：诺 西肽产生菌Ｓａｔ ｓｓ（ ． ｕ ｕ 由沈阳药大实验 室提供 ）；鉴 ｃｏ 定菌 ：枯草 芽孢杆菌 （ａｉ ｓｕｔｉ Ｂ ｃｌ ｂ ｌ） ｌ ｓ ｉｓ ｕ
１ ． 品 ２药
态 ，并可通过突触前抑制减少Ｇ ｕ ｌ的释放 。二者存在 动态平衡 。
液凝 固、血小板 聚集、纤维蛋 白溶 解和 出血 时间 ，因此不会增 加出血
风险 。
大量研 究表 明，严重脑缺血 缺氧发作 可导致脑 内谷 氨酸等 兴奋性 氨基 酸 的浓度 异常 升高 ， Ｙ一 丁酸 等抑制 性氨基 酸 的浓度 降低 ， 氨基
取 单孢 子悬液 于无菌试管 中，加入Ｎ Ｇ Ｔ 溶液２ ℃或４ ￣水浴 ，经 ８ ０ Ｃ
稀释后涂布培养 。 ２ ． ３效价测定 取 发酵液 以１： ＶＶ） 比例加 入９％乙醇 ，３ ￣浸 泡半小时 ， １（ ／ ５ ７Ｃ
亚硝基胍 ；９％乙醇 ；糊精 ；酵母粉 ；Ｎ Ｃ ；Ｃ Ｃ ， ５ ａ Ｉ ａ Ｏ等
从 而产生兴奋 性神经毒作 用。细胞膜 上的高亲和 性兴奋性 氨基 酸转运 体 （ Ａ Ｔ ）可将 兴奋性氨基 酸从突触 间隙转运 至细胞 内，在 及时终 Ｅ Ａｓ 止兴奋 性突触 传递 以及维 持细胞外液 兴奋性氨基 酸的正常水 平 中发挥 重要 作用 。本 实验发现大 鼠脑组织 内兴奋性氨基酸 神经递质 的含量于 出血 后 １４ 内开始升高 ，２ｈ 高峰 ，以后逐渐 下降 ，至第 ７ ～ｈ ４达 天基本恢
参考 文献
［】 Ｔ ｎ ｋ Ｗａ ａＮ， ｒ Ｋ，ｔ １ ｒｎｃｃ ｒｂａ ｙ ｏ ｅｆ ｓ ｎ １ ａ ａ ａＫ， ｄ Ｈｏｉ ｅ ． ｏ ｉ ｅｅ ｒｌ ｐ ｐ ｒｕ ｉ ａ Ｃｈ ｈ ｏ ｄｓｕ ｔ ｄｓｒｍｉａｉｅｂ ｈ ｖ ｏ ｎａ ｑ ｉｅ ｅ ｒ ｉｇｒｔ Ｊ． ｉｒｐｓ ｉｃｉ ｎ ｔ ｅ ａ ｉｒｉ ｃ ｕｒｄ ｌａｎｎ ａｓ［］ ｖ Ｊ ｕ ｏｃ ｔｏ ｓ ０ ８８ （／） ６ — ８ ｒｓｉ ｈ ｄ ， ０ ，４ １２ ： ３６ ． Ｎｅ Ｍｅ ２
１ 试剂 ． ４ １． ． １亚硝基胍溶液 （ Ｔ ４ Ｎ Ｇ）
电子天平精 确称取ＮＴ 于 无菌试管 中，加入微量 Ｎ，Ｎ 二 甲基 Ｇ 一 甲酰胺 （ ＭＦ Ｄ ）溶解 ，用 适量磷 酸盐 缓冲液 稀释 至所需 浓度 （ 现用
现配 ）。
提高 禽 畜 的 出肉率 ，并可 加入 鱼饵 中以防 止鱼 类 的坏死 性 肠炎 及
２１ ０ ２年 ４月第 １ ０卷 第 １ ０期
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实验研究 ・ ８ ７
诺西肽 产生菌 的菌种选育
刘 平
（ 丹东市食 品药 品检验所 ，辽宁 丹东 １８ ０ ） １０ ２
【 要】 目的 对 诺 西 肽 产 生 茵 进 行 菌 种 选 育 。 方 法 自然 分 离、物 理 和 化 学诱 变育 种 （ 中 包括 紫 外 线诱 变和 ＮＴ 摘 其 Ｇ诱 变 ） 的 方 法 。
１ － ３仪器
摇床 （５ｒ ｎ ２ ０／ ）；高压灭菌 锅 ；超净 工作 台 ；电子 天平 ；恒温 ｍｉ 水浴 ；紫外灯箱 （ 紫外灯 １Ｗ ，照射距 离４ ｃ ；离心机 。 ５ ０ｍ）
离心取上清液用 生物效价法测定 。
而作为 内源 性兴 奋递 质 的谷氨酸 一 旦增 加 即会打 破这 种平衡 ，导致 神经 细胞损 害。
死亡作用 ，本试验 从脑 出血缺血后７ 时点的动态观察后 发现依达拉 】 个 奉作用在脑 出血缺 血后２ ｈ ４ 达高峰 ，且 １ 周仍具有脑保护作用 。依达拉 ．
谷氨酸 （ ！）是 ｖ 氨基 丁酸 （Ａ Ａ）的前体 ，经谷氨酸脱羧酶 Ｇｕ ＧＢ
催化脱 羧后生成Ｇ Ｂ Ａ Ａ，Ｇ Ｂ 是脑 内最重要 的抑 制性 氨基 酸 （ Ａ） Ａ Ａ Ｉ Ａ 递 质 ，具有 突触 后抑 制作 用 ，可通 过突 触后 膜超 极化 、减 少离 子 内

结果 选 定 了出发 菌株 ；考 察得 到 紫外 线和 ＮＴ 对 出发 茵株 进行 诱 变的最佳 剂量 ；出 发菌株 经 几次诱 变得 到 诱 变 菌株 。结 论 最终 得 到 的 Ｇ
诱 变菌株 其 诺 西肽 的产量 是 出发 菌株 的 ３ 。 倍
【 关键 词 】诺 西肽 ；菌种选 育 ； 高产 菌株 中图分 类号 ：Ｒ ７ ３ 文献标 识 码 ：Ｂ 文章 编号 ：１ ７— １ ４ （Ｏ２ ０ ０ ８— ２ ６ １ ８９ ２ ｌ ）１ — ０ ７ ０