LncRNA HOTTIP在胃癌D2根治术后肿瘤复发、耐药及预后中的作用

LncRNA HOTTIP在胃癌D2根治术后肿瘤复发、耐药及预后中的作用
作者：沈珠花徐永灿乔鹏
来源：《中国现代医生》2022年第13期
[摘要] 目的分析LncRNA HOTTIP在胃癌D2根治术后肿瘤复发、耐药及预后中的作用。

方法随机选取2018年1月至2020年6月在湖州市中心医院行胃癌D2根治术的126例胃癌患者作为研究对象。

结果胃癌组织中LncRNA HOTTIP表达水平明显升高，胃癌组织LncRNA HOTTIP表达水平与TNM分期、淋巴结转移、侵袭深度及术后复发明显相关。

TNM分期、侵袭深度越高并伴有淋巴结转移及术后复发的患者LncRNA HOTTIP越高。

Kaplan-Meier生存曲线分析，LncRNA HOTTIP高表达组患者生存期均明显低于LncRNA HOTTIP低表达组患者。

SGC7901/DDP组细胞LncRNA HOTTIP表达水平明显高于SGC7901组（P
[关键词] LncRNA HOTTIP;胃癌D2根治术;肿瘤复发;耐药;预后
[中图分类号] R735.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2022）13-0042-05
[Abstract] Objective To analyze the role of LncRNA HOTTIP in tumor relapse， drug resistance and prognosis after D2 radical surgery for gastric cancer. Methods A total of 126 patients with gastric cancer who underwent D2 radical surgery for gastric cancer in Huzhou Central Hospital from January 2018 to June 2020 were randomly selected as study subjects. Results The expression level of LncRNA HOTTIP was significantly increased in gastric cancer tissues，which was significantly correlated with tumor node metastasis （TNM） stage，lymph node metastasis，invasion depth and postoperative relapse.The higher the TNM stage and the deeper the invasion depth， the higher the LncRNA HOTTIP expression level in patients with lymph node metastasis and postoperative relapse.The Kaplan-Meier survival analysis showed that the survival period was shorter in patients with high-expression level of LncRNA HOTTIP than that in patients with low-expression level of LncRNA HOTTIP.The expression level of LncRNA HOTTIP in the SGC7901/DDP group was significantly higher than that in the SGC7901 group（P
[Key words] LncRNA HOTTIP; D2 radical surgery for gastric cancer; Tumor relapse; Drug resistance; Prognosis
目前，临床上治疗胃癌主要采用手术联合放化疗的综合治疗方法，其中，顺铂是临床上常用的化疗药物[1]。

但化疗药物耐药性的产生仍是造成术后患者复发的重要原因[2-3]。

研究发
现[4-5]，肿瘤细胞耐药性的发生与机体内异常表达的长链非编码RNA（long non coding RNA，LncRNA）关系密切。

Wu等[6]研究发现，在卵巢癌中高表达的HOXA末端转录本反义RNA（HOXA transcript at the distal tip，HOTTIP）被认为是促进卵巢癌发生、发展及复发的重要因素。

本研究旨在探讨LncRNA HOTTIP对胃癌D2根治术后肿瘤复发、耐药及预后的作用，为临床治疗提供相关依据，现报道如下。

1 资料与方法
1.1 一般资料
随机选取2018年1月至2020年6月在湖州市中心医院行胃癌D2根治术的126例胃癌患者作为研究对象。

收集手术切除的胃癌组织及癌旁正常组织（各126例样本）。

纳入标准：①所有患者均符合胃癌的诊断及治疗标准[7]，且经病理学检查确诊;②无精神疾病史，能够配合;③参与研究前未经放化疗治疗;④经医院医学伦理委员会批准;⑤患者及家属均知情并签订知情同意书。

排除标准：①病历资料不全或中途退出者;②伴有乙肝等感染性疾病患者;③合并其他恶性肿瘤者。

人胃癌细胞系SGC7901（武汉普诺赛生命科技有限公司）。

根据LncRNA HOTTIP对胃癌复发诊断的最佳截断值分为LncRNA HOTTIP高表达组（n=67）与LncRNA HOTTIP低表达组（n=59）。

1.2 主要仪器及试剂
WB-1-15电热恒温水浴箱（上海实贝仪器设备厂）;WMJ-9590光学显微镜（上海豫光仪器有限公司）;TL-988-IV实时定量荧光PCR仪（济南光耀医疗设备有限公司）;SIGMA 3-18K低温高速离心机（华威科创（武汉）科技有限公司）;DW-86W300超低温冰箱（浙江捷盛低温设备有限公司）;逆转录试剂盒（广州东盛生物科技有限公司）;CytoFLEX流式细胞仪（美国贝克曼库尔特有限公司）;胎牛血清（上海恒远生物科技有限公司）;PBS缓冲液（重庆赛诺生物药业股份有限公司）;兔抗人LC3单克隆抗体（上海易汇生物科技有限公司）;兔抗人Beclin1多克隆抗体（上海瑶韵生物科技有限公司）;顺铂（齐鲁制药有限公司，国药准字
H37191358，规格：10 mg/瓶）。

1.3 方法
1.3.1 实时荧光定量PCR法检测胃癌组织及癌旁正常组织中LncRNA HOTTIP表达情况取胃癌组织及癌旁正常组织进行实验，使用核酸蛋白微量测定仪测定提取物RNA水平;使用逆转录试剂盒合成cDNA，多次实验以减小误差。

待反应完成后确认实时PCR扩增曲线与融解曲线，进行PCR定量时制作标准曲线，采用2-△△Ct的方法[其中ΔΔCt=（Ct，目的基因-Ct，管家基因）实验组-（Ct，目的基因-Ct，管家基因）对照组]计算LncRNA HOTTIP的表达水平。

引物序列见表1。

1.3.2 细胞培养构建SGC7901（SGC7901组）顺铂耐药细胞株SGC7901/DDP
（SGC7901/DDP组），培养出能够耐受60 Um/L顺铂的胃癌耐药细胞株SGC7901/DDP，取生长状态良好的SGC7901/DDP细胞，加入胰蛋白酶消化，进行传代培养，取生长状态良好且处于对数生长期的细胞，继续培养。

1.3.3 细胞转染将生长状态良好且处于对数生长期的细胞以10 000个/孔接种至96孔板，在细胞培养箱中培养至细胞密度达75%左右。

将LncRNA HOTTIP干扰质粒及空白质粒转染进SGC7901/DDP细胞内进行培养，取对数生长期细胞，以适当密度接种至6孔板，置于培养箱中进行培养，获得LncRNA HOTTIP低表达组及对照组，每组设置6个复孔。

见图1。

1.3.4 采用CCK-8法测定细胞增殖能力取细胞悬液以10 000个/孔接种至96孔板中进行培养，使用酶标仪测定470 nm处的吸光度值。

每组设置6个复孔。

1.3.5 采用CCK-8法观察LncRNA HOTTIP对胃癌细胞存活的影响观察各组的细胞存活率，每组设置6个复孔。

1.3.6 采用流式细胞仪检测LncRNA HOTTIP对胃癌细胞凋亡的影响计算细胞凋亡率。

每组设置6个复孔。

1.4 观察指标
1.4.1 临床病理资料收集收集胃癌患者的性别、年龄、分化程度（根据WHO病理组织学分类）[8]、TNM分期（Ⅱ、Ⅲ）（国际抗癌联盟/美国癌症联合委员会制定的TNM分期标准）[9]、肿瘤位置（胃体、胃窦、近端、多发）、淋巴结转移（是、否）、肿瘤大小（≤5 cm、>5 cm）、侵袭深度（T1+T2+T3、T4）（以浸润至黏膜或黏膜下层为T1，浸润至肌层或浆膜下层为T2，肿瘤穿透浆膜层为T3，肿瘤直接侵及临近组织或器官为T4）[10]、术后复发（是、否）等基本资料。

1.4.2 LncRNA HOTTIP表达水平检测取患者胃癌组织及癌旁正常组织，采用实时荧光定量PCR法检测患者胃癌組织LncRNA HOTTIP表达水平。

1.4.3 LncRNA HOTTIP表达水平与患者临床病理资料的相关性比较胃癌组织中LncRNA HOTTIP表达水平与患者临床病理资料的相关性。

[Key words] LncRNA HOTTIP; D2 radical surgery for gastric cancer; Tumor relapse; Drug resistance; Prognosis
目前，临床上治疗胃癌主要采用手术联合放化疗的综合治疗方法，其中，顺铂是临床上常用的化疗药物[1]。

但化疗药物耐药性的产生仍是造成术后患者复发的重要原因[2-3]。

研究发现[4-5]，肿瘤细胞耐药性的发生与机体内异常表达的长链非编码RNA（long non coding RNA，LncRNA）关系密切。

Wu等[6]研究发现，在卵巢癌中高表达的HOXA末端转录本反义RNA（HOXA transcript at the distal tip，HOTTIP）被认为是促进卵巢癌发生、发展及复发的重要因素。

本研究旨在探讨LncRNA HOTTIP对胃癌D2根治术后肿瘤复发、耐药及预后的作用，为临床治疗提供相关依据，现报道如下。

1 资料与方法
1.1 一般资料
随机选取2018年1月至2020年6月在湖州市中心医院行胃癌D2根治术的126例胃癌患者作為研究对象。

收集手术切除的胃癌组织及癌旁正常组织（各126例样本）。

纳入标准：①所有患者均符合胃癌的诊断及治疗标准[7]，且经病理学检查确诊;②无精神疾病史，能够配合;③参与研究前未经放化疗治疗;④经医院医学伦理委员会批准;⑤患者及家属均知情并签订知情同意书。

排除标准：①病历资料不全或中途退出者;②伴有乙肝等感染性疾病患者;③合并其他恶性肿瘤者。

人胃癌细胞系SGC7901（武汉普诺赛生命科技有限公司）。

根据LncRNA HOTTIP对胃癌复发诊断的最佳截断值分为LncRNA HOTTIP高表达组（n=67）与LncRNA HOTTIP低表达组（n=59）。

1.2 主要仪器及试剂
WB-1-15电热恒温水浴箱（上海实贝仪器设备厂）;WMJ-9590光学显微镜（上海豫光仪器有限公司）;TL-988-IV实时定量荧光PCR仪（济南光耀医疗设备有限公司）;SIGMA 3-18K低温高速离心机（华威科创（武汉）科技有限公司）;DW-86W300超低温冰箱（浙江捷盛低温设备有限公司）;逆转录试剂盒（广州东盛生物科技有限公司）;CytoFLEX流式细胞仪（美国贝克曼库尔特有限公司）;胎牛血清（上海恒远生物科技有限公司）;PBS缓冲液（重庆赛诺生物药业股份有限公司）;兔抗人LC3单克隆抗体（上海易汇生物科技有限公司）;兔抗人Beclin1多克隆抗体（上海瑶韵生物科技有限公司）;顺铂（齐鲁制药有限公司，国药准字
H37191358，规格：10 mg/瓶）。

1.3 方法
1.3.1 实时荧光定量PCR法检测胃癌组织及癌旁正常组织中LncRNA HOTTIP表达情况取胃癌组织及癌旁正常组织进行实验，使用核酸蛋白微量测定仪测定提取物RNA水平;使用逆转录试剂盒合成cDNA，多次实验以减小误差。

待反应完成后确认实时PCR扩增曲线与融解曲线，进行PCR定量时制作标准曲线，采用2-△△Ct的方法[其中ΔΔCt=（Ct，目的基因-Ct，管家基因）实验组-（Ct，目的基因-Ct，管家基因）对照组]计算LncRNA HOTTIP的表达水平。

引物序列见表1。

1.3.2 细胞培养构建SGC7901（SGC7901组）顺铂耐药细胞株SGC7901/DDP
（SGC7901/DDP组），培养出能够耐受60 Um/L顺铂的胃癌耐药细胞株SGC7901/DDP，取生长状态良好的SGC7901/DDP细胞，加入胰蛋白酶消化，进行传代培养，取生长状态良好且处于对数生长期的细胞，继续培养。

1.3.3 细胞转染将生长状态良好且处于对数生长期的细胞以10 000个/孔接种至96孔板，在细胞培养箱中培养至细胞密度达75%左右。

将LncRNA HOTTIP干扰质粒及空白质粒转染进SGC7901/DDP细胞内进行培养，取对数生长期细胞，以适当密度接种至6孔板，置于培养箱中进行培养，获得LncRNA HOTTIP低表达组及对照组，每组设置6个复孔。

见图1。

1.3.4 采用CCK-8法测定细胞增殖能力取细胞悬液以10 000个/孔接种至96孔板中进行培养，使用酶标仪测定470 nm处的吸光度值。

每组设置6个复孔。

1.3.5 采用CCK-8法观察LncRNA HOTTIP对胃癌细胞存活的影响观察各组的细胞存活率，每组设置6个复孔。

1.3.6 采用流式细胞仪检测LncRNA HOTTIP对胃癌细胞凋亡的影响计算细胞凋亡率。

每组设置6个复孔。

1.4 观察指标
分类）[8]、TNM分期（Ⅱ、Ⅲ）（国际抗癌联盟/美国癌症联合委员会制定的TNM分期标准）[9]、肿瘤位置（胃体、胃窦、近端、多发）、淋巴结转移（是、否）、肿瘤大小（≤5 cm、>5 cm）、侵袭深度（T1+T2+T3、T4）（以浸润至黏膜或黏膜下层为T1，浸润至肌层或浆膜下层为T2，肿瘤穿透浆膜层为T3，肿瘤直接侵及临近组织或器官为T4）[10]、术后复发（是、否）等基本资料。

1.4.2 LncRNA HOTTIP表达水平检测取患者胃癌组织及癌旁正常组织，采用实时荧光定量PCR法检测患者胃癌组织LncRNA HOTTIP表达水平。

1.4.3 LncRNA HOTTIP表达水平与患者临床病理资料的相关性比较胃癌组织中LncRNA HOTTIP表达水平与患者临床病理资料的相关性。

[Key words] LncRNA HOTTIP; D2 radical surgery for gastric cancer; Tumor relapse; Drug resistance; Prognosis
目前，临床上治疗胃癌主要采用手术联合放化疗的综合治疗方法，其中，顺铂是临床上常用的化疗药物[1]。

但化疗药物耐药性的产生仍是造成术后患者复发的重要原因[2-3]。

研究发现[4-5]，肿瘤细胞耐药性的发生与机体内异常表达的长链非编码RNA（long non coding RNA，LncRNA）关系密切。

Wu等[6]研究发现，在卵巢癌中高表达的HOXA末端转录本反义RNA（HOXA transcript at the distal tip，HOTTIP）被认为是促进卵巢癌发生、发展及复发的重要因素。

本研究旨在探讨LncRNA HOTTIP对胃癌D2根治术后肿瘤复发、耐药及预后的作用，为临床治疗提供相关依据，现报道如下。

1 资料与方法
1.1 一般资料
随机选取2018年1月至2020年6月在湖州市中心医院行胃癌D2根治术的126例胃癌患者作为研究对象。

收集手术切除的胃癌组织及癌旁正常组织（各126例样本）。

纳入标准：①所有患者均符合胃癌的诊断及治疗标准[7]，且经病理学检查确诊;②无精神疾病史，能够配合;③参与研究前未经放化疗治疗;④经医院医学伦理委员会批准;⑤患者及家属均知情并签订知情同意书。

排除标准：①病历资料不全或中途退出者;②伴有乙肝等感染性疾病患者;③合并其他恶性肿瘤者。

人胃癌细胞系SGC7901（武汉普诺赛生命科技有限公司）。

根据LncRNA HOTTIP对胃癌复发诊断的最佳截断值分为LncRNA HOTTIP高表达组（n=67）与LncRNA HOTTIP低表达组（n=59）。

1.2 主要仪器及试剂
有限公司）;TL-988-IV实时定量荧光PCR仪（济南光耀医疗设备有限公司）;SIGMA 3-18K低温高速离心机（华威科创（武汉）科技有限公司）;DW-86W300超低温冰箱（浙江捷盛低温设备有限公司）;逆转录试剂盒（广州东盛生物科技有限公司）;CytoFLEX流式细胞仪（美国贝克曼库尔特有限公司）;胎牛血清（上海恒远生物科技有限公司）;PBS缓冲液（重庆赛诺生物药业股份有限公司）;兔抗人LC3单克隆抗体（上海易汇生物科技有限公司）;兔抗人Beclin1多克隆抗体（上海瑶韵生物科技有限公司）;顺铂（齐鲁制药有限公司，國药准字
H37191358，规格：10 mg/瓶）。

1.3 方法
1.3.1 实时荧光定量PCR法检测胃癌组织及癌旁正常组织中LncRNA HOTTIP表达情况取胃癌组织及癌旁正常组织进行实验，使用核酸蛋白微量测定仪测定提取物RNA水平;使用逆转录试剂盒合成cDNA，多次实验以减小误差。

待反应完成后确认实时PCR扩增曲线与融解曲线，进行PCR定量时制作标准曲线，采用2-△△Ct的方法[其中ΔΔCt=（Ct，目的基因-Ct，管家基因）实验组-（Ct，目的基因-Ct，管家基因）对照组]计算LncRNA HOTTIP的表达水平。

引物序列见表1。

1.3.2 细胞培养构建SGC7901（SGC7901组）顺铂耐药细胞株SGC7901/DDP
（SGC7901/DDP组），培养出能够耐受60 Um/L顺铂的胃癌耐药细胞株SGC7901/DDP，取生长状态良好的SGC7901/DDP细胞，加入胰蛋白酶消化，进行传代培养，取生长状态良好且处于对数生长期的细胞，继续培养。

1.3.3 细胞转染将生长状态良好且处于对数生长期的细胞以10 000个/孔接种至96孔板，在细胞培养箱中培养至细胞密度达75%左右。

将LncRNA HOTTIP干扰质粒及空白质粒转染进SGC7901/DDP细胞内进行培养，取对数生长期细胞，以适当密度接种至6孔板，置于培养箱中进行培养，获得LncRNA HOTTIP低表达组及对照组，每组设置6个复孔。

见图1。

1.3.4 采用CCK-8法测定细胞增殖能力取细胞悬液以10 000个/孔接种至96孔板中进行培养，使用酶标仪测定470 nm处的吸光度值。

每组设置6个复孔。

1.3.5 采用CCK-8法观察LncRNA HOTTIP对胃癌细胞存活的影响观察各组的细胞存活率，每组设置6个复孔。

1.3.6 采用流式细胞仪检测LncRNA HOTTIP对胃癌细胞凋亡的影响计算细胞凋亡率。

每组设置6个复孔。

1.4 观察指标
分类）[8]、TNM分期（Ⅱ、Ⅲ）（国际抗癌联盟/美国癌症联合委员会制定的TNM分期标准）[9]、肿瘤位置（胃体、胃窦、近端、多发）、淋巴结转移（是、否）、肿瘤大小（≤5 cm、>5 cm）、侵袭深度（T1+T2+T3、T4）（以浸润至黏膜或黏膜下层为T1，浸润至肌层或浆膜下层为T2，肿瘤穿透浆膜层为T3，肿瘤直接侵及临近组织或器官为T4）[10]、术后复发（是、否）等基本资料。

1.4.2 LncRNA HOTTIP表达水平检测取患者胃癌组织及癌旁正常组织，采用实时荧光定量PCR法检测患者胃癌组织LncRNA HOTTIP表达水平。

1.4.3 LncRNA HOTTIP表达水平与患者临床病理资料的相关性比较胃癌组织中LncRNA HOTTIP表达水平与患者临床病理资料的相关性。

[Key words] LncRNA HOTTIP; D2 radical surgery for gastric cancer; Tumor relapse; Drug resistance; Prognosis
目前，临床上治疗胃癌主要采用手术联合放化疗的综合治疗方法，其中，顺铂是临床上常用的化疗药物[1]。

但化疗药物耐药性的产生仍是造成术后患者复发的重要原因[2-3]。

研究发现[4-5]，肿瘤细胞耐药性的发生与机体内异常表达的长链非编码RNA（long non coding RNA，LncRNA）关系密切。

Wu等[6]研究发现，在卵巢癌中高表达的HOXA末端转录本反义RNA（HOXA transcript at the distal tip，HOTTIP）被认为是促进卵巢癌发生、发展及复发的重要因素。

本研究旨在探讨LncRNA HOTTIP对胃癌D2根治术后肿瘤复发、耐药及预后的作用，为临床治疗提供相关依据，现报道如下。

1 资料与方法
1.1 一般资料
随机选取2018年1月至2020年6月在湖州市中心医院行胃癌D2根治术的126例胃癌患者作为研究对象。

收集手术切除的胃癌组织及癌旁正常组织（各126例样本）。

纳入标准：①所有患者均符合胃癌的诊断及治疗标准[7]，且经病理学检查确诊;②无精神疾病史，能够配合;③参与研究前未经放化疗治疗;④经医院医学伦理委员会批准;⑤患者及家属均知情并签订知情同意书。

排除标准：①病历资料不全或中途退出者;②伴有乙肝等感染性疾病患者;③合并其他恶性肿瘤者。

人胃癌细胞系SGC7901（武汉普诺赛生命科技有限公司）。

根据LncRNA HOTTIP对胃癌复发诊断的最佳截断值分为LncRNA HOTTIP高表达组（n=67）与LncRNA HOTTIP低表达组（n=59）。

1.2 主要仪器及试剂
有限公司）;TL-988-IV实时定量荧光PCR仪（济南光耀医疗设备有限公司）;SIGMA 3-18K低温高速离心机（华威科创（武汉）科技有限公司）;DW-86W300超低温冰箱（浙江捷盛低温设备有限公司）;逆转录试剂盒（广州东盛生物科技有限公司）;CytoFLEX流式细胞仪（美国贝克曼库尔特有限公司）;胎牛血清（上海恒远生物科技有限公司）;PBS缓冲液（重庆赛诺生物药业股份有限公司）;兔抗人LC3单克隆抗体（上海易汇生物科技有限公司）;兔抗人Beclin1多克隆抗体（上海瑶韵生物科技有限公司）;顺铂（齐鲁制药有限公司，国药准字
H37191358，规格：10 mg/瓶）。

1.3 方法
1.3.1 实时荧光定量PCR法检测胃癌组织及癌旁正常组织中LncRNA HOTTIP表达情况取胃癌组织及癌旁正常组织进行实验，使用核酸蛋白微量测定仪测定提取物RNA水平;使用逆转录试剂盒合成cDNA，多次实验以减小误差。

待反应完成后确认实时PCR扩增曲线与融解曲线，进行PCR定量时制作标准曲线，采用2-△△Ct的方法[其中ΔΔCt=（Ct，目的基因-Ct，管家基因）实验组-（Ct，目的基因-Ct，管家基因）对照组]计算LncRNA HOTTIP的表达水平。

引物序列见表1。

1.3.2 细胞培养构建SGC7901（SGC7901组）顺铂耐药细胞株SGC7901/DDP
（SGC7901/DDP组），培养出能够耐受60 Um/L顺铂的胃癌耐药细胞株SGC7901/DDP，取生长状态良好的SGC7901/DDP细胞，加入胰蛋白酶消化，进行传代培养，取生长状态良好且处于对数生长期的细胞，继续培养。

1.3.3 细胞转染将生长状态良好且处于对数生长期的细胞以10 000个/孔接种至96孔板，在细胞培养箱中培养至细胞密度达75%左右。

将LncRNA HOTTIP干扰质粒及空白质粒转染进SGC7901/DDP细胞内进行培养，取对数生长期细胞，以适当密度接种至6孔板，置于培养箱中進行培养，获得LncRNA HOTTIP低表达组及对照组，每组设置6个复孔。

见图1。

1.3.4 采用CCK-8法测定细胞增殖能力取细胞悬液以10 000个/孔接种至96孔板中进行培养，使用酶标仪测定470 nm处的吸光度值。

每组设置6个复孔。

1.3.5 采用CCK-8法观察LncRNA HOTTIP对胃癌细胞存活的影响观察各组的细胞存活率，每组设置6个复孔。

1.3.6 采用流式细胞仪检测LncRNA HOTTIP对胃癌细胞凋亡的影响计算细胞凋亡率。

每组设置6个复孔。

1.4 观察指标
分类）[8]、TNM分期（Ⅱ、Ⅲ）（国际抗癌联盟/美国癌症联合委员会制定的TNM分期标准）[9]、肿瘤位置（胃体、胃窦、近端、多发）、淋巴结转移（是、否）、肿瘤大小（≤5 cm、>5 cm）、侵袭深度（T1+T2+T3、T4）（以浸润至黏膜或黏膜下层为T1，浸润至肌层或浆膜下层为T2，肿瘤穿透浆膜层为T3，肿瘤直接侵及临近组织或器官为T4）[10]、术后复发（是、否）等基本资料。

1.4.2 LncRNA HOTTIP表达水平检测取患者胃癌组织及癌旁正常组织，采用实时荧光定量PCR法检测患者胃癌组织LncRNA HOTTIP表达水平。

1.4.3 LncRNA HOTTIP表达水平与患者临床病理资料的相关性比较胃癌组织中LncRNA HOTTIP表达水平与患者临床病理资料的相关性。