用逆转录病毒载体表达乙型肝炎病毒表面抗原

用逆转录病毒载体表达乙型肝炎病毒表面抗原
杨毅力;赵小侠;龚春梅;侯云德
【期刊名称】《病毒学报》
【年(卷),期】1992(8)3
【摘要】将含有乙型肝炎病毒(HBV)Pre-S及S基因开放读码框架的DNA片段克隆到逆转录病毒表达载体Pzip-neo SV(X)的5′-端长末端重复序列(LTR)下游BamH Ⅰ位点,构建成重组质粒Pzip-HBS。

用磷酸钙沉淀技术将重组质粒转染到辅助包装细胞ψ-2中,经G418筛选,2周后获得的抗性细胞克隆能有效地表达HBsAg。

5×10~6细胞培养48小时之后,收集上清,用放射免疫方法测得HBsAg 产量达6283cpm,P/N值为32.6。

Western blot证实,在分子量约23kD处有一条与乙型肝炎病毒表面抗体相结合的特异性蛋白带。

Southern杂交显示,在细胞染色体上整合有HBsAg基因。

电镜观察可见上清液中的HBsAg和重组的逆转录病毒颗粒。

【总页数】5页(P223-227)
【关键词】逆转录病毒;载体;乙型肝炎病毒;抗原
【作者】杨毅力;赵小侠;龚春梅;侯云德
【作者单位】中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室;中国医学科学院医学生物学研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R394.8
【相关文献】
1.乙型肝炎病毒表面抗原M蛋白真核表达细胞株的建立及其表达产物的检测 [J], 何芳;秦山;赵连三;刘丽
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