【doc】扫描电镜观察骨形成蛋白与生物活性玻璃陶瓷复合材料...

扫描电镜观察骨形成蛋白与生物活性玻璃
陶瓷复合材料...
38现代口腔医学杂志1992年第6卷第l期
..
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扫!描电镜观察骨形成蛋白与生物活性玻璃陶瓷复合
●
材料种植后的组织学反应
∽,第四军医大学口腔医学院7l0032
'修复科
.
至大一堑周敬行王忠义7;.f'H_-I_''～●,.
'组织病理科杨连}7,/金岩
,——一
.提耍本研究采用扫描电镜观察了骨形成蛋白(BMP)与生物活性玻璃陶瓷(B. GC)复合材料
在狗牙槽中种植后2周到6个月的组织学反应,现BGc可作为BMP的载体,复合材料有良好的骨诱
导性,复合物与诱导骨可形成完整的骨性结合.
关键词登堡至墨笙旦生物活性玻璃陶瓷塑陶瓷.
-r
羟基磷灰石(HA)类科i植材料已用于临
床修复骨缺损.这类材料有良好的生物'相容
性,较高的机械强度和稳定的理化性能.但
是,它不能诱导骨形成[¨,它与受植区骨床
所形成的骨性结食缓慢而不完整;.
骨形成蛋白(母MP)是从脱矿骨基质中
提取的具有骨诱导活性的物质.将它植入机体的某些部位后能诱导骨组织形成[].
本研究把I~IHA为主要成份的生物活性玻
璃陶瓷(BGC)与BMP复合植入骨缺损处,
用扫描电子显微镜(SEM)观察不同植入期
的组织学反应..,
1材料和方法.
1.1BMP与BGC复合材料BGC微孔颗粒型,直径为0.5^v2mm,华西医科大学提供.
本院组织病理科提供BMP,根据要求复合两
种材料.复合物颗粒象受潮的糖粒样粘在一起.
1.2.实验动物1^v2岁健康杂种狗4只,体
重10,,一15kg,两性兼有.
1.3手术方法?常规麻醉,消毒.在双侧下颌
前磨牙区作梯形切口,翻瓣,形成长宽深约为20×7×5mm的人为骨缺损区.植入复合材料,缝合切口.
术后每天肌肉注驸J人火霉素8万单位,持
续3天.软瓮J周,7天后拆线.
1.4标本制备4只动物分别于术2周,1
个月,2个月和G个月处死,取下颌骨,置I
醛中固定IO天.分切种植区标本块,将标本块置液氮中冷冻后劈开,形成自然断裂面.用缓
冲液冲洗,2%钺酸处理I.5小时,再用50%^v 1oo%的系列乙腈逐级脱水20分钟,置镀膜仪中低真空干燥,喷金.用日本产的日立牌扫描
电子显微镜观察.
2结果
种植后两剧,复合物颗粒表面有一薄层诱
导骨出现,复合物颗粒内部微孔系统中充满了不同程度矿化的纤维组织(图I).一个月
后,复合物颗粒内部的纤维矿化为类骨质.包绕复台物颗粒的诱导骨增厚,近复合物颗粒的诱导骨较为成熟,骨细胞少.在诱导骨的边缘区域,有成群的未分化间充质细胞分化为造骨细胞,'新生的造骨细胞密集地排列于诱导骨周围,部分造骨细胞埋人迅速形成的骨基质中而成为骨细胞(图2,5).部分诱导骨与从牙
槽嵴骨缺损边缘长出的新骨相融合.,
2个月后,复合物颗粒内部微孔系统中充满
了骨组织.复合物颗粒与诱导骨之间有类骨质分隔(图l3).半年后,复合物颗粒与诱导骨之间已不存在任何'分辨的其它结构【图4).诱导骨与从牙槽嵴骨缺损边缘长出的新骨广泛融合, 并与复合物颗粒一起充满骨缺损区,仅留下少遗小":纤维结缔组织区域散在于骨块之间.
3讨论
3.1关于BMP与BGC复合物的诱导性
Urist(1965)报告骨诱导物质--BMP保
留在盐酸脱钙的胶原骨基质中.BMP已被分离出来,其分子量约为20~v30KDa,是一种
糖蛋白,完全脱糖基后分子量约为I2KDa,但是,完全脱糖基,高度纯化的BMP活性大为
降低t'3¨].BMP的成骨机理是诱导未分化
的间充质细胞分化为软骨母细胞和骨母细胞
进而形成新骨.实验发现,BMP与转移生
长因子结合能诱导异位骨发生….并非所有
物质都可作BMP的载体,有些物质可抑制BMP 活性[5].本研究选广泛使用的BGC作BMP的载体,期望通过BMP来改善BGC的一些缺陷, 例如BGC无诱导活性,与周围骨整合缓慢,不
完全等.研究发现,BMP与BGC复合物种植
后两周其边缘就出现诱导骨.一个月后,有较
厚的诱导骨包裹着复合物颗粒,此种诱导过程
十分活跃,可见成群的未分化问充质细胞分化
为造骨细胞.这种现象说明,BMP与BGC复
合物有良好的骨诱导性,BGC可作为BM.p的
载体.
诱导骨的特点是包绕复合物颗粒向四周生
长在复合物植入后的早期,诱导骨与从牙槽
嵴骨缺损边缘生长的新骨有明显的界限,有厚
层纤维结缔组织把复合物颗粒及其诱导骨与从牙槽骨生长的新骨分开,半年后两种来源的新
骨才广泛融合.,
3.2关于BMP与BGC复台物和甩围组织的界面,.
有关BGC与围组织界面的报告结果不
一
,包括骨性融畲,类骨质相连,.纤维组织包
绕和几种成份同时存在的情况."'.].作者
发现,BGC~p植后与周围组织的界面主要是
纤维性的,骨性融合区域少而且形成速度缓
慢[.].
BMP与BGC复合物,其表面及BGC内部
微孔中存在着具有生物诱导活牲的有机物质, 植入骨缺损区后能诱导骨形成.单纯种植BGC ,在'缺边缘有新骨向种植区缓慢生长,
逐渐与BGC分表面十u融合,丽复合物种植后,种植区的新骨形成是双向性的,一方面骨
◆
39
缺损边缘的牙槽骨向种植区缓慢生长,另一方面,复合物诱导的新骨包绕整个复合物颗粒的表面向四周生长.故界面骨整合过程快而且完整.SEM观察发现,复合物种植后二周,其
表面就出现诱导骨,半年内在复合物颗粒与其诱导骨之间已见不到其它结构,而形成了完整的骨性结合.
3.3关于BMP对BGC的赋形作用
有人认为,用HA颗粒重建牙槽嵴时,主
要面临两个问题:1,HA颗粒象砂子,难塑
形,术后不易维持在原位上..2,骨膜不可拉
伸,如果操作中撕破骨膜,可造成HA颗粒进
入粘膜下.对此,可用注射器置放材料来解
决.对于前者,常用HA颗粒与骨胶原,纤维
蛋白胶,巴黎糊剂,静脉血等复合的方法来解
决c.'¨.
_
本研究发现BMP有一定的粘性.它与BGC
复合后,可将BGC颗粒粘成较松的大小不等的块状,便于放置,便于塑形.-一?
4结论
BG可作为BMP韵载体.两者复合
复合物具有良好的骨诱导活性.种植后半年内复合物颗粒就可以和其诱导骨形成完整的骨性结合.BMP对BGc有一定的赋形作用.
(本文图鬼西)
参考文献
I.StanfordJW.Bone-inducingmaterialSl theirplaceindentistry.IntDentJ-1989,
37I162..
2.UristMR.BonFormationbyautoinduction Science1965,159l89
3.
3.杨连甲?,等.骨形成蛋白(BMP)的实验研究～BMP提取及生物话性检查.实用口腔医学杂考1987j3l78.'
4.SeyedSMeta1.0steoinductn.Are- portonthediscoveryandresearchofunique growthfactorsmediatingbohedevelopment.
+
OralSurgOralMedOralpathol1989,∞t
527.
5.GlassDA,eta1.Histologicevaluationof
bone{nductireproteins'complexed1rl, corallinehydroxylapatieinanextraskele-
talsite0ftherat.JPeriodo1"1tol1989I80l
121..一
,
'
.
'
'
.
(下转49页)
现代口腔医学杂志1992年第g卷第!期?49?
升支部并行经过下颌体,其末端分别开口于各自的颏孔.继而Nortie等人c.]观察分析T36t?张下颌骨全
景X线片,发现33例(0.9%)下颌管存在分叉,他
称之为第二下颌孔或第二下颌管.从解剖学角度看,许多学者认为下颌孔或下颌管的变异,就意味着下齿槽
神经的变异.Grover等c?】进一步观察了5,000例17—28岁成人下颌骨全景X线片,共发现4例(0.08%)为
下齿槽神经分叉.Lang1ait$~也发现约0.033%的人
下颌孔或下颌管为双孔双管其中含有神经血管束.
我们观察和测量了318侧下颔孔和颏孔.其副下颌孔
和副顿孔共18侧,占5.6%,其发生率高于Nortie和Grover.的报道,分析其原因,我们认为是观察的手
段不一样,一是某些短小的副孔或副管因X线片拍摄的角度或重叠不易在全景片上显示出来,二是直视解
剖观察可以发现某些更为隐蔽的副孔或副管,三是双
下颌管或双下齿槽神经的发生率确实少于副下颌孔, 管和副颏孔.我们在观察临床下齿槽神经阻滞病例
时,亦发现有6%左右的患者在既无局部炎症,又无
精神紧张等因素的存在而发现镇痛不全的现象,部分
病例在更换注射点后,其麻醉效果明显改善,由此可
以推断在排除注射方法误差因素外确实有下颌管解剖变异的存在.Gustainist6】等认为,在确定有双下
齿槽神经变异时,应改变其注射点是获得良好麻醉效
果的有效途径.总之,副下颌孔,副下颌管和副颏
孔的发生率不是一种罕见现象,它不但是下齿槽神经
阻滞麻醉不全的解剖学依据,也是给病人作好解释工
作的理论依据,更是改变麻醉方法的参考依据.
参考文献
1.朱友家.局麻拔牙镇痛不全113铡的原因分析及其处
理方法.口腔医学纵横1987~3l38'
2.PattersonJE,eta1.Bifidinferioralveoler
cana1.OralSurg1973~6l287.
3.NortieCJ,eta1.V ariatio11inthenortonl
8Ⅱ8t0mmyoftheinferiordental(mandibular) callcallArefrospectirestudyofpanoramic
radiographsfrom3612routinedentalpatio-
1its.BrJ0ra1Surg1978~15l55.
4.GroverPS,eta1.Bifidmandibularnerve
asapossiblecauseofi11adequateanesthesia
inthema11dible.JOralMaxillofacSurg1983,
41l177.
llglaiRP,Bifidmandibularcanalsinpatio—
ramieradiographs.JADA1985~10Olg2?.
6.GustsillisJF,et81.Analt~rllatiremethod
mandibularnerveblock.AmDentASSOC1981l
,
103l33.
靛净}辩秘{截睁}辩耪}{丢碍韶弓帮告格;翘{静}÷露静}寺.导{.{}.嘻格}静}}舛{{睁括{{辩鲁净}辩詈斟唔}.÷碍{{垮{{.{÷.{净}瓣柏}乎}寺舛静{拇}
(接32页)
的浅面潜行分离,膈神经的损伤是可以避免
的.
参考文献
1.HiralladalliLH.Themanagementofcervi-
calmetstasai11theheadandneckCaricers.
JLaryng1971,85l1097..
2.Co111eyJ.Radica111edkdissection,JLary-
11g1975~85l'1344.
3.RaM11SRE,eta1.ResettiO11forora】c8r—cillomma.A111JSurg1957,130l178.
4.李树玲,等.根治性颈都淋巴结清除术l25例的疗效总结.天津医药杂右肿瘤学附刊1965,3l124.
5.Y arillgto11JCT,eta1.Ma11agemmelltofehy-
1OU$fistulas.JLaryng1975,85l835.
6.张永福.口腔颈面部恶性肿瘤手术治疗失败因素的探讨.华西口腔医学杂志1984,2l1bO.
7.Y oelJ,et,a1.The$chobillgeri11cisiOⅡAm
JSurg1964~108l526.
8.开茂胃,等.舌癌综合治疗的疗效分析一一兼论影响疗效的有关因素.IZl腔医学l99Il2.I21.
(接39页)
6.扬小东,等.锫一羟基磷灰石种植体一骨界面结合的研究.羟基礴灰石人工骨材料基础和临床应用研究论文汇编.华西医科大学l985,51.'
7.陈安玉,等.人工牙种植的研究一I错灰石膏瓷
.
的礴稍及初步应用.华西1:1腔医学杂右198614l 44.
8.BlockMS,eta1.Mandibularaugmentation indogswithhydroxy18p8titecombined withdemineralizedbone.JOralMaxillofae
Snrg1987~45l414.
9.汪大林,等.种植BGC和BGC-BMP复合物的动
物实验对比研究.全国首届1:1腔修复学组学术会议论文汇编1989,130.
1O.WittkampfARM.Fibringlueascement
forHA--granules.JGrallio-Max-FacSurg
1989I17l179.
11.KentJN,eta1.A1veolarridgeaugmentation
using11011resorbablehydroxylapa!liewith
orwithoetautogenouscallce11o11sbohe.J
Ora1Maxl11of马cSlIIrg1983,41l629.
扫描电镜观察骨形成蟹t3与生物活性玻璃陶瓷正文见..页
复合材料种植后的组织学反应
图I复合物种植后两周,表面有
薄层诱导骨出现
图4半年后,复台物颗粒与新骨之
间不存在可分辨的其它结构
本期责任编辑韩忘蜂许卓文
图2复合物种植后一个月,成群的未分图3复台物种植后二个月,它与新骨之化同冗质细胞分化为造骨细胞间有类骨质分隔
图5复合物种植后一个月,其内部
微孔中充满类骨质
图5经Nd—Y AG激光照射后24
天,上皮完全覆盖牯膜病损
现代口腔医学条奄
XIANDAIKOUQIANGYIXUEZAZHI
loumalofModemStomatology
(季刊)1987年创刊
1992年第6卷第1期
出版日期:每季中月19日
主办
中华医学会河北,北京,天津,内蒙古,山西五分会暨北京
医科大学口腔医学院,北京口腔医院,河北医学院口腔
系,呼和浩特市口腔医院,邯郸市口腔医院
编辑.
现代口腔医学杂志编委会
出版
现代口腔医学杂志社
河北省石家庄市长安西路5号050017
发行
总发行处:石家庄市邮局
订购处:全国各地邮局
印刷
河北医学院印刷厂
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