硅胶层析柱方法

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硅胶层析柱方法
说实话硅胶层析柱这事儿,我一开始也是瞎摸索。

我就知道硅胶层析柱是用来分离混合物的,可具体怎么做,真是一头雾水。

我开始的时候,就知道要装柱。

这装柱啊,就像是盖房子打地基,基础打不好,后面全白搭。

我当时把硅胶一股脑地就往柱子里倒,也没太注意均匀不均匀的事儿。

结果呢,等我开始上样分离的时候,根本就分不好,这就是个教训。

后来我就学到了,装柱的时候得讲究。

硅胶得慢慢加进去,一边加还得一边用东西轻轻敲打柱子,就像你装修房子时小心翼翼地砌墙一样,让硅胶均匀地铺在柱子里,不能有断层啥的。

我试过用玻璃棒敲,效果还不错。

可千万不能敲太狠了,不然硅胶都被震得太实了,样品在柱子里走得特别慢,也不利于分离。

说完装柱,再说上样。

上样的浓度我就折腾了好久。

我一开始上样浓度特别高,想着这样是不是分离得快些。

结果呢,样品在柱子里都黏糊糊的,走得歪歪扭扭的,一点都不整齐。

就好比一群人排队走,如果前面人堆得太密集,后面人就没法好好走了,全乱套了。

后来我把样品的浓度调整合适了,分离效果才好起来。

还有那个洗脱剂,我老是搞不定流速。

流速太快吧,样品可能就分不
开,都一下子冲出来了。

流速太慢呢,又浪费时间。

我也不知道到底多少算合适。

不过据我的经验,刚开始洗脱的时候,可以先慢一点,看看样品的分离情况,如果分离得还不错,再稍微加快一点速度试试。

我都是用那种滴液漏斗慢慢控制流速的,虽然不是特别精准,但总比一开始一股脑让它流要强多了。

收集洗脱液的时候我也闹过笑话。

开始的时候,我不管三七二十一,只要流出来就收,也没记清楚哪个时间段出来的可能是什么样的成分。

后来我就学聪明了,我按照流速大概估算一下时间,然后分成好几个小瓶子收集,并且做好标记。

这样最后分析成分的时候就方便多了。

我这硅胶层析柱的操作啊,也还在不断摸索当中,这些都是我的一些尝试过程和经验教训,希望能给你点帮助。

像我做的时候还得特别注意温度,不同温度对分离效果是有影响的,只是这个影响到底有多大,我还不是特别确定,但总还是要尽量保持实验环境温度相对稳定为好。

还有硅胶的质量,我也不敢保证哪种就一定好,反正我试过不同的品牌,在一些细微的分离效果上还是有些差别的。

这些就是我所知道的关于硅胶层析柱方法的东西啦。

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