下调生长阻滞和DNA损伤诱导蛋白45β表达对PC9肺腺癌细胞的影响

下调生长阻滞和DNA损伤诱导蛋白45β表达对PC9肺腺癌
细胞的影响
佚名
【期刊名称】《中南大学学报（医学版）》
【年(卷),期】2018(43)11
【摘要】目的:探讨下调生长阻滞和DNA损伤诱导蛋白45β(growth arrest and DNA damage inducible protein 45β,GADD45β)表达对PC9肺腺癌细胞及吉非替尼敏感性的影响.方法:设计并合成GADD45β基因小干扰RNA(GADD45β-small interfering RNA,GADD45β-siRNA)序列,通过慢病毒介导将GADD45β-siRN转入PC9肺腺癌细胞中,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和Western印迹检测转染前后PC9肺腺癌细胞GADD45β的mRN及蛋白水平,采用膜联蛋白V(annexin V)-别藻蓝蛋白(allophycocyanin,APC)双染流式细胞法检测转染后细胞凋亡水平;通过流式细胞术检测转染后细胞内DNA 含量,计算转染后细胞各周期时相百分率,分析转染对细胞生长周期的影响;通过计数克隆形成数检测RNA干扰对细胞成瘤能力的影响;采用MTT法检测PC9肺腺癌细胞的吉非替尼半数抑制浓度IC50.结果:筛选出5'-AAATCCACTTCACG CTCAT-
3‘为GADD45β基因RN干扰的有效序列.转染GADD45β-siRNA 48 h后,qRT-PCR和Western印迹结果显示PC9肺腺癌细胞GADD45β的mRNA和蛋白表达水平明显下调(均P＜0.05),细胞凋亡率明显增加(P＜0.05),且成瘤克隆数明显减少(P＜0.05);PC9肺腺癌细胞位于S期及G2/M期细胞增多(P＜0.05),吉非替尼的
IC50明显下降(p＜0.05).结论:PC9肺腺癌细胞转染GADD45β-siRNA后,能成功下调GADD45β基因的mRNA和蛋白表达;下调GADD45β表达可降低PC9肺腺
癌细胞的克隆形成能力,促进细胞凋亡;下调GADD45β表达可明显提高PC9肺腺癌细胞对吉非替尼的敏感性.
【总页数】7页(P1209-1215)
【正文语种】中文
【相关文献】
1.生长受阻的DNA损伤诱导性基因45β表达的下调与肝癌的发生有关 [J], 李冰
2.冬凌草甲素诱导人胰腺癌SW1900细胞DNA损伤及对H2AX蛋白表达的影响[J], 罗兰;侯杰;邱冰;曹惠君;魏凤香
3.生长阻滞和DNA损伤诱导基因153在慢性缺氧诱导心肌细胞凋亡中的表达 [J], 董建军;李小鹰;鲁晓春;刘秀华;张振英
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5.生长阻滞和DNA损伤诱导蛋白45α在心血管疾病中的研究进展 [J], 叶雨佳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。