样品采集与送检注意事项猪

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样品采集与送检注意事项(猪)
一、样品采集
(一)病原检测包括传统的细菌与病毒分离培养鉴定,现代分子生物学(PCR)鉴定等检测方法。

1、采样时机:可选择在发病的初期(可活体送检、也可剖检后送内脏器官),快要死亡(已无治疗价值),刚刚死亡(夏季最好不超过2小时,冬季不超过6 小时)。

2、采样数量:病料 3~5份、活猪2~3头。

3、病料种类:采样时要无菌操作,解剖刀剪等采集工具要充分消毒(消毒药液浸泡、火焰烧灼等),剖解后采取病变典型组织送检,以淋巴结、扁桃体、肺脏、肾脾、肝为主。

4、做好标记:不同的个体,不同组织,分开存放(一次性自封袋或干净的食品袋)并用不易掉色的记号笔标记清楚(编号、日龄、场名、送检人、联系方式等),按要求填写采样记录单与病料一同送至实验室。

(二)抗体检测采用进口ELISA试剂盒检测
1、采血时机与次数:尽量在喂食之前采集,或进食2小时后进行;对于经产母猪和商品猪评估疫苗免疫水平的,可在免疫后14~20天进行;对于后备猪可在转群配种前所有疫苗接种完后进行;对于猪病流行状况调查(猪群健康状况摸底调查)可随机采样。

建议:有条件的商品场,猪瘟、蓝耳病和伪狂犬病每年检测2~3次。

引种或种猪场,猪瘟、蓝耳病和伪狂犬病每年检测3~4次。

2、采血数量:规模化猪场样品采集数量少,不足以代表整个场的抗体水平;样品采集数量多,不经济。

根据统计学一般规律,采样量20头时可信度达98%,30头时可信度达99%,40头时可信度达99.5%,50头时可信度达99.9%。

因此
建议每个阶段分别至少采样30头。

考虑到种公猪的特殊重要性,最好每头公猪都要采样。

以存栏母猪的量为例列举了各个阶段的采样数量,仅供参考。

表1 按母猪存栏量分阶段采样
存栏母猪(头)
采样数量(份)
母猪(分胎次)仔猪保育猪育肥猪
100 10 12 12 12
500 12 15 15 15
1000 15 18 18 18
3000 20 25 25 25
3、采血方法:用兽用一次性采血器(或一次性注射器),种猪可采用耳缘静脉,产房仔猪和保育猪可采用前腔静脉采血。

每份血样采集3ml以上,针管内一定要有1ml 以上的空隙,同时将手柄一拉到底并旋转退去手柄,然后将采血器倾斜45 度,37℃静置1~2小时,2~8℃冷藏2小时以上,使血清自然析出后送检。

如有条件,也可以用离心机离出血清,离心条件为:1500~2000转/分,离心10~15分钟。

严禁采完后马上加冰块运输。

4、做好标记:采集的血样标记要清楚,编号要有规律,样品的排列要有顺序,以便于检测、统计结果。

按要求填写采样记录单(有详细的说明,包括猪的日龄、胎龄、种类、最后免疫时间和疫苗来源等数据)与血样一同送至实验室。

二、样品送检
1、病料组织:一般采用冷冻运输(细菌分离除外,越新鲜越好),装至泡沫箱或其它密闭容器,固定好后加足够冰袋运送(直接送检或邮寄)至实验室。

2、血样样品:一般采用冷藏运输(只做病原检测需冷冻),分捆扎紧固定。

有条件的话能分离出血清最好,如是全血,夏天加冰袋,冬天可直接运送,途中尽量避免摇晃,以免溶血。

3、运输时间:低温运输时间不能太长,一般要求24小时内运到实验室,越快越好,一般不超过48 小时。

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