牛樟芝多糖对HepG2细胞酒精性氧化损伤的保护作用
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樟 菰 、樟 窟 内 菰 （戴 玉 成 和 李 玉 2011; Wuet a/. 2 0 1 2 ) , 生 长 在 台 湾 本 土 特 有 树 种 牛 樟 树 腐 朽 心 材 内 壁 上 的 一 种 真 菌 （ Geethangili & Tzeng 20 1 1 ) 。 牛 樟 芝 在 台 湾 民 间 用 于 治 疗 肝
是 防 治 酒 精 性 肝 病 的 重 要 手 段 （ Yi W a/.
2020)。
牛樟芝 raA/vcr/io/u/igt/5 camphoratus (M. Zang & C.H.Su) Sheng H.Wu ef cr/•又称为牛樟
芝 、樟 生 薄 孔 菌 、牛 樟 菇 、红 樟 芝 、樟 菇 、
[引用本文】杨彬君，冯彩玲，吴岩斌，易骏，吴锦忠，吴建国， 20 2 1 .牛樟芝多糖对HePG 2 细胞酒精性氧化损伤的保护作 用.菌物学报， 40(6): 1549-1560 Yang BJ, Feng CL, Wu YB, Yi J, Wu JZ, Wu JG, 2021. Protective effect of yo/iva/io/ungt/s camphoratt/s polysaccharides on alcoho卜induced oxidative injury in HepG2 cells. Mycosystema, 40(6): 1549-1560
病 具 有 很 长 的 历 史 ，现代研究表明牛樟芝含
有 多 糖 、三 萜 、 留体、玻珀酸及马来酸衍生 物 以 及 泛 醌 衍 生 物 等 多 种 活 性 物 质 ，具有解 酒 保 肝 、抗 氧 化 、 免 疫 调 节 、抗 炎 、抗肿瘤
等 作 用 （ Hu e ta /. 2014; Wu eta/. 2019)。本
文 探 讨 了 牛 樟 芝 不 同 提 取 物 包 括 醇 提 物 、水 提 物 、醇提后水提物和多糖对酒精诱导的
HepG2 细 胞 损 伤 的 保 护 作 用 ， 旨 在 阐 明 牛 樟
芝 解 酒 保 肝 的 活 性 部 位 ，为 其 开 发 利 用 提 供 实验依据。
1 材料与方法
1.1实验材料
1 .1 .1 仪 器 ： MS105D U 万 分 之 一 天 平 ，瑞士 METTLER TOLEDO公 司 ；SFG-02B 电热恒温鼓
Research paper
Protective effect of Taiw anofungus cam phoratus polysaccharides on alcoho卜induced oxidative injury in HepG2 cells
YANG Bin-Jun10 FENG Cai-Ling10 WU Yan-Bin1 Yl Jun2 WU Jin-Zhong1 WU Jian-Guo10
Abstract: The protective effect of different doses (100, 200 and 400|ig /mL) of water extract after extraction by ethanol (WEE) and crude polysaccharide (CP)from Toiwonofungus comphorotus on alcohol-induced HepG2 cell injury was investigated. Compared with the model experimental group, various doses of CP and 200 and 400^ig/mL of WEE could significantly improve cellular viability. lOO^g/mL CP and WEE could significantly reduce the alanine aminotransferase (ALT) level in culture medium. 200 and 400(ig/mL of CP and WEE could notably reduce ALT and aspartate aminotransferase (AST) level in culture medium, and simultaneously improve the intracellular catalase (CAT) activity. 200 and 400^g/mL WEE and 400|ig/mL CP could remarkably increase the intracellular superoxide dismutase (SOD) activity.Treatment with various doses of WEE and 400|ig/mL of CP conspicuously reduced the intracellular reactive oxygen species (ROS) level.CP was consisted of 5 monosaccharides, including mannose, rhamnose, glucose, galactose and fucose with the molar ratio of 1:0.1622:6.651:2.646:0.3929. Results proved that WEE and CP could increase the cellular response to oxidative stress and reduce the intracellular ROS level to protect HepG2 cell from oxidative injury induced by alcohol prominently, suggesting that CP was one of the main active ingredients responsible for drunkenness-alleviating and liver-protecting effects. Key words: Taiwanofungus comphorotus, polysaccharide, HepG2 cells, alcoholic liver injury, reactive oxygen species, protective effect
Research paper
22 June 2021, 40(6): 1549-1560 Mycosystema ISSN1672-6472 CN11-5180/Q
研究论文 DOI: 10.13346/j.mycosystema.200380
Hale Waihona Puke 牛樟芝多糖对HepG2 细胞酒精性氧化损伤的保护 作用
杨彬君冯彩玲吴岩斌1
©School of Pharmacy, Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou, Fujian 350122, China ©Department of Science, Fujian Institute of Education, Fuzhou, Fujian 350001, China
基 金项目： 国 家 自 然 科 学 基 金 （8 1 7 0 0 5 2 4 );福 建 省 自 然 科 学 基 金 （2019j〇1341) Supported by the National Natural Science Foundation of China (81700524), and Natural Science Foundation of Fujian Province (2019J01341). o Corresponding author. E-mail: wjgl419@ ORCID: WU JIAN-Guo (0000-0001-6809-7169) o Contributed equally to this work. Received: 2020-12-04, accepted: 2020-12-29
肝 脏 是 酒 精 的 主 要 代 谢 器 官 ，长期酗酒 会 导 致 肝 功 能 紊 乱 等 酒 精 性 肝 病 ，进而演变 为酒精性肝炎、肝纤 维 化 ，最后甚至形成肝
硬 化 和 肝 癌 （ Dugum & Mccullough 2〇15; Wang eta /. 2018)。近 年 来 ，由 于 生 活 水 平 的
Copyright © 2021 Institute of Microbiology, CAS. All rights reserved. |jwxt@ Tel: +86-10-64807521
菌 物 学 报 1549
杨 彬 君 等 /牛 樟 芝 多 糖 对 HePG2细 胞 酒 精 性 氧 化 损 伤 的 保 护 作 用
起 到 重 要 作 用 （ Chen e ta /. 2020)。 目前临床
上酒精性肝损伤仍无令人满意的有效药物
(Anstee et a/. 2011)。寻 找 一 种 能 有 效 提 高
肝脏抗氧化应激能力并缓解肝损伤的药物，
1 5 5 0 菌物学报
研究论文
22 June 2021, 40(6): 1549-1560 Mycosystema ISSN1672-6472 CN11-5180/Q
O 福建中医药大学药学院福建福州350122
© 福建教育学院理科部福建福州350001
易骏2
吴锦忠1
吴建国M
摘 要 ：研 究 了 不 同 剂 量 （1 0 0 、 2 0 0 和 40〇n g / m L ) 的 牛 樟 芝 粗 多 糖 （C P ) 和 醇 提 物 后 的 水 提 物 （W E E ) 对 酒 精 诱 导 的 H e p G 2 细胞氧化损伤的保护作用。研宂结果表明：与模型组比较，各 剂 量 组 的 C P 和 2 0 0 、 40 〇n g / m L 的 W E E 均 能 极 显 著 提 高 H e p G 2 细胞的细胞活力。10〇n g / m L 的 C P 和 W E E 均能极显著降低细胞 培 养 液 的 A L T 水平；2 0 0 和 4 0 0 (ig / m L 的 C P 和 W E E 均能显著降低细胞培养液的A LT、 A S T 水 平 ，同时提 高 胞 内 的 C A T 活 力 ；2 0 0 和 4 0 〇n g / m L 的 W E E 及 4 0 0 p ig / m L C P 能 明 显 提 高 胞 内 的 S O D 活 力 。此 外 ，W EE 各 剂 量 组 和 40 〇ng/m L C P 中 的 胞 内 R O S 水平显著下降。C P 中含有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半 乳 糖 、岩 藻 糖 5 种 单 糖 ，摩 尔 比 为 1:0 .1622:6.651:2.646:0.3929。 W E E 和 C P 能提高细胞的抗氧化应激能力，降低 胞 内 R 0 S , 对 酒 精 诱 导 的 H e p G 2 细胞氧化损伤起到明显的保护作用，提示多糖是牛樟芝解酒保肝的重要 活性成分之一。 关 键 词 ： 牛 樟 芝 ，多 糖 ， H ePG 2 细 胞 ，酒精性肝损伤，活性氧，保护作用
不 断 提 高 ，酒 精 性 肝 病 逐 年 递 增 ， 己成为继 病毒性肝炎之后肝损伤的第二大诱因
( Nimantha & Day 2007)。酒 精 性 肝 病 的 病 理
学 机 制 目 前 尚 不 十 分 明 确 ，现认为主要与氧 化 应 激 、细 胞 因 子 、脂 质 过 氧 化 、线粒体功 能 障 碍 和 内 质 网 应 激 等 有 关 （丁 晓 东 2012)， 其中氧化应激在酒精性肝损伤的发生和发展
是 防 治 酒 精 性 肝 病 的 重 要 手 段 （ Yi W a/.
2020)。
牛樟芝 raA/vcr/io/u/igt/5 camphoratus (M. Zang & C.H.Su) Sheng H.Wu ef cr/•又称为牛樟
芝 、樟 生 薄 孔 菌 、牛 樟 菇 、红 樟 芝 、樟 菇 、
[引用本文】杨彬君，冯彩玲，吴岩斌，易骏，吴锦忠，吴建国， 20 2 1 .牛樟芝多糖对HePG 2 细胞酒精性氧化损伤的保护作 用.菌物学报， 40(6): 1549-1560 Yang BJ, Feng CL, Wu YB, Yi J, Wu JZ, Wu JG, 2021. Protective effect of yo/iva/io/ungt/s camphoratt/s polysaccharides on alcoho卜induced oxidative injury in HepG2 cells. Mycosystema, 40(6): 1549-1560
病 具 有 很 长 的 历 史 ，现代研究表明牛樟芝含
有 多 糖 、三 萜 、 留体、玻珀酸及马来酸衍生 物 以 及 泛 醌 衍 生 物 等 多 种 活 性 物 质 ，具有解 酒 保 肝 、抗 氧 化 、 免 疫 调 节 、抗 炎 、抗肿瘤
等 作 用 （ Hu e ta /. 2014; Wu eta/. 2019)。本
文 探 讨 了 牛 樟 芝 不 同 提 取 物 包 括 醇 提 物 、水 提 物 、醇提后水提物和多糖对酒精诱导的
HepG2 细 胞 损 伤 的 保 护 作 用 ， 旨 在 阐 明 牛 樟
芝 解 酒 保 肝 的 活 性 部 位 ，为 其 开 发 利 用 提 供 实验依据。
1 材料与方法
1.1实验材料
1 .1 .1 仪 器 ： MS105D U 万 分 之 一 天 平 ，瑞士 METTLER TOLEDO公 司 ；SFG-02B 电热恒温鼓
Research paper
Protective effect of Taiw anofungus cam phoratus polysaccharides on alcoho卜induced oxidative injury in HepG2 cells
YANG Bin-Jun10 FENG Cai-Ling10 WU Yan-Bin1 Yl Jun2 WU Jin-Zhong1 WU Jian-Guo10
Abstract: The protective effect of different doses (100, 200 and 400|ig /mL) of water extract after extraction by ethanol (WEE) and crude polysaccharide (CP)from Toiwonofungus comphorotus on alcohol-induced HepG2 cell injury was investigated. Compared with the model experimental group, various doses of CP and 200 and 400^ig/mL of WEE could significantly improve cellular viability. lOO^g/mL CP and WEE could significantly reduce the alanine aminotransferase (ALT) level in culture medium. 200 and 400(ig/mL of CP and WEE could notably reduce ALT and aspartate aminotransferase (AST) level in culture medium, and simultaneously improve the intracellular catalase (CAT) activity. 200 and 400^g/mL WEE and 400|ig/mL CP could remarkably increase the intracellular superoxide dismutase (SOD) activity.Treatment with various doses of WEE and 400|ig/mL of CP conspicuously reduced the intracellular reactive oxygen species (ROS) level.CP was consisted of 5 monosaccharides, including mannose, rhamnose, glucose, galactose and fucose with the molar ratio of 1:0.1622:6.651:2.646:0.3929. Results proved that WEE and CP could increase the cellular response to oxidative stress and reduce the intracellular ROS level to protect HepG2 cell from oxidative injury induced by alcohol prominently, suggesting that CP was one of the main active ingredients responsible for drunkenness-alleviating and liver-protecting effects. Key words: Taiwanofungus comphorotus, polysaccharide, HepG2 cells, alcoholic liver injury, reactive oxygen species, protective effect
Research paper
22 June 2021, 40(6): 1549-1560 Mycosystema ISSN1672-6472 CN11-5180/Q
研究论文 DOI: 10.13346/j.mycosystema.200380
Hale Waihona Puke 牛樟芝多糖对HepG2 细胞酒精性氧化损伤的保护 作用
杨彬君冯彩玲吴岩斌1
©School of Pharmacy, Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Fuzhou, Fujian 350122, China ©Department of Science, Fujian Institute of Education, Fuzhou, Fujian 350001, China
基 金项目： 国 家 自 然 科 学 基 金 （8 1 7 0 0 5 2 4 );福 建 省 自 然 科 学 基 金 （2019j〇1341) Supported by the National Natural Science Foundation of China (81700524), and Natural Science Foundation of Fujian Province (2019J01341). o Corresponding author. E-mail: wjgl419@ ORCID: WU JIAN-Guo (0000-0001-6809-7169) o Contributed equally to this work. Received: 2020-12-04, accepted: 2020-12-29
肝 脏 是 酒 精 的 主 要 代 谢 器 官 ，长期酗酒 会 导 致 肝 功 能 紊 乱 等 酒 精 性 肝 病 ，进而演变 为酒精性肝炎、肝纤 维 化 ，最后甚至形成肝
硬 化 和 肝 癌 （ Dugum & Mccullough 2〇15; Wang eta /. 2018)。近 年 来 ，由 于 生 活 水 平 的
Copyright © 2021 Institute of Microbiology, CAS. All rights reserved. |jwxt@ Tel: +86-10-64807521
菌 物 学 报 1549
杨 彬 君 等 /牛 樟 芝 多 糖 对 HePG2细 胞 酒 精 性 氧 化 损 伤 的 保 护 作 用
起 到 重 要 作 用 （ Chen e ta /. 2020)。 目前临床
上酒精性肝损伤仍无令人满意的有效药物
(Anstee et a/. 2011)。寻 找 一 种 能 有 效 提 高
肝脏抗氧化应激能力并缓解肝损伤的药物，
1 5 5 0 菌物学报
研究论文
22 June 2021, 40(6): 1549-1560 Mycosystema ISSN1672-6472 CN11-5180/Q
O 福建中医药大学药学院福建福州350122
© 福建教育学院理科部福建福州350001
易骏2
吴锦忠1
吴建国M
摘 要 ：研 究 了 不 同 剂 量 （1 0 0 、 2 0 0 和 40〇n g / m L ) 的 牛 樟 芝 粗 多 糖 （C P ) 和 醇 提 物 后 的 水 提 物 （W E E ) 对 酒 精 诱 导 的 H e p G 2 细胞氧化损伤的保护作用。研宂结果表明：与模型组比较，各 剂 量 组 的 C P 和 2 0 0 、 40 〇n g / m L 的 W E E 均 能 极 显 著 提 高 H e p G 2 细胞的细胞活力。10〇n g / m L 的 C P 和 W E E 均能极显著降低细胞 培 养 液 的 A L T 水平；2 0 0 和 4 0 0 (ig / m L 的 C P 和 W E E 均能显著降低细胞培养液的A LT、 A S T 水 平 ，同时提 高 胞 内 的 C A T 活 力 ；2 0 0 和 4 0 〇n g / m L 的 W E E 及 4 0 0 p ig / m L C P 能 明 显 提 高 胞 内 的 S O D 活 力 。此 外 ，W EE 各 剂 量 组 和 40 〇ng/m L C P 中 的 胞 内 R O S 水平显著下降。C P 中含有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半 乳 糖 、岩 藻 糖 5 种 单 糖 ，摩 尔 比 为 1:0 .1622:6.651:2.646:0.3929。 W E E 和 C P 能提高细胞的抗氧化应激能力，降低 胞 内 R 0 S , 对 酒 精 诱 导 的 H e p G 2 细胞氧化损伤起到明显的保护作用，提示多糖是牛樟芝解酒保肝的重要 活性成分之一。 关 键 词 ： 牛 樟 芝 ，多 糖 ， H ePG 2 细 胞 ，酒精性肝损伤，活性氧，保护作用
不 断 提 高 ，酒 精 性 肝 病 逐 年 递 增 ， 己成为继 病毒性肝炎之后肝损伤的第二大诱因
( Nimantha & Day 2007)。酒 精 性 肝 病 的 病 理
学 机 制 目 前 尚 不 十 分 明 确 ，现认为主要与氧 化 应 激 、细 胞 因 子 、脂 质 过 氧 化 、线粒体功 能 障 碍 和 内 质 网 应 激 等 有 关 （丁 晓 东 2012)， 其中氧化应激在酒精性肝损伤的发生和发展