鼠伤寒沙门菌SseB和SseL蛋白的原核表达和多克隆抗体的制备

鼠伤寒沙门菌SseB和SseL蛋白的原核表达和多克隆抗体的
制备
李海宾;冯政;仲艳;王希玉;李超;秦涛;陈素娟;彭大新
【期刊名称】《中国家禽》
【年(卷),期】2020(42)6
【摘要】为制备鼠伤寒沙门菌SseB和SseL蛋白的特异性多克隆抗体(多抗),以鼠伤寒沙门菌S025为供体菌,PCR扩增sseB和sseL基因,插入原核表达载体pGEX-6P-1,转化BL21(DE3)感受态细胞进行诱导表达,获得纯化蛋白免疫小鼠制备多抗;使用λ-red同源重组方法构建sseB和sseL基因缺失株;通过野生株和缺失株的Western-blot分析验证制备血清的特异性。

结果显示:成功构建出重组质粒pGEX-6P-1-sseB和pGEX-6P-1-sseL,转化感受态细胞后,在IPTG 1 mmol/L、温度28℃、转速为220 r/min、诱导时间12 h的条件下,SseB和SseL蛋白呈可溶性表达;纯化蛋白免疫小鼠制备了多抗,Western-blot分析显示该多抗可特异性检测鼠伤寒沙门菌中的SseB和SseL蛋白。

这两种蛋白多抗的获得为进一步研究其功能奠定基础。

【总页数】6页(P42-47)
【作者】李海宾;冯政;仲艳;王希玉;李超;秦涛;陈素娟;彭大新
【作者单位】扬州大学兽医学院;江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;江苏省家禽疫病防控工程技术研究中心
【正文语种】中文
【中图分类】S855.1
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