一种外科生物补片及其制备方法[发明专利]

[19]
中华人民共和国国家知识产权局
[12]发明专利申请公布说明书
[11]公开号CN 101314054A [43]公开日2008年12月3日
[21]申请号200710041489.7[22]申请日2007.05.31
[21]申请号200710041489.7
[71]申请人上海契斯特医疗科技公司
地址201400上海市奉贤区南桥镇肖南路757号
[72]发明人谭强 潘银根 金跃辉 殷青 [74]专利代理机构上海新天专利代理有限公司代理人王敏杰
[51]Int.CI.A61L 27/36 (2006.01)
权利要求书 1 页 说明书 5 页
[54]发明名称
一种外科生物补片及其制备方法
[57]摘要
本发明属生物医学工程领域，具体涉及一种外
科生物补片及其制备方法。

它以脱细胞技术为基础，
以生物来源上皮组织材料为原料，主要适用于胸外
科术后肺创面的止血和防漏气，并可用于各类实质
性脏器(例如肝脏，脾脏等)创面的止血。

200710041489.7权 利 要 求 书第1/1页
1、一种外科生物补片，其特征在于使用脱细胞生物材料。

2、根据权利要求1所述的外科生物补片，其特征在于所述的脱细胞生物材料包括同种异体或异种来源生物材料。

3、根据权利要求1或2所述的外科生物补片，其特征在于所述的脱细胞生物材料包括脱细胞小肠黏膜和/或脱细胞腹膜和/或脱细胞真皮。

4、一种外科生物补片的制备方法，用于制备如权利要求1或2或3所述的外科生物补片，其特征在于它包括如下步骤：
A.取新鲜生物上皮组织，仔细剪去附着的脂肪组织，放置入磷酸盐缓冲生理盐水(phosphate-buffered saline，PBS)运输保存；
B.将取得的腹膜放入含蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟
(phenylmethyl-sulfonyl fluoride)0.20-0.5ml/L的低张三羟甲氨基甲烷缓冲液溶液(hypotonic tris buffer)中，该溶液Ph值为7.5-8.5，然后在0-20℃摇床混合处理24-48小时；
C.在上述溶液中加入1-5％温和性去垢剂曲拉通，继续处理24-48小时，然后用Hank氏模拟体液彻底冲洗；
D.加入DNA酶，RAN酶36-38℃处理1小时；
E.重复曲拉通处理24-48小时后H a n k氏液浸泡两到五天。

200710041489.7说 明 书第1/5页
一种外科生物补片及其制备方法
技术领域
本发明属生物医学工程领域，具体涉及一种外科生物补片及其制备方法。

背景技术
外科手术中各类实质性脏器创面渗血和漏气是常见的并发症。

以胸外科为例，各类肺手术后肺组织创面的渗血和漏气延长手术时间，增加手术死亡率。

少量渗血和缝合针眼的漏气可自行愈合。

严重的术后渗血，每小时超过200ml，需要急诊剖胸止血。

术后严重的漏气(超过7天，约占所有病人的15％)提示支气管胸膜漏，常导致脓胸，需要长期或重新放置胸管，胸腔内注射化学制剂造成胸膜粘连，甚至于再次开胸手术。

临床资料显示，术后肺组织持续漏气和长期留置胸管导致的疼痛是胸外科患者住院时间延长的最主要原因。

目前肺手术中采用的防止渗血和漏气措施主要有：缝线加固，生物胶覆盖，各类垫片的应用。

缝线加固看似最经济简便的选择，但是该方法增加手术时间，且不适合大面积肺创面的处理。

因为缝合后会导致正常肺组织不张，且缝合面张力较大，在肺充盈期针眼处常漏气并常有吻合口撕裂导致再次渗血漏气的负面报道。

目前所有针对生物胶的临床和动物实验研究结果，也未能提供令人信服的证据证明其具有加固缝合组织强度和减少渗血漏气发生率的功效。

且生物胶溶解速度往往过快，强度
较弱，凝结后与肺组织黏附性较差，容易脱落，且价格昂贵，使用步骤烦琐。

因此目前各类补片，特别是可降解的生物来源补片被认为是防止各类实质性脏器渗血和漏气的最佳选择。

发明内容
本发明的目的在于提供一种外科生物补片及其制备方法，主要解决上述现有技术中所存在的缺陷，它主要适用于胸外科术后肺创面的止血和防漏气，并可用于各类实质性脏器(例如肝脏，脾脏等)创面的止血。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：
一种外科生物补片，其特征在于使用脱细胞生物材料。

所述的脱细胞生物材料包括同种异体或异种来源生物材料。

所述的外科生物补片，其特征在于所述的脱细胞生物材料包括脱细胞小肠黏膜和/或脱细胞腹膜和/或脱细胞真皮。

一种外科生物补片的制备方法，用于制备如上述的外科生物补片，其特征在于它包括如下步骤：
A.取新鲜生物上皮组织，仔细剪去附着的脂肪组织，放置入磷酸盐缓冲生理盐水(phosphate-buffered saline，PBS)运输保存；
B.将取得的腹膜放入含蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟
(phenylmethyl-sulfonyl fluoride)0.20-0.5ml/L的低张三羟甲氨基甲烷缓冲液溶液(hypotonic tris buffer)中，该溶液Ph值为7.5-8.5，然后在0-20℃摇床混合处理24-48小时；
C.在上述溶液中加入1-5％温和性去垢剂曲拉通，继续处理24-48小时，然后用Hank氏模拟体液彻底冲洗；
D.加入DNA酶，RAN酶36-38℃处理1小时；
E.重复曲拉通处理24-48小时后Hank氏液浸泡两到五天。

本发明产品和方法以脱细胞技术为基础，以生物来源上皮组织材料为原料，主要适用于胸外科术后肺创面的止血和防漏气，并可用于各类实质性脏器(例如肝脏，脾脏等)创面的止血。

该产品的主要特点有：
1、本发明产品具有良好的生物相容性，完全去除原材料中细胞成分，保留细胞外基质成分，其成分以胶原为主，抗原性低，无免疫排斥反应。

2、使用本发明产品可促进创面止血和一期愈合。

在早期止血和炎性反应阶段，可机械性的堵塞创面防止漏气，激活血小板，发生生物化学性黏附聚集，辅助纤维蛋白交联，快速形成血栓。

增殖阶段为角质细胞、内皮细胞、成纤维细胞的迁移提供导引支架，加速肉芽组织的生成，促进上皮化阻止漏气。

在晚期的成熟及重塑阶段，应逐步降解，避免对成纤维细胞的过度刺激，防止较厚的疤痕组织形成，最大限度的保持正常肺功能。

3、本发明产品具有良好的黏附性及顺应性，与创面紧密附着，随呼吸运动延展和收缩，强度可耐受30--40c m H2O的肺充气压力，在肺充盈期不易脱落，仍保持防漏气功效。

4、本发明产品保留完整的基底膜结构，应用早期无需与生物蛋白胶合用，即可达到防止漏气功效。

5、制备本发明产品德操作简易，适用于胸腔镜等微创手术。

具体实施方式
实施例1
猪小肠黏膜脱细胞基质的制备
步骤一：取一岁内猪的新鲜小肠组织，仔细剪去附着的脂肪组织，切开肠腔，放置入磷酸盐缓冲生理盐水(phosphate-buffered saline，PBS)运输保存。

步骤二：将取得的腹膜放入含蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟(phenylmethyl-sulfonyl fluoride，0.20-0.5ml/L)的低张三羟甲氨基甲烷缓冲液溶液(hypotonic tris buffer，Ph 7.5-8.5)中，0-20℃摇床混合处理24-48小时。

步骤三：在上述溶液中加入1-5％温和性去垢剂曲拉通，继续处理24-48小时。

Hank氏模拟体液彻底冲洗。

步骤四：加入DNA酶，RAN酶36-38℃处理1小时
步骤五：重复曲拉通处理24-48小时后H a n k氏液浸泡两到五天。

将制备完成的上述产品作为外科手术中的生物补充片。

实施例2(是实施例1的优选方案)
猪小肠黏膜脱细胞基质的制备
步骤一：取一岁内猪的新鲜小肠组织，仔细剪去附着的脂肪组织，切开肠腔，放置入磷酸盐缓冲生理盐水(phosphate-buffered saline，PBS)运输保存。

步骤二：将取得的腹膜放入含蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟(phenylmethyl-sulfonyl fluoride，0.35ml/L)的低张三羟甲氨基甲烷缓冲液溶液(h y p o t o n i c t r i s b u f f e r，P h 8.0)中，4℃摇床混合处理24小时。

步骤三：在上述溶液中加入1％温和性去垢剂曲拉通，继续处理24小时。

Hank氏模拟体液彻底冲洗。

步骤四：加入DNA酶，RAN酶37℃处理1小时
步骤五：重复曲拉通处理24小时后Hank氏液浸泡两天。

将制备完成的上述产品作为外科手术中的生物补充片。

综上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用来限定本发明的实施范围。

即凡依本发明申请专利范围的内容所作的等效变化与修饰，都应为本发明的技术范畴。