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烷基二苯醚双磺酸钠的制备及性能研究

烷基二苯醚双磺酸钠的制备及性能研究

烷基苯磺酸钠(LAS )是国内用量最大的阴离子表面活性剂,具有良好的泡沫、润湿、乳化和去污等性能,在洗涤剂配方中应用广泛[1]。

双烷基二苯醚双磺酸钠(DADS )是两个LAS 单体通过一个氧原子连接的双子型表面活性剂,在材料、日化、印染等诸多领域有着良好的应用前景[2-4]。

单烷基二苯醚双磺酸钠(MADS )结构与DADS 类似(少一条疏水碳链),具有良好的耐酸碱性和抗硬水能力,在高分子材料、纺织、民用及工业清洗等领域应用广泛[5-7]。

LAS 、MADS 和DADS 均属于烷基芳基磺酸盐类表面活性剂,区别在于分子中苯环、磺酸基及烷链个数不同,关于其性能差异的研究相对较少。

本研究制备了单十二烷基二苯醚双磺酸钠(C 12-MADS )和双十二烷基二苯醚双磺酸钠(C 12-DADS ),曹圣悌,霍月青,刘晓臣,牛金平(中国日用化学工业研究院,山西太原030001)摘要:以十二烯、二苯醚和发烟硫酸为原料,固体超强酸SO 4-/ZrO 2为烷基化催化剂,经烷基化、磺化及中和反应制备单十二烷基二苯醚双磺酸钠(C 12-MADS )和双十二烷基二苯醚双磺酸钠(C 12-DADS ),并采用高效液相色谱、电喷雾质谱进行表征。

测试十二烷基苯磺酸钠(LAS )、C 12-MADS 、C 12-DADS 的耐酸碱性、平衡表面张力、与阳离子表面活性剂复配体系的稳定性及界面张力等。

结果表明:C 12-MADS 的耐酸碱性高于LAS 和C 12-DADS ;C 12-DADS 的临界胶束浓度(cmc )最低,LAS 在cmc 处的表面张力最低;C 12-MADS/DTAC 复配体系的稳定性优于LAS/DTAC 和C 12-DADS/DTAC ;LAS/DTAC 复配质量比为8/2时,平衡界面张力最低,可以达到10-3mN/m 数量级。

关键词:磺酸盐;耐酸性;耐碱性;表面张力;界面张力中图分类号:TQ423文献标志码:A文章编号:1004-0439(2021)05-0034-04Preparation and performance of alkyl diphenyl ether disulfonatesCAO Shengti,HUO Yueqing,LIU Xiaochen,NIU Jinping(China Research Institute of Daily Chemical Industry,Taiyuan 030001,China)Abstract:Monoalkylated diphenyl ether disulfonates (C 12-MADS)and dialkylated diphenyl ether disulfo⁃nates (C 12-DADS)were synthesized by dodecene and diphenyl oxide through alkylation using the hybrid solid acid as catalyst,sulfonation and neutralization reaction.The products were characterized by HPLC and ESI-MS.The acid and alkali resistance,surface tension of LAS,C 12-MADS and C 12-DADS and the solution stability and interfacial tension of the complex system of LAS,C 12-MADS and C 12-DADS with cationic surfactant were studied.The results showed that the acid and alkali resistance of C 12-MADS were better than that of LAS and C 12-MADS.The critical micelle concentration (cmc)of C 12-DADS was the lowest,and the surface tension at cmc of LAS was the lowest.The solution stability of C 12-MADS/DTAC was higher than that of LAS/DTAC and C 12-DADS/DTAC.When the mass ratio of LAS/DTAC complex system was 8/2,the interfacial tension was the lowest,which could reach the order of 10-3mN/m.Key words:sulfonates;acid resistance;alkali resistance;surface tension;interfacial tension收稿日期:2019-10-11基金项目:国家重点研发计划资助项目(2017YFB0308800);伽蓝研究基金资助项目(JALA2017)作者简介:曹圣悌(1992—),男,在读硕士,研究方向为表面活性剂的合成与应用,E-mail :****************。

肉苁蓉不同提取部位对db

肉苁蓉不同提取部位对db

㊀基金项目:国家中医药管理局-重点实验室研究领域的中医临床疗效提升项目(No.2100222179)ꎻ国家自然科学基金(No.81874345)ꎻ辽宁省自然科学基金-资助面上项目(No.2022-MS-223)作者简介:程世赞ꎬ女ꎬ硕士生ꎬ研究方向:中药炮制学ꎬE-mail:1376324304@qq.com通信作者:史辑ꎬ女ꎬ博士ꎬ教授ꎬ博士生导师ꎬ研究方向:中药炮制化学ꎬTel:0411-85890157ꎬE-mail:lnshiji@163.com肉苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠降血糖作用程世赞1ꎬ廉婧1ꎬ聂紫璇1ꎬ苏国明1ꎬ常源1ꎬ史辑1ꎬ2ꎬ贾天柱1ꎬ2(1.辽宁中医药大学药学院ꎬ辽宁大连116600ꎻ2.辽宁省中药炮制技术产业创新中心ꎬ辽宁大连116600)摘要:目的㊀探讨肉苁蓉和酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠降血糖的作用及机制ꎮ方法㊀富集肉苁蓉和酒苁蓉总多糖㊁总寡糖和总苷部分ꎬ对其含量进行了比较分析ꎮ选用db/db小黑鼠为实验动物ꎬ给药28d后ꎬ记录小黑鼠体重㊁进食量㊁饮水量ꎬ检测血糖ꎬ采用ELISA检测血清胰岛素(INS)㊁糖化血红蛋白(HbA1c)ꎬ肝脏甘油三酯(TG)㊁总胆固醇(TC)㊁低密度脂蛋白(LDL-C)㊁高密度脂蛋白(HDL-C)㊁丙二醛(MDA)㊁超氧化物歧化酶(SOD)ꎬ血浆和尿液中尿酸(UA)㊁肌酐(Cr)以及尿微量白蛋白(mALB)水平ꎻHE染色方法制备胰腺和肾脏组织病理切片ꎻIHC测定肾脏type-IVcollagen蛋白表达水平ꎮ结果㊀肉苁蓉多糖部位经过酒蒸后含量下降ꎬ肉苁蓉寡糖部位中的甜菜碱经过酒蒸后含量增加ꎬ总苷类成分酒蒸后松果菊苷的含量稍有下降ꎬ毛蕊花糖苷含量下降ꎬ异类叶升麻苷含量上升ꎮ与模型组相比ꎬ肉苁蓉和酒苁蓉不同提取部位能降低体重㊁空腹血糖(FBG)㊁口服葡萄糖耐量(OGTT)㊁HbA1c㊁胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)㊁胰岛β细胞分泌指数(HOMA-β)㊁MDA㊁LDL-C㊁UA㊁Cr以及mALBꎬINS和HDL-C有上升趋势(P<0.05ꎬP<0.01)ꎬ且能改善胰腺和肾脏的病理损伤以及type-IVcollagen的表达ꎮ结论㊀肉苁蓉和酒苁蓉总苷组降血糖作用较好ꎬ酒苁蓉多糖和寡糖也有一定的降血糖作用ꎮ关键词:肉苁蓉ꎻ总多糖ꎻ总寡糖ꎻ总苷ꎻdb/db小黑鼠ꎻ降血糖中图分类号:R285.5㊀文献标志码:A㊀文章编号:2095-5375(2024)01-0006-009doi:10.13506/j.cnki.jpr.2024.01.002HypoglycemiceffectofdifferentextractsofCistanchedeserticolaondb/dbmiceCHENGShizan1ꎬLIANJing1ꎬNIEZixuan1ꎬSUGuoming1ꎬCHANGYuan1ꎬSHIJi1ꎬ2ꎬJIATianzhu1ꎬ2(1.SchoolofPharmacyꎬLiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicineꎬDalian116600ꎬChinaꎻ2.LiaoningTCMProcessingEngineeringTechnologyResearchCenterꎬDalian116600ꎬChina)Abstract:Objective㊀ToexplorethehypoglycemiceffectandmechanismofdifferentextractsofCistanchedeserticolaandprocessedC.deserticolaondb/dbmice.Methods㊀ThetotalpolysaccharidesꎬtotaloligosaccharidesandtotalglycosidesofC.deserticolaandprocessedC.deserticolawereenrichedꎬandtheircontentswerecomparedandanalyzed.Selectdb/dbmiceasexperimentalanimals.After28daysofadministrationꎬrecordthebodyweightꎬfoodintakeꎬwaterconsumptionꎬbloodglucoseꎬseruminsulin(INS)ꎬglycosylatedhemoglobin(HbA1c)ꎬlivertriglyceride(TG)ꎬtotalcholesterol(TC)ꎬlowdensitylipoprotein(LDL-C)ꎬhighdensitylipoprotein(HDL-C)ꎬmalondialdehyde(MDA)ꎬsuperoxidedismutase(SOD)ꎬuricacid(UA)inplasmaandurinecreatinine(Cr)andurinarymicroalbumin(mALB)levelsꎻPathologicalsectionsofpancreasandkidneywerepreparedbyHEstainingꎻTheexpressionleveloftype-IVcollagenproteininkidneywasdeterminedbyimmu ̄nohistochemistry.Results㊀ThecontentofpolysaccharideinC.deserticoladecreasedafterwinesteamingꎬthecontentofbeta ̄ineinthepolysaccharideinC.deserticolaincreasedafterwinesteamingꎬthecontentoftotalglycosidesdecreasedslightlyaf ̄terwinesteamingꎬthecontentofverbascosidedecreasedꎬandthecontentofisoacteosideincreased.Comparedwiththemodelgroupꎬthefastingbloodglucose(FBG)ꎬoralglucosetolerance(OGTT)ꎬHbA1cꎬinsulinresistanceindex(HOMA-IR)ꎬHO ̄MA-βꎬMDAꎬLDL-CꎬUAꎬCrandmALBinthedifferentextractsofC.deserticolaandprocessedC.deserticolaweresignifi ̄cantlydecreasedꎬINSandHDL-Cshowedanupwardtrend(P<0.05ꎬP<0.01)ꎬandcanimprovepathologicaldamagetothepancreasandkidneysꎬaswellastheexpressionoftype-IVcollagen.Conclusion㊀ThetotalglycosidesofC.deserticolaandprocessedC.deserticolahavebetterhypoglycemiceffectsꎬwhilepolysaccharidesandoligosaccharidesofprocessedC.deserti ̄colaalsohavecertainhypoglycemiceffects.Keywords:C.deserticolaꎻTotalpolysaccharideꎻTotaloligosaccharideꎻTotalglycosidesꎻdb/dbmiceꎻHypoglycemic㊀㊀肉苁蓉为列当科植物肉苁蓉或管花肉苁蓉的干燥带鳞叶的肉质茎ꎮ春季苗刚出土时或秋季冻土之前采挖ꎬ除去茎尖ꎬ切段ꎬ晒干[1]ꎮ肉苁蓉具有补肾阳㊁益精血㊁润肠通便的功效ꎬ临床上多用于肾阳不足㊁精血亏虚㊁阳痿不孕㊁腰膝酸软㊁筋骨无力㊁肠燥便秘等ꎮ肉苁蓉的药理作用包括抗衰老㊁抗氧化㊁抗痴呆㊁抗疲劳以及润肠通便等[2-3]ꎮ肉苁蓉主要成分有苯乙醇苷类㊁环烯醚萜苷类㊁多糖等ꎬ其中苯乙醇苷类㊁多糖类成分为主要药效物质[4]ꎮ现代的药理研究表明ꎬ肉苁蓉多糖具有调节免疫活性㊁抗衰老㊁改善学习记忆能力㊁保护神经㊁抗肝损伤㊁抗病毒㊁抗肿瘤㊁影响肠道菌群等诸多药理作用[5]ꎮ肉苁蓉总苷具有滋补肝肾㊁益精血㊁抗氧化㊁抗衰老㊁免疫增强和神经保护作用[6]ꎮ«中国药典»2020年版(一部)收载有肉苁蓉片和酒苁蓉两个炮制品种ꎬ课题组前期研究发现ꎬ生品肉苁蓉偏于润肠通便ꎬ酒苁蓉补肾助阳作用明显增强ꎮ肉苁蓉总苷和总多糖为补肾阳的有效部位ꎬ肉苁蓉寡糖类成分为其润肠通便的有效部位[7]ꎮ肉苁蓉酒蒸过程中ꎬ苯乙醇苷类成分发生较大的变化ꎬ毛蕊花糖苷含量下降ꎬ而其同分异构体异毛蕊花糖苷含量明显增加[8]ꎮ2型糖尿病是由胰岛素抵抗ꎬ伴随胰岛β细胞结构和功能性损伤ꎬ继而导致胰岛素分泌不足ꎬ以血糖升高为主要特征的代谢疾病[9]ꎮ中医认为糖尿病往往与肾精有关ꎬ肾藏精ꎬ精亏则可诱发糖尿病ꎬ甚至会导致糖尿病肾病ꎮ2型糖尿病症状多表现为尿多㊁乏力㊁口渴喜饮㊁多食易饥等与肾阳虚类似症状ꎬ故中医临床治疗糖尿病多以补肾固本㊁补益肾阳为主[10-11]ꎮ文献报道ꎬ肉苁蓉中的苯乙醇苷类成分ꎬ如松果菊苷和毛蕊花糖苷不仅能够抑制餐后血糖水平的增加ꎬ而且能提高淀粉负荷小鼠的葡萄糖耐量[12-15]ꎮ这也提示着肉苁蓉具有降血糖的作用ꎮdb/db小黑鼠是由于瘦素(leptin)受体基因缺陷导致的先天肥胖性T2DM小鼠ꎬ其瘦素受体基因失去功能ꎬ在出生后2周内就发生高胰岛素血症ꎬ3~4周发展为肥胖ꎬ8周后就发展为非常严重的高血糖症ꎬ期间伴有胰岛素抵抗ꎬβ细胞功能衰竭[16-17]ꎬ一般在8~10个月内死亡ꎬ可并发明显的肾脏疾病[18]ꎮ本研究以db/db小黑鼠为实验对象ꎬ分别富集肉苁蓉和酒苁蓉的总多糖㊁总寡糖和总苷类成分ꎬ并对不同提取部位的降血糖作用进行了比较研究ꎬ期望为肉苁蓉酒蒸的炮制机理提供科学依据ꎮ1㊀材料与仪器1.1㊀实验动物㊀自发性2型糖尿病小鼠模型的BKS.Cg-Dock7m+/+Leprdb/JNju(基因型:db/db糖尿病小黑鼠)雄性7周龄的小黑鼠ꎬ体重35~40gꎬdb/dbm+(基因型:db/m+小黑鼠)雄性7周小黑鼠ꎬ体重量18~20gꎬ由南京大学-南京生物医药研究院ꎬ南京大学模式动物研究所提供ꎮ本研究方案通过辽宁中医药大学实验动物伦理委员会审核ꎬ批准编号:2018YSDW-030-02ꎮ1.2㊀药物与试剂㊀肉苁蓉药材于2019年5月采自内蒙古阿拉善(批号:20190508-1)ꎬ经辽宁中医药大学药学院翟延君教授鉴定为列当科植物肉苁蓉(CistanchedeserticolaY.C.Ma)的干燥带鳞叶肉质茎ꎬ标本保存于辽宁省中药炮制技术产业创新中心ꎮ松果菊苷(echinacoside)对照品(批号:MUST-13080801ꎬ纯度ȡ98%)㊁毛蕊花糖苷(verbascoside)对照品(批号:MUST-13122711ꎬ纯度ȡ98%)㊁异毛蕊花糖苷(isoacteoside)对照品(批号:MUST-15081001ꎬ纯度ȡ99.77%)㊁甜菜碱对照品(批号:894-200001ꎬ纯度ȡ98%)均购自中国药品生物制品检定所ꎻD101型大孔树脂由成都曼斯特生物科技有限公司提供ꎮ小鼠抗8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)单克隆抗体[批号:ab62623ꎬ艾博抗(上海)贸易有限公司]ꎻPAS(批号:G1281ꎬ北京索莱宝科技有限公司)ꎻ抗荧光淬灭封片液(海碧云天生物技术有限公司)ꎻSP9001兔SP检测试剂盒(无锡傲锐东源生物科技有限公司)ꎻDAB㊁胰岛素(INS)㊁糖化血红蛋白(HbA1c)㊁甘油三酯(TG)㊁小鼠总胆固醇(TC)㊁低密度脂蛋白(LDL-C)㊁高密度脂蛋白(HDL-C)㊁尿酸(UA)㊁肌酐(Cr)㊁丙二醛(MDA)㊁超氧化物歧化酶(SOD)㊁尿微量白蛋白(mALB)试剂盒(上海朗顿生物技术有限公司)ꎮ胆固醇㊁二甲苯㊁无水乙醇㊁乙腈㊁甲醇为色谱纯ꎬ水为超纯水ꎬ其他试剂均为分析纯ꎮ1.3㊀主要仪器㊀ACQUITYH-ClassUPLC(美国Waters公司)ꎻ血糖仪和血糖试纸条(拜耳医药保健有限公司)ꎻAE240型1/10万电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司)ꎻFA1004型电子天平(上海精密科学仪器有限公司)ꎻBN-518生物组织自动包埋机(湖北伯纳医疗科技有限公司)ꎻ电热恒温干燥箱(忠伟电子仪表有限公司)ꎻLeicaRM2245切片机(德国LeicaBiosystems公司)ꎻpH酸度计(上海鹏顺科学仪器有限公司)ꎻMilli-QIntegral3型净水机(法国Molsheim公司)ꎮ2㊀实验方法2.1㊀肉苁蓉炮制品制备㊀肉苁蓉:取肉苁蓉药材ꎬ洗净杂质ꎬ上锅常压蒸制2hꎬ切成6mmꎬ70ħ烘干ꎮ酒苁蓉:取肉苁蓉饮片ꎬ加入适量黄酒拌匀ꎬ闷润8h(黄酒ʒ水=1ʒ1)ꎬ高压蒸制4hꎬ70ħ烘干ꎮ(每100g肉苁蓉用黄酒30mL)ꎮ2.2㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位富集㊀取肉苁蓉/酒苁蓉粗粉30gꎬ加10倍量水加热回流提取2次ꎬ每次2hꎬ合并提取液ꎬ浓缩ꎬ加乙醇至含醇量达60%ꎬ低温沉淀12hꎬ抽滤ꎬ沉淀即为粗多糖部位ꎮ将上清液浓缩至适当浓度ꎬ上D101大孔吸附树脂ꎬ依次用水和不同浓度的乙醇洗脱ꎬ收集水洗脱液ꎬ减压浓缩至稠膏ꎬ即为总寡糖部位ꎻ40%乙醇洗脱液ꎬ减压浓缩干燥ꎬ即为肉苁蓉总苷部位ꎮ2.3㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位含量测定2.3.1㊀肉苁蓉/酒苁蓉总多糖的含量测定㊀称取葡萄糖样品20.00mg于50mL容量瓶中ꎬ制成0.4mg mL-1的葡萄糖标准溶液ꎬ分别吸取3㊁4㊁5㊁6㊁7mL置于50mL容量瓶ꎬ用水定容至刻度ꎬ分别吸取各个浓度梯度的葡萄糖溶液2.0mL于试管中ꎬ另取等量蒸馏水作空白对照ꎬ在各管加入1mL5%苯酚ꎬ摇匀ꎬ迅速加入5mL浓硫酸ꎬ放置10minꎬ置40ħ水浴中保持15minꎬ取出ꎬ迅速冷却至室温ꎬ在490nm处测其吸光度值ꎬ以吸光度(A)为纵坐标ꎬ葡萄糖浓度(C)为横坐标ꎬ绘制标准曲线ꎬ得回归方程Y=8.37X-0.1628(R2=0.9946)ꎮ精密称取生㊁制品总多糖部分的粉末1.0gꎬ分别置于50mL容量瓶中ꎬ加水溶解并定容至刻度ꎬ精密吸取2.0mL于试管中ꎬ同标准曲线制备方法ꎬ测定ꎬ即得ꎮ2.3.2㊀肉苁蓉/酒苁蓉中甜菜碱的含量测定2.3.2.1㊀对照品溶液制备㊀精密称定甜菜碱对照品1.17mgꎬ放入5mL量瓶中ꎬ加入50%甲醇溶解并定容ꎬ即得ꎮ2.3.2.2㊀色谱条件㊀色谱柱为Ecosil120-5-AMINO色谱柱(4.6mmˑ250mmꎬ5μm)ꎬ流动相:乙腈-水(99.5ʒ0.5)ꎬ柱温:30ħꎬ检测波长:194nmꎬ流速:0.6mL min-1ꎬ进样量10μLꎬ色谱图见图1ꎮA.甜菜碱对照品ꎻB.肉苁蓉总寡糖部位ꎻC.酒苁蓉总寡糖部位图1㊀肉苁蓉/酒苁蓉总寡糖部位的高效液相色谱图2.3.2.3㊀供试品溶液的制备㊀精密称取生㊁制品总寡糖部位的粉末1.0gꎬ分别置于5mL容量瓶中ꎬ加蒸馏水溶解并定容至刻度ꎬ摇匀ꎬ过0.45μL微孔滤膜ꎬ即得ꎮ2.3.2.4㊀样品含量测定㊀精密吸取生㊁制肉苁蓉中总寡糖供试品溶液ꎬ按 2.3.2.2 项下条件测定ꎬ计算样品中甜菜碱含量ꎮ2.3.3㊀肉苁蓉/酒苁蓉中松果菊苷㊁毛蕊花糖苷和异类叶升麻苷含量测定2.3.3.1㊀对照品溶液的制备㊀精密称定松果菊苷4.50mg㊁毛蕊花糖苷4.80mg㊁异类叶升麻苷5.05mg分别放入5mL容量瓶内ꎬ加50%甲醇溶解并定容至刻度ꎬ分别取各对照品溶液200μLꎬ置于进样小瓶内ꎬ加400μL50%甲醇ꎬ混匀ꎬ制成混合对照品溶液ꎬ摇匀ꎬ即得ꎮ2.3.3.2㊀色谱条件㊀色谱柱为EcosilC18(4.6mmˑ250mmꎬ5μm)ꎬ甲醇为流动相Aꎬ0.1%甲酸为流动相Bꎬ梯度洗脱ꎬ0~45minꎬ30%Aң70%Aꎬ流速1.0mL min-1ꎬ柱温30ħꎬ检测波长330nmꎬ进样量10μLꎬ色谱图见图2ꎮA.混合对照品ꎻB.肉苁蓉总苷部位ꎻC.酒苁蓉总苷部位㊀1.松果菊苷ꎻ2.毛蕊花糖苷ꎻ3.异类叶升麻苷图2㊀肉苁蓉/酒苁蓉总苷的样品高效液相色谱图2.3.3.3㊀供试品溶液的制备㊀精密称取生㊁制品总苷部分粉末1.0gꎬ分别置于100mL容量瓶中ꎬ加50%甲醇溶解并定容至刻度ꎬ摇匀ꎮ各精密吸取5mL置于10mL容量瓶中ꎬ加入50%甲醇定容ꎬ摇匀ꎬ过0.45μm微孔滤膜ꎬ即得ꎮ2.3.3.4㊀样品含量测定㊀精密吸取肉苁蓉总苷样品ꎬ按 2.3.3.2 项下条件测定ꎮ计算样品中松果菊苷㊁毛蕊花糖苷以及异类叶升麻苷的含量ꎮ2.4㊀动物分组㊁造模及给药㊀动物房为12h光照㊁12h黑暗ꎬ相对湿度为50%~70%ꎬ室温为18~22ħꎮdb/db小黑鼠和db/m小黑鼠(正常对照组)以普通饲料正常喂养ꎬ至9周龄开始实验ꎬ除去正常对照组外ꎬ其余db/db小黑鼠根据血糖值及体重随机分为8组ꎬ分别是模型组㊁阳性对照组㊁肉苁蓉总多糖组㊁肉苁蓉总寡糖组㊁肉苁蓉总苷组㊁酒苁蓉总多糖组㊁酒苁蓉总寡糖组㊁酒苁蓉总苷组ꎮ除正常对照组和模型组外ꎬ其余各组大鼠按2mL/100g的剂量连续4周灌胃给药ꎬ药液浓度均为4.1g kg-1ꎬ正常对照组和模型组同法同量灌胃生理盐水ꎮ2.5㊀肉苁蓉不同炮制品提取部位对db/db小黑鼠血糖水平的影响2.5.1㊀口服葡萄糖耐量(OGTT)检测㊀给药26d后ꎬ禁食12hꎬ次日给药60min后ꎬ各组小黑鼠分别给予2.0g kg-1的葡萄糖ꎬ分别于0㊁0.5㊁1.0㊁2.0h尾静脉取血测定血糖值ꎬ以血糖值为纵坐标ꎬ时间为横坐标ꎬ制作血糖变化图ꎬ并按公式计算各实验组血糖曲线的线下面积(AUCꎬhmmoL L-1)[19]ꎮAUC=Aˑ0.25+Bˑ0.50+Cˑ0.75+D式中:A㊁B㊁C㊁D分别为0㊁0.5㊁1.0㊁2.0h的血糖值ꎮ2.5.2㊀胰岛素抵抗指数及动脉硬化指数计算㊀根据文献方法计算胰岛素抵抗指数[20]:HOMA-IR=GlucoseˑInsulin/22.5ꎬHOMA-β=20ˑInsulin/(Glucose-3.5)ˑ100%ꎮIR是胰岛素抵抗ꎬβ(%)是β细胞功能ꎮ葡萄糖的摩尔单位mmoL L-1ꎮ胰岛素以mU L-1给出ꎮ葡萄糖和胰岛素数字都是在禁食期间检测ꎮ根据Zheng等[21]描述的方法计算动脉硬化指数(Atherogenicindex)ꎬ计算方法:Athero ̄genicindex=(TC-HDL-C)/HDL-Cꎮ2.5.3㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠血清INS㊁HbA1c的影响㊀取冻存血清样品放至室温后ꎬ用于INS㊁HbA1c酶联免疫试剂盒的测试ꎬ严格按照试剂盒说明书的方法及步骤进行操作ꎮ2.6㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠肝脏氧化应激水平影响㊀取冻存血清样品放至室温后ꎬ用于MDA㊁SOD酶联免疫试剂盒的测试ꎬ严格按照试剂盒说明书的方法及步骤进行操作ꎮ2.7㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠肝脏脂肪代谢的影响㊀大鼠血清TG㊁TC㊁HDL-C㊁LDL-C水平测定均采用相关试剂盒测定ꎬ具体测定步骤参考试剂盒说明书ꎮ2.8㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠血浆和尿液中UA㊁Cr以及mALB的影响㊀取冻存血浆㊁尿液样品放至室温后ꎬ用于UA㊁Cr㊁mALB酶联免疫试剂盒的测试ꎬ严格按照试剂盒说明书的方法及步骤进行操作ꎮ2.9㊀HE染色法观察胰腺和肾脏病理切片㊀取出经10%多聚甲醛固定液浸泡24h后的胰腺㊁肾脏组织ꎬ蒸馏水清洗组织后保存于70%乙醇中ꎮ取出组织样品ꎬ经过梯度乙醇脱水㊁透明处理㊁石蜡包埋和切片处理ꎬ然后用苏木精和伊红染色(H&E染色)ꎮ待切片胶干后用高分辨率数码成像系统观察切片并拍照ꎮ2.10㊀免疫组化法测定肾脏组织type-IVcollagen的表达㊀取肾脏切片脱蜡至水后进行抗原修复ꎬ10%山羊血清封闭ꎬ一抗4ħ孵育过夜ꎬ洗涤后孵育二抗ꎬ现配溶液DAB显色ꎬ洗涤㊁脱水㊁封片ꎬ于光学显微镜下观察肾脏组织type-IVcollagen蛋白表达ꎮ2.11㊀统计学方法㊀运用GraphPadPrismVersion5.01(2007ꎬGraphPadSoftwareinc)软件分析数据ꎬ结果以meanʃS.E.M.表示ꎬ两组间差异进行One-wayANOVA(followedbyBonferroniᶄscompareselectedpairsofcolumntest)方法ꎬP<0.05为差异显著ꎬ具有统计学意义ꎮ3㊀实验结果3.1㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位含量测定结果㊀按 2.3 项下条件测定ꎬ肉苁蓉及酒苁蓉不同提取部位含量测定结果见表1ꎮ表1㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位含量测定结果成分总多糖(%)甜菜碱/mg g-1松果菊苷/mg g-1毛蕊花糖苷/mg g-1异类叶升麻苷/mg g-1肉苁蓉1.380.98752.01020.95820.5820酒苁蓉1.191.04411.82670.71470.67053.2㊀药理学指标测定结果3.2.1㊀一般情况观察㊀动物实验周期为4周ꎬ每周测定小黑鼠的空腹体重ꎬ结果见表2ꎮ灌胃实验开始至结束ꎬ模型组小黑鼠的体重出现持续上升ꎬ符合2型糖尿病模型体重增加的特征ꎮ正常对照组大鼠的体重基本不变ꎮ不同给药组对db/db小黑鼠灌胃1周后ꎬ与模型组相比ꎬ各给药组大鼠体重增加的状态均有不同程度改善ꎬ其中以酒苁蓉总苷的改善作用最为明显(P<0.05)ꎻ不同给药组对db/db小黑鼠灌胃2周和4周后ꎬ酒苁蓉寡糖体重改善明显(P<0.05或P<0.01)ꎮ以上结果表明ꎬ肉苁蓉及酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠有降低体重的作用ꎬ结果见表2ꎮ表2㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠体重的影响(g)组别0d7d14d21d28d正常对照组20.00ʃ0.3920.47ʃ0.6718.07ʃ1.0019.57ʃ1.3319.97ʃ1.47模型组38.78ʃ0.50#40.75ʃ1.68##37.93ʃ1.20##41.30ʃ0.80##46.55ʃ1.19##阳性对照组37.90ʃ1.8039.88ʃ1.7436.95ʃ1.9438.60ʃ1.5643.47ʃ1.96肉苁蓉多糖组39.97ʃ1.0339.60ʃ0.7637.92ʃ1.4442.17ʃ1.4844.83ʃ1.40肉苁蓉寡糖组39.33ʃ1.7140.42ʃ2.0239.47ʃ1.3841.03ʃ2.1643.92ʃ2.14肉苁蓉总苷组39.53ʃ1.2440.47ʃ1.1639.55ʃ1.0942.63ʃ1.2446.22ʃ1.18酒苁蓉多糖组39.20ʃ1.1639.45ʃ1.2838.17ʃ0.8142.45ʃ0.9344.70ʃ1.05酒苁蓉寡糖组36.88ʃ0.6238.58ʃ1.1734.10ʃ0.55∗38.03ʃ0.7140.68ʃ0.61∗∗酒苁蓉总苷组37.25ʃ0.6536.10ʃ0.97∗36.10ʃ0.4339.58ʃ1.0343.42ʃ1.03㊀注:与正常对照组比较ꎬ#P<0.05ꎬ##P<0.01ꎻ与模型组比较ꎬ∗P<0.05ꎬ∗∗P<0.01ꎮ3.2.2㊀肉苁蓉不同炮制品提取部位对db/db小黑鼠血糖水平的影响㊀正常对照组db/db小黑鼠血糖均维持在一个正常水平(4.3~5.7mmoL L-1)ꎬ而模型组小黑鼠血糖持续升高(P<0.01)ꎮ与模型组相比ꎬ给药1周后ꎬ肉苁蓉总多糖㊁总寡糖㊁总苷组及酒苁蓉总多糖㊁总寡糖㊁总苷FBG降低(P<0.01)ꎻ给药2周后ꎬ酒苁蓉总苷FBG降低(P<0.05)ꎻ给药3周后ꎬ肉苁蓉总多糖和酒苁蓉总寡糖FBG降低(P<0.05或P<0.01)ꎻ给药4周后ꎬ肉苁蓉总多糖㊁总寡糖及酒苁蓉总多糖㊁总寡糖㊁总苷FBG降低(P<0.05)ꎬ结果见表3ꎮ㊀㊀在口服葡萄糖耐量实验(见表4)中ꎬ正常对照组小黑鼠的平均血糖水平在30min时达到峰值ꎬ然后快速下降到正常水平ꎮ而模型组小黑鼠的平均血糖水平在30min达到峰值后ꎬ继续保持在较高的水平ꎮ与模型组相比ꎬ各给药组小黑鼠血糖达到最高值后呈不同程度的下降趋势ꎬ其中酒苁蓉总多糖㊁总寡糖和总苷组下降速度较快ꎮ此外ꎬ根据计算得各组AUCꎬ结果显示各给药组小黑鼠AUC均低于模型组ꎬ肉苁蓉总多糖和酒苁蓉总苷降低了给予葡萄糖后2个时间点(90㊁120min)的血糖值(P<0.05或P<0.01)ꎬ肉苁蓉总寡糖和酒苁蓉总多糖降低了给予葡萄糖120min后的血糖值(P<0.05)ꎬ酒苁蓉总寡糖降低了给予葡萄糖后3个时间点(0㊁90㊁120min)及曲线下面积(P<0.05或P<0.01)ꎮ结果表明ꎬ肉苁蓉和酒苁蓉可改善db/db小黑鼠的OGTT能力ꎮ表3㊀肉苁蓉不同炮制品及提取部位对db/db小黑鼠FBG值的影响(mmoL L-1)组别0d7d14d21d28d正常对照组5.33ʃ0.284.97ʃ0.524.33ʃ0.225.67ʃ0.535.10ʃ0.33模型组16.92ʃ1.88##19.55ʃ3.31##14.90ʃ1.40##12.40ʃ0.78##12.82ʃ0.77##阳性对照组16.92ʃ1.0614.20ʃ1.91∗8.60ʃ0.89∗∗10.20ʃ1.4810.35ʃ2.08肉苁蓉多糖组15.47ʃ0.8611.32ʃ1.09∗∗14.07ʃ1.777.73ʃ0.77∗9.05ʃ1.14∗肉苁蓉寡糖组17.35ʃ3.2310.00ʃ1.05∗∗11.55ʃ1.0811.02ʃ0.799.18ʃ1.00∗肉苁蓉总苷组16.63ʃ1.588.32ʃ1.95∗∗12.77ʃ2.0114.85ʃ3.0712.00ʃ1.93酒苁蓉多糖组17.15ʃ1.7611.30ʃ1.49∗∗14.68ʃ1.2512.55ʃ1.008.82ʃ0.91∗酒苁蓉寡糖组13.00ʃ1.319.43ʃ1.69∗∗6.43ʃ1.56.55ʃ0.58∗∗8.90ʃ1.03∗酒苁蓉总苷组14.63ʃ0.5712.75ʃ0.96∗∗10.63ʃ1.48∗9.80ʃ1.108.27ʃ0.34∗㊀注:与正常对照组比较ꎬ#P<0.05ꎬ##P<0.01ꎻ与模型组比较ꎬ∗P<0.05ꎬ∗∗P<0.01ꎮ㊀㊀与正常对照组相比ꎬ模型组小黑鼠胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)㊁HbA1c水平升高(P<0.05)ꎬ胰岛β细胞分泌指数(HOMA-β)水平降低ꎮ与模型组相比ꎬ肉苁蓉寡糖组㊁肉苁蓉多糖组㊁酒苁蓉寡糖组与酒苁蓉总苷组血清HbA1c含量明显降低(P<0.05)ꎻ肉苁蓉多糖组㊁酒苁蓉多糖组㊁酒苁蓉寡糖组与酒苁蓉总苷组HOMA-IR指数明显降低(P<0.05)ꎻ经过给药组干预4周后ꎬ与模型组相比ꎬ各给药组小黑鼠胰岛β细胞分泌指数水平均有不同程度的升高ꎬ结果见表5ꎮ胰岛素属于一种蛋白质激素ꎬ主要由胰腺组织中的胰岛β细胞合成与分泌ꎬ参与机体的糖代谢ꎬ维持机体血糖平衡ꎬ血清INS水平可反映糖尿病治疗的效果ꎮ从表5可知ꎬ与正常组相比ꎬ模型组小黑鼠的INS水平显著降低(P<0.01)ꎮ经过给药组干预4周后ꎬ与模型组相比ꎬ各给药组小黑鼠空腹血清胰岛素水平均有不同程度的升高ꎬ其中以肉苁蓉和酒苁蓉的总苷组升高最为明显ꎮ结果表明ꎬ各给药组可提高db/db小黑鼠的血清胰岛素水平ꎬ促进胰岛β-细胞分泌胰岛素ꎮ表4㊀肉苁蓉不同炮制品及提取部位对db/db小黑鼠OGTT的影响组别AUC/h mmoL L-10min30min60min90min120min正常对照组14.98ʃ2.944.65ʃ0.309.00ʃ3.576.65ʃ1.324.68ʃ0.334.32ʃ0.57模型组36.91ʃ1.22##12.23ʃ1.18##23.02ʃ2.42##13.38ʃ0.85##12.4ʃ0.23##12.13ʃ0.36##阳性对照组30.96ʃ2.6210.50ʃ0.8720.63ʃ2.7313.40ʃ1.668.43ʃ1.02∗∗7.97ʃ0.54∗∗肉苁蓉多糖组33.90ʃ0.9014.70ʃ2.8028.42ʃ2.6910.63ʃ0.408.25ʃ0.24∗∗8.05ʃ0.58∗∗肉苁蓉寡糖组36.81ʃ0.3613.20ʃ1.7429.75ʃ0.5612.85ʃ0.979.80ʃ0.979.00ʃ0.32∗肉苁蓉总苷组35.97ʃ2.7815.08ʃ3.3328.20ʃ4.7713.88ʃ3.3311.70ʃ1.2410.20ʃ0.65酒苁蓉多糖组33.25ʃ2.7811.10ʃ1.1026.40ʃ2.4710.90ʃ1.0710.98ʃ1.459.10ʃ1.50∗酒苁蓉寡糖组26.42ʃ2.71∗∗8.00ʃ0.88∗21.15ʃ3.439.43ʃ1.418.05ʃ1.00∗∗6.78ʃ0.36∗∗酒苁蓉总苷组32.97ʃ2.4710.73ʃ0.3326.22ʃ2.5611.20ʃ1.208.85ʃ0.95∗8.77ʃ0.93∗㊀注:与正常对照组比较ꎬ#P<0.05ꎬ##P<0.01ꎻ与模型组比较ꎬ∗P<0.05ꎬ∗∗P<0.01ꎮ表5㊀db/db小黑鼠的HOMA-IR㊁HOMA-β和血清HbA1c㊁INS水平组别HbA1c/ng mL-1INS/mU L-1HOMA-IRHOMA-β正常对照组39.91ʃ2.5366.39ʃ6.1612.17ʃ0.5763.48ʃ5.83模型组50.62ʃ4.20#45.95ʃ1.81##31.34ʃ6.64##16.32ʃ1.18##阳性对照组45.83ʃ3.1854.91ʃ3.31∗26.01ʃ6.4621.90ʃ1.86肉苁蓉多糖组38.43ʃ0.20∗48.50ʃ3.1019.64ʃ2.99∗18.27ʃ1.89肉苁蓉寡糖组37.60ʃ3.68∗52.95ʃ2.8921.89ʃ3.3320.94ʃ2.36肉苁蓉总苷组40.37ʃ3.6753.42ʃ2.3527.35ʃ4.0219.71ʃ1.45酒苁蓉多糖组45.13ʃ3.6746.16ʃ3.1218.24ʃ2.60∗17.09ʃ1.00酒苁蓉寡糖组37.30ʃ5.99∗47.95ʃ6.0319.32ʃ3.80∗20.20ʃ3.27酒苁蓉总苷组40.20ʃ1.01∗51.94ʃ3.0719.04ʃ1.08∗20.54ʃ1.86㊀注:与正常对照组比较ꎬ#P<0.05ꎬ##P<0.01ꎻ与模型组比较ꎬ∗P<0.05ꎬ∗∗P<0.01ꎮ3.2.3㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠肝脏氧化应激水平影响㊀模型组小黑鼠肝脏MDA水平显著高于正常组(P<0.05)ꎮ经过给药组干预4周后ꎬ与模型组相比ꎬ各给药组的MDA水平均出现不同程度下降(P<0.05)ꎬ其中肉苁蓉总多糖㊁肉苁蓉总寡糖㊁肉苁蓉总苷㊁酒苁蓉总苷和酒苁蓉总寡糖的小黑鼠肝脏组织MDA水平减少最明显(P<0.05或P<0.01)ꎮ结果表明ꎬ肉苁蓉对降低db/db小黑鼠肝脏组织MDA水平具有一定的效果ꎬ改善效果好于酒苁蓉给药组ꎮ模型组小黑鼠肝组织中SOD活力低于正常对照组(P<0.05)ꎮ当给予肉苁蓉和酒苁蓉不同提取部位灌胃后ꎬ可提高db/db小黑鼠肝脏组织中SOD活力ꎬ与模型组相比ꎬ各给药组均可恢复SOD活力ꎬ其中肉苁蓉总苷组差异有统计学意义(P<0.05)ꎬ结果见表6ꎮ3.2.4㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠肝脏脂肪代谢的影响㊀为评价肉苁蓉/酒苁蓉对db/db小黑鼠的血清血脂代谢水平影响ꎬ实验检测了糖尿病脂质代谢相关标志物ꎮ从表7可知ꎬ与正常对照组相比ꎬ模型组小黑鼠血清LDL-C水平显著升高(P<0.05)ꎬHDL-C水平降低ꎮ经过给药干预4周后ꎬ与模型组相比ꎬ肉苁蓉总多糖㊁总寡糖和总苷组以及酒苁蓉总多糖㊁总寡糖和总苷组的血清TG㊁TC和LDL-C水平均出现不同程度降低ꎬHDL-C水平升高ꎬ其中肉苁蓉总苷组有改善TC水平作用(P<0.05)ꎮ结果表明ꎬ肉苁蓉和酒苁蓉在一定程度上可改善db/db小黑鼠的脂代谢紊乱ꎮ表6㊀db/db小黑鼠的肝脏重量㊁相对肝脏重量和肝脏SOD㊁MDA水平组别肝脏重量/g相对肝脏重量(%)SOD/nmoL mL-1MDA/ng mL-1正常对照组0.86ʃ0.034.33ʃ0.2019.89ʃ0.5433.94ʃ1.05模型组2.39ʃ0.09##5.12ʃ0.11#17.36ʃ0.98#38.32ʃ0.94#阳性对照组2.13ʃ0.204.87ʃ0.2816.92ʃ0.1930.53ʃ0.86∗∗肉苁蓉多糖组2.13ʃ0.064.75ʃ0.1718.53ʃ0.5631.31ʃ0.41∗∗肉苁蓉寡糖组2.18ʃ1.134.85ʃ0.3918.95ʃ0.8731.81ʃ0.42∗∗肉苁蓉总苷组2.35ʃ0.215.08ʃ0.4219.82ʃ0.50∗30.51ʃ1.38∗∗酒苁蓉多糖组2.33ʃ0.055.23ʃ0.2018.03ʃ0.4036.46ʃ1.25酒苁蓉寡糖组1.77ʃ0.12∗∗4.35ʃ0.24∗19.17ʃ0.8634.06ʃ0.87∗酒苁蓉总苷组2.22ʃ0.055.13ʃ0.2018.61ʃ1.4733.19ʃ3.15∗㊀注:与正常对照组比较ꎬ#P<0.05ꎬ##P<0.01ꎻ与模型组比较ꎬ∗P<0.05ꎬ∗∗P<0.01ꎮ3.2.5㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠血浆和尿液中UA㊁Cr以及mALB的影响㊀给药4周后ꎬ与模型组相比ꎬ肉苁蓉总多糖㊁总寡糖以及酒苁蓉总苷组的UA㊁Cr以及mALB水平均出现不同程度的降低ꎬ其中肉苁蓉总苷组对血浆中的Cr以及尿液中的Cr㊁UA和mALB有降低作用(P<0.05或P<0.01)ꎬ酒苁蓉多糖组对尿液中的UA㊁Cr以及mALB水平改善作用(P<0.05或P<0.01)ꎬ酒苁蓉对血浆中UA水平有改善作用(P<0.05)ꎬ肉苁蓉总苷一定程度上可降低db/db小黑鼠血浆UA㊁Cr以及mALB水平ꎮ3.2.6㊀肉苁蓉不同炮制品及提取部位对db/db小黑鼠胰腺㊁肾脏组织病理学影响㊀正常对照组小黑鼠胰腺组织无病理学损伤ꎬ胰岛可见清晰边缘ꎬ胰岛细胞呈椭圆形且有序排列在胞浆中ꎬ细胞核呈圆形ꎬ胰岛数量较多且体积较大ꎮ模型组小黑鼠胰腺组织无完整胰岛ꎬ胰岛边缘不清晰且形状不完整ꎬ胰岛β细胞排列杂乱无章ꎬ数量较少ꎬ并出现萎缩现象ꎬ胰腺出现严重损伤ꎮ与模型组大鼠相比ꎬ经过肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位灌胃4周后ꎬ各提取部位给药组的胰岛组织部分恢复ꎬ胰岛细胞体积出现不同程度变大ꎬ胰岛细胞可见清晰的边界ꎬ排列无序的状况得到改善ꎮ其中ꎬ以肉苁蓉和酒苁蓉总苷组恢复的最好ꎮ表7㊀db/db小黑鼠的肝脏TC㊁LDL-C㊁HDL-C和TG水平组别TG/μmoL L-1LDL-C/mmoL L-1TC/mmoL L-1HDL-C/μmoL mL-1HDL-C/TC动脉硬化指数正常对照组1.12ʃ0.041.58ʃ0.303.56ʃ0.092.28ʃ0.020.64ʃ0.020.56ʃ0.04模型组1.19ʃ0.062.26ʃ0.11##3.68ʃ0.13##2.26ʃ0.020.62ʃ0.020.63ʃ0.06阳性对照组1.09ʃ0.042.15ʃ0.093.20ʃ0.122.10ʃ0.050.66ʃ0.030.53ʃ0.07肉苁蓉多糖组1.23ʃ0.052.11ʃ0.083.97ʃ0.332.18ʃ0.040.56ʃ0.040.82ʃ0.14肉苁蓉寡糖组1.28ʃ0.092.03ʃ0.093.46ʃ0.182.27ʃ0.050.66ʃ0.040.53ʃ0.09肉苁蓉总苷组1.18ʃ0.031.96ʃ0.063.07ʃ0.22∗2.11ʃ0.070.70ʃ0.060.46ʃ0.12酒苁蓉多糖组1.26ʃ0.032.19ʃ0.043.59ʃ0.072.14ʃ0.050.60ʃ0.020.68ʃ0.07酒苁蓉寡糖组1.37ʃ0.032.27ʃ0.093.63ʃ0.082.27ʃ0.060.63ʃ0.020.60ʃ0.06酒苁蓉总苷组1.26ʃ0.062.22ʃ0.083.69ʃ0.242.24ʃ0.070.61ʃ0.040.65ʃ0.09㊀注:与正常对照组比较ꎬ#P<0.05ꎬ##P<0.01ꎻ与模型组比较ꎬ∗P<0.05ꎬ∗∗P<0.01ꎮ表8㊀治疗第28天db/db小黑鼠血浆和尿液中UA㊁Cr以及mALB水平组别Cr/mg dL-1UA/mg dL-1血浆尿液血浆尿液mALB/μg dL-1正常对照组1.35ʃ0.020.041ʃ0.0011.56ʃ0.019.80ʃ0.098.85ʃ0.17模型组1.62ʃ0.08#0.044ʃ0.0041.67ʃ0.06##10.40ʃ0.7611.11ʃ0.12阳性对照组1.41ʃ0.020.047ʃ0.0011.82ʃ0.079.57ʃ0.4810.64ʃ0.71肉苁蓉多糖组1.47ʃ0.080.044ʃ0.0031.60ʃ0.069.42ʃ1.059.26ʃ1.48肉苁蓉寡糖组1.42ʃ0.070.040ʃ0.0021.63ʃ0.058.94ʃ0.6411.02ʃ0.81肉苁蓉总苷组1.33ʃ0.08∗0.034ʃ0.003∗1.77ʃ0.137.75ʃ0.52∗∗9.15ʃ0.47∗酒苁蓉多糖组1.58ʃ0.110.036ʃ0.001∗1.69ʃ0.078.05ʃ0.06∗∗7.85ʃ0.65∗酒苁蓉寡糖组1.43ʃ0.99∗0.052ʃ0.0041.66ʃ0.079.86ʃ0.068.00ʃ1.24酒苁蓉总苷组1.53ʃ0.090.043ʃ0.0041.83ʃ0.049.21ʃ0.3610.59ʃ1.19㊀注:与正常对照组比较ꎬ#P<0.05ꎬ##P<0.01ꎻ与模型组比较ꎬ∗P<0.05ꎬ∗∗P<0.01ꎮ图3㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠胰腺病理学的影响(H&Eꎬ200ˑ)㊀㊀正常对照组小黑鼠的肾脏组织无明显损伤ꎬ肾小球结构㊁形态以及与肾小球囊腔的比例正常ꎬ近端小管与远端小管的管壁薄厚㊁管腔大小正常ꎮ模型组小黑鼠肾小球结构㊁形态㊁大小不规则ꎬ血管球萎缩㊁肾球囊腔消失ꎬ近端小管与远端小管的管壁薄厚不匀㊁管腔大小不一㊁界限不清模糊ꎬ肿胀坏死ꎬ有大量的炎性细胞浸润ꎮ与模型组大鼠相比ꎬ经过肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位灌胃4周后ꎬ各提取部位给药组的肾脏组织有所改善ꎬ肾小球结构㊁形态㊁大小接近正常ꎬ近端小管与远端小管的管壁薄㊁管腔大小得到改善ꎬ肿胀减轻ꎬ有的部位仍可见少量的炎性细胞浸润ꎮ其中以肉苁蓉多糖组和酒苁蓉多糖组恢复最好ꎮ3.2.7㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠肾脏组织中type-IVcollagen表达㊀与正常组相图4㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠肾脏病理学的影响(H&Eꎬ200ˑ)比ꎬ模型组小黑鼠肾脏type-IVcollagen蛋白表达发生了明显变化(P<0.05)ꎮ与模型组相比ꎬ各给药组小黑鼠的平均肾膜基质面积增加ꎬ其中肉苁蓉多糖组㊁酒苁蓉寡糖组㊁酒苁蓉总苷组中type-IVcollagen的表达改善ꎬ而肾基膜中的type-IVcollagen表达差异无统计学意义ꎮ图5㊀肉苁蓉/酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠肾脏type-IVcollagen表达型胶原的表达结果4㊀讨论与结论本文研究表明肉苁蓉多糖部位经过酒蒸后含量下降ꎬ推测多糖在酒蒸过程中发生水解ꎻ肉苁蓉寡糖部位中的甜菜碱经过酒蒸后含量增加ꎬ炮制过程中可能生成了甜菜碱类成分ꎬ而使甜菜碱含量增加ꎻ总苷类成分ꎬ松果菊苷的含量稍有下降ꎬ毛蕊花糖苷含量下降ꎬ异类叶升麻苷含量上升ꎮ2型糖尿病(T2DM)的病因众多ꎬ其病机是由于β细胞功能障碍和胰岛素抵抗而引起糖㊁脂肪㊁蛋白质的代谢紊乱ꎮ其中基因㊁肥胖和体力活动显然是2型糖尿病最重要的风险因素[22]ꎮ从中医学角度分析ꎬ2型糖尿病属于 消渴 范畴ꎬ而脾肾阳虚证是因为阳气耗损ꎬ在脾阳虚的状态下无法发挥滋补脾肾的作用ꎬ从而导致阳气损伤的发生[23]ꎮHbA1c是评价糖尿病血糖控制的 金标准 ꎮ英国前瞻性糖尿病研究发现HbA1c水平越高ꎬ糖尿病慢性并发症发生风险越大ꎮ本实验表明ꎬ肉苁蓉多糖和寡糖及酒苁蓉寡糖和总苷显著降低HbA1c水平ꎮINS分泌相对不足是2型糖尿病的发病机制之一[24]ꎮ本研究证明ꎬ肉苁蓉及酒苁蓉各部位均能提高胰岛素水平ꎬ说明生制肉苁蓉不同提取部位可增加胰岛素分泌ꎮmALB对于早期肾损害具有重要参考意义ꎬ而尿Cr能准确反映肾功能状态[25]ꎮ肉苁蓉总苷和酒苁蓉总多糖显著降低了mALB水平ꎬ肉苁蓉总苷㊁酒苁蓉多糖和寡糖显著降低了Cr水平ꎬ降低了肾功能损害ꎮUA通过参与氧化应激ꎬ导致内皮功能障碍ꎬ加重胰岛素抵抗[26]ꎮ肉苁蓉总苷和酒苁蓉总多糖显著降低UA水平ꎬ使尿酸分泌减少ꎬ降低胰岛素抵抗ꎮ2型糖尿病血脂异常的主要表现为HDL-C㊁LDL-C㊁TG水平升高等ꎬ这些因素同样是诱发动脉粥样硬化的因素[27]ꎮ本实验中ꎬ肉苁蓉总多糖㊁总寡糖和总苷组以及酒苁蓉总多糖和总苷组的血清HDL-C㊁LDL-C以及TG水平均出现不同程度降低ꎬ一定程度上可降低血脂从而促进降血糖作用ꎮ肉苁蓉不同提取部位可显著提高HDL-C/TC水平ꎬ降低动脉粥样硬化指数ꎮ提示肉苁蓉不同提取部位对糖尿病和心血管疾病的治疗均有益处ꎮ研究发现ꎬMDA在糖尿病患者体内的表达水平比正常人高ꎻ超氧化物歧化酶SOD在糖尿病患者的活性比正常人低ꎬ提示氧化应激可能在糖尿病肾病的发生发展中起重要作用[28]ꎮ本实验各给药组的MDA水平均出现不同程度下降ꎬSOD活力均有提高ꎬ提示在肉苁蓉及酒苁蓉各提取部位有抑制氧化应激的作用ꎮ本文深入研究了肉苁蓉不同提取部位的降血糖作用ꎬ发现肉苁蓉和酒苁蓉总苷具有较好的降血糖作用ꎬ酒苁蓉多糖和寡糖也有一定的降血糖作用ꎬ为临床合理应用肉苁蓉及其炮制品提供可靠实验依据ꎮ肉苁蓉是我国著名的补益中药ꎬ其药理作用广泛ꎬ在临床疾病的预防和治疗中发挥巨大的作用ꎬ其有很好的应用前景ꎮ然而ꎬ肉苁蓉具有抗高血糖和降血脂作用的生物活性成分和机制有待进一步研究ꎮ参考文献:[1]㊀国家药典委员会.中华人民共和国药典2020年版(一部)[S].北京:中国医药科技出版社ꎬ2020:140. [2]LIYꎬPENGYꎬWANGMYꎬetal.Rapidscreeningandi ̄dentificationofthedifferencesbetweenmetabolitesofCistanchedeserticolaandC.tubulosawaterextractinratsbyUPLC-Q-TOF-MScombinedpatternrecognitionanal ̄ysis[J].JPharmBiomedAnalꎬ2016(131):364-372. [3]刘博男ꎬ史辑ꎬ贾天柱ꎬ等.肉苁蓉高压蒸制工艺的优化[J].中成药ꎬ2019ꎬ41(11):2576-2580.[4]ZHANGXꎬZHENGFJꎬZHANGZ.TherapeuticeffectofCistanchedeserticolaondefecationinsenileconstipationratmodelthroughstemcellfactor/C-kitsignalingpathway[J].WorldJGastroenterolꎬ2021ꎬ27(32):5392. [5]FANLꎬPENGYꎬCHENXNꎬetal.IntegratedanalysisofphytochemicalcompositionꎬpharmacokineticsꎬandnetworkpharmacologytoprobedistinctionsbetweenthestemsofCistanchedeserticolaandC.tubulosabasedonan ̄tidepressantactivity[J].FoodFunctꎬ2022ꎬ13(16):8542-8557.[6]樊燕燕ꎬ张石在.肉苁蓉总苷通过调控lncRNAGAS5保护神经细胞缺血再灌注损伤[J].中成药ꎬ2022ꎬ44(7):2320-2324.[7]范亚楠ꎬ王佳ꎬ贾天柱ꎬ等.肉苁蓉不同提取部位对便秘大鼠通便作用的影响[J].中国医院药学杂志ꎬ2017ꎬ37(13):1256-1258.[8]高云佳ꎬ姜勇ꎬ戴昉ꎬ等.肉苁蓉润肠通便的药效物质研究[J].中国现代中药ꎬ2015ꎬ17(4):307-310. [9]张超ꎬ华悦ꎬ廉婧ꎬ等.肉苁蓉炮制过程中苯乙醇苷类成分含量变化规律研究[J].中国中医药信息杂志ꎬ2022ꎬ29(4):92-97.[10]徐灿坤ꎬ黄延芹.络以治微[M].济南:山东科学技术出版社ꎬ2019.[11]LIAOZZꎬZHANGJYꎬLIUBꎬetal.Polysaccharidefromokra(Abelmoschusesculentus(L.)Moench)improvesan ̄tioxidantcapacityviaPI3K/AKTpathwaysandNrf2translocationinatype2diabetesmodel[J].Moleculesꎬ2019ꎬ24(10):1906.。

关于重点实验室科研秘书工作的几点思考

关于重点实验室科研秘书工作的几点思考
日新月异的科学技术发展和多元化的社会发展促使重点实验室 科研工作和科研管理工作必须与时俱进袁不断创新遥 一名合格的科研 辅助人员需要具备一定的创新能力袁能够借鉴并掌握现代化的管理观 念和经验袁创新自己的工作方式方法袁关注学科前沿动态并学习从大 量的实践工作中归纳总结经验用来指导今后的管理工作遥 工作中要结 合本重点实验室的研究方向和研究领域袁充分发挥积极性和主动性袁准 确把握和解读各种政策和法规袁掌握相关背景资料袁为科研工作者解 决相关的政策研读问题遥 1.4 高效的沟通能力
Rg 为增益电阻袁 当 Rg 为无穷大时袁渊这里选用 600M赘冤袁 增益约为 1
倍袁当 Rg 为 5.6k赘 时袁增益约为 10 倍袁当 Rg 为 470 时袁增益约为 100
倍袁当 Rg 为 47 时袁增益约为 1000 倍遥
A=(2*R3/Rg+1)*R2/R1
渊1冤
b)对所设计的生物电位放大器进行仿真袁验证其功能 如图 1 所示院使用+Vdm/2 和-Vdm/2 两个信号源组合成模拟心电
图 3 差模增益幅频响应曲线渊纵坐标为差模增益渊dB冤袁横坐标为频 率渊Hz冤冤
对图 1 的生物电位放大器进行仿真袁 测量其差模增益频率响应袁 如图 3 所示遥 图中从上到下的短划线尧虚线尧点划线和实线分别代表差 模增益约为 1000 倍尧100 倍尧10 倍和 1 倍时的幅频响应遥 由图 3 可见袁 00 倍时袁幅 频响应在 1kHz 左右就开始截止曰 差模增益约 100 倍时袁 幅频响应在 10kHz 左右开始截止曰差模增益约 10 倍时袁幅频响应在 100kHz 左右 开始截止曰差模增益约 1 倍时袁幅频响应在 1MHz 左右开始截止遥
随着重点实验室科研工作不断深入进行袁学科之间交叉融合也是 越来越多袁这就要求科研秘书加强学习袁对本学科基础理论知识和学 科前沿研究现状进行随时跟踪和了解袁不断扩充学科交叉融合所涉及 到的不同领域的专业知识袁在工作中不断巩固尧积累袁并做到及时掌握 新的知识袁在工作中要善于发现问题并能够分清主次矛盾袁只有这样袁 才能做到重点实验室科研管理工作中有的放矢遥 科研管理者的业务水 平和专业素养直接关系到重点实验室的科学研究水平曰因此袁科研秘 书要清楚重点实验室在该学科同行实验室中所处的水平和地位及实 验室科研人员的科研情况遥 2.3 重视培训

制药企业GMP实施与认证指南(1)

制药企业GMP实施与认证指南(1)

第四节
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第二节
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周黑鸭传说

周黑鸭传说
据周鹏观 察 , 个月后做卤鸭生意的“ 几 来双 看着 风风 火火的 生意 即将 毁于 一旦 , 牌 从 局 中清醒 过来的周鹏意 识到已经犯下一个 致命 的错 误 。 次教训 让他刻 骨铭 心地记 住 :坚 决 这 “ 不做 假货 。 尽管下 决心 时几乎 丢掉生 意 , 周 ” 但 扬 ” “ 久 丫” 纷进军北京市场 并遍地开店 。 和 久 纷
不过如意 鸭 。 有所好转 , 但略 一天 下来还能赚到
点 小钱 。 二姐 做生 意很有经 验 , 告诉 周鹏 , 她 如
果 比如意鸭早 到菜场就能争取到上 班族和不愿
意排 队的一些 顾客 。 二天 , 鹏和姐 姐7 第 周 点半 就到 市摊点开 始吆 喝起来 , 比头天 提前 两三个 小时开张 。 二姐这招 还真灵 , 这次 比头天 又多卖 了好几只 。 一周后 , 如意 鸭促销活动结束 把价格 调整为1 元/ , 2 只 而周鹏的 卤鸭 依然保持在 1 块 0 钱 , 位优 势很明显。 价
酒店 不但不给 货款 , 还把上 门要账 的周鹏 暴打

两个 月 ” 如 果 不 是 刚交 完 两 月房 租 , l 。 周
顿 ,他欠我账 , 还要挨打 !竟然 还有这 种 “ 我
陂迫败 撤 回老家 了。
道理 !” 无奈 的周鹏 开始反思 做酒店 生意存 在
很大 风险 , 手头 现金难 以快速 回流 。 9 6 底 19年 时, 周鹏 开始考 虑 :送 酒店的 生意 不是我 的出 “
酱鸭充 当样 品送给酒 店老 板 , 低价优 势供心 以
给 酒店。 刚开始酒店 每天能卖掉几 只播鸭 . 后粜 销 量慢慢减 少, 半个月后竟然 一只 也难以 化 , 当酒 店老板发现 周峭作假后 , 断绝 跟他合作 , 拒绝支 付之 前的账款。

补骨脂的化学及代谢成分的超高效液相色谱串联质谱法鉴定

补骨脂的化学及代谢成分的超高效液相色谱串联质谱法鉴定
直接 作 用 的 药 效 成 分 。
关键 词 : 超高效液相 色 串 谱 联质谱法; 补骨脂; 化学成分; 代谢产物 D I O 标识 :o:0 3 6 / . s .0 8 8 5 2 1 . 9 0 1 di1 . 9 9 ji n 10 - 0 .0 0 0 .5 s 0
中图分类 号 : 2 4 1 R 8 .
血浆 中检 测 出1 0个入 血成 分 , 鉴定 出7个成分 , 分别为补骨脂素 、 异补 骨脂 素、srl oiei poaeoie6一羧 甲基 一 poa n s 、 osr n s 、 e d s l d
7一羟 基 香 豆 素 、 骨脂 素和 异补 骨 脂 素 的 单 羟基 硫 酸 酯 结合 物 。 结 论 含 药 血 浆 中 的 1 入 血 成 分 可 能 为 补 骨脂 体 内 补 O个
取物后 的代谢产物 , 为探究补骨脂药效物质奠定 了基础 。
1 材 料 与仪 器
l 溶解 , 涡旋 3 ,30 0r m n 。 0s1 0 ・ i 。离心 5mi, n 取上清液备用。 2 3 色 谱 条 件 A Q IY U L B H C8 ( 0 m ×2 1 . C UT P C E 】柱 10 m .
何药物 ( 中药 ) 是通 过与人 体相互 作用 发挥 疗效 的 , 中含有 C 都 血 MC— a N 制成 1g・m 灌 胃剂 ( 补骨 脂 药 材量 计 算 ) 取 l 按 ; 的成分才是 中药 的体 内直接作 用物质 , 因此 , 体 内成分 的角度 Wi a 大 鼠, 从 sr t 禁食 1 , 2h 自由饮水 , 1 k 体质量 剂量 , 按 0g・ g 灌 去研究 中药发挥药效的物质 基础更 为科学 。 目前关 于补骨脂体 胃给予 补骨脂提 取物 , 给药 4h , 后 通过眼眶后 静脉丛采血 1m , l 内成 分 研 究 只 有 一 篇 文 献 报 道 J 采 用 HP C—u 法 检 测 出补 置 于涂 有肝 素钠 的 管 中 ,300 r・ i 离 心 1 n 取 上 清 液 , L V 1 0 mn 0mi, 骨 脂 入 血 后 有 3个 代 谢成 分 , 未 能 对 其 进 行 定 性 鉴 别 分 析 。本 20 l加 入 乙腈 6 0 l涡 流 6 ,300r m n 离 心 1 i, 但 0 , 0 , 0s1 0 ・ i 5m n 文采用 U L P C—MS MS , 究 补 骨 脂 化 学 成 分 及 大 鼠 口服 其 提 吸取 上 清液 6 0 lN / 法 研 0 , 流 下 吹 干 , 渣 用 乙 腈 :水 (0 0 10 残 1 :9 )0

一种黄精膏及其制备方法[发明专利]

一种黄精膏及其制备方法[发明专利]

专利名称:一种黄精膏及其制备方法
专利类型:发明专利
发明人:蒋智林,郭茸莲,杨昊,董竞成,魏颖,申科,徐雨生申请号:CN202011004737.2
申请日:20200922
公开号:CN112189811A
公开日:
20210108
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明公开一种黄精膏及其制备方法,属于食品加工技术领域。

该黄精膏主要由以下重量百分比原材料制备而成:90~110份黄精、60~70份核桃、20~30份红枣、15~25份芝麻、5~15份枸杞、6~10份茯苓粉、6~10份葛根粉、2~3份食用黄原胶、2~3份食用结冷胶、2~3份食用明胶。

本发明黄精膏不仅通过黄精与核桃、红枣、芝麻、枸杞、茯苓粉和葛根粉的合理配伍,使黄精膏对脾胃的保健功能得到显著增强,能有效预防、治疗脾、胃、肾疾病;还利用添加的食用黄原胶、食用结冷胶和食用明胶,使膏方成形性更好,感官性状得到显著改善。

得到的黄精膏便于密封分装和食用,保质期更长。

申请人:普洱学院
地址:665000 云南省普洱市思茅区学苑路6号
国籍:CN
代理机构:昆明合盛知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人:龙燕
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一种依巴斯汀片剂及其制备方法[发明专利]

一种依巴斯汀片剂及其制备方法[发明专利]

专利名称:一种依巴斯汀片剂及其制备方法专利类型:发明专利
发明人:虞英民,陈松军
申请号:CN200510049854.X
申请日:20050527
公开号:CN1868474A
公开日:
20061129
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明涉及一种抗过敏药品片剂及其制备方法,尤其涉及一种依巴斯汀片剂及其制备方法。

本发明主要由组合物依巴斯汀、羟丙纤维素、微晶纤维素、乳糖、粘合剂通过超细粉碎、配料、混合、制粒、整粒、总混、压片几个步骤制备而得。

本制备方法所得的依巴斯汀片剂质量稳定、不易变色、片剂的溶出度高、疗效好。

申请人:杭州澳医保灵药业有限公司
地址:310022 浙江省杭州市半山保灵路5号
国籍:CN
代理机构:杭州丰禾专利事务所有限公司
代理人:王鹏举
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我国制药企业的专利战略

我国制药企业的专利战略

我国制药企业的专利战略
袁延寿
【期刊名称】《科技管理研究》
【年(卷),期】2004(024)002
【摘要】专利战略是指利用专利法的规定合理地制定专利管理方针,在市场竞争和技术竞争中,为制定者的长久发展谋求利益最大化和技术优势.针对我国制药企业的特点和现状,笔者认为,灵活的运用创新战略、me-too战略、选择发明战略、技术追随战略、专利过期战略,将有利于我国制药企业抓住发展的机遇,实现跨越式的发展.
【总页数】3页(P113-114,112)
【作者】袁延寿
【作者单位】华中科技大学法学院,湖北,武汉,430074
【正文语种】中文
【中图分类】G306.3
【相关文献】
1.基于专利分析及案例推理的企业专利战略决策--以我国中枢神经制药企业为例[J], 陈佳佳;徐怀伏
2.我国中小型制药企业“仿创结合”专利战略研究--以圣和药业的崛起经验为例[J], 赵铃莉;刘标;姜卫;郑平安
3.我国入世后制药企业的专利战略探讨 [J], 施红兵
4.浅谈我国制药企业的专利战略 [J], 何文威;李野;杨悦
5.我国生物制药企业专利战略制定研究 [J], 种法辉;金世辉
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美迪紫檀素及其衍生物的植物来源及药理作用的研究进展

美迪紫檀素及其衍生物的植物来源及药理作用的研究进展

美迪紫檀素及其衍生物的植物来源及药理作用的研究进展赖克道;陆国寿;黄周锋;胡筱希;黄建猷;韦桂宁;何俊慧
【期刊名称】《广西医学》
【年(卷),期】2023(45)1
【摘要】美迪紫檀素是一种紫檀类母核结构的黄酮类化合物,为鸡血藤的主要活性成分之一,具有抗肿瘤、促进骨生长、保护神经系统等药理作用,开发潜力较大。

本文对美迪紫檀素及其衍生物的植物来源分布、药理作用、药物动力代谢学的研究进展进行综述,为促进美迪紫檀素的开发利用提供参考。

【总页数】7页(P92-97)
【作者】赖克道;陆国寿;黄周锋;胡筱希;黄建猷;韦桂宁;何俊慧
【作者单位】广西壮族自治区中医药研究院;广西中药质量标准研究重点实验室【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
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1.青蒿素及其衍生物的药理作用研究进展
2.不同植物来源苦丁茶的化学成分及药理作用研究进展
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4.青蒿素及其衍生物抗寄生虫药理作用研究进展
5.后莫紫檀素、美迪紫檀素对人肝癌细胞抑制作用的研究
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骨碎补总黄酮对骨关节炎家兔骨髓间充质干细胞软骨定向分化的实验研究

骨碎补总黄酮对骨关节炎家兔骨髓间充质干细胞软骨定向分化的实验研究

骨碎补总黄酮对骨关节炎家兔骨髓间充质干细胞软骨定向分化的实验研究尚平;贺宪;安耀武;江永发;杨俊龙;陈晓陇;潘勇泉;赖震【期刊名称】《生物骨科材料与临床研究》【年(卷),期】2009(006)006【摘要】目的观察骨碎补总黄酮(Gusuibu,GSB)对骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)家兔骨髓间充质干细胞(Mesen-chymal mtem cells,MSCs)体外扩增及向软骨细胞分化的影响,深入探讨骨碎补防治OA的作用机理.方法选用6月龄家兔采用Hulth法建立OA模型.运用全骨髓贴壁法和密度梯度离心法分离培养OA家兔MSCs,通过流式细胞仪对其表面标志测定鉴定MSCs.运用MTT法检测不同浓度的GSB对OA家兔MSCs增殖的影响,以确定最佳促增殖添加剂量.运用流式细胞仪对细胞周期的测定来探讨GSB对OA家兔MSCs增殖周期的影响.将OA家兔MSCs分为空白对照组、经典诱导组、GSB组和经典诱导+GSB组.用免疫组织化学方榆测Ⅱ型胶原的表达,阿利新蓝比色法测定GAG含量来检测OSB对OA家兔MSCs体外成软骨细胞的影响. 结果经MTT法榆测GSB对MSCs增殖作用,发现0.2mMGSB组的OD值较其它组明显提高.流式细胞仪对细胞周期的测定显示0.2mMGSB干预的MSCs细胞周期的比率最高(P<0.05).GSB和成软骨诱导液能增加OA家兔MSCs的活性,Ⅱ型胶原的表达,促进软骨的形成(P<0.05). 结论GSB能明显促进OA家兔MSCs增殖;促进OA家兔MSCs软骨向分化.【总页数】4页(P10-13)【作者】尚平;贺宪;安耀武;江永发;杨俊龙;陈晓陇;潘勇泉;赖震【作者单位】南方医科大学附属花都医院骨科(广州市花都区人民医院骨科),广东,广州,510800;南方医科大学附属花都医院骨科(广州市花都区人民医院骨科),广东,广州,510800;南方医科大学附属花都医院骨科(广州市花都区人民医院骨科),广东,广州,510800;南方医科大学附属花都医院骨科(广州市花都区人民医院骨科),广东,广州,510800;南方医科大学附属花都医院骨科(广州市花都区人民医院骨科),广东,广州,510800;南方医科大学附属花都医院骨科(广州市花都区人民医院骨科),广东,广州,510800;南方医科大学附属花都医院骨科(广州市花都区人民医院骨科),广东,广州,510800;南方医科大学附属花都医院骨科(广州市花都区人民医院骨科),广东,广州,510800【正文语种】中文【中图分类】Q254【相关文献】1.骨碎补总黄酮对骨关节炎兔膝软骨MMP-1、MMP-3 和TIMP-1 表达的研究[J], 周荣魁;陈昌红;李贺;王宸;段继强2.体外诱导兔骨髓间充质干细胞定向分化为软骨细胞的实验研究 [J], 陈任安;刘利;刘强;郝淼旺;杜鹃;曹义战;梁英民3.大鼠骨髓间充质干细胞分离、体外培养和向软骨细胞表型定向分化的实验研究[J], 丁晓飞;赵劲民;陈维平;杨志;苏伟4.miR-410可促进骨髓间充质干细胞定向分化为软骨细胞 [J], 张庆金;关若洪;张安文;谢正轶;罗宇;颜池5.补肾活血汤含药血清干预体外培养大鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化及补肾活血汤联合骨髓间充质干细胞治疗大鼠膝骨关节炎的实验研究 [J], 吴刚;童培建因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

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美的制冷家电集团2009届校园招聘实施手册行政与人力资源部二00八年十月2009届校园招聘实施手册一、应用原则1、本手册主要用于校园招聘实施阶段,供各单位参考借鉴;2、本手册旨在通过规范的招聘流程与专业的甄选工具,保证招聘质量;3、本手册主要用于人力资源工作人员及业务体系面试官群体使用,各单位应严格做好09校园招聘面试实施过程的标准化工作。

二、甄选操作指引2.1各甄选环节人员比例及甄选标准注:鉴于09年全球经济预期不佳,建议各单位结合本单位年度人员定岗定编及人均效率水平,可按最终需求的80%~100%招聘。

2.2甄选试题使用规则注:1、对专业笔试试卷和无领导小组讨论题目均增强了标识,位于试卷的左下角,便于现场发卷的分类和辨认。

2、试卷或题目中各标识的代表对象如下:□代表技术类,◇代表财务类,☆代表营销管理类,△代表外销类。

3、有几个符号代表第几套题,比如技术类第三套题的标识为□□□。

2.3笔试须知一、笔试人员应在考试前15分钟进入考场,携带好学生证、身份证等有效证件。

入场时不得携带任何书籍、报刊、笔记本和手机、传呼机、电子记事本、电子词典等物品。

二、迟到15分钟者不得进入考场;无特殊情况迟到者,取消考试资格。

三、开考30分钟后方可交卷出场。

四、笔试人员必须在答题指令下达后方可答题。

领到试卷后,注意填写好姓名、应聘者编号、申请职位类别、毕业院校和所学专业,不得在试卷上做任何标记或乱画。

答案一律填写在答题纸上,将所选的选项涂黑。

五、考试中笔试人员如遇有问题应事先举手示意,经监考员同意后方可行动或询问。

离开考场时应经监考员允许方可离场。

离场时不得高声喧哗或逗留在考场周围。

六、笔试人员在考场内必须保持安静,自觉遵守考场纪律,听从监考员的指令。

不准冒名代考或交换试卷。

在考场内,不准交头接耳、左顾右盼;不准抄袭、偷看他人试卷;不准吸烟。

七、笔试人员在考试结束指令下达后,应立即终止答题,将答题卡和试卷分开放在桌子靠近走道一侧,并依次离开考场。

2.4团队活动实施方案一、小组划分原则本着尽量使应聘者保持陌生状态的原则,根据应聘者应聘的岗位,按照应聘类别把应聘者分组,并注意男女比例协调。

二、小组讨论规则实施无领导小组讨论时,每组应聘者同时进入讨论会场就座。

讨论过程中须遵循以下规则(组织者在讨论开始时进行介绍):●讨论开始时,要求每名成员依次发言(每人必须发言),发言时间2分钟;●讨论过程中鼓励积极发言,鼓励相互辩论,但应避免攻击性词语和过激的态度;●讨论过程中强调无领导的规则,讨论开始后面试官保持沉默;●介绍规则时明确时间限制,保证小组按时给出讨论结果。

三、面试官评价指导●每一行为依据其展现出的强度(由强到弱)依次为2分、1分、0分;为避免无法准确打分,打分时可以在同一组学生当中进行对比,以确定分值,保证总分的排名能代表自己实际的评价;●觉得特别突出或者比较突出但有些方面拿捏不定的学生,请做好记号以便会后讨论;●每组讨论完后,及时对相关资料进行整理,分类,以便当晚进行汇总;●在评价中,若某学生所有行为得分总分低于该面试题所列明的建议考察行为总数的80%,则建议将该学生淘汰;●每一组面试的学生进入下轮面试的比例原则上应不高于该组人数的40%,但所有行为得分总分高于该面试题所列明的建议考察行为总数的1.6倍的学生可考虑进入下一轮面试;●技术类和财务类学生若在团队活动过程中过于沉默,面试官可予以提问引导●在面试结论中如考官有不同意见采取少数服从多数原则。

四、须准备工作与物料清单●准备好面试地点和等候地点;●面试头晚准备好面试组别、每组面试次序和时间、面试通知海报;●准备物料:●面试评分表(每组2张)、团队活动任务书-面试官版(每名面试官1份)、团队活动任务书-学生版(每名学生1份)、回形针一盒、号码牌(上书编号1~8号,每组1套)、签字笔(每名面试官1支,另3支给没笔的学生备用)、带橡皮铅笔(每名面试官1支)。

2.5即兴演讲指引一、即兴演讲流程:1、抽签:题目保密,采用现场随机抽题的方式进行,8人为1组,主考官随机排列8人的先后顺序,同时抽取题目编号,按顺序进行演讲;2、准备:每人准备时间为3分钟,在上一人开始演讲时由工作人员通知下一应聘者抽取的题目编号所对应的题目内容;3、即兴演讲:时间3分钟,根据要求题目进行即兴演讲,工作人员在2分30秒时给予提示,超时将强行终止演讲。

4、现场观众提问(视情况而定):现场观众包括本小组成员及2个面试官,最多提2个问题,答题长度每题不超过30秒;二、评分标准2.6网上测评指引1 硬件应用环境要求弈衡招聘选拔系统需要计算机连接互联网,同时要求计算机配置的微软公司 5.5以上版本的Internet Explorer程序。

2 什么是剖面图?剖面图是指绩优员工在职位模板所包含的素质特征上的具体得分情况,也就是理想应聘者的得分应该分布的范围,如下图所示。

3 答题时间需要多长?注:题目包含能力题和非能力题目两类4 什么是序列号?序列号的作用是什么?序列号是弈衡系统生成的、用来作为测试者答题“许可证”的一串数字。

管理员可以在每一个活动中根据需要生成一定数量的序列号,分发给测试者。

测试者在测试页面需要输入正确的序列号,才能进入对应的测试。

5 弈衡系统中的匹配度代表什么?弈衡招聘选拔系统会根据应聘者在各项胜任力素质上的表现给出与职位要求的匹配度。

匹配度是指测试者的整体素质特征与职位要求的契合程度,由测试者的素质测评结果与职位剖面图比对得到。

需要注意的是:本测评仅对测试者在目标职位胜任力上的表现进行测试,并不包括测试者的知识水平、相关经验等,因此该匹配度仅仅体现测试者的内在素质与职位要求的吻合程度,对于测试者在一些非素质项上的表现,请通过其他方式进行考察。

6 登陆地址弈衡招聘选拔系统的企业登陆网址为:/ep,该网址打开后,输入用户名和密码,并正确填写验证码后,即可登陆并使用弈衡系统。

7 注意事项测试端技术要求●建议使用IE6.0以上浏览器,请不要使用火狐、遨游等浏览器。

●请不要阻止弹出窗口,安全级别设置为“中”或者中以下级别。

●由于测评是计时的,为了能够在规定时间内完成测评,请注意网速不能太慢,如遇网速确实较慢,请不要连续点击下一步或提交按键,可以尝试退出后重新登录继续测评。

●在线测评方式,注意发送给测评者的测评地址一定要正确(重点核查二级域名/);●在线测评方式,注意发送给测评者的序列号不能重复;8 技术支持热线如果在弈衡系统的使用过程中您遇到任何问题,请拨打电话:(010)82776800。

同时,您还可以随时点击系统页面下方的“递交反馈”,向弈衡的系统管理员反馈,北森的客户服务人员会定期为您解决问题。

具体的操作请见用户操作手册2.7结构化面试指引1.面试过程注意事项-时间控制在30分钟左右-保持整齐职业的着装,公正开放的形象-保持环境安静-提问清晰-态度平静,对应聘者的回答不要给予评价和反馈-不要和应聘者争执-完成填写面试表格,注意您的签名。

2.提问与评估-在评估核心要素的时候,请参照《面试指导书》作为评价参考-在面试过程中应尽量对应聘者的所有必备素质(所有的考察维度)进行考察,注意使用STAR 的方法,对其行为进行追问,以便得到准确的评价3.面试观察要点-显著的行为特点-与工作密切相关的行为-近期的行为-行为趋势三、对应届大学毕业生的基本素质要求(建议)1、学习成绩——在班上排名中等以上,主要课程成绩在70分以下的不得超过三门以上,无补考重修现象;2、英语水平——在招聘时本科必须通过国家四级,英语专业的必须通过专业八级;3、计算机水平----需通过国家二级水平,计算机专业除外;4、生源要求——对本科以上学历的毕业生,不受生源限制;5、身体状况——身体健康,精神状态良好,不得有乙肝病毒、肺结核、非典等传染性疾病或精神性疾病;从事技术类男生建议身高165cm以上,女生建议身高155cm以上,五官端正;从事管理、营销类男生要求建议身高175cm以上,女生建议身高165cm以上,形象好,气质佳;6、证件要求——毕业时必须获毕业证、学位证、四级以上英语等级证书,缺一不可;7、素质要求——语言表达、反应能力、学习能力、理解能力、个人发展潜质较好,有较强的责任心和进取心,有较强的敬业和团队精神,心态好,认同公司文化;8、职位要求——专业对口,符合用人部门需求。

四、对参加高校面试官的要求1、熟知公司的基本情况(包括公司发展历程及未来发展方向,公司产品及人员结构等)。

2、了解公司的招聘计划,集团和公司对接收应届大学毕业生的要求及各项政策(含工资、福利、劳动合同及保密协议签定年限、户口及档案关系所在地、岗位安排等)。

3、参加09届面试官培训认证,掌握一定的面试技巧,有录用学生的决定权。

4、相貌端庄,衣着大方(要求男穿公司统一深色西装、打领带,女穿职业装,并需佩戴美的LOGO),举止稳重,口头表达能力较强。

5、派出人员应是人力资源管理人员与专业技术人员合理搭配,对工作认真负责。

五、签约仪式5.1签约仪式。

校园招聘制冷集团线路项目经理统一组织签约仪式,仪式上与录用学生签订三方协议(已发协议的必须现场签约)或发放接收函,同时填写《校园招聘情况统计表》,同时抄送给制冷集团招聘负责人(牟小帅)备案。

签约礼品:人力资源手册、美的制冷手机挂链、当期新视界专刊(包含异地事业部)5.2要注意保留好学生的就业协议书、毕业生推荐表原件、身份证复印件,记录好接收函发放信息统计、录用学生的信息,另建议每个职位需备存5-20份参加面试而未录取的学生简历资料,回公司后统一备案管理,以备后期补录。

六、就业协议书的签定办法由于新的劳动合同法的实施,各单位在签订就业协议书时,一定要慎重,签订就业协议时,必须在协议的备注栏内写明以下内容:(此部分不用于对外宣传)(1)毕业时,毕业证、学位证、报到证三证齐全。

(2)身体健康,无精神病史,无其它传染性疾病。

(3)非英语专业本科生通过国家英语四级以上考试,英语专业通过国家专业八级;研究生通过国家英语六级。

(4)违约金情况说明(考研1500元,其他3000元)。

(5)……(以及各单位需要注明的一些情况)七、签约后期维护鉴于去年后期维护的成果,对于已经下发接收函及签订就业协议书的学生,各单位要派专人进行跟进,跟进时间段为签发接收函之日起至毕业生到公司报道止,要求如下:(1)中国传统节日问候。

各单位将录取毕业生信息(姓名、手机号码)发至制冷家电集团牟小帅处,由制冷集团统一通过呼叫中心以短信形式发送;(2)各单位对录取毕业生进行分组,并进行团队建设,确定以学校或地区为区域的团队负责人,并及时将美的咨询与信息与其沟通(《美的报》《制冷新视界》邮寄);(3)在跟进时间段内,每个事业部结合学生拟安排岗位类别,制定读书学习计划,并提交学习心得(具体方案由各单位制定,提交制冷家电集团牟小帅处备案)。

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