微生物形态学检验-PPT

➢ 培养特性：在沙氏培养基或营养琼脂上培养5-7日 可见菌落，菌落表面有皱折、呈颗粒状、黄色或深 橙色；在血琼脂平板上菌落较小、凸起、呈白色
肠杆菌科 Enterobacteriaceae
➢ 基本特征：在血琼脂平板上生长，在麦康凯、伊红 亚甲蓝、中国蓝琼脂平板上形成发酵和不发酵乳糖 的菌落；在三糖铁或克氏双糖底层、上层产酸、产 气、氧化酶试验阴性
伤寒沙门氏菌 S.typhi
➢ 形态与染色：革兰阴性杆菌，菌体细长，有周鞭毛
➢ 培养特性：在麦康凯上形成无色、透明菌落，SS平 板上呈无色、透明菌落、但大部分菌落中央呈黑色
肺炎克雷伯氏菌K.pneumoniae
➢ 形态与染色：革兰阴性杆菌，单个、成双或短链排 列，荚膜染色可见外周有透明、环状荚膜
细菌分离培养及鉴定
➢ 细菌分离培养：使细菌在平板上分散生长，便 于观察菌落特征，也易于挑取单个菌落进行生 化鉴定或血清学试验
➢ 细菌鉴定：形态与培养特性：形态、染色、培 养特性和菌落特征是鉴定细菌的初步依据
细菌形态与染色特点
➢ 染色性：革兰阳性、阴性，抗酸染色阳性、阴性等 ➢ 形状、大小和排列：球菌、杆菌、螺形菌，菌体大小、
荧光假单胞菌 P.fluorescens
➢ 形态与染色：阴性杆菌、无芽孢、无荚膜、端鞭毛 ➢ 培养特性：在麦康凯上呈无色半透明菌落，在营养
琼脂上形成荧光色的菌落
恶臭假单胞菌 P.putida
➢ 形态与染色：阴性杆菌、无芽孢、无荚膜、极端鞭毛 ➢ 培养特性：在麦康凯上呈较大无色、湿润菌落，在营
养琼脂上形成黄绿色菌落，紫外线下可见荧光
炭疽芽孢杆菌 B.anthracis
➢ 形态与染色：为致病细菌中最大的革兰阳性杆菌， 两端截平，体外培养后形成长链，排列呈竹节形。 在体内常单个存在或短链，有荚膜，在人工培养基 上可见芽孢，卵圆形并位于菌体中央，菌体不膨大
➢ 培养特性：在血平板上形成较大、灰白边缘不整齐 菌落。在营养琼脂上形成灰白色、扁平、干燥而无 光泽、不透明、边缘不整齐的菌落，对青霉素敏感
➢ 培养特性：在血平板上形成较大、圆形、凸起、灰白色、不 溶血菌落；血平板上极少数菌株可出现较大、粗糙型、野菊 花状菌落。麦康凯上形成隆起、大而粘液样、易融合的粉红 色菌落，接种环挑取呈丝状粘连
普通变形杆菌 P.vulgaris
➢ 形态与染色：革兰阴性杆菌，多数为单个存在、也 可见成对或短链状排列，周身鞭毛
❖ Optochin试验：鉴别肺炎链球菌与甲型链球菌的重要试验 ❖ CAMP试验：鉴定B群链球菌
➢ 菌落特征：血平板上的溶血有助于一些细菌的 初步鉴定，如金黄色葡萄球菌、链球菌属等
➢ 镜下形态：单个、成双矛头状、链状、四链状、 葡萄状
➢ 根据菌落特征及镜下形态，结合一些基本试验 可初步判断属于哪类细菌，再进一步做相应的 生化试验即可确定细菌种属
➢ 培养特性：初次分离需在5-10%二氧化碳环境中 生长，血平板上形成灰白、光滑、湿润、有光泽、
透明或半透明、边缘整齐、不溶血的菌落。在巧克
力平板上形成圆形、凸起、湿润、有光泽、灰兰色 菌落
白喉棒状菌 C.diphteriae
➢ 形态与染色：革兰阳性，细长微弯、菌体一端或两 端粗大，呈棒状，排列不规则，菌体一端或两端可 见异染颗粒
粪肠球菌 E.faecalis
➢ 形态与染色：阳性球菌、单个、成双或短链排列
➢ 培养特性：在血平板上形成较小、灰白色、湿润、 凸起、有α或β溶血环的菌落，在麦康凯琼脂平板 上形成较小、干燥、粉红色菌落
脑膜炎奈瑟菌 N.meningitidis
➢ 形态与染色：阴性双球菌、肾形或咖啡豆状，常成 双排列，凹面相对，在脑脊液直接涂片中常位于中 性粒细胞内
微生物形态学检验
邱宗文 第三军医大学附属新桥医院
细菌的形态与结构
➢ 细菌基本形态有三种：
ƌ球菌、杆菌、螺形菌
➢ 细菌基本结构包括：
ƌ细胞壁、细胞膜、细胞质、核质
➢ 细菌的特殊结构有：
ƌ荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢
真菌的形态与结构
➢ 真菌形态有两种类型：
❖ 单细胞型：呈圆形或卵圆形，常见于酵母菌和酵母样菌 ❖ 多细胞型：多呈丝状，分支交织成团、称为丝状菌，通称霉菌
➢ 真菌的基本结构：
❖ 菌丝—由孢子生出芽管，逐渐延长呈丝状 ❖ 孢子—是真菌的生殖结构，真菌繁殖的微小单位
细菌形态学检查
➢ 不染色标本的检查：
❖ 主要用于检查细菌动力及运动状况，包括湿片法、 悬滴法、毛细吸管法
➢ 染色标本的检查：
❖ 观察细菌形态、大小、排列、染色特性、以及荚 膜、鞭毛、芽孢、异染颗粒等结构，有助于细菌 的初步认识或诊断
➢ 培养特性：初次分离需在5-10%二氧化碳环境中 生长，血平板上形成灰白、光滑、湿润、有光泽、
透明或半透明、边缘整齐、不溶血的菌落。在巧克
力平板上形成圆形、凸起、湿润、有光泽、灰兰色 的似露滴状菌落
淋病奈瑟菌 N.gonorrhoeae
➢ 形态与染色：阴双球菌、成双、肾形排列。生殖道 分泌物直接涂片，急性期常位于白细胞内、慢性期 位于白细胞外
非发酵阴性杆菌 Nonfermentative
➢ 基本特征：在最初分离培养基上，如果有菌落生长 并有下列三种情况之一，可认为有非发酵菌存在
❖ 在血平板上生长而在麦康凯上不生长或生长很差，菌落呈无 色、针尖大或完全看不到生长
❖ 麦康凯上生长的无色菌落（不发酵乳糖），氧化酶试验阳性 ❖ 在三糖铁或克氏双糖培养基内，斜面与底层均不变色，表明
金黄色葡萄球菌 S.aureus
➢ 形态与染色：阳性球菌、单个、双成、短链或 不规则葡萄状排列
➢ 培养特性：在血平板上典型菌落为金黄色，周围有 明显β溶血环，部分菌落也可以呈灰白色或柠檬色
化脓链球菌S.pyogenes
➢ 形态与染色：阳性球菌、 固体培养基上呈单个或成 双排列，较少呈链状，肉 汤中呈长链状排列，脓液 标本直接涂片呈单个、成 脓液 双或短链状
蜡样芽孢杆菌 B.cereus
➢ 形态与染色：革兰阳性大杆菌，卵圆形芽孢，位于 菌体中央，菌体不膨大
➢ 培养特性：在血平板上形成较大浅灰色、似毛玻璃 样菌落。在营养琼脂上形成灰白色、不透明、圆形、 凸起的较大菌落，边缘常呈扩展状，迎光看似白蜡 状。故名蜡样芽孢杆菌
枯草芽孢杆菌 E.subtilis
该菌不分解葡萄糖与乳糖，提示为非发酵菌 ❖ 注意：不能在麦康凯、SS及其他含糖培养基上作氧化酶试验，
而应在营养琼脂或半固体培养基上做氧化酶试验，因糖分解 产酸会影osa
➢ 形态与染色：阴性杆菌、细长，菌体一端有单鞭毛
➢ 培养特性：在血平板上形成扁平、湿润、有金属光 泽、蓝绿色，透明溶血环的菌落，有生姜味。在麦 康凯上可形成5种不同菌落
➢ 形态与染色：革兰阳性大杆菌、有芽孢、无荚膜
➢ 培养特性：在营养琼脂上形成较大、灰白色、不透 明、锯齿状粗糙菌落。血平板上形成较大、扁平、 β溶血的菌落
星型奴卡菌 N.asteroides
➢ 形态与染色：革兰阳性、菌体为丝状，在培养早期 菌体裂解为较多的球菌或杆菌状，分之状菌丝较少； 培养后期可见丰富菌丝体形成，在临床标本中为纤 细分支状菌丝，抗酸弱阳性
1、典型型：菌落不规 则，边缘呈伞状伸展
2、大肠菌样型：菌落 圆形、凸起、无色透明
3、粗糙型：菌落呈纽 扣状，表面粗糙，或菌 落中央隆起边缘扁平
4、粘液样：菌落光滑、隆 起、呈粘液状，嵌入培养 基内，不易挑起，似肺克
5、侏儒型：生长缓慢、培 养24h后才有小菌落生长
铜绿假单胞菌特征：蓝绿色或荧光色素，有生姜味， 动力和氧化酶试验阳性
革兰阳性球菌 Gram-positive cocci
➢ 基本特征：在血琼脂平板上生长，在麦康凯、伊红 亚甲蓝、中国蓝琼脂平板上不生长
➢ 基本鉴定试验要求：
❖ 触酶试验：任何阳球先做触酶试验，挑取菌落时不宜碰到血 琼脂，因红细胞内含有过氧化物酶可致假阳性
❖ 凝固酶试验：是鉴定葡萄球菌的重要试验，少数金葡菌玻片 法阴性，试管法阳性，是因该菌无结合凝固酶，有游离凝固 酶；不能使用枸橼酸盐抗凝血浆，因有些细菌可分解枸橼酸 盐致假阳性
➢ 培养特性：在血平板上形成较小、圆形、凸起、光 滑、灰白色菌落，似干酪状，易碎成两半，无或狭 窄溶血环，在亚啼酸钾血琼脂平板上形成黑色或灰 黑色菌落
产单核细胞李斯特氏菌L.monocytogenes
➢ 形态与染色：革兰阳性小杆菌，直或微弯、无 芽孢、无荚膜
➢ 培养特性：在血平板上形成较小、圆形、光滑、而 有β溶血环的菌落，在液体培养基中呈均匀浑浊生 长，在半固体培养基中，动力字穿刺线向四周蔓延 生长，呈倒伞状
紫黑色菌落，在麦康凯上呈紫色菌落
放射根瘤菌R.radiobacter
➢ 形态与染色：阴性杆菌、单个或成双、有周鞭毛 ➢ 培养特性：在血平板上形成灰白色、光滑、湿润、
凸起、无溶血环的菌落，在麦康凯上呈无色、湿润、 粘液样菌落、时间延长时呈淡粉红色
流感嗜血菌Haemophilus
➢ 形态与染色：阴性短小杆菌、两端钝圆，粘液型菌株有荚膜 ➢ 培养特性：在5-10%二氧化碳中可促进生长，生长需Ⅴ、Ⅹ两
红斑丹毒丝菌 E.rhusiopathiae
➢ 形态与染色：革兰阳性杆菌，菌体细长，有时呈长 丝状，易被脱色而呈革兰阴性的杆菌，其间夹着革 兰阳性颗粒
➢ 培养特性：在血平板上形成的光滑型菌落细小、光 滑圆形、凸起有光泽；粗糙型菌落较大、表面呈颗 粒状，周围有轻微溶血，在亚啼酸钾血琼脂平板上 形成黑色菌落
➢ 培养特性：在血平板上蔓延生长、布满整个平板表 面（纤徒现象），麦康凯上形成圆形、扁平、无色 （不发酵乳糖）半透明菌落
霍乱弧菌 V.cholerae
➢ 形态与染色：革兰阴性、菌体弯曲呈弧形或逗点状， 米泔样粪便直接涂片染色，可见头尾相接、平行排 列的弧菌，悬滴法直接镜检可见活泼的运动
➢ 培养特性：具有耐硷性，pH9.2时仍能生长，硷 性蛋白胨水增菌时液体浑浊、表面形成菌膜；在 TCBS平板上形成较大、黄色菌落
纯培养
增菌
➢ 培养特性：在血平板上形成较小、圆形、凸起、β 溶血的灰白色菌落
杆菌肽敏感实验＞10cm
肺炎链球菌S.pneumoniae
➢ 形态与染色：呈矛头状， 成双或链状，有荚膜
荚膜染色
纯培养
痰液
➢ 培养特性：在5-10%二氧化碳环境中生长良好， 血平板上形成细小、圆形、中央呈脐窝状，表面光 滑、灰色、扁平，周围有草绿色溶血环，部分菌株 与典型菌落不同，不是中央凹陷，而是湿润、透明 的粘液样菌落
种因子，适宜培养基是巧克力平板。在巧克力平板上形成微 小、无色透明似露滴状菌落，在血平板上形成极小、圆形、 透明菌落，并有“卫星现象”
产气荚膜杆菌 C.perfingens
➢ 基本鉴定试验要求：
❖ 氧化酶试验：用于鉴定肠杆菌科细菌，必做试验
大肠杆菌 E.coli
➢ 形态与染色：革兰阴性杆菌、粗短、多数有周鞭毛
➢ 培养特性：血平板上呈圆形、边缘整齐、灰白色、不透明的 菌落、少数菌株β溶血环。麦康凯上形成不透明、粉红色菌 落，部分不发酵乳糖菌株呈无色菌落，少数呈粘稠状菌落
单个、成双、短链、葡萄状等 ➢ 细菌特殊结构：芽孢大小、位置、鞭毛数目及位置等
细菌培养特性
➢ 营养要求：简单或复杂 ➢ 生长特性：快或慢 ➢ 气体环境：需氧、兼性厌氧或厌氧 ➢ 适宜生长温度：25℃、35-37℃、42℃
菌落特征
➢ 大小：一般可分为大＞3mm、中2-3mm、小＜2mm ➢ 表面：光滑、粗糙、粘液样、皱纹、放射状、同心圆等 ➢ 透明度：透明、半透明、不透明 ➢ 外形：圆形、不规则等 ➢ 高度：扁平、凸起、脐形等 ➢ 边缘：整齐、锯齿状等 ➢ 光泽：有光泽、无光泽等 ➢ 色素：金黄色、白色、乳白色、绿色、紫色、黑色等 ➢ 气味：酸味、生姜味、恶臭味 ➢ 溶血性：完全溶血、不完全溶血、不溶血
鲍曼不动杆菌 A.baumannii
➢ 形态与染色：阴性杆菌、单个或呈双排列、有时呈 现丝状或链状
➢ 培养特性：在血平板上形成圆形、光滑、边缘整齐 的菌落，部分菌落呈粘液状；在麦康凯上形成粉红 色菌落，48h后菌落呈深红色，部分菌落呈粘液型
紫色杆菌 C.violaceum
➢ 形态与染色：阴性杆菌、具有极端鞭毛和周鞭毛 ➢ 培养特性：在血平板上形成圆形、光滑、β溶血、