pcr 溶解曲线问题
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pcr 溶解曲线问题
PCR溶解曲线问题可能有以下几种情况:
没有扩增曲线:可能的原因包括没有打开荧光信号采集、引物降解、模板浓度低等。
扩增曲线不光滑:可能的原因包括仪器长时间未校准导致波动、RNA模板不纯等。
扩增曲线平台期抖动:可能的原因包括仪器与管材不匹配导致的信号采集产生波动。
扩增曲线基线期上飘:可能的原因包括基线终点值大于CT值、仪器默认起峰位置仍为基线期等。
扩增曲线呈锯齿状断裂:可能的原因是试剂中的参比荧光染料ROX浓度与仪器机型不匹配导致的Badrox,往往出现在需要高浓度ROX校正的ABI 7900HT、StepOne等仪器上。
可在「Setup」中进行设置,将「Passive Reference」的「ROX」调整为「None」,扩增曲线即恢复正常。
如遇到以上问题,请根据具体原因进行解决,如调整基线值、更换试剂等。