纳米铜对大鼠肝毒性相关蛋白磷脂酰乙醇胺结合蛋白I(PEBP1)的分离鉴定及生物信息学分析

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研究报告
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化树。中毒组大鼠肝脏ＰＥＢＰ１蛋白表达下调，导致肝细胞线粒体功能障碍，可能是纳米铜发挥毒性作用
的途径之一。
关键词
纳米铜，肝毒性，蛋白质组学，磷脂酰乙醇胺结合蛋白Ｉ（ＰＥＢＰ１），生物信息学，大鼠
纳米铜对大鼠肝毒性相关蛋白磷脂酰乙醇胺结合蛋白Ｉ（ＰＥＢＰ１）￣分离鉴定及生物信息学分析
高昭辉薛慧文荔霞ｚ董书伟ｚ，申小云
１甘肃农业大学动物医学院，兰州７３００７０；２中国农业科学院兰州Ｉ畜牧与兽药研究所农业部兽用药物创制重点实验室／甘肃省中兽药工程技术中心，兰州７３００５０；３毕节学院，毕节５５１７００；４甘肃省牦牛繁育工程重点实验室，兰州Ｉ７３００５０通讯作者，ｘｕｅｈｗ＠ｇｓａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ；ｌａｎｚｈｏｕｌｉｘｉａ＠１６３．ｔｏｍ
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１ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＶｅｔｅｉｎｒａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＧａｎｓｕＡｇｉｃｒｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌａｎｚｈｏｕ７３００７０，Ｃｈｉｎａ；２ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｙｒｏｆＶｅｔｅｉｎｒａｙｒＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＭｉｎｉｓｔｙｒｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ／Ｅｎｇｉｎｅｅｉｎｒｇ＆ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＶｅｔｅｉｎｒａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅｏｆＧａｎｓｕＰｒｏｖｉｎｃｅ／ＬａｎｚｈｏｕＩｎｓｔｉｕｔｔｅｏｆＨｕｓｂａｎｄｒｙａｎｄＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｌａｎｚｈｏｕ７３００５０，Ｃｈｉｎａ；３
摘
要
为筛选纳米铜对大￣（Ｒａｔｔｕｓｎｏｒ￣ｅｇｉｃｕｓ）肝脏毒性的差异蛋白，探讨其毒性作用机制，本研究应
用双向电泳（ｔｗｏｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏ－ｐｈｏｒｅｓｉｓ，２－ＤＥ）￣Ｎ质谱等蛋白质组学方法，分离和鉴定肝毒性相关差异蛋白，并利用荧光定量ＰＣＲ验证和生物信息学分析。结果共筛选到显著差异表达的蛋白斑点共４３个，其中下调的一个差异蛋白点１００６被鉴定为磷脂酰乙醇胺结合蛋白１（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ — ｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ１，ＰＥＢＰ１）；荧光定量ＰＣＲ验证与双向电泳结果一致。ＰＥＢＰ１蛋白的生物信息学分析表明其性质稳定，不存在信号肽，定位于细胞质，可能属于非分泌性蛋白，含磷脂酰乙醇胺结合蛋白家族信号位点６４ｙＴＬＶＬＴＤＰＤＡＰＳＲＫＤＰＫＦＲＥＷＨＨ；主要二级结构元件为无规则卷曲和延伸链。同源性分析表明，大鼠ＰＥＢＰ１蛋白与其他９个物种有较高同源性，并构建了ＰＥＢＰ１蛋白的系统进