高坡猪肌肉生长抑制素基因多态性及其与肉质性状的相关性分析

单核苷酸多态性"#进行研究!运用 N?NN0&'&软件分析 48D? 基因 NQ? 与肉质性状的关联性&结果表明!仅
在高坡猪 48D? 基因第*外显子(*79处检测到%个 J%Z 突变位点!该突变为同义突变!未引起编码 氨 基 酸 的 改 变&基因型分析发现!仅有*个个体在该位点发生突变!JJ 基 因 型 为 优 势 基 因 型!J 为 优 势 等 位 基 因!无 ZZ 纯 合
"%'贵州大学动物科学学院!高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室!贵阳 22&&02( 0'正安县畜牧产业发展办公室!遵义 2(*)&&(*'贵州省安顺市畜牧技术推广站!安顺 2(%&&&#
摘!要为了探讨肌肉生长抑制素"E6#M545$-!HNZQ#基因的 多 态 性 对 高 坡 猪 肉 质 性 状"水 分'粗 脂 肪'粗 蛋 白 质' 粗灰分'眼肌面积'大理石纹'9\'肉色'嫩度'滴水损失'失水率#的 影 响!试 验 以 48D? 基 因 作 为 肉 质 性 状 候 选 基 因!以%&月龄的2&头高坡猪为研究对象!采用 ?JK 扩增产物直接测序的方法对高坡猪 48D? 基因*个外显子的
收 稿 日 期 0&%(!%%!*& 基金项目高坡猪种质资源利用与高效养殖模式研究"黔科合 QC 字)0&%&**&2&号# 作 者 简 介 易 恒 洁 "%1R/!#!女 !重 庆 人 !硕 士 !助 理 畜 牧 师 !研 究 方 向 $品 种 改 良 !I!E4$G$6$F;-8+$;2&0!%(*',#E " 通 信 作 者 李 ! 辉 "%1/R!#!女 !山 东 高 唐 人 !博 士 !教 授 !研 究 方 向 $动 物 遗 传 育 种 与 繁 殖 !I!E4$G$;GG;-G$FY$!M$-4',-
4#$#+3./;<>-*5%3#;$!!;((2@2;<&$#'%(85#2$52!R*#P";*A$#B2.+#3/!R*#/%$@22&&02!!"#$%( 0NQ"2$@%$!;*$3/:#B2+3;5VK$-*+3./=2B2(;I'2$3M<<#52!Q*$/#2(*)&&!!"#$%(
量进一步研究&
关键词高坡猪(48D? 基因(肉质性状
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易 恒 洁 等 $高 坡 猪 肌 肉 生 长 抑 制 素 基 因 多 态 性 及 其 与 肉 质 性 状 的 相 关 性 分 析
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中 国 畜 牧 兽 医 !!"#$!%%"%#$##"!!##"$
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高坡猪肌肉生长抑制素基因多态性及其与 肉质性状的相关性分析
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#! 材 料 与 方 法
#F#! 试 验 动 物 高坡猪由贵州自然之园生态农业发展股份有限
公司高坡猪养殖场 提 供!随 机 抽 取 %& 月 龄 的 2& 头
高坡猪进行屠宰!采 集 背 最 长 肌 样 品 置 于 冰 盒 带 回
实验室!k0& b保存备用& #F!! 主 要 试 剂 及 仪 器
血液%细 胞%组 织 基 因 组 AQ= 提 取 试 剂 盒'琼 脂糖'0aD%E?JK H4M5;:H$U 试剂'AW0&&&AQ= H4:.;:'O#G"P$;[ ' 型 核 酸 染 料'无 水 乙 醇'Z:$M 苯酚'硼酸'乙二胺四乙酸二钠"IAZ=#均购 自格 瑞 恩生物科技有限公司&
试验采用血液%细胞%组织基因组 AQ= 提取试剂 盒分别对2&头高坡猪背最长肌中基因组 AQ= 进行抽 提!并用微量紫外分光光度计对所获得的 AQ= 进行浓 度和纯度测定!%'&`琼脂糖凝胶检测其完整性& #F%!引物设计及 7BH 扩增
CB\;-8!+$;%!0!WB\Y$%" !e\=@eF#-8!F4$%!C=QO \Y4!5$-8%!?IQO>4-8!U$-8*!L=QO CY0 "%N92/:%,;.%3;./;< &$#'%(R2$23#5+!C.22-#$@%$-F2I.;-*53#;$#$3"26(%32%* 4;*$3%#$;*+F2@#;$!
基因型&经
0
9
适 合 性 检 验 分 析 !该
NQ? 在研究群体中处于
\4:"6!L;$-7;:8 平 衡
状 态"6$&'&2#& 群
体遗传参数
分析发现!J(*Z 标记位点的杂合度")2#相对较低!表明 其 在 高 坡 猪 群 体 中 的 变 异 较 小(就 多 态 信 息 含 量 "6K!#而
言!该位点属于低度多态"6K!#&'02#!说明该遗传标记能够提供少量的遗传信息&将该位点的不同基因型与 肉 质 性状指标进行关联分析表明!所有肉质性状指 标 在 不 同 基 因 型 间 差 异 均 不 显 著 "6$&'&2#& 综 上 所 述!48D? 基 因外显子在高坡猪中存在多态性!但变异较少!相对保守!能否作为高坡猪肉质性 状 的 遗 传 标 记 有 待 于 扩 大 样 本 数
,#YG"7;,#-M$";:;"4M8;-;5$,E4:.;:M3#:E;45iY4G$565:4$5M#3O4#9#9$8#:-#5' D*0E-83>$O4#9#9$8(48D? 8;-;(E;45iY4G$565:4$5M
! ! 高 坡 猪 是 贵 州 优 良 地 方 品 种 !属 中 小 型 猪 !具 有 肉品质好'抗逆性强'耐粗饲'早熟易肥等特 点)%*!所 含乳酸脱氢酶和淋 巴 细 胞 数 远 高 于 成 人 正 常 值!在 实验动物开发和药物试验上有广泛的研究前景&但 由 于 外 来 品 种 的 不 断 引 入 !农 民 的 粗 放 饲 养 !为 追 求 经济效益改良地方 品 种!使 得 高 坡 猪 品 种 资 源 优 势 得不到发挥!甚至岌岌可 危& 肌 肉 生 长 抑 制 素"E6! #M545$-!HNZQ#又 称 OA<!R "8:#[5F "$33;:;-5$4! 5$#-34,5#:#!是 转 化 生 长 因 子!# "5:4-M3#:E$-8 8:#[5F34,5#:!ZO<!##超 家 族 的 一 员!作 为 肌 肉 生 长 的 负 调 控 因 子 !调 控 着 骨 骼 肌 的 生 长 和 分 化 !可 能 影响瘦素的 产 生'分 泌)0*和 调 控 脂 肪 细 胞 分 化& 由 于 HNZQ 的 影 响!猪)**'羊))!2*'牛 都 )(* 表 现 出 双 肌 现象&^Y:6G等)/*通 过 荧 光 原 位 杂 交 将 猪 48D? 基 因 定 位 于 %2 号 染 色 体 上 !并 用 第 0 内 含 子 多 态 性 和相关微卫星标记 构 建 了 猪 第 %2 号 染 色 体 的 连 锁 图谱&李慎涛等)R*对猪 48D? 基因进行了克隆和序 列测定!并对 48D? 基因的结构进行了阐述!结果发 现!猪 48D? 基因有*个外显子&研究表明!48D? 基 因 在 不 同 物 种 间 十 分 保 守 !在 哺 乳 动 物 中 外 显 子 区 具有高 度 的 保 守 性)1*&目 前!48D? 基 因 在 肌 细 胞 增 殖 分 化 '肌 蛋 白 合 成 与 分 解 '脂 肪 代 谢 '骨 骼 发 育 等 方 面 的 作 用)%&*被 陆 续 发 现 & 本 研 究 以 高 坡 猪 为 研 究 对象!研究 48D? 基因的多态性对高坡猪肉质性状 的影响!以期寻找有效的分子遗传标 记!为 高 坡猪的 进一步开发利用'保种等提供理论依据&
?JK 扩增仪'移 液 器'离 心 机'电 子 天 平'微 波 炉'电热恒温 鼓 风 干 燥 箱'ACC!(J 型 电 泳 仪'摩 尔 超纯 水 器'>$#N;-MNJ /%& 凝 胶 成 像 分 析 系 统' WAeX!2&<= 型立 式 压 力 蒸 汽 灭 菌 器'国 产 一 次 性 抗凝 采 血 管 "> 型 #'国 产 ?I 离 心 管 "%'2 EW' 0&&%W#和 国 产 一 次 性 吸 头 "%&&&'0&&'%&%W#& #FG!基因组 NI1 提取