地塞米松磷酸钠检验操作规程

目的： 为检验地塞米松磷酸钠规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。

范围： 适用于地塞米松磷酸钠的检验。

职责： 检验室主任、检验员。

规程：
1. 性状 本品为白色或微黄色粉末，无臭，味微苦，有引湿性。

本品在水或甲醇中溶解，
在丙酮或乙醚中几乎不溶。

1.1 比旋度
取本品精密称取250mg 置25ml 量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，
照旋光度测定法(SOP-QC-310-00) 检验，比旋度为+72°至+80°为符合规定。

计算 []()
B w a a -⨯⨯=
125
a: 旋光仪读数; w: 样品称量（mg ）; B: 水分含量（%）; 2． 鉴别
2.1 试剂与仪器
2.1.1 硫酸，盐酸 2.1.2 硝酸 2.1.3 0.01mol/L 氢氧化钠溶液
2.1.4 茜素氟蓝试液
2.1.5 12% 醋酸钠的稀醋酸溶液
2.1.6 硝酸亚铈试液
2.1.7 氨试液 2.1.8 活性炭 2.1.9 醋酸氧铀锌试液 2.1.10 硝酸银 2.1.11 氯化铵镁试液 2.1.12 钼酸铵试液 2.1.13 烧杯，试管，量筒 2.1.14 电炉 2.1.15 电子天平(万分之一克)
2.1.16 移液管（2ml ，1ml ，10ml ）
2.1.17 红外光谱仪 2.1.18 锥形瓶（500ml）
2.1.19 漏斗，漏斗架，滤纸 2.1.20 酒精灯
2.2 项目与步骤
2.2.1 取本品约8mg，加硫酸2ml使溶解，放置数分钟，即显黄色或红棕色，将此溶液倾
入10ml水中，即析出黄色絮状沉淀为符合规定。

2.2.2 取本品，按红外分光光度法(SOP-QC-302-00)检验，红外吸收图谱应与对照的图谱
（光谱集141图）一致为符合规定。

2.2.3 有机氟化物的鉴别反应
取供试品约7mg，照氧瓶燃烧法(SOP-QC-317-00)进行有机破坏，用水20ml与0.01mol/L 氢氧化纳溶液6.5ml为吸收液，俟燃烧完毕后，充分振摇，取吸收液2ml加茜素氟蓝试液
0.5ml，再加12%醋酸钠的稀醋酸溶液0.2ml用水稀释至4ml，加硝酸亚铈试液0.5ml即显蓝
色，同时做空白对照试验，为符合规定。

2.2.4 取样品约40mg，加硫酸2ml，缓缓加热至发生白烟，滴加硝酸0.5ml，继续加热至
氧化氮蒸气除尽，放冷，滴加水2ml,再缓缓加热至发生白烟，溶液显微黄色，放冷，滴加水10ml，用氨试液中和至溶液遇石蕊试纸显示中性反应，加少许活性炭脱色，滤过，滤液显钠盐与磷酸盐的鉴别反应。

2.2.4.1 钠盐鉴别反应:
取供试品的中性溶液，加醋酸氧铀锌试液，即生成黄色沉淀为符合规定。

2.2.4.2磷酸盐鉴别反应:
（1）取供品试品的中性溶液，加硝酸银试液即生成浅黄色沉淀，分离，沉淀在氨试液或稀酸中均易溶解，为符合规定。

（2）取供品试品溶液加氯化铵镁试液，即生成白色结晶性沉淀为符合规定。

（3）取供品试品溶液加钼酸铵试液与硝酸后，加热即生成黄色沉淀为符合规定。

3．检查
3.1 试剂与仪器
3.1.1 黄色2号标准比色液 3.1.2 1号浊度标准液
3.1.3 磷酸二氢钾 3.1.4 硫酸溶液（3→10）
3.1.5 钼酸铵硫酸试液 3.1.6 1-氨基-2-萘酚-4-磺酸溶液3.1.7 无水亚硫酸钠 3.1.8 亚硫酸氢钠
3.1.9 甲醇 3.1.10 地塞米松对照品
3.1.11 二氯甲烷-乙醚-甲醇（77:15:8:1.2） 3.1.12 硅胶GF254薄层板
3.1.13 丙酮 3.1.14正丙醇
3.1.15 酸度计 3.1.16 烧杯，试管，量筒
3.1.17 比色管 3.1.18 电子天平（万分之一克）3.1.19 容量瓶（25ml，1000ml,10ml） 3.1.20 紫外分光光度计
3.1.21 微量进样器 3.1.22 减压恒温干燥箱
3.1.23 气相色谱仪 3.1.24 称量瓶
3.1.25 移液管（5ml，20ml，1ml，2ml）
3.2 项目与步骤
3.2.1 碱度：取本品的干燥品50mg，加水10ml溶解后，依法测定(SOP-QC-312-00),PH值应为7.5～10.5为符合规定。

3.2.2 溶液的澄清度与颜色：取样品0.20g，加水10ml溶解后，溶液应澄清无色，如显浑浊与1号浊度标准液,按溶液颜色检查法(SOP-QC-329-00)比较，不得更浓；如显色，与黄色2号标准比色液, 按溶液颜色检查法(SOP-QC-328-00)比较,不得更深为符合规定。

3.2.3 游离磷酸盐：
精密称取本品20mg，置25ml量瓶中，加水15ml使溶解，另取标准磷酸盐溶液[精密称取经105℃干燥2小时的磷酸二氢钾0.35g，置1000ml量瓶中，加硫酸溶液（3→10ml）10ml与水适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀，临用时再稀释10倍] 4.0ml置另一25ml量瓶中,加水11 ml；各精密加钼酸铵硫酸试液2.5ml与1-氨基-2-萘酚-4-磺酸溶液（取无水亚硫酸钠5g，亚硫酸氢钠94.3g与1-氨基-2-萘酚-4-磺酸0.7g充分混合，临用时取此混合物1.5g加水10ml使溶解，必要时滤过）1ml，加水至刻度，摇匀，在20℃放置30—50分钟。

照分光光度法(SOP-QC-301-00),在740nm的波长处测定吸收度，供试品溶液的吸收度不得大于对照品溶液的吸收度为符合规定。

3.2.4 其他甾体:
取本品，精密称取200 mg置10ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度,摇匀，作为供试品溶液；另取地塞米松对照品，精密称取20mg置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

照薄层色谱法 (SOP-QC-304-00) 试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以二氯甲烷-乙醚-甲醇-水 (77：15：8：1.2)为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品溶液如显杂质斑点，不得多于2个，其颜色与对照品溶液的主斑点比较，不得更深为符合规定。

3.2.5 甲醇与丙酮
精密量取甲醇10μl(相当于7.9mg)与丙酮100μl（相当于79mg），置100ml量瓶中，精密加0.1%(ml/ml)正丙醇（内标物质）溶液20ml，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；另取本品约0.16g，精密称定，置10ml量瓶中，精密加入上述内标溶液2ml，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品的溶液。

取上述溶液照气相色谱法
(SOP-QC-346-00) ,用高分子多孔小球色谱柱（按正丙醇计算的理论板数应大于700），在柱温105℃测定。

含丙酮不得过5.0%(g/g)并不得出现甲醇峰为符合规定。

3.2.6干燥失重: 称取本品约1g，置称量瓶中，照干燥失重测定法(SOP-QC-325-00),
在100℃减压干燥至恒重，减失重量不得过16.0%为符合规定。

4 含量测定:
4.1 试剂与仪器
4.1.1 C18硅胶色谱柱 4.1.2 地塞米松磷酸钠对照品
4.1.3 醋酸氢化可的松对照品 4.1.4 0.34% 磷酸二氢钾溶液
4.1.5 甲醇 4.1.6 容量瓶（25ml，100ml）、单标移液管（5ml）4.1.7 注射器（10μl）过滤头，滤膜 4.1.8 电子天平（万分之一克），称量瓶
4.1.9 高效液相色谱仪
4.2检验步骤按高效液相色谱法(SOP-QC-306-00)检测。

4.2.1 色谱条件和系统适用性试验
用C18硅胶色谱柱，流动相为甲醇-0.34%磷酸二氢钾溶液（60：40）；流速为1.0ml/min，检测波长为240nm。

量取地塞米松磷酸钠的对照溶液与内标溶液的混合对照液[*]20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，地塞米松磷酸钠峰与内标物峰的分离度应大于4.8，理
论板数按地塞米松磷酸钠峰计算，应不低于1250。

4.2.2 内标溶液的制备: 取醋酸氢化可的松14mg ，置于100ml 量瓶中，加甲醇60ml 使溶
解，用0.34%磷酸二氢钾溶液稀释至刻度,摇匀，即得。

4.2.3 地塞米松磷酸钠对照溶液与样品溶液的制备及测定
地塞米松磷酸钠对照溶液与内标物溶液的混合对照溶液的制备:
取在40℃减压干燥至恒重的地塞米松磷酸钠对照品20mg ，精密称定，置100ml 量瓶中，
用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。

[*]精密量取该溶液与内标溶液各5ml ，置25ml 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，
作为混合对照溶液。

样品溶液与内标溶液的混合液的制备及测定:
精密称取本品20mg ，置100ml 量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取该
溶液与内标溶液各5ml ，置25ml 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。

量取20μl 注入液相色谱仪，将地塞米松磷酸钠的混合对照溶液按同法测定。

按下式计算本品中地塞米松磷酸钠（C 22H 23FNa 2O 8P ）的折干含量，应在96.0%～102.2%为符合规定。

()%1/B C C w d -= C d : 本品的折干含量； C w : 本品的湿品含量； B%: 本品的含水百分数；
%1001
1⨯⨯⨯⨯
=W A Ws A f C s w
W s : 内标物的称样量（g ）；
A s :内标物溶液中醋酸氢化可的松的峰面积或峰高； A 1: 样品中地塞米松磷酸钠的峰面积或峰高； W 1: 样品的称样量（g ）； f: 为校正因子。

2
2//W A W A f s
s =
A s,W s: 同上式意义；
A2: 地塞米松磷酸钠混合对照溶液中地塞米松磷酸钠的峰面积或峰高；
W2: 地塞米松磷酸钠对照品的称样量（g）；
允许差：本法的相对偏差不得超过2.0%.
化学名：即16a-甲基-11β,17a,21-三羟基-9a-氟孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮-21-磷酸酯二钠盐；
分子式: C22H23FNa2O8P
分子量: 516.41；
5．类别：肾上腺皮质激素类药；
6．贮藏：遮光，密封，在干燥处保存。