乙肝两对半PPT课件

ALT 肝组织无明显异常 肝组织坏死炎症表现 活动性慢性乙型肝炎 肝硬化 肝组织无明显异常 肝组织坏死炎症
Lok ASF. N Engl J Med 2002; 346(22):1682 Yim HJ, Lok AS. Hepatology, 2006,43:S173-S181
活动性慢性乙型肝炎 肝硬化
前S蛋白/抗前S蛋白：前S：出现在急性HBV感染的最早期,在
HBsAg消失之前消失,是病毒清除的最早迹象。抗前S是最早出现的抗 体，前S抗体参与病毒清除机制。最早出现抗前S，可能是病毒将清 除最早标志物。在暴发性肝炎，出现抗前S可能预示垂危中的生机。
HBV的抗原抗体系统HBcAg和抗HBc1
HBcAg：是病毒核壳的结构蛋白，包裹在病毒的核心中，不
短链的5'-末端通过长达250-300个核苷酸的碱基配对而维持分子 的环状结构。DNA多聚酶作用不断延长短链3′端以修补缺口。缺 口可能与HBV的DNA在感染细胞内的整合有关。 总而言之，Dane颗粒是一个完整的乙肝病毒颗粒，存在于乙肝病 毒携带者或乙肝病人的血清或肝细胞中，它只能在电子显微镜下 才能被看到，临床上我们检测乙肝病毒的抗原、抗体以及它的 DNA来判断是否感染了HBV。
园形颗粒和管形颗粒是HBsAg的空壳，而Dane颗粒中存在乙肝病 毒核酸（即DNA）。 Dane颗粒是具有感染性的完整的HBV颗粒，呈球形，Dane颗粒直 径只有42纳米，乙肝病毒有包膜和核心两个部分，外壳厚7—8纳 米，就是HBsAg（乙肝表面抗原）。核心颗粒直径28纳米，呈二 十面体立体对称。
Dane’s 颗粒 小球形颗粒 管形颗粒
乙肝病毒（HBV）是一种DNA病毒，乙肝病毒对人的肝脏“情有独 衷”，在生物学上它是嗜肝DNA病毒科（hepadnavividae）家族中 的一员。这个家族中的病毒成员在哺乳动物和鸟类的身上也都有 发现，它们的结构、基因序列和复制策略都非常相似，但是它们 之间却不会互相交叉。
－
+
－
————————————————————————————— 项目 意义 ————————————————————————————— HBsAg 标志HBV感染，但急性肝炎或慢性病变活动却可能由于 重叠其他病因 抗-HBs 感染后免疫；对疫苗的免疫应答；或HBIG的被动免疫 表示对HBV有免疫力 HBeAg 反映HBV复制，有病毒血症，血液有高传染性；与病变程度 并不一定相关,可作为HBV复制和传染性高的指标 抗-HBe ALT持续正常者表示HBV低复制或不复制，血液 低传染性；ALT波动者表示HBV可能有pC/ntG1896A或Bcp 变异，病变可轻可重 ，表示HBV仍有复制 低滴度表示过去感染；高滴度表示现行感染，感染过HBV， 无论是否被清除，均为阳性 抗-HBc IgM高滴度表示急性或近期感染；活动性病变可出现 低滴度抗-HBc IgM阳性提示HBV复制 —————————————————————————————
乙肝病毒感染后基本无法从人体内完全清除。一则 cccDNA可能在患者肝内存活多年，二则乙肝病毒基 因很早就可能和肝细胞核整合。 微量HBVDNA对肝脏的影响：与癌变可能有关，乙肝 病毒再激活有关。
HBV DNA检测


HBVDNA聚合酶链反应PCR HBV DNA定性和定量检测：反映病毒复制情况 或水平，定量检测可判断复制程度、传染性大 小、抗病毒疗效。 PCR因方法和试剂的灵敏性有一检测的阈值， 不能表达极低复制水平的感染，因而并不能代 替血清标志物的检测。事实上HBVM的检测与 HBVDNA一样重要。在诊断、治疗及预后的判 断 等方面HBVDNA都不能替代。
核心颗粒的表面才是病毒真正的衣壳，由乙肝病毒的核心抗原 （பைடு நூலகம்BcAg）组成。HBeAg为HBcAg的可溶性成份，两者约有75%的 氨基酸序列相同，但二级结构不同，各有特异的抗原决定族。临 床上在血液中只检测其可溶性成份。而HBcAg在肝细胞内更容易 被检测到。Dane颗粒中的中心部位就是环状并且有缺口的DNA双 链和依附在上面的DNA聚合酶。
IgM-/IgG-抗HBc：抗HBcIgM－早期抗体（1周－6月），抗
HBV的抗原抗体系统HBeAg和抗HBe1


HBeAg： 是功能蛋白。是临床上表达病毒复制较实
用的血清标志物。 临床意义：在急性HBV感染HBeAg仅存在于感染 的早期，在病变极期之后HBeAg消失，持续存在者 预示趋向慢性。
能直接在血清中检出，较HBsAg有更强的免疫原性。几乎所有感染 者抗HBc 阳性。肝细胞坏死，细胞内的HBcAg可释放入血，致机体 产生抗HBc反应。
HBV的抗原抗体系统HBcAg和抗HBc2
抗HBc：非保护性抗体；产生早、量大、持续时间长；是HBV感
染的印证。在急性期几乎在所有感染个例都可检出抗HBc，有时 是唯一的血清标志物。无论肝病是否存在或病毒已否清除，抗 HBc可持续存在数十年。国外一些地区以抗HBc筛检HBV感染供血， 认为是最灵敏的血清学试验；我国有大量抗HBc(+)的过去感染者， 不宜作为筛检的标志物 。单项抗HBc(+)的患者在接受免疫抑制剂 治疗可能存在乙肝病毒再激活的风险。是否提前预防有争议，至 少应随访。
抗-HBc
。
HBV血清学检测 基本意义
不典型的血清学表现1 HBsAg和抗HBs
单 一 HBsAg 阳 性 ： 在 所 有 肝 炎 病 毒 标 志 物 中 HBsAg比较稳定，罕有假阳性。 单一HBsAg见于急性HBV感染的最早期，一般随 之出现HBeAg和IgM抗HBc 单一 HBsAg ：若滴度较低，可能是非特异性反 应。
假阳性：在我国正常人群中约近10%可检出单一抗HBc,单一抗
HBc有很高的假阳性，可达30%甚至更高。原因：未完全成熟的B 细胞对任何抗原都是敏感的，可被非特异地激活，能产生低滴度 的IgM-及／或IgA-抗HBc。 HBcIgG－出现晚－终身。高滴度的抗HBc(主要是IgM)表示现行感 染；被认为诊断急性乙型肝炎的“金标准”。低滴度的抗HBc(主 要是IgG)表示过去感染。
后二者为HBV复制过程中过剩的病毒外壳（HBsAg），不含核酸。 要认识乙肝，在我看来首先要知道什么是乙肝病毒Dane 颗粒。 Dane 颗粒的来历：1970年D S Dane（戴恩）在肝炎患者血清中发 现具有传染性的颗粒，称为Dane颗粒（Dane‘particle），电子显 微镜下可以看到，HBsAg在乙肝患者血循环中以三种形式存在， 即园形颗粒、管形颗粒和Dane颗粒。



HBV的抗原抗体系统HBsAg和抗HBs2
抗HBs：是一种保护性抗体，出现在急性感染的后期（约半数在
HBsAg（－）后数月才可检出。6－12个月后逐步达到高峰，持续多 年后逐步下降。部分人终身不产生抗HBs。
阳性表示：感染HBV后病毒清除形成对HBV免疫力；对疫苗的免
疫应答；或HBIG的被动免疫。 单一低滴度的抗HBs可以是假阳性。国内一期反应夹心法，国外二 期反应夹心法假阳性率较低。 HBV感染时间久，可能表现为HBsAg(－)/抗HBs(+)慢性肝病（隐匿 性乙型肝炎）。抗HBs(+)的肝硬化少数仍由乙型肝炎进展而来；30% 乙型肝炎肝硬化进展的HCC可抗HBs（+）。
宿主RNA聚合酶
修补正链
Ccc DNA
HBV的抗原抗体系统HBsAg和抗HBs1
HBsAg ：组装病毒外模的主蛋白（外膜蛋白包括主蛋白、中蛋白、
大蛋白）。外模蛋白与其相应的抗体形成复合物与一些肝外疾病 有关。 HBsAg: 只具有抗原性，无传染性 急性自限性HBV感染：感染HBV后1－2周（11－12周）HBsAg出 现，持续1－6周（20周）。 ASC（HBV携带者）和CHB（慢性乙型肝炎）的HBsAg可持续多 年甚至终身。高滴度的HBsAg常表示病毒的高复制水平，低滴度 的HBsAg可能在感染恢复期时病毒低复制；或者在组织病变高度 活动时病毒和抗原已被部分清除。 少数可因病毒变异，以致HBsAg的抗原性有改变，与试剂抗体 的亲和性降低 。 HBsAg负反馈调节肝内CCCDNA的合成；目前认为其滴度与肝内 CCCDNA的量呈正相关。滴度与乙肝病毒的基因型有关.
HBV感染后血清学表现的基本解释
HBsAg
+ + +
抗HBs
－
抗HBc
－
IgM抗 HBc
－
解释
急性感染早期，少数不出现抗HBc的慢性感染 急性感染
－
+ +
+ －
－
慢性感染
－
+
－
+
+
－
感染恢复
－
+
急性感染恢复过程中的“窗期”
－
－
+ －
－
远期感染后，或HBsAg（－）慢性HBV携带 者 远期感染后，疫苗应答，或近期HBIG注射
HBV感染的转归
急性HBV感染
婴儿期感染 85%~95 %
成年期感染 5%~10% 慢性HBV感染
慢性乙型肝炎
5年发生率12%~25%
肝硬化
5年发生率5%~15%
肝细胞癌
肝移植
5年发生率20%~23%
肝功能衰竭
慢性HBV感染的自然病程
免疫耐受 免疫清除 非活动或低复制期 再活动
HBsAg
HBeAg anti-HBe HBV DNA
制低下、病变静止的标志；但在抗HBe(+)慢性活动性肝 病可有病毒活跃复制，绝大多数是前C或C基因启动子 变异毒株，是病变持续活动的原因。 HBeAg血清学转 换－免疫激活－病变活动－病毒复制静止，是临床抗 病毒药物的停药标准。 有些HBV感染HBeAg消失后可不出现抗HBe（小二 阳）。HBeAg(－)/抗HBe(－)的慢性HBV感染有不同的感 染状态：有的表示病毒复制已静息，但无抗HBe应答； 有的病毒复制一时减少，HBeAg消失后可再现。
研究Dane颗粒DNA结构发现，DNA分子含有约3，200个核苷酸。 它包括两个链；一个长度固定的负链和另一长度不定的正链。由 于DNA生物合成是在多聚酶作用DNA引物生长末端3′－OH与加入 的脱氧核苷酸的5'-磷酸基形成磷酸二脂键完成的，因此，链的增 生按5'-3'顺序进行，而且加到链上的每种脱氧核苷酸是按模板 DNA的碱基配对互补规律进行，长链在1,800或1,818核苷酸附近 有一个制品。
慢性HBV感染临床诊断小结
携带者
慢性乙肝
隐匿性慢性乙 肝
乙肝 肝硬化
乙肝相关肝 癌
HBeAg+ 乙肝
HBeAg乙肝
代偿期
失代偿期
HBV携带 者(HBV DNA+)
非活动性 HBsAg携带者 (HBV DNA－)
轻、中、重
活动期和静止期
HBV的复制过程
HBV DNA 聚合酶
e cap
3.5kb
RNA pregenome
浅谈乙肝两对半
乌海市海勃湾区中医院检验科
李俊琦
乙肝两对半的最初来由
。。。
Blumberg 于1965年在澳大利亚土著人 血清中发现澳大利亚抗原 (表面抗原）.
HBV在我国感染率及发病率均高. 乙肝病毒两对半是我国约定俗成的俗称，国际上统称乙型肝炎病 毒血清标志。
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的 结构
8是一个完整的乙肝颗粒是一个完整的乙肝病毒颗粒存在于乙肝病毒携带者或乙病毒颗粒存在于乙肝病毒携带者或乙肝病人的血清或肝细胞中它只能在电肝病人的血清或肝细胞中它只能在电子显微镜下才能被看到临床上我们检子显微镜下才能被看到临床上我们检测乙肝病毒的抗原抗体以及它的测乙肝病毒的抗原抗体以及它的dna来判断是否感染了来判断是否感染了hbvlhbvhbv属嗜肝脱氧核糖核酸病毒其完整的病毒颗粒即属嗜肝脱氧核糖核酸病毒其完整的病毒颗粒即danedane颗粒直径颗粒直径4242nmnm
这个家族中的病毒成员除了对具体的器官具有特异性，它们对寄 主也同样有“种族要求”，比如HBV就只对人和猩猩有易感性。 乙型肝炎病毒（HBV）为专一的嗜肝病毒，HBV感染者血清经电 镜检查有3种病毒颗粒：①Dane颗粒（HBV颗粒），外壳蛋白为 HBsAg，核心含有HBV-DNA及HBVDNAp（DNA-多聚酶）、HBcAg、 HBeAg；②小球形颗粒；③管形颗粒。

在AsC，HBeAg是免疫耐受的调节因子，在感染的 较前阶段HBeAg持续存在，是免疫耐受的高感染低 应答期。 前C区或C基因启动子变异可导致HBeAg阴性而事实 上HBVDNA存在复制。40%肝炎为HBeAg阴性的慢性 乙型肝炎。

HBV的抗原抗体系统HBeAg和抗HBe2
抗HBe（+）：部分保护性抗体；是HBV感染病毒复
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的 结构
Dane’s 颗粒 小球形颗粒 管形颗粒
HBV属嗜肝脱氧核糖核酸病毒，其完整的病毒颗粒 （即 Dane 颗粒）直径42nm。包括二部分：1、包膜 蛋白即乙型肝炎表面抗原(HBsAg) ，在肝细胞内合成， 大量释放于血循环中，其本身只有抗原性而无感染性。 2、核心部分：包括双股环状DNA，DNA聚合酶 （DNA-P），核心抗原及E抗原，为病毒复制的主体， 有传染性。