养鱼塘水中叶绿素a的测定

养鱼塘水中叶绿素a的测定
孔琪
摘要测定叶绿素a的仪器和方法有许多种，分光光度法测定叶绿素a是一简便易行的测定方法，水样经离心或过滤浓缩、研磨、丙酮提取后，定容，取上清液分别测量750nm、645nm、663nm、652nm等几个波长下的吸光度值，根据经验公式可分别计算出叶绿素a含量
关键词分光光度法叶绿素a
前言叶绿素作为水生态系统中主要初级生产者一浮游植物的生物量和生产力的指标,具有测定方便快速和重复性好等优点.在水生生物学研究,水质评价和富营养化水体的调查研究中,叶绿素既作为生态系统结构指标,又作为功能指标被广泛使用.叶绿素在红光(600nm以上)区域有吸收波长极值,因而用分光光度法可以测定叶绿素的含量
1 试验部分
1.1主要仪器与试剂
90%丙酮溶液，2mol/LHcl；10mL具塞小试管 1cm玻璃比色皿，滤纸玻璃纤维滤膜，可见分光光度计
1.2实验步骤
1.2.1水样处理：所取的水样应往湖中间点不能去表面水样，水样中如有大的微粒，可用搅拌器搅拌2～3 min，以至混合均匀。

1.2.2 将100~500mL水样经玻璃纤维滤膜过滤，记录过滤水样的体积。

将滤纸卷成香烟状，放入小瓶或离心管。

加10mL或足以使滤纸淹没的90％丙酮液，记录体积，塞住瓶塞，并在4℃下暗处放置4h。

如有浑浊，可离心萃取。

将一些萃取液倒入1cm玻璃比色皿，加比色皿盖，以试剂空白为参比，分别在波长665nm和750nm处测其吸光度。

1.2.3 加滴2mol/L盐酸于上述两只比色皿中，混均并放置1min，再在波长665nm和750nm 处测定吸光度。

2 结果与讨论
2.1结果处理酸化前： A=A665-A750
酸化后： A a=A665a-A750a
在665 nm处测得吸光度减去750 nm处测得值是为了校正浑浊液。

用下式计算叶绿素- a的浓度（μg/L）：
2.2计算：叶绿素-a=29*（0.01+0.05）*12/200=0.1044μg/L
3结论
3.1池塘水中的叶绿素-a含量为0.1044μg/L.
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