实践四、维生素B12的含量测定

含量。
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三、实验原理
结构特点：含钴的卟啉类化合物 临床用途：控制恶性贫血 性状：红色晶体物质
在361nm有最大吸收。 可以采用紫外分光光度法测 定含量。
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三、ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ验原理
吸光系数法
1、配制待测溶液，计算配制浓度的百分浓度Cx；
2、以溶剂作为空白参比，测定待测溶液的吸光度Ax；
3
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数据处理
E = 1% 1cm（样）
Ax Cxl
=
Ax 0.0025 1
%

EE1111cc%%mm（ （样 标） ）100%=
E1% 1cm（样） 207
=
Ax
100%
0.0025 207
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3、计算待测溶液的吸收系数
E = 1% 1cm（样品）
Ax Cx
4、计算含量
w%
E1% 1cm（样品）
E1% 1cm（标准）
已知E11c%m（标）=207
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四、实践步骤
• 1、维生素B12样品溶液的配制：
准备0.5mg/ml 注射液
取5.00ml
定容至100ml
C样

0.5mg/ml 5.00ml 100.00ml
=0.0025g/100ml
• 2、以纯化水为参比，测定样品溶液的吸光度
• 3、计算样品含量
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四、实践步骤
• 3、计算样品含量
E = 1% 1cm（样）
Ax Cxl
=
Ax 0.0025 1
%

EE1111cc%%mm（ （样 标） ）100%=
E1% 1cm（样） 207
=
Ax
100%
0.0025 207
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注意事项
• 1、维生素B12有不同的规格，稀释倍数根 据实际含量来定。
• 2、移取溶液时注意移液管的润洗。
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实践记录
数据记录
样品名称
所用仪器 型号
样品溶液配 制过程
测定序号 1
吸光度A
吸光度 平均值
结果：含量=
检验日期 检测波长
2
实践四 维生素B12的含量测定
任课教师：甘淋玲
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一、实验目的
• 1、掌握紫外-可见分光光度计的使用方 法；
• 2、熟悉用吸光系数法进行样品溶液的含 量分析。
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二、实验内容
• 1、配制维生素B12样品溶液； • 2、利用紫外-可见分光光度计测定样品
溶液吸光度值A。 • 3、用吸光系数法计算维生素B12注射液的