大鼠膀胱原代上皮细胞的提取方法

大鼠膀胱原代上皮细胞的提取方法
1. 准备工具和试剂：灭菌的手术刀、拉伸器、灭菌的差压离心管、
灭菌的组织绞磨器、PBS、胰酶（如Trypsin）、DNA酶（如DNase I）、
糖酶（如Hyaluronidase）。

2.大鼠膀胱的制备：选取健康成年大鼠，进行皮肤消毒和麻醉，通过
腹腔镜技术将大鼠膀胱取出，立即置于含PBS的离心管中。

3.上皮细胞的剥离：将膀胱置于无菌环境下，用手术刀将膀胱表面的
肿块、结石、血块等杂质切除，并清除黏膜层。

然后用拉伸器将膀胱上皮
层轻轻拉伸，用剪刀将上皮层细胞剪下并放入含有胰酶、DNA酶、糖酶的PBS溶液中，转移至组织绞磨器，用绞磨器处理细胞，得到细胞悬液。

4.细胞离心：离心细胞悬液10-20分钟，分离细胞上清液和细胞沉淀。

5.上皮细胞的筛选：将上清液过滤筛选或用差压离心分离上皮细胞。

6.细胞贴壁培养：将上皮细胞以适当密度接种于含有培养基和适当培
养条件的培养皿中，放入培养箱培养。