实验四、革兰氏染色
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实验四、革兰氏染色
革兰氏染色是一种常用于细菌分类和鉴定的染色方法。
该方法分为革兰氏阳性染色和
革兰氏阴性染色两种。
革兰氏染色的原理是根据细菌细胞壁的结构差异来进行染色。
革兰
氏阳性菌细胞壁主要由厚的层状胞壁和内层的细胞质膜构成,可以被革兰氏染色液染成紫色。
而革兰氏阴性菌细胞壁由较薄的胞壁和外层的膜双层构成,不能被革兰氏染色液染色,需加上其他染色剂才可以被显色。
革兰氏染色方法的操作步骤如下:
1.准备好需要染色的细菌培养物,一般建议使用18-24小时老化充分的培养物。
2.将菌液滴于玻片上,覆盖薄片后在空气中晾干。
3.用火将玻片送入火焰中进行加温灭菌,使菌落固定于玻片上。
注意火力不要太大,
以免将菌落烧焦。
4.将玻片放入革兰氏染色液中,静置1分钟。
5.用蒸馏水冲洗玻片,使多余的染色液流失。
6.加上碘液,静置1分钟。
8.将玻片放入96%乙醇或酒精醋酸液中,静置数秒钟至10秒钟。
10.将玻片放入甲苯中干燥。
11.观察染色结果,革兰氏阳性菌呈紫色,革兰氏阴性菌呈红色。
革兰氏染色适用于大多数细菌的分类和鉴定。
通过观察菌落的形态、大小、色泽、透
明度、光泽等特征,再结合革兰氏染色的结果,可以对细菌进行初步鉴定。
革兰氏染色还
可以用于临床检测,如分离出的尿液、呕吐物、血液等可通过革兰氏染色结果初步判断细
菌是否存在。
革兰氏染色对于细菌形态学和生理学的研究具有重要意义,但也有一些缺点。
例如,
一些细菌在革兰氏染色中难以区分其是否为革兰氏阴性菌,此时需要结合其他的鉴定方法
进行辅助鉴定。
此外,革兰氏染色只能在细菌培养物中进行,无法对非细菌生物或生长周
期长的菌种进行染色。
此时需要采用其他的染色方法或者细胞学技术。
总之,革兰氏染色是一种方便、简单、易于操作的染色方法,是细菌形态学研究和临
床检测的常用方法之一。