自由基清除剂及其加工技术课件
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超氧化物歧化酶的制备 原料 动物：牛血、猪血、马血、兔血、蛋黄、 鸭血、猪肝、牛乳等； 植物：剌梨、大蒜、小白菜、饭豆等； 微生物：酵母菌。
沉淀法 热稳定性好，温度低于80℃，短时间热处理酶活力损失不大，一般杂蛋白在高于55℃易变性沉淀。 酶蛋白在等电点时，溶液中的静电荷为零，酶蛋白的溶解度最小而沉淀下来。
抗衰老作用 提高SOD活性，减低细胞的脂质过氧化物，延缓肌脂褐素形成，起抗衰老延寿作用。 抗辐射作用 抗癌作用 消炎、抑菌及抗病毒作用 没食子酸酯有抑制伤寒、副伤寒、霍乱和痢疾
维持正常血管功能 防龋齿作用 有杀死龋齿细菌。
茶多酚的制备工艺 沉淀萃取法提取 水溶液将茶多酚浸提； 利用茶多酚能与Bi2+、Ca2+、Hg2+、Sb3+等金属离子产生络合沉淀，将茶多酚从含茶多酚的水浸提液中分离出来； 用酸转溶，用乙酸乙酯抽提。
酵母发酵法 酵母菌种进行摇瓶培养； 离心收集菌体，悬浮于磷酸钾缓冲液中，超声波破壁，离心除去残渣，得粗酶提取液； 经盐析和柱层析得酵母SOD。
第一节 自由基清除剂种类和作用机理
自由基的概念及其对人体的影响 任何包含一个或多个未成对电子并能独立存在的原子或基团。 氢自由基、超氧阴离子、羟自由基、烷氧基、氢过氧基、单线态氧。 过氧化氢是活性氧，有高反应性，可促进自由基生成，称自由基关联物质。
氧的损伤 氧分子轨道有两个未成对电子，很易转变为自由基或活性氧。 氧化应激 生物体内氧化与抗氧化失去平衡。 氧化应激原因 营养不良造成膳食抗氧化剂耗竭；活性氧自由基产生过多。
减压蒸馏法 水中有一定溶解度，易溶于甲醇、乙醇、醋酸乙酯等有机溶剂。 用热水浸提出多糖、脂类及黄酮类化合物等可溶性成分，再用有机物溶剂进一步提纯。
树脂柱纯化法 离子交换树脂是一种不溶性高分子物质，对溶液中的离子具有选择吸附能力; 适宜的树脂，极性相近的黄酮类被吸附在树脂柱内，得到富集、纯化，用洗脱剂洗脱。
糕点食品中 面包、饼干、桃酥、羊羹、云片等。 添加量：茶多酚150~200mg/mg食品 茶膳中 茶叶挂面、茶叶汤面、茶叶馒头、茶叶紫菜浇饭
第四节 超氧化物歧化酶
超氧化物歧化酶的基本特性及生理功 超氧化物歧化酶的组成和分类 Cu,Zn-SOD， 绿色； Mn-SOD，紫色； Fe-SOD，黄褐色。
碱提取酸沉淀法 黄酮苷类不溶于酸性水，易溶于碱性水; 在提取液中加酸，黄酮苷类即可沉淀析出。 简便易行，如芦丁、橙皮苷、黄芩苷的提取。
超声波提取 破坏植物细胞壁，使细胞内有效成分大量溶于有机溶剂，提高提取效率。 超临界CO2提取
黄酮类化合物的应用 植物提取液直接制取功能食品。 提取液经浓缩、分离纯化、干燥，制取高纯度的黄酮化合物，用于食品抗氧化剂和制造功能食品。 饮料中应用 葛根黄酮功能饮料：20~30倍的水量浸提；
抗菌及抗病毒作用 木犀草素、黄芩素有抗菌作用。 解痉作用 解除平滑肌痉挛作用，如异甘草素、黄豆甘原。
黄酮类化合物的制备工艺 原料 豆类：大豆； 水果类：山楂、葡萄柚、蔷薇果、柑桔、柠檬、红桔、樱桃、李； 蔬菜类：花茎甘蓝、洋葱、番茄； 沙棘、茶叶、葡萄酒、蜂蜜、啤酒、咖啡；
抗癌作用 致癌物(苯、苯并芘、亚硝基化合物)，由惰性物经生物转化成的高活性物质，能破坏细胞结构，引发疾病，转化中产生一些自由基中间物，进一步形成活性很强的羟基自由基和单线态氧，引发癌症。 黄酮类化合物作为寻找有效抗癌活性物质。
抗炎作用 具有抗病原微生物、抗炎症、抗感染作用。 保护肝脏作用 能促进组织再生，修复内脏器官的病变组织。 调节内分泌功能 植物激素——异黄酮，具有抗雌激素作用。
提取工艺流程 罗汉果→粉碎、过目→一定量的原料加溶剂酶解→过滤→一次提取物→浓缩→乙醇沉淀→石油醚萃取→乙酸乙酯萃取→罗汉果黄酮类物质 对酶解温度、酶解时间、酶的浓度及pH等影响因素进行四因素三水平的正交试验。
无水乙醇沉淀除去溶液中的多糖、蛋白质等大分子物质，石油醚为萃取剂除去溶液中的脂溶性色素等，乙酸乙酯可萃取出罗汉果黄酮。 用正交试验确定无水乙醇、石油醚、乙酸乙酯的用量，确定分离纯化的工艺条件。
纤维酶酶解条件的正交因素表
水平
A
B
C
D
酶解温度/℃
酶浓度/( U/mL)
pH值
酶解时间/min
1
65
30
4.9
50
2
70
50
5.2
80
3
75
70
5.5
110
编号
A
B
C
D
得率g.100g-1)
1
1
1
1
1
2.010
2
1
2
2
2
3.610
3
1
3
3
3
1.942
4
2
1
2
3
1.323
5
2
2
3
1
1.470
罗汉果的果实和叶含有罗汉果三萜皂苷，还含有大量的果糖、黄酮类化合物、十多种人体必需氨基酸、脂肪酸、维生素C、微量元素等。 酶法提取：根据植物药材细胞壁的构成，利用酶反应所具有的高度专一性等特点，选择相应的酶，将细胞壁的组成成分水解或降解，破坏细胞壁的结构，使有效成分充分暴露出来，溶解、混悬或胶溶于溶剂中，达到提取细胞内有效成分的目的的提取方法。
粗酶溶液中加入一些弱极性有机溶剂（丙酮），改变溶液的介电常数，使不同种类的蛋白质的溶解度产生不同程度的下降； 可以把超氧化物歧化酶和其他的杂蛋白分开。
离子交换层析法 离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行。 等电点在4~6之间，pH>7.0时带负电，能被阴离子交换剂吸附， 根据离子交换剂对蛋白质结合力差异，用具有一定离子强度流动相进行洗脱，就可和其他杂蛋白分开。经透析，冷冻干燥。
第二节 黄酮类化合物
黄酮类化合物的结构及生理功能 黄酮类化合物的结构 基本母核：2-苯基色原酮类化合物； 黄酮、黄酮醇，人体每天从食物中摄取可达1g； 二氢黄酮、二氢黄酮醇类、异黄酮、二氢异黄酮、双黄酮类、查尔酮类、橙酮类、黄烷醇类、花青素、新黄酮类。
黄酮类化合物的生理功能 清除自由基 与超氧阴离子反应阻止自由基反应的引发，与铁离子络合阻止羟基自由基的生成，与脂质过氧化基反应阻止脂质过氧化过程。
6
2
3
1
3.302
7
3
1
3
5.313
8
3
2
1
3.119
9
3
3
2
6.123
K1
15.586
12.630
10.726
K2
12.753
15.145
16.059
K3
16.843
17.407
18.395
极差
4.090
4.778
7.669
乙酸乙酯用量的影响最大。 各影响因素的作用强度依次为：乙酸乙酯>石油醚>乙醇。
第三节 茶多酚
茶多酚的结构及其生理功能 茶多酚的结构 儿茶素类、黄酮、黄酮醇、花青素酚酸、缩酚酸。 儿茶素类化合物，占茶多酚总量70%。
茶多酚的生理功能 清除自由基、增强机体免疫力 当L-表没食子儿茶素没食子酸酯浓度为0.006mg/ml，对超氧阴离子消除率达98%；当浓度为0.1mg/ml，对羟自由基消除率达99.9%。
提取物的紫外光谱分析
在250nm、320nm处均有吸收峰，在黄酮类化合物紫外吸收范围内，所得的产物为罗汉果黄酮类化合物。 该方法的提取率要比一般的提取方法的提取率高。
传统的提取方法，温度高，收率低，成本高，消耗大量的溶剂，会造成对环境的污染。 酶制剂具有专一性、特异性，在常温、常压条件下就能起催化作用，能有效地提高植物药中的有效成分的含量，减少污染物的排放，能真正实现“绿色中药工业”。
抗氧化酶 能清除活性氧的酶。 非酶类清除剂 抗氧化剂：食品和药物中的抗氧化成分； 自由基清除剂：能清除自由基实现抗氧化作用的物质；
自由基清除剂只有在足够浓度时才起作用； 清除剂只有在产生自由基的位置附近才能起作用； 清除剂与自由基反应后本身会成为新自由基，这个新自由基的毒性应小于原来的才能起防护作用。
自由基处于产生与清除的动态平衡 体内物质和能量的转化（氨基酸的氧化等）；维持在一个适当水平（破坏细胞结构）。 自由基引发并参与脂质过氧化作用。 改善膳食（减少脂肪、增加水果蔬菜和谷物），食物抗氧化剂的积累，延迟或预防疾病。
自由基清除剂的种类和作用机理 能清除体内自由基或能阻断自由基参与氧化反应的物质。 非酶类清除剂 抗氧化剂（VE、VC、胡萝卜素、还原型谷胱甘肽）。 酶类清除剂 抗氧化酶（超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化酶）。
调节免疫功能 增强巨噬细胞吞噬能力和自然杀伤细胞活性； 增加抗体产量，调节体液免疫功能和细胞免疫功能； 通过血脑屏障吸收活性自由基，起抗衰老作用。
保护心血管系统 能影响血管的脆性和渗透性，改善血液循环状态，增加寇脉流量； 选择性地与血管壁上的血栓结合，起抗血栓形成作用； 防治血管老化和脑血管供血不足作用；
亲和层析 把对SOD具有识别能力的配体Cu2+以共价键的方式固化到含有活化基团基质如壳聚糖上，然后装入层析柱； SOD粗酶液通过该柱量，由于静电引力，结构互补效应等作用使其被吸附，而无亲和力或非特异吸附的物质被起始缓冲液洗涤出来。
改变起始缓冲液的pH，或增加离子强度，或加入抑制剂等； 把SOD解离下来。 这一操作可把SOD和杂蛋白分开。
盐析法和金属螯合亲和层析法 盐的浓度增高到一定数值时，水活度降低； 蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏； 引起蛋白质分子间相互聚集从溶液中析出。 一定浓度范围的盐浓度(如1%~25%饱和度硫酸铵)，使部分杂质呈“盐析”(沉淀)状液，选择一定浓度范围的盐浓度(如25%~60%饱和度的盐溶液)； 使SOD呈盐析状态，另一部分杂质呈盐溶状态； 离心收集的沉淀为初步分离制备的SOD。
精制后的产品，添加入果汁中，再调配。 焙烤食品的应用 面包、桃酥等。 小吃食品的应用 冰淇淋、绿豆糊、黑米糊等。 其他食品中的应用 奶粉、糖果、植物油等。
酶解-溶剂法提取罗汉果中黄酮类物质 研究酶法与溶剂提取相结合提取罗汉果中黄酮类化合物的工艺条件； 通过正交试验找出纤维素酶法及溶剂提取的最佳工艺条件。
6
2
3
1
2
1.148
7
3
1
3
2
1.207
8
3
2
1
3
0.769
9
3
3
2
1
1.129
K1
2.521
3.600
2.889
3.680
K2
4.564
3.797
4.043
3.929
K3
3.593
3.283
3.748
3.071
极差
1.486
0.543
0.711
0.644
酶解温度影响最大。 各影响因素的作用强度依次为：A>C>D>B。
溶剂提取条件的正交因素表
水平
a
b
c
乙醇:粗提液 /体积比
石油醚:粗提液 /体积比
乙酸乙酯:粗提液 /体积比
1
1:28
1:1
1:1
2
1:18
2:1
2:1
3
1:8
3:1
3:1
编号
a
b
c
得率/(g.100g-1)
1
1
1
1
2.847
2
1
2
2
5.002
3
1
3
3
5.616
4
2
1
2
2.752
5
2
2
3
4.963
超氧化物歧化酶的主要理特性 等电点pH4~6，偏酸性，酸性蛋白； 对热、pH和蛋白水解酶的稳定性好。
超氧化物歧化酶的物化特性和生理功能 延缓由于自由基侵害引起的衰老现象 自由基引起机体衰老的机制： 生物大分子的交联聚合和脂褐素积累； 器官组织细胞的死亡和癌变； 免疫力降低。
治疗由自由基损伤而诱发的疾病 消除肌肉疲劳 提高人体的抵抗力
溶剂萃取法 利用茶多酚及其杂质在不同溶剂中溶解度的不同； 用溶剂去杂或抽提。
粗制品的纯化 粗制品溶于水，用乙醚萃取，乙醚层减压回收，干燥即得较纯茶多酚； 水层用乙酸乙酯反复萃取，除去水层，收集乙酸乙酯层； 将乙酸乙酯溶液层减压低温浓缩，干燥，得茶多酚初级氧化聚合物。
茶多酚的应用 饮料 茶叶软饮料、发酵酒饮料等。 茶多酚添加量为250mg/mL。 小吃食品 冷冻制品（雪糕、冰淇淋）；糖果（硬糖、奶糖、水果糖、口香糖）。
沉淀法 热稳定性好，温度低于80℃，短时间热处理酶活力损失不大，一般杂蛋白在高于55℃易变性沉淀。 酶蛋白在等电点时，溶液中的静电荷为零，酶蛋白的溶解度最小而沉淀下来。
抗衰老作用 提高SOD活性，减低细胞的脂质过氧化物，延缓肌脂褐素形成，起抗衰老延寿作用。 抗辐射作用 抗癌作用 消炎、抑菌及抗病毒作用 没食子酸酯有抑制伤寒、副伤寒、霍乱和痢疾
维持正常血管功能 防龋齿作用 有杀死龋齿细菌。
茶多酚的制备工艺 沉淀萃取法提取 水溶液将茶多酚浸提； 利用茶多酚能与Bi2+、Ca2+、Hg2+、Sb3+等金属离子产生络合沉淀，将茶多酚从含茶多酚的水浸提液中分离出来； 用酸转溶，用乙酸乙酯抽提。
酵母发酵法 酵母菌种进行摇瓶培养； 离心收集菌体，悬浮于磷酸钾缓冲液中，超声波破壁，离心除去残渣，得粗酶提取液； 经盐析和柱层析得酵母SOD。
第一节 自由基清除剂种类和作用机理
自由基的概念及其对人体的影响 任何包含一个或多个未成对电子并能独立存在的原子或基团。 氢自由基、超氧阴离子、羟自由基、烷氧基、氢过氧基、单线态氧。 过氧化氢是活性氧，有高反应性，可促进自由基生成，称自由基关联物质。
氧的损伤 氧分子轨道有两个未成对电子，很易转变为自由基或活性氧。 氧化应激 生物体内氧化与抗氧化失去平衡。 氧化应激原因 营养不良造成膳食抗氧化剂耗竭；活性氧自由基产生过多。
减压蒸馏法 水中有一定溶解度，易溶于甲醇、乙醇、醋酸乙酯等有机溶剂。 用热水浸提出多糖、脂类及黄酮类化合物等可溶性成分，再用有机物溶剂进一步提纯。
树脂柱纯化法 离子交换树脂是一种不溶性高分子物质，对溶液中的离子具有选择吸附能力; 适宜的树脂，极性相近的黄酮类被吸附在树脂柱内，得到富集、纯化，用洗脱剂洗脱。
糕点食品中 面包、饼干、桃酥、羊羹、云片等。 添加量：茶多酚150~200mg/mg食品 茶膳中 茶叶挂面、茶叶汤面、茶叶馒头、茶叶紫菜浇饭
第四节 超氧化物歧化酶
超氧化物歧化酶的基本特性及生理功 超氧化物歧化酶的组成和分类 Cu,Zn-SOD， 绿色； Mn-SOD，紫色； Fe-SOD，黄褐色。
碱提取酸沉淀法 黄酮苷类不溶于酸性水，易溶于碱性水; 在提取液中加酸，黄酮苷类即可沉淀析出。 简便易行，如芦丁、橙皮苷、黄芩苷的提取。
超声波提取 破坏植物细胞壁，使细胞内有效成分大量溶于有机溶剂，提高提取效率。 超临界CO2提取
黄酮类化合物的应用 植物提取液直接制取功能食品。 提取液经浓缩、分离纯化、干燥，制取高纯度的黄酮化合物，用于食品抗氧化剂和制造功能食品。 饮料中应用 葛根黄酮功能饮料：20~30倍的水量浸提；
抗菌及抗病毒作用 木犀草素、黄芩素有抗菌作用。 解痉作用 解除平滑肌痉挛作用，如异甘草素、黄豆甘原。
黄酮类化合物的制备工艺 原料 豆类：大豆； 水果类：山楂、葡萄柚、蔷薇果、柑桔、柠檬、红桔、樱桃、李； 蔬菜类：花茎甘蓝、洋葱、番茄； 沙棘、茶叶、葡萄酒、蜂蜜、啤酒、咖啡；
抗癌作用 致癌物(苯、苯并芘、亚硝基化合物)，由惰性物经生物转化成的高活性物质，能破坏细胞结构，引发疾病，转化中产生一些自由基中间物，进一步形成活性很强的羟基自由基和单线态氧，引发癌症。 黄酮类化合物作为寻找有效抗癌活性物质。
抗炎作用 具有抗病原微生物、抗炎症、抗感染作用。 保护肝脏作用 能促进组织再生，修复内脏器官的病变组织。 调节内分泌功能 植物激素——异黄酮，具有抗雌激素作用。
提取工艺流程 罗汉果→粉碎、过目→一定量的原料加溶剂酶解→过滤→一次提取物→浓缩→乙醇沉淀→石油醚萃取→乙酸乙酯萃取→罗汉果黄酮类物质 对酶解温度、酶解时间、酶的浓度及pH等影响因素进行四因素三水平的正交试验。
无水乙醇沉淀除去溶液中的多糖、蛋白质等大分子物质，石油醚为萃取剂除去溶液中的脂溶性色素等，乙酸乙酯可萃取出罗汉果黄酮。 用正交试验确定无水乙醇、石油醚、乙酸乙酯的用量，确定分离纯化的工艺条件。
纤维酶酶解条件的正交因素表
水平
A
B
C
D
酶解温度/℃
酶浓度/( U/mL)
pH值
酶解时间/min
1
65
30
4.9
50
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5.2
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70
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编号
A
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C
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得率g.100g-1)
1
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罗汉果的果实和叶含有罗汉果三萜皂苷，还含有大量的果糖、黄酮类化合物、十多种人体必需氨基酸、脂肪酸、维生素C、微量元素等。 酶法提取：根据植物药材细胞壁的构成，利用酶反应所具有的高度专一性等特点，选择相应的酶，将细胞壁的组成成分水解或降解，破坏细胞壁的结构，使有效成分充分暴露出来，溶解、混悬或胶溶于溶剂中，达到提取细胞内有效成分的目的的提取方法。
粗酶溶液中加入一些弱极性有机溶剂（丙酮），改变溶液的介电常数，使不同种类的蛋白质的溶解度产生不同程度的下降； 可以把超氧化物歧化酶和其他的杂蛋白分开。
离子交换层析法 离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行。 等电点在4~6之间，pH>7.0时带负电，能被阴离子交换剂吸附， 根据离子交换剂对蛋白质结合力差异，用具有一定离子强度流动相进行洗脱，就可和其他杂蛋白分开。经透析，冷冻干燥。
第二节 黄酮类化合物
黄酮类化合物的结构及生理功能 黄酮类化合物的结构 基本母核：2-苯基色原酮类化合物； 黄酮、黄酮醇，人体每天从食物中摄取可达1g； 二氢黄酮、二氢黄酮醇类、异黄酮、二氢异黄酮、双黄酮类、查尔酮类、橙酮类、黄烷醇类、花青素、新黄酮类。
黄酮类化合物的生理功能 清除自由基 与超氧阴离子反应阻止自由基反应的引发，与铁离子络合阻止羟基自由基的生成，与脂质过氧化基反应阻止脂质过氧化过程。
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3.302
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3.119
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6.123
K1
15.586
12.630
10.726
K2
12.753
15.145
16.059
K3
16.843
17.407
18.395
极差
4.090
4.778
7.669
乙酸乙酯用量的影响最大。 各影响因素的作用强度依次为：乙酸乙酯>石油醚>乙醇。
第三节 茶多酚
茶多酚的结构及其生理功能 茶多酚的结构 儿茶素类、黄酮、黄酮醇、花青素酚酸、缩酚酸。 儿茶素类化合物，占茶多酚总量70%。
茶多酚的生理功能 清除自由基、增强机体免疫力 当L-表没食子儿茶素没食子酸酯浓度为0.006mg/ml，对超氧阴离子消除率达98%；当浓度为0.1mg/ml，对羟自由基消除率达99.9%。
提取物的紫外光谱分析
在250nm、320nm处均有吸收峰，在黄酮类化合物紫外吸收范围内，所得的产物为罗汉果黄酮类化合物。 该方法的提取率要比一般的提取方法的提取率高。
传统的提取方法，温度高，收率低，成本高，消耗大量的溶剂，会造成对环境的污染。 酶制剂具有专一性、特异性，在常温、常压条件下就能起催化作用，能有效地提高植物药中的有效成分的含量，减少污染物的排放，能真正实现“绿色中药工业”。
抗氧化酶 能清除活性氧的酶。 非酶类清除剂 抗氧化剂：食品和药物中的抗氧化成分； 自由基清除剂：能清除自由基实现抗氧化作用的物质；
自由基清除剂只有在足够浓度时才起作用； 清除剂只有在产生自由基的位置附近才能起作用； 清除剂与自由基反应后本身会成为新自由基，这个新自由基的毒性应小于原来的才能起防护作用。
自由基处于产生与清除的动态平衡 体内物质和能量的转化（氨基酸的氧化等）；维持在一个适当水平（破坏细胞结构）。 自由基引发并参与脂质过氧化作用。 改善膳食（减少脂肪、增加水果蔬菜和谷物），食物抗氧化剂的积累，延迟或预防疾病。
自由基清除剂的种类和作用机理 能清除体内自由基或能阻断自由基参与氧化反应的物质。 非酶类清除剂 抗氧化剂（VE、VC、胡萝卜素、还原型谷胱甘肽）。 酶类清除剂 抗氧化酶（超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化酶）。
调节免疫功能 增强巨噬细胞吞噬能力和自然杀伤细胞活性； 增加抗体产量，调节体液免疫功能和细胞免疫功能； 通过血脑屏障吸收活性自由基，起抗衰老作用。
保护心血管系统 能影响血管的脆性和渗透性，改善血液循环状态，增加寇脉流量； 选择性地与血管壁上的血栓结合，起抗血栓形成作用； 防治血管老化和脑血管供血不足作用；
亲和层析 把对SOD具有识别能力的配体Cu2+以共价键的方式固化到含有活化基团基质如壳聚糖上，然后装入层析柱； SOD粗酶液通过该柱量，由于静电引力，结构互补效应等作用使其被吸附，而无亲和力或非特异吸附的物质被起始缓冲液洗涤出来。
改变起始缓冲液的pH，或增加离子强度，或加入抑制剂等； 把SOD解离下来。 这一操作可把SOD和杂蛋白分开。
盐析法和金属螯合亲和层析法 盐的浓度增高到一定数值时，水活度降低； 蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏； 引起蛋白质分子间相互聚集从溶液中析出。 一定浓度范围的盐浓度(如1%~25%饱和度硫酸铵)，使部分杂质呈“盐析”(沉淀)状液，选择一定浓度范围的盐浓度(如25%~60%饱和度的盐溶液)； 使SOD呈盐析状态，另一部分杂质呈盐溶状态； 离心收集的沉淀为初步分离制备的SOD。
精制后的产品，添加入果汁中，再调配。 焙烤食品的应用 面包、桃酥等。 小吃食品的应用 冰淇淋、绿豆糊、黑米糊等。 其他食品中的应用 奶粉、糖果、植物油等。
酶解-溶剂法提取罗汉果中黄酮类物质 研究酶法与溶剂提取相结合提取罗汉果中黄酮类化合物的工艺条件； 通过正交试验找出纤维素酶法及溶剂提取的最佳工艺条件。
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K1
2.521
3.600
2.889
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K2
4.564
3.797
4.043
3.929
K3
3.593
3.283
3.748
3.071
极差
1.486
0.543
0.711
0.644
酶解温度影响最大。 各影响因素的作用强度依次为：A>C>D>B。
溶剂提取条件的正交因素表
水平
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乙醇:粗提液 /体积比
石油醚:粗提液 /体积比
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3
1:8
3:1
3:1
编号
a
b
c
得率/(g.100g-1)
1
1
1
1
2.847
2
1
2
2
5.002
3
1
3
3
5.616
4
2
1
2
2.752
5
2
2
3
4.963
超氧化物歧化酶的主要理特性 等电点pH4~6，偏酸性，酸性蛋白； 对热、pH和蛋白水解酶的稳定性好。
超氧化物歧化酶的物化特性和生理功能 延缓由于自由基侵害引起的衰老现象 自由基引起机体衰老的机制： 生物大分子的交联聚合和脂褐素积累； 器官组织细胞的死亡和癌变； 免疫力降低。
治疗由自由基损伤而诱发的疾病 消除肌肉疲劳 提高人体的抵抗力
溶剂萃取法 利用茶多酚及其杂质在不同溶剂中溶解度的不同； 用溶剂去杂或抽提。
粗制品的纯化 粗制品溶于水，用乙醚萃取，乙醚层减压回收，干燥即得较纯茶多酚； 水层用乙酸乙酯反复萃取，除去水层，收集乙酸乙酯层； 将乙酸乙酯溶液层减压低温浓缩，干燥，得茶多酚初级氧化聚合物。
茶多酚的应用 饮料 茶叶软饮料、发酵酒饮料等。 茶多酚添加量为250mg/mL。 小吃食品 冷冻制品（雪糕、冰淇淋）；糖果（硬糖、奶糖、水果糖、口香糖）。