如何清洁验证

3、如何选择目标化合物
选择了目标化合物之后，我们来解决第二个问题： 3.2 我们的可接受标准是多少？
按第一种方式来计算
➢残留物浓度限度：10mg/kg，即10ppm；
计算公式：
先生产品种可接受残留量=10mg/kg ×下一品种生产批量
举例：比如先生产产品A，再生产产品B，产品B的批量为M(kg)，则产品A在 产品B中的可接受总残留量=10 ×M（mg）
清洁验证培训
2014年10月
培训内容
1、法规要求? 2、什么是清洁验证？ 3、如何选择目标化合物？ 4、如何取样？ 5、如何检测? 6、如何做定期监测？
1、法规要求
❖ 中国2010版GMP，第一百四十三条 清洁方法应当经过验证，证实其清洁的效果， 以有效防止污染和交叉污染。清洁验证应当综 合考虑设备使用情况、所使用的清洁剂和消毒 剂、取样方法和位置以及相应的取样回收率、 残留物的性质和限度、残留物检验方法的灵敏 度等因素。
➢是否使用了成分比较复杂的清洗剂？（一般用水）
3、如何选择目标化合物
首先我们来解决第一个问题： 3.1 选择哪一个作为我们的目标化合物？第二种情况：
B
共用生产线：品种一次性增加
比如一次性增加A、B、C、D四个品种，见下表格：
3、如何选择目标化合物
首先我们来解决第一个问题： 3.1 选择哪一个作为我们的目标化合物？第三种情况：
1、法规要求
❖ICH Q7： 第12.7 Cleaning Validation
❖WHO GMP : 第12.7 Cleaning Validation(同ICH Q7是一致 的)
1、法规要求
可参考的书籍：
❖ 《制药工艺验证实施手册》（何国强主编，化学工业出版 社出版）
❖ 《药品GMP指南》原料药分册（国家食品药品监督管理局 药品认证管理中心编写，中国医药科技出版社出版）
➢淋洗法的回收率：
我们目前的回收率标准： 不锈钢是多少？ 搪玻璃是多少？ 衬四氟是多少？
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4、如何取样？
➢擦拭法： 优点：能够直接对最难清洁部位取样，能够有效弥补淋洗取样不能取到的 残留物； 缺点：对大的复杂和难以接触区域取样困难。
➢擦拭法的回收率（推荐为不小于50%，推荐做3个浓度，每个浓度做3份计算 RSD）： 我们目前的做法：1个浓度做5份，计算RSD；
举例：先生产产品A，后生产产品B，产品A的最小剂量为2mg，最大日剂量为10mg ，批量为100kg，产品B的最小剂量为5mg，批量为150mg，按照日剂量限度的 计算方式，A产品清洁后的可接受残留总量为？
3、如何选择目标化合物
举例：先生产产品A，后生产产品B，产品A的最小剂量为2mg，最 大日剂量为10mg，批量为100kg，产品B的最小剂量为5mg，最大 剂量为20mg，批量为150kg，按照日剂量限度的计算方式，A产品清
5、如何检测
溶液稳定性
化合物可能在进行分析前发生降解，比如：在样品溶液贮存 的过程中可能发生降解。在这些情况下，方法开发时应考虑被 分析物和标准物质的稳定性。
使用同一份溶液，测定其在预定的时间间隔里产生的结果偏差，以此 来测定溶液的稳定性。
5、如何检测
讨论一个问题： 按照10ppm的计算方式，A的可接受残留仅为1g，淋洗液的体积总共为 10000L，则A的可接受浓度为0.1ppm，已经低于某台液相的检测限？如何
HPLC分析方法验证：
➢ 专属性；
➢ 准确度； ➢ 精密度（重复性、中间精密度）； ➢ 定量限和检测限； ➢ 线性和范围；
➢ 溶液稳定性；
➢ 耐用性；
5、如何检测
定量限和检测限
定量限指试样中的被分析物能够被定量测定的最低量，其测定结 果应具有一定的准确度和精密度。
检测限指试样中的被分析物能够被检测到的最低量，但不一定要准 确定量。
2、什么是清洁验证？
更为合理的方式是：
➢先有验证方案，方案中已经包括了如何进行清洁（即清洁的程序）； ➢根据方案中的清洁描述起草清洁记录（供车间工人使用）； ➢根据方案开展验证； ➢起草验证报告，结束验证； ➢将方案中关于清洁的描述内容剥离，形成清洁程序。
即在进行清洁验证的过程中是没有清洁程序的，按照方案进行清洁 ，但是方案中对清洁的描述是详尽的。
➢TLC ➢TOC ➢UV ➢pH（通常作为辅助） ➢电导率 ➢目视（通常作为辅助）
5、如何检测
清洁验证所采用的分析方法，在清洁验证开始之前应 完成方法学验证。
分析方法验证，代表性的验证原则：ICH Q2
清洁验证中的分析对象是残留物，分析方法的 验证与杂质定量验证的原则相似。
5、如何检测
我们目前采用的仪器分析方法为： HPLC
设备残留的总和。 注：需要在清洁验证中说明设备列表及与其他产品的共用情况，方便清楚的计算。
4、如何取样？
通常有以下几种取样方式 ：
➢淋洗法 ➢擦拭法
➢浸泡法
4、如何取样？
➢淋洗法： 优点：取样面积大，对于不便拆卸的设备能够取到，对擦拭不能擦到的也能够 取到；
缺点：只能基于残留物易于溶解，并且保证设备内表面需要被浸润。 淋洗法得到的样品如在外观上有颜色，有异物，可以直接判定为不合 格，无需检测，所以淋洗法通常先进行目视检查。
3、如何选择目标化合物
选择了目标化合物之后，我们来解决第二个问题： 1、我们的可接受标准是多少？
按第二种方式来计算
➢基于日治疗剂量的限度：生物学活性的限度，即最低日治疗剂量的1/1000
计算公式：
3、如何选择目标化合物
选择了目标化合物之后，我们来解决第二个问题：
3.2 我们的可接受标准是多少？
按第二种方式来计算 ➢基于日治疗剂量的收率标准分别为：
不锈钢是多少？ 搪玻璃是多少？ 衬四氟是多少？
4、如何取样？
➢浸泡法：
主要是适用于如离心机袋、真空袋、收粉袋的清洁后取样。
➢浸泡法的的回收率： 我们目前的回收率标准是多少？不同材质的袋子， 其回收
率都不相同，都需要做。
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5、如何检测
检测的方法一般有：
➢HPLC
需要考虑两个层次的问题： 3.1、选择哪一个作为我们的目标 化合物？ 3.2、目标化合物选择了之后，我 们的可接受标准是多少？
3、如何选择目标化合物
首先我们来解决第一个问题： 3.1 选择哪一个作为我们的目标化合物？ 有以下三种情况：
专用的生产线
A
共用生产线：品种一次性增加 B C
共用生产线：品种逐个增加
➢选择某一个设备，将该设备的结果与首次验证的结果进行比对； ➢选择这一年变更的某个设备（如当时清洁验证未做），该设备所在的
整段残留与变更前的该段残留进行比对； ➢轮流选择不同的品种进行该品种整条线的清洁验证。
5、如何检测
定量限和检测限
定量限和检测限通常采用 信噪比法 确定。
信噪比：已知低浓度的样品信号：空白样品的信号 定量限：信噪比为 10:1 检测限：信噪比为（2 ~ 3）:1
5、如何检测
定量限和检测限
5、如何检测
线性和范围
线性：在设定范围内，检测结果与供试品种被分析物的浓度（量 ）直接呈线性比例关系的能力。
1、法规要求
可参考的指南：
❖ FDA的清洁验证指南 ❖ APIC的清洁验证指南
注APIC：
欧盟化学工业委员会(CEFIC) 的原料药委员会(APIC）
2、什么是清洁验证？
如何评价清洁效果是 否达到要求？
清洁检查：每次清 洁后，进行取样检 测，直至检测结果 符合要求。这种方 式是否适用于我们 做新产品的清洁效 果评价？
先列出前后生产的矩阵组合
1、采用第一种方式计算：10ppm浓度计算方式
完成表格空白部分内容
3、如何选择目标化合物
先列出前后生产的矩阵组合 2、采用第二种方式计算：日剂量千分之一 完成表格空白部分内容
3、如何选择目标化合物
讨论以下这种情况：
A产品共3个生产岗位涉及的设备分3段，分别为a1、a2、a3，B产品共4个生产 岗位，涉及的设备分4段，分别为b1、a2、a3、b4。即其中a2、a3设备是两个产 品共用的。则计算A在B中的残留或者是B在A中的残留可以仅仅计算a2和a3
范围：能够达到一定的准确度、精密度和线性，测试方法适 用的试样中被测物的高、低限浓度或者量。
5、如何检测
线性和范围
清洁验证的分析范围一般从定量限至残留物限度的100%， 线性试验至少有5个浓度水平，每个浓度水平至少平行做2次，一般3
次。
线性的合格标准不同的分析方法，要求不同。通常清洁验证中线性的
可接受标准：要求回归方法的相关系数大于0.99。
处理比较合适？
6、如何进行定期监测？
➢定期监测：对已经验证并投入运行的清洁方法进行监控，对清 洁方法的变更实行变更管理，根据监测的结果来看各种生产活
动中，所采用的清洁方法是否能够达到预期的效果。 ➢我们《验证管理程序》中规定，清洁验证的定期监测周期为2
年。
6、如何进行定期监测？
我们可以根据以下原则来做定期监测：
3、如何选择目标化合物
首先我们来解决第一个问题：
3.1 选择哪一个作为我们的目标化合物？第一种情况：
A
专用的生产线
这是最简单的情况，通常我们选择专用产品作为目标化合物。如果要做得 更加全面还需要考虑以下因素： ➢是否在过程中有使用了毒性大、溶解性差的物质，且该物质没有反应完
全，残留比较多？
➢是否在过程中有副反应，生成了毒性大、溶解性差的物质？
清洁验证：对某一个
清洁的方法进行一次 验证，如果验证能够 符合要求，那么之后 每次采用该方法进行 清洁都能够符合要求 。
2、什么是清洁验证？
探讨一个问题：
是先有清洁程序还是先有 清洁验证？
2、什么是清洁验证？
我们目前的方式是：
➢先有程序；
➢再根据程序制定清洁验证方案 ➢再根据方案开展验证
➢验证结束后证明该清洁程序可用
2、什么是清洁验证？
一个完整的清洁验证包括以下6个方面的内容：
➢建立清洁的可接受标准；
➢建立清洁程序，包括：鉴别设备的最难清洁处、鉴别被 清洗物质的特性（活性、批量、清洗物、溶解能力等）， 确定清洁溶剂或试剂、设计清洁方法；
➢取样程序及验证； ➢分析方法及验证；
➢验证报告。
3、如何选择目标化合物
选择了目标化合物之后，我们来解决第二个问题：
3.2 我们的可接受标准是多少？
目前通用的计算方式有两种（目视清洁不描述） ➢残留物浓度限度：10mg/kg，即10ppm； ➢基于日治疗剂量的限度：也称生物学活性的限度，即最低日治
疗剂量的1/1000；
上述两种计算方式，哪种计算得到的数据更加严格，就选择哪 个。
C
共用生产线：品种逐个增加
这种情况是我们目前最多的情况，比如已有A、B、C三个品种，现在需要增加D品种，见
下表格
A、B、C为原先已有的产品，其清洁后的残留数据从已有的清洁验证中收集，需要考虑A、B 、C在D中的残留数据是否是可接受的； 本次验证应该做的是D的残留在A、B、C中是否可接受
3、如何选择目标化合物
洁后的可接受残留总量为？
可接受残留总量 =2 ×1500000/20/1000=150mg
3、如何选择目标化合物
基于前面的内容，我们来考虑实例，以共线生产A、B、C四个品种为例 ，A、B、C产品信息如下：
注：如A产品每日使用 1~5片，每片2mg，则最低日剂量为2mg，最大日剂量为10mg
3、如何选择目标化合物