甲苯胺红不加热血清试验标准操作程序

甲苯胺红不加热血清试验标准操作程序黑龙江省性病防治中心(黑龙江省皮肤病防治研究所)实验室标准操作规程hljsxb(hljspy)-sop-TRUST
甲苯胺红不加热血清试验标准操作程序 1. 目的:
当人体感染梅毒螺旋体后4,10周左右，血清中可产生一定
数量的抗类脂质抗原的非特异性反应素(主要是IgM、IgG)。

这
些抗体可用免疫学方法进行检测。

血清学检查是辅助诊断梅毒的
重要手段。

2. 原理:
梅毒螺旋体感染人体后，宿主会产生抗类脂抗原的抗体(反
应素)，与一定比例的心磷脂、卵磷脂、及胆固醇混合物抗原反应，
可检测梅毒患者血中的抗类脂抗原的抗体。

3. 仪器材料:
3.1水平旋转仪
3.2试剂盒:TRUST抗原液、直径为18mm圆圈的反应卡片、抗
原滴管、针头。

4. 标本采集:
4.1血清:抽取静脉血，室温静止凝固后，分离新鲜血清。

也可采
用冻存的血清。

4.2血浆:各种抗凝剂制备的血浆。

5. 操作步骤:
5.1定性试验:
5.1.1加样:吸取50uL血清(浆)放在卡片圆圈中，并均匀地涂
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布在整个圈内。

5.1.2加抗原:将TRUST抗原轻轻摇匀，用9号针头(60?1滴/mL)
加一滴抗原。

5.1.3反应:将卡片置水平旋转仪旋转8分钟(100?2转/分钟)。

立即在亮光下观察结果。

5.2定量试验:
5.2.1稀释液准备:在圆圈内加入50uL生理盐水(根据需要确定
稀释度)，勿浆盐水涂开。

5.2.2加样:吸取50uL血清(浆)与各圈中盐水作系列稀释，并
涂布整个圈内。

5.2.3加抗原:将TRUST抗原轻轻摇匀，用9号针头(60?1滴/mL)
加一滴抗原。

5.2.4反应:将卡片置水平旋转仪旋转8分钟(100?2转/分钟)。

立即在亮光下观察结果。

6. 结果判读:
凝集反应强度分级:
3+,4+:圆圈内出现中到大的红色絮状物，液体清亮
2+:圆圈内出现小到中的红色絮状物，液体较清亮
1+:圆圈内出现小的黑色絮状物，液体浑浊
–:圆圈内仅见甲苯胺红颗粒集于中央一点或均匀分散 7. 结果报告:
7.1定性试验:
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7.1.1阳性:出现1+,4+强度的凝集反应。

7.1.2阴性:不产生凝集反应。

7.2定量试验:
滴度:出现凝集反应的血清最高稀释倍数。

8. 临床意义:
8.1 TRUST试验适用于梅毒筛查、疗效观察、复发或再感染的检
查。

8.2对未经治疗的一期、二期和潜伏梅毒患者的敏感性分别为
86%、100%、98%。

9. 注意事项:
试验应在23,29?环境中进行。

10. 引用文件:
《性病诊断标准与实验室检测方法工作手册》
甲苯胺红不加热血清学试验诊断试剂盒说明书
3。