透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在大肠杆菌中的高效表达

透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在大肠杆菌中的高效表达
祁艳霞;杨明明;高文;祝发明;樊俊华;陈玉林
【期刊名称】《黑龙江畜牧兽医》
【年(卷),期】2005()8
【摘要】利用PCR技术将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)克隆到融合表达载体
pET28 a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达。

重组蛋白在30℃诱导获得可溶表达。

利用
N i2+亲和层析对重组蛋白进行了纯化,得到重组的透明颤菌血红蛋白,蛋白呈红色。

实验现象显示重组蛋白与血红素相结合。

紫外光区和可见光区波长扫描分析显示:
蛋白粗提物和纯化后的血红蛋白在230 nm和413 nm都有强吸收峰,初步表明,尽管重组蛋白比天然蛋白多36个氨基酸,重组蛋白仍然具有生理活性。

诱导后4 h和6 h的培养液氨基乙酰丙酸含量分别达到17 mg/L和21 mg/L,说明重组蛋白的表达明显促进了体内hem e合成途径。

【总页数】3页(P7-9)
【关键词】透明颠菌;血红蛋白基因;表达
【作者】祁艳霞;杨明明;高文;祝发明;樊俊华;陈玉林
【作者单位】西北农林科技大学动物科技学院;武汉阳光广济医药开发有限公司;湖
北工业大学;浙江大学材料与化工学院生物工程研究所
【正文语种】中文
【中图分类】S852.612
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