禽流感的研究进展
禽流感病毒致病机制的研究进展
文献综述禽流感病毒致病机制的研究进展摘要:禽流感对畜禽养殖业造成巨大经济损失,并对人类健康造成威胁,已成为各国公共卫生关注的人畜共患病。
本文从禽流感病毒(Avian Influenza Virus .AIV)的分子学特性,跨越种属的传播机制以及各基因组份与致病性的作用等方面进行简述。
关键词:禽流感病毒;传播机制;致病机制1前言禽流感(AvianInfluenza.AI)是由正粘病毒科A型流感病毒(Avian Influenza Virus. AIV)引起的禽类急性传染病,被世界动物卫生组织和我国《家畜家禽防疫条例》列为A类烈性传染病。
禽流感病毒根据其核蛋白(NP)和基质蛋白(M1)抗原性及其基因特性的不同可划分为A、B、C型。
其中A型流感病毒感染范围最广、危害最大,常以流行性的形式出现,并能引起世界性人流感的大流行。
A型流感病毒也可以从各种动物体中分离到,例如人、猪、马、海洋哺乳动物、猫、狗和鸟类等[1]。
根据对鸡致病性的不同,AIV可以分为高致病性禽流感(Highly PathogenicAvianInfluenza.HPAI)和低致病性禽流感(Low PathogenicAvian Influenza.LPAI)。
高致病性AIV 由于其传染性极强,可引起家禽全身性感染,造成多个组织器官严重病理损伤,致死率达100%,其感染禽类达88种,主要是鸡、鸭、鹅,除此之外,还可感染猪、猫、狗、老虎等哺乳动物和人类,是一种人畜共患病,对各国的公共卫生构成严重的危害[2]。
近年来不断增加的H5N1亚型禽流感病毒(AIV)直接感染人、致人死亡的事件不断增加。
本文对禽流感病毒致病机制的研究进展综述如下,以期提高人们对公共卫生学意义上禽流感防控紧迫性的认识。
2AIV生物学特征流感病毒属正黏病毒科,是一种呈球形或杆状、有包膜的单股负链RNA病毒,其基因组分为8个节段,编码血凝素(hemagglutinin,HA)),神经酰胺酶(neuraminidase, NA),基质蛋白(matrix protein,M)M1和离子通道M2,非结构(nonstructrual,NS)蛋白NS1和NS2,核蛋白(nucleo protein,NP)以及三个聚合酶PB1、PB2(polymerase basic1,2)和PA(polymeraseacidic)以及新发现的与有道细胞凋亡有关的PB1-F2蛋白[3]等10种蛋白。
禽流感病毒的免疫研究进展
禽流感病毒的免疫研究进展禽流感是由禽流感病毒(avian influenza virus)引起的家禽呼吸系统疾病,主要感染家禽,如鸡、鸭、鹅等,但极少数情况下也可以传染给人类。
自从2003年中国发生了SARS疫情以来,禽流感疫情就被公众所关注。
禽流感的爆发不仅对家禽养殖业产生了巨大的经济影响,更是对人类健康造成了巨大的威胁。
因此,对禽流感的病毒学特性和免疫学研究已经成为了当前研究的热点之一。
禽流感病毒的病理学特性禽流感病毒是一种RNA病毒,属于正反式病毒科(Orthomyxoviridae),分为A、B、C、D四种型号。
其中只有A型和B型病毒会引起流感病毒,而D型病毒则主要感染牲畜。
A型病毒具有高变异率和广泛感染性,可以感染多种动物和人类。
据统计,自2003年开始,全球已经发生了多次禽流感大规模暴发,间歇性地在全球不同地区爆发。
1.清洁蛋白材料。
禽流感病毒外表皮有两种糖蛋白质:血凝素和神经氨酸酯化酶。
其中血凝素是禽流感病毒的主要清洁标记物,其血凝素亚型不同决定了其毒性和致病性的差异。
2.覆盖膜。
每个病毒都包含了一层薄膜,这是由病毒在宿主细胞内复制过程中夺取细胞膜形成的。
病毒的薄膜的主要成分是磷脂类物质和覆盖蛋白质。
3.病毒复制能力。
禽流感病毒具有强大的复制能力和变异能力,可以在任何宿主内复制。
病毒的感染和复制也受到宿主细胞的限制,禽流感病毒能感染和复制于多种宿主细胞中,然而只在特定环境下才会产生足够的病毒产生细胞,从而继续传播病毒。
禽流感病毒的病原学特性决定了其研究的重要性,研究其免疫学特性则是控制禽流感疫情的重要途径之一。
禽流感病毒的免疫学特性主要涉及以下几个方面。
1.病毒抗原结构分析。
研究禽流感病毒血凝素、内质膜蛋白、核蛋白、非结构蛋白等多种蛋白结构,寻找高度保守的免疫原性表位,为开发新型疫苗提供理论依据。
2.疫苗研发。
目前,研究禽流感病毒免疫学特性主要集中在疫苗的研制上。
禽流感病毒的血凝素亚型具有多样性,不同亚型的血凝素互相之间没有交叉保护能力。
禽流感的研究进展
来 严 重 的 后 果 。注 意 选 择 适 宜 的 给 药
立 用 药记录 ,农业 部颁 布 了禁 止使 用 的 兽 药及 其化 合 物清 单 。有休 药 期规 定 的兽 药 用 于食 用动 物 时 ,饲养 者应 向购买 者 或者 屠 宰者 提供 准 确 的 、真 实 的用 药 记录 。禁 止 销售 含有 违禁 药
种 呼 吸 系 统 到 严 重 全 身 性 败 血 症 等 多
以 为它 是 一种 自限性 疾病 ,是 一种 真 性 鸡 瘟 。15 9 5年 S h fr 实 该 病 原 c ae 证 属 于 A型 流感病 毒 ,18 年在 美 国马 91 里兰 州 召开 的 首 届禽 流感 会议 上把 该
禽 流感 病毒 广 泛分 布 于 许 多家 禽
在 宾 夕法 尼亚 州 、弗 吉尼 亚 州、新 泽
西 州 暴 发 的 HP , 资 5 0万 美 元 , AI 耗 0 间 接 经 济 损 失 达 34 .9亿 美 元 。 我 国
二 、病 原学
( )分 类和命名 禽流感的病原 一 为禽流感 病毒 , 类属于正黏 病毒 科 。 分 根据 病原核蛋 白 ( NP) 和膜 蛋白 ( MP) 抗 原 及其 基 因特性 的 不 同将流 感病 毒 分 为 A、B、C三型。A型流 感病 毒可 引起 人和 动物 发 生流 感 ,常以 流行 形 式 出现 ,引起 世界 性 流 感大 流行 ,在 动物 中广 泛 存在 ,也 可能 引起 大批 动 物死 亡 ,B型和 C型流 感病 毒 主要 引 起人 发生流感 。 A 型流 感病 毒根 据 表面 抗 原血 凝
一
区 病定名 为 “ 高致病性 禽流感 ”( ih y H g l 个 省 ( ) 的部 分 地 区暴 发 禽 流 感 。
浅析禽流感的研究进展
试验研究
Shy n ianYa
浅 析 禽 流 感 的研 究 进 展
口 郭俊华 (山西省 阳泉 市平 定 县 畜牧 兽 医局 0 5 0 4 2 0)
摘 要 :高致 病 性 禽 流 感是 禽 类毁 灭 性 疾 病 ,当前 在 世 界 各 地 的爆 发 呈 上 升 势 头 ,每 次爆发 ,都 给 养 禽 业 造成 巨大的 经 济损 失 ,严 重 影 响 养禽 业发 展 。 特 别是 高致 病 性 禽 流 感 的流 行 已对人 类 的健 康 构 成 了威 胁 , 引起 各 国
一
同 的病毒 蛋 白。病 毒有 囊 膜 ,上 有
层 1 ~1 纳米 的纤 突 ,两种 不 同形 2 4
理 : 当 流 感 病 毒 与 宿 主 细 胞 结 合 后 ,会 诱 导 病 毒 囊 膜 与 细 胞 膜 结 合 ,使 病 毒粒 子进 入 细胞 。病 毒要 具 有侵 染 性 ,必须 经 过 两个 过 程 : ① 宿 主 蛋 白 酶 将 H 裂 解 为 HA 和 A 1 H 2 A ;②裂解 后的H 2 A 暴露 出疏水去 并 与宿 主 细胞 膜脂 双 层相 互 结合 。
病毒科流感病毒属。 22 病毒 的分类 :整 个流 感病 毒分 、
为 3 "抗 原 型 , 即 甲 (A) 、 乙 4
症状 的综 合症 。禽 流 感被 世 界卫 生 组织 ( I O E)定 为A 动 物疫 病 ,我 类 国将 其 列 为 一 类 动 物 疫 病 ,真 欧
面 ,包 围着 核衣 壳 ,是 维持 病 毒形 态 的结构 蛋 白。核 酸外 被覆 螺 旋排
列 的 壳 粒 , 主 要 由 核 蛋 白 ( P)构 N 成 。 由 于 流 感 病 毒 的 多 形 性 , 不 同 毒株 的化 学 组成 会有 一 些差 异 。 由 流 感 病 毒 基 因组 R A的8 基 因 片 段 N 个 编码 的蛋 白成 分 共 有 1种 。 0 24 亚 型 禽 流 感 病 毒 基 因 结 构 的 多 .
禽流感病毒的免疫研究进展
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陈志染,导致疫情不断扩大。目前 来看,AIV的主要的传播形式是横向传播,但也不能否定 没有垂直传播的可能性,呼吸道和消化道是AIV感染的主 要途径。 2.3.3 潜伏期
1 禽流感的研究进展
禽流感(Avian Influenza, AI)是由A型流感病毒引起 的一种急性禽类传染病,主要发生在家禽和野鸟之间, 存在多种表现形式,常见的临床症状有轻度上呼吸道感染 以及急性致死等,高致病性AI被世界动物卫生组织确定为 A类急性传染病,我国也将其列为一类动物疫病[1-2]。 1.1 AI的发现
1878年,Perroncito[3]首次报道在意大利鸡群中暴发AI 的情况,最初怀疑是鸡瘟病毒,而在1901年,Centannic 和Sarunozzi[4]两位研究者分离了该病的病原并对该病原进 行了详细描述,直到1955年,Schafer[5]证实这种疑似鸡瘟 的病原实际上就是现在的A型流感病毒。 1.2 AI的分布
AIV的主要易感群体是家禽,并且在世界范围内均广 泛感染,一些野禽也属易感动物。家禽包括鸡、火鸡、 石鸡、珍珠鸡、鹤鹑、雉、鹅等,野禽包括天鹅和燕鸥 等都是AIV的易感动物群体[18]。 2.3.2 传播途径
AIV的传染源主要包括病禽的排泄物、分泌物及病禽 尸体。当AIV的传染源污染到饮用水、饲料或者其他禽类 能接触到的物体时,正常健康的易感动物就会通过直接
第13卷第18期 Vol.13 No.18
南方农业 South China Agriculture
2019年6月 Jun. 2019
禽流感病毒的免疫研究进展
陈志雄1,姜 平2,赵志辉2
(1. 原南京军区司令部农副业基地,江苏南京 210016;2. 广东海洋大学,广东湛江 524088)
禽流感致病机理及防控技术研究进展
试验研究LIVESTOCKANDPOULTRYINDUSTRYNo.3,2022基金项目:重庆市技术创新与应用发展项目(20234)禽流感致病机理及防控技术研究进展吉雅图1,许国洋2,3通信作者(1.乌拉特后旗动物疫病预防控制中心,内蒙古巴彦淖尔015543;2.重庆市畜牧科学院,重庆402460;3.重庆市兽用生物制品工程技术研究中心,重庆402460)摘 要:禽流感(AvianInfluenza,AI)是由正黏膜病毒科,多形螺旋对称的A型流感病毒引起的一种传染性疾病综合征,该病毒属于RNA病毒[1]。
被世界动物卫生组织(OIE)认定为A类传染病。
禽流感病毒致病性的强弱与多个因素有关,致病机理较为复杂,而禽流感的防治原理也因方法的选择而有所差异,作用效果也各不相同。
对禽流感致病机理和疫病防控进行综合分析,为禽流感的科学防控和机制探索提供理论基础。
关键词:禽流感;病毒类型;治病机理;防控技术doi:10.19567/j.cnki.1008-0414.2022.03.005 引言禽流感(AvianInfluenza,AI)在早期被称为鸡瘟,依据报道,1878年该病在意大利最早出现,随着科学技术的发展,该病被证实是由甲型病毒引起的一种传染性疾病,后被命名为禽流感。
依据禽流感病毒致病性的差异,可将其分为高致病性、低致病性及非致病性3类。
禽流感可在多个季节发生,火鸡和鸡最易感染,感染后多呈急性致死性暴发[1]。
鸭和鹅感染率较低,但均可携带病毒,并且可以形成隐形感染,为病毒的传播提供了可能,感染后,情况较严重的也可出现大批死亡。
禽流感病毒主要存在于病禽的分泌物、尸体、粪便和污水中,健康宿主可通过呼吸道和消化道被感染。
禽类是禽流感感染的主要对象,但随着病毒的不断变异,其致病性越来越大,危害对象的范围也逐渐扩大,高致病性的禽流感已可感染多种哺乳动物,严重的可造成宿主的死亡[2]。
禽流感不仅可以对禽类健康状况造成巨大的危害,同时也可以给人类带来严重的经济损失,甚至危害到人类的健康以及生命安全。
禽流感病毒免疫研究进展
用 鼠单克隆抗体与待测血清 竞争结 合禽流感病 毒 N P虽 白, 二抗是抗 鼠单克 隆抗体 的抗体 。该 方 法能够检测 除 鼠以外
的多 种 禽 类 和哺 乳 动 物 血 清 中 的流 感 病 毒 抗 体 。
火鸡 体 内感 染 的 流 感 病 毒 , 现 出 高 进 化 率 和 高 变 异 率 - , 呈 3 】 鼠 , 产 生 的 N 抗 体 能 增 强 H 抗 体 的保 护 作 用 。用 只含 所 A A 有N A基 因 的 D A疫 苗 免 疫后 进 行 攻 毒试 验 证 明 , A抗 体 能 N N 减少 病毒 的排 放 , 只含 有 H 而 A蛋 白 的疫 苗却 能完全 保护 【 。 5 】
粘膜 免疫反应 产生 的分泌性 抗体对保 护宿主和 防御病 毒的进一步感染可能起重要 的作 用 , 特别是 对主要以粘膜感
染 为 主 的低 致 病 性 禽 流 感 ( A )但 是 对 抗 高致 病 性 禽 流 MP I ,
疫苗免疫的结果与此一致 。鸭血清中存在 5 7s和 7 8S的 . 两 种 不 同 的 IY。5 7S的 IY 是 主 要 的 抗 体 , 重 链 上有 2 g . g 在
感( P ) H AI感染也可能有作 用 , 因为 H A 病毒颗粒最初是通 PI 过粘膜表面而感染 的。流感病毒不 同分离株感染鸭 子后 , 能
在 胆 汁 中 检 测 到 IA 抗 体 , 是 根 据 IA 基 因 的 表 达 模 式 , g 但 g IA 抗 体 也 可 能 存 在 别 的 粘 膜 表 面 。 目前 报 道 的 有 新 城 疫 g 病 毒 和 传 染 性 支 气 管 炎 病 毒 感 染 后 产 生 的 IA 抗 体 能 产 生 g
禽流感的研究进展
至坏死 ,脚鳞 出血;呼 吸 困难 、咳嗽 、打 喷嚏 、流 泪 。
初期两 眼流浆液 性带泡沫 的 分泌物 ,后期 流黄 白色脓性
分泌物 , 肉髯增 厚变硬 , 向两 侧开 张 ,呈 金鱼 头状 。也 有 的 出现抽 搐 ,头颈 后 扭 ,运 动 失 调 ,瘫 痪 等神 经 症 状 。如 不采取措 施 ,很 容易造 成疫情 扩散 、蔓延 。并且 病毒毒力还有变强 的可 。
先 要 搞清 楚 禽 流 感病 毒 的致病 机 制 ,对于 禽 流感 的危 害 。我们必须要有全面 、正确 、科学 的认识。
参考文献 【 l 】牟维东。王永 录.禽流感 的研 究进展.中国兽医科技【 J 】 .2 0 0 4 ,
3 4 ( 4 ) : 3 2 — 3 9 .
4 病理变化
3 . 2 急性型 表现 为突然发 病 ,体温 升高 ,可达4 2 ℃ 以 上 ;采食量 急剧 下降 ,头部 、鸡冠 和 肉髯肿胀 、出血甚
7 结语 目前 ,禽流 感 己给 世 界养 禽业 造 成 了巨大 的经济损 失,更重要 的是它 对人类 健康 也构 成 了极 大威胁 ,所 以 A I 的 防治工作 已经提 升到前 所 未有 的 公共 卫生学 高度。 A I 是一种 古老 的禽类传 染病 ,对 于人类又 是一个新 的课 题 。要高度警 惕禽 流感病 毒可 能发 生抗原 变异 ,所 以首
山东畜牧兽医
2 0 1 3 年第 3 4
禽流感 的研 究进展
穆平玲 ( 山东 省泰安市 岱岳区畜牧兽医 局 2 7 1 0 0 0 )
中图分类号 :¥ 8 5 8 . 3 1 文献标识码 ;A 文章编号: 1 0 0 7 . 1 7 3 3 ( 2 0 1 3 ) 0 2 . 0 0 6 0 - 0 2
H9亚型禽流感病毒变异的研究进展
H9亚型禽流感病毒变异的研究进展1. H9亚型禽流感病毒简介H9亚型禽流感病毒(H9N2)是一种常见的禽流感病毒,广泛存在于鸡、鸭、鹅等禽类中。
该病毒对家禽的感染具有高度传染性,且对人类具有一定的潜在传染性。
近年来,H9N2病毒发生了多次变异,引起了广泛的关注。
本文将介绍H9N2亚型禽流感病毒变异的最新研究进展。
2. H9N2亚型禽流感病毒变异的临床表现H9N2亚型禽流感病毒在家禽中引起了一系列临床表现,包括呼吸道炎症、消化道异常等。
在人类中,该病毒引起了轻度呼吸道感染,并偶尔导致重度肺部损伤和死亡。
近年来发现的新变异株显示出更高的传染性和致死率。
3. H9N2亚型禽流感病毒基因组变异H9N2亚型禽流感病毒基因组变异是其变异的重要基础。
研究发现,H9N2病毒的表面糖蛋白HA和NA基因发生了多次变异,导致了病毒的抗原性和传染性的改变。
此外,H9N2病毒内部基因片段的重组和变异也是其变异的重要原因。
4. H9N2亚型禽流感病毒与其他流感病毒亚型间的基因交换H9N2亚型禽流感病毒与其他流感病毒亚型之间存在着广泛而频繁的基因交换。
这种交换导致了新流行株的出现,增加了人类和动物之间传播的风险。
近年来发现H9N2与H7N9、H5N1等高致死性禽流感病毒亚型之间存在着多次基因交换事件。
5. H9N2亚型禽流感病毒对抗药物耐药性近年来,一些H9N2亚型禽流感株对抗药物出现耐药性。
这种耐药性不仅增加了治愈该类感染的难度,也增加了人类治愈其他高致死性禽流感病毒感染的难度。
因此,研发新的抗病毒药物对于控制H9N2亚型禽流感病毒的传播至关重要。
6. H9N2亚型禽流感病毒的传播途径H9N2亚型禽流感病毒主要通过飞沫传播途径在家禽间传播。
然而,近年来发现该病毒也可以通过空气传播和接触传播途径在家禽间和人类间传播。
这种多种传播途径增加了该病毒对人类健康的威胁。
7. H9N2亚型禽流感病毒变异对防控措施的影响H9N2亚型禽流感病毒变异增加了防控该类疾病的难度。
禽流感病毒检测技术的研究进展
摘 要 介 绍 了禽 流感 的检测 技 术 , 且进 行 了展 望。 并 关 键词 禽 流感 ; 毒 ; 病 检测 中图分 类号 ¥5 - 883 文献标 识码 A 文 章编 号
O 1— 6 l20 )224 — 5 7 6 1(06 1— 70 0
维普资讯
安徽 农 业科 学 。 u a o n u A r S i2 0 , 4 1 )2 4 - 7 1 J r l f h i gi c. 0 6 3 ( 2 :7 0 2 4 on A .
责 任编 辑 刘 月娟 责 任校 对 范世 群
禽流感病毒检测技术 的研究进展
检测原理为寻找传染性因子的特异 D A序列 , N 对待测样品
进行 P R扩增 。如果 检测 出 了相 应 的扩 增 带 。 C 则判 为 阳性 反 应 ; 之 , 扩增 带则 为 阴性 反 应 。R — C 反 无 T P R分子诊 断技 术 可从 基 因水 平检 测 AV, 有高 度 的敏 感性 和 特异 性 , I 具 并 且 可 以大 大缩 短 AV 的检 出时 间 。 I 克服 了传 统 的 AV诊 断 I 技 术病 毒 分离 鉴定试 验周 期长 的缺点 ,为 A V早 期快 速 诊 I 断提供 了敏感 、 速 、 的方 法 。而 且研 究试 验发 现 ,T 快 实用 R— P R的灵敏 度 高于 E I 可 以避免 一些 错 误 的阴性 结 果 , C LS A, 并 且可 以鉴 别 高低致 病 力 A Vr。在 此基 础 上发 展起 来 的 lrl - s
禽 流感 ( v nn unaA ) 称真 性 鸡瘟 或 欧洲 鸡瘟 , A i f ez ,I俗 ai l
禽流感的发展趋势
禽流感的发展趋势
禽流感的发展趋势受多种因素影响,包括禽类和人类的接触频率、野生鸟类和家禽的迁徙模式、生态环境的变化以及病毒的变异能力等。
总体来说,禽流感的发展趋势可能包括以下几个方面:
1. 病毒变异:禽流感病毒具有较高的变异能力,可能会出现新的病毒亚型,导致对人类和家禽的新的威胁。
2. 人禽接触频率增加:随着人口增长和城市化的加剧,人类与禽类的接触频率增加,可能导致病毒的传播和感染风险增加。
3. 家禽养殖方式改变:随着家禽养殖方式的改变,例如大规模养殖和密集化养殖,可能会增加禽流感的传播和爆发风险。
4. 疫苗和控制措施的发展:随着科学技术的发展,疫苗和其他控制措施可能会不断改进,可以有效预防和控制禽流感的传播。
因此,对于禽流感的发展趋势,需要不断监测和研究,并采取有效的预防和控制措施,以减少禽流感对人类和动物的影响。
禽流感病毒的研究进展
染禽 的禽种 、 日龄 、 别 、 发症等 因素 , 性 并 综合征可表 现为从
亚 临床到轻度 的呼吸 系统疾病 , 从产蛋下降到急性致死性疾 病等多种形式 , 临床症状 有咳嗽 、 其 喷嚏 、 流泪 、 窦炎 、 羽毛散 乱、 皮肤发绀 ( 特别是冠 和 肉髯 ) 头面部水肿 、 经紊乱 、 、 神 下 痢等 , 这些症状可单独 或同时出现 , 有些禽类发病迅速 , 甚至
经济损失 。禽流感已被国际兽医局( I ) 为 A类烈性传染 OE列 病 ,9 5年我 国农业 部也将其列 为 I 18 类传染病 。近几 年来 ,
在 我 国 的一 些 地 区也 发 生 了禽 流感 的 流 行 , 已经 并 正 在 给养
状 的香港儿童体 内分离 到 H N 病毒 , 92 经过研究发 现此毒株 与鹌鹑体 内存在 的病毒 A Q a/ o gogG /7 H N ) 着 / uiH n kn/ 1 ( 9 2有 l 9 相似 的抗原性 与分子生物学特性 。这两次事件 发生后 , I AV 作为可以感 染人的病原而得到 了人们 的重新认识 , 引人关 更 注的问题是原来 只存 在于禽类 中的流感病 毒亚 型是否也 具 有引起人类 流感大暴发 的潜在威胁?
专 论 与 综 述
禽 流感病 毒 的研 究 展 荭
于 洋 , 敬 双 李
( 宁 医学院 畜牧 兽 医学 院 。锦 州 1 1 0 ) 辽 20 1
DO l 0.9 9J. : 36/ I 1 SSN.6 1 6 2 .0 0. 10 6 1 7 — 0 72 1 1 。0
1 禽流感的概述
禽流感病毒检测方法研究进展
禽流感检测方法研究进展郑胜男本硕21摘要:禽流感是一种可以感染多种禽类和人的烈性传染病,其病毒亚型众多,宿主范围广,容易发生变异和重组,由于各亚型之间无交叉反应性,使得禽流感病毒的检测工作较为困难。
目前,该病毒的检测方法主要有病毒分离鉴定、血清学方法和分子生物学方法,同时,人们也正致力于用一些新兴检测方法来检测禽流感病毒。
现就禽流感病毒的检测方法做一综述。
关键词:禽流感病毒;检测方法;AIV;血清;诊断;分子生物;禽流感是由正黏病毒科、A型流感病毒属中的不同亚型引起的禽类的一种急性高度接触性传染病。
目前已知禽流感病毒的血凝素包括16种亚型,[1]神经氨酸酶包括9种亚型。
其中H5和H7亚型常为高致病性的禽流感病毒。
1.病原学检测方法1 .1病毒分离与鉴定病毒的分离鉴定是禽流感的经典诊断方法,最常用的为细胞接种和鸡胚接种法,以细胞发生病变,鸡胚死亡或培养物尿囊液具有凝集红细胞特性作为判定依据作初步鉴定,也可用针对NP的单抗,用免疫荧光染色作病毒的初步鉴定。
[2]确诊还需其它辅助检测手段。
其检测结果准确可靠,灵敏,极少量病毒也可检出。
但其操作程序繁杂,费用高,实验室要求高,耗时费力,周期长,检测时间需1~3 周,大面积应用推广受到较大限制。
1 .2电镜检测技术用电镜技术或免疫电镜技术诊断禽流感病毒,可以在电子显微镜下清楚观察到粒子形态,确定病毒的有无。
[3]、[4]电镜技术快速、准确,但检验结果与样品制备技术、取病材料的部位和时间有关,且本方法不能用于亚型及致病性的测定。
2.免疫学检测2 .1血凝(HA )和血凝抑制(HI)试验HA 和HI 简单、快速、特异性好,但是操作繁琐费时,不能用已知HA亚型的抗血清检出禽流感新的HA亚型。
HI试验是WHO进行全球流感监测所采用的普及方法。
[5]一般先将可疑病料接种适龄鸡胚或细胞进行病毒分离,然后用HA试验检测出培养物是否具血凝素活性,再用已知阳性血清进行HI试验来验证。
禽流感诊断研究进展
进展作一综述 。
诊断禽流感主要依靠临床症状 、病理解 剖及实验室诊 断。常用的 实验室诊断方法有 : 病毒的分离鉴定 ,血清 学诊断方 法包括 血凝及血 凝抑制实验( AH) H ,I、神经氨酸酶抑制实验 ( I N T)、琼脂糖扩散实验 (G A P)、病 毒中和 实验 ( T)、酶联免 疫吸附 实验 ( LS N E IA)、 免 疫荧 光技 术 ( r等 ;分 子生 物 学 诊 断 技 术 以 及 电镜 技 术 等 。 I ) F 2 0年 我国通过国家质检总局鉴定 ,确认荧光R — C 法作为国家检 04 T PR 测禽流感新的标准 。
免疫吸附试验(L S ) 点一 LS 研 究的基础上 , E IA 和斑 E IA 建立 了以杆状病 毒系统表达 的A V I 核蛋 白为抗原 的禽流感 间接酶联免疫吸附试验诊断
出 ,将直接 影响活禽及相 关产品 的对 外 贸易 ,并造 成恶 劣 的国际影 响。特别是 高致病性 禽流感 (P 1 H A) ,是严 重危 害养禽业 的烈性传染 病 ,不仅对鸡群造成毁 灭性打击 ,而且严重威胁到人类生命健康。据 世卫组织公布的最新资料显示 : 03 2 从20年1月底在亚洲各国爆发的禽
流感至今 年l 月 ,有1 8 O 1 人感染禽流感 ,其 中6人 死亡 。禽流感在亚 1 洲肆虐之后 ,又蔓延至欧洲诸 国。我国于2 0 年冬1 多个省地相继发 05 O 生禽流感, 并出现人类死亡病例“ 面对 日益严峻的形势 ,多国纷纷推 ’ 。
禽流感病毒实验室诊断技术研究进展
分离病毒以采集气管和泄殖腔拭子为最佳 ,死后采
在实 际 中 的应 用 。但是 由于传 统检 测方 法对 实验 条 件 要 求 不高 , 无需特殊实验仪器设备 , 易 于在 基 层 兽 医检测 部 门推广 , 特 别是 一些 新 的 A I V检 测 方法 建立 都 要 以传 统 检测 方 法 为标 准进 行 比较 验 证 , 为 此 国内外 学 者 对 A I V传 统 检 测方 法 也 进 行 了积 极 探索 和改 进 。
1病毒 分离培 养 由于 临 床 症 状 和 剖 检 病 变 变 化 较 大 且 无 特 征
性, 所 以多 年来 A I 确 诊一 直 依 赖于 病毒 分 离 鉴定 。
疫病防制
而抗 原 9种 神经 氨酸酶 亚型 鉴定 。 1 9 8 3年 V a n等 对 常量 N I 试验 进 行改 良 ,建 立 了平板 微 量 N I 试验。 美 国 国立兽 医 实验 所 已将微 量 N I 试 验 列 为 流感 病 实用 的方法 。E L I S A方 法的敏 感性 和特 异性 与抗 原
性也 千 差 万别 , 早 期 快速 诊 断 和血 清 学监 测 无 疑是
预防 、 控制 A I的前 提 条 件 。所 以 , 建立 特 异 、 准确 、 敏感 的诊 断 A I 的方法 , 成 为迫 在 眉 睫的 问题 , 也 成
为 目前 研究 的热点 。
一
传统 检测 方 法
2血 清学诊 断 技术
禽流感病原学研究进展
要 的表 面抗 原[ 2 1 。
№
根据流感病毒血凝 素( H A ) 和神经氨酸酶( N A ) 差 异 ,可将 A型流感病毒分为不同亚型。迄今为止 , H A 已发现 1 6种 , N A有 9种 ,分别 以 H 1 ~ H I 6 、 N 1 ~ N 9 表示。它们之间可发生随机组合 , 从而形成 许多不 同亚型。目 前 已经发现的流感病毒亚型至少 有8 0 余种 , 其 中高致病性亚型主要是 H 5 和H 7 。
2禽 流感病 毒 的形态 和结 构
电子 显微 镜 下可 明显 看 到 表面 纤 突分 为 两类 , 一类 呈棒状 , 由血 凝 素 分 子 的三 聚 体 构 成 ; 另 一类 呈 蘑
A型流感 病毒 的致 病性 与毒株 和 宿主 均有很 大
关系 , 不同毒株对 同一宿 主或同一毒株对不同宿主 的致病性差异很大 , 根据毒力强弱将禽流感病毒划 分为无致病性 、 低致病性禽流感 ( 1 o w p a t h o g e n i c a —
的病 毒 型 。
点 。A型流感病毒共编码 l 1 种病毒蛋白, 其中 8 种 是 病 毒 的组成 成 分 ( H A 、 N A 、 N P 、 M1 、 M 2 、 P B 1 、 P B 2
和P A ) , 另外 长 度最小 的 N S基 因编码 是两 个非 结 构
蛋白N S 1 和N S 2 , 还有病毒粒子外 的脂质囊膜伸出
而转变为具有严重致死性的高致病性禽流感病毒 , 至今高致病性 禽流感病毒包括 H 7 和H 5 亚型中的 部分毒株 , 由于其传染性极强 , 可引起 家禽全 身性 感染 , 造成多个组织器官严重病理损伤 , 致死 率可
禽流感免疫预防的研究进展
反 应 能力 因种 属 不 同差 异 很大 。同样 ,不 同种 属对
要 作 用 , 别是 由黏 膜感染 的 L A 。在 鸡和 火鸡 中黏 特 PI 膜免 疫应 答研 究较 少, 染 AI 在 胆 汁和其 他 黏 鸭感 V后 膜表 面都 能检 测到 IA。肉鸡 感染 新城 疫病 毒 和传 染 g 性 支 气 管炎病 毒后 会产 生 IA。 究 表 明 , A对 呼 吸 g 研 I g
1 AI 免 疫 性 V的
11 V 的 抗 原 . AI 流 感病 毒 囊 膜 表 面 的纤 突 是 3个 H A单 体 聚合
一
比较 , 究发 现两个 重要 结 论 。第 一 , 与受 体结 合 研 病毒
起形 成 的 三 聚体 , 分 成两 部分 , 部分 是 呈球 状 可 一 的头部 , 有 受体 结 合 位 点和 抗原 决 定簇 ; 含 另一 部分
道感 染 的病 毒具有 保护 性 免疫 应答 。
1. . 3机 体 细胞 免 疫 2
细胞 免疫 在 防 御 肿 瘤 和非 肿
一
的 A型流感病毒引起 的禽类疾病, 其中高致病性禽流 感 ( i l p toபைடு நூலகம்ei a i un a, P I 已 被 世 hg y ah gnc v ni ez H A ) h a n l f 界动物卫生组织 ( I 列为 I OE) 类烈性传染病 。现就 离 流 感病 毒 ( I ) 免 疫 性 、 I 苗 及 AI AV 的 A疫 的预 防 予 以综述 。
为柄 , 与囊膜 相连 。 A是 A V 中最 大 的糖蛋 白 , H I 它是
诱 生保 护. 1 生免疫 的 主要 抗 原 。 囊膜 上 N A纤 突是 N A 单 体形 成 的四聚体 ,每个 N A纤 突有 4个 抗 原位 点 , 每个 位 点 又含 有 多个 抗 原 决定 簇 ,抗原 位 点 . 主 2是 要 的免疫 原位 点 。国外有 人发 现 , 点 12和 3的单 位 、 克 隆抗 体 对动 物 有保 护 作 用 , 位点 1 护作 用 最 强 , 保 位 点 4无 保护 作 用 。N P是 特异 型 抗 原 , 主要 决 定宿 主 范 围 ,P至少 有 3 互 相 重 叠 的抗 原 区 ,其 中 一 N 个
禽流感病毒诊断技术研究进展
禽流感病毒诊断技术研究进展一、引言禽流感是一种高致病性病毒性疾病,目前已在世界范围内造成大量的家禽死亡和经济损失。
禽流感病毒的快速检测和准确诊断对于疫情的防控和阻断至关重要。
该文将介绍目前禽流感病毒诊断技术的研究进展。
二、免疫学诊断技术1. 细胞培养法细胞培养法是禽流感病毒的最早诊断方法之一,通过将感染样品接种细胞培养物中,观察是否有细胞损伤和病毒分离情况。
但由于该方法需要特定实验室条件,并且需要较长时间,因此已渐被其他更先进的诊断技术所取代。
2. 补体结合反应(CFT)CFT是一种免疫学诊断方法,它通过观察血清中禽流感特异性抗体和禽流感病毒抗原之间的补体结合情况来诊断病毒。
但是,由于该方法对试剂质量和操作技巧要求较高,且存在假阴性和假阳性等问题,因此不常用于临床检测。
3. 酶联免疫吸附试验(ELISA)ELISA是一种快速、准确和经济的诊断方法。
该方法利用特异性抗体与抗原之间的特异性结合,通过酶标记活性物质,使结合物可定量检测。
目前,ELISA已被广泛应用于疫情监测和疫苗效果评估等方面。
4. 荧光素酶联免疫吸附试验(F-ELISA)F-ELISA是一种对传统ELISA方法的改进,它利用荧光素作为标记物,从而提高了灵敏度和特异性。
F-ELISA操作简单、快速、可靠,已被广泛用于临床检测和疫情监测。
三、分子诊断技术1. 聚合酶链反应(PCR)PCR是一种高度敏感和特异的分子诊断技术,它能够从样品中扩增病毒DNA或RNA片段,从而进行病毒诊断。
PCR具有快速、准确、可靠的优点,因此已成为禽流感病毒诊断的首选方法之一。
2. 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)RT-qPCR将常规PCR与荧光标记技术相结合,能够快速、准确地扩增、检测禽流感病毒。
该方法可用于样品的快速筛选和诊断。
此外,RT-qPCR还可用于研究禽流感病毒的毒株差异和基因变异。
3. 巢式PCR巢式PCR是将PCR的灵敏度和特异性提高到更高水平的方法。
禽流感病毒研究进展
文献综述
禽流感病毒研究进展
包小 萌 范 磊 ( 山东省海阳市动物疫病预防与控制 中心 2 6 5 1 0 0 ) 高延娜 ( 山东省海阳市二十里店镇畜牧兽医站 ) 宋丽霞 ( 山东省海阳市辛安镇兽医站 )
中图分类号 :¥ 8 5 8 . 3 1 文献标识码 :B 文章编号 :1 0 0 7 — 1 7 3 3 ( 2 0 1 6 ) 1 2 — 0 0 8 7 . 0 4
学 、诊断技 术 和疫 苗研制 等方 面的研 究取得 了较大 的进 展 。( 2)禽流感 通常 只感染 鸟类 ,少 见情况会 感染 猪 。
到感染 ,抗病 能力 比较 高之余 ,病发 后 的生 存机会 也很
高 。然而 ,鸡 只对流感 病毒非 常敏感 ,一旦 受到感 染的
禽 流感病 毒高度 针对特定 物种 ,但在 罕有情况 下会 跨越 物种 障碍 感染 人 。 自从 1 9 9 7 年在 香港 发现人类 也会 感染
接触 的物 种 ,而 那 些 自始 至 终 远离 人 类社 会 的 国际进 出 口贸易 。低致 病性 禽流感病 毒可 以经基 因突变 或基 因重配转 变成 高致病性 禽 流感病 毒 。高致病性 禽流感 病毒 是在人 群 中引发流感 的一个潜 在危 险 因素 ,并会 严重地 威胁人 类健康 。因此
禽流感病毒( a v i a n i n l f u e n z a v i r u s , AI V ) 可引起禽类 的 呼吸器官 或全 身性感染 。高致 病性 禽流感 病毒 可以直接
感 染禽类 ,偶 尔也能 直接或 间接感 染人类 。禽 流感 的流
野 外研 究显示 ,绝 大多数罹 患禽流 感的野 生鸟类 ,都是 在迁徙 、越冬 和繁殖 过程 中与人类 饲养 的家禽有 近距离
禽流感病毒(H5N1)的研究进展
造成亚洲地 区 6 3例 死 亡 。 中 东 南 亚 地 区 5 其 3例 。研 究 表
明, 禽流 感 病 毒 的 影 响 范 围 正 沿 着 鸟 类 迁 徙 的 方 向 逐 渐 扩
大, 萨克、 哈 蒙古 、 罗 斯 等 地 相 继 出 现 禽 流 感 的暴 发 流 行 , 俄
为 直接 接 触 和 间 接接 触 两 种 方 式 : 接 传播 是 指 直 接 吸 入 含 直
该病 毒 具 有 囊膜 , 去 污 剂 等 脂溶 剂 的灭 活 性 比较 敏 感 。 甲 对
醛 、 内酯 、 化 剂 、 酸 、 醚 、 氧 胆 酸 钠 、 胺 、 二 烷 丙 氧 稀 乙 去 羟 十 基硫 酸钠 和 铵 离 子 能 迅 速 破 坏 其 传 染 性 。 在 加 热 、 端 的 极
2 .禽 流 感 病 毒 ( N ) 传 播 : 前 已 经 证 实 H5 H5 1 的 目 N1 型 禽 流 感 病 毒 主 要 通 过 患 病 家 禽 或 野 生 鸟 类 传 播 给 人 。多 数 禽 流感 患 者 有 与 患病 家 禽 的 接 触 史 . 者 与 禽 类 接 触 可 分 患
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中华传染病杂志 20 旦笙 堂笠 塑 07年
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3 9 ・ 7
综述 ・
禽流感 病毒( 5 ) H N1 的研 究进 展
张 云 智 卢 洪 洲
19 9 7年 , 国香 港 出现 禽 流 感 病 毒 ( N1 , 造 成 】 中 H5 ) 并 8 人 感 染 , 中 6 死 亡 ,5 其 例 1 0万 只 家 禽被 处 理 , 病 毒 给 全 球 ・ 该 尤 其 是 亚洲 以养 殖 业 为 主 的 国 家 造 成 严 重 影 响 。近 年 来 因 感 染 该 病 毒 而死 亡 的 人 数 不 断 增 多 ,0 3年 至 今 , 流 感 已 20 禽
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前言禽流感是由A型流感病毒引起鸡、火鸡、鸭、鹅、鹌鹑等家禽的传染病,同时也是一种人畜共患病、我国将其列为一类动物传染病[1]。
早在1878年,该病就在意大利的流行,当时叫“鸡瘟”。
1981年在美国马里兰州召开的第一届国际禽流感学术讨论会上废除了“鸡瘟”这一病名,改称高致病性禽流行性感冒。
由基于该病在经济上的重要性,尤其是考虑到该病感染人的巨大威胁,对该病毒的基础研究显得迫在眉睫。
目前,与其他病毒性疾病相同,禽流感的防制尚无特别有效的方法,接种疫苗是预防禽流感发生与传播的最有效手段。
随着禽流感病毒多种亚型的发现,以及基础免疫学理论、分子生物学及生物技术的发展,科研人员已研发出了针对禽流感的数种疫苗。
除了应用较为普遍的全病毒灭活疫苗外,对多种新型疫苗的研发也有了较大的进展。
本文对目前国内外几种主要禽流感疫苗进行简要综述。
1 病原禽流感病毒(AIV)属于正黏病毒科, 流感病毒属。
一般多形性,直径为80-120纳米,也可见有同样直径的丝状形态,长短不一。
禽流感病毒是分节段的单股负链RNA病毒,共有8个独立的RNA片段,每个RNA片段都以不同的核酸蛋白复合体形式存在。
这8个片段编码10种蛋白,其中有8种结构蛋白, 2种非结构蛋白。
病毒表面有10-12纳米的密集钉状物或纤突覆盖,病毒囊膜内有螺旋形核衣壳。
两种不同形状的表面钉状物是HA(棒状三聚体)和NA(蘑菇形四聚体)。
禽流感病毒粒子大约由0.8%-1.1%的RNA,70%-75%的蛋白质,20%-24%的脂质和5%-8%的碳水化合物组成。
病毒蛋白包括HA蛋白、NA蛋白NP蛋白、非结构蛋白、M蛋白、聚合酶蛋白。
2 禽流感病毒的分类及致病性2.1 禽流感病毒的分类禽流感病毒(AIV)可按病毒粒子表面的血凝素和神经氨酸酶的糖蛋白进行分类,分为15个H亚型和9个N亚型,其血清型有H1N1、H4N2、H5N1、H5N2、H7N2、H9N2 等。
其中最受关注的是含H5和H7血凝素的AIV。
这些病毒常表现出具有或转变为高致病性的潜力(短期内变异),出现这种变异的原因是最初的病毒未受到强有力的控制而得以在许多鸡群中繁殖和传播。
有时很难将实验室分类的结果与病毒可能在某一鸡群中引起的病情关联起来, 即无致病性AIV在有些情况下也可能表现明显的致病性。
2.2 禽流感的致病性禽流感病毒可分为高致病性、低致病性和非致病性三大类。
其中高致病性禽流感是由H5和H7亚毒株(以H5N1和H7N7为代表)引起的疾病。
高致病性禽流感特点是潜伏期短,传播快,发病急,发病率高,死亡率高,但传播范围往往不大。
低致病性禽流感特点是潜伏期长,传播慢,病程长,发病率和死亡率低,一旦发病,如不采取积极措施,病毒很难在疫区根除,疫情会逐渐向周边地区扩散,使疫区越来越大,而且病毒毒力还有变强的可能,应高度重视。
2.3 禽流感的人致病性在1997年香港首次发现禽流感病毒能感染人并致人死亡的事件之前,研究者虽然提出了禽流感流行的动物源性学说,即病毒在动物内形成重组后再感染人。
一般认为,决定流感病毒宿主特异性的主要因素是细胞膜上的受体和HA受体的结合位点的结构。
人类与禽类细胞膜上的结合位点有很大的不同,这就是为什么1株流感病毒不能同时感染人和禽的原因。
常见的流感病毒受体可因其对人和禽的结合不同分为两种。
但从香港分离到的 HA 受体具有两种受体结合特异性,因此易于感染人类细胞。
最新的研究已经表明,人和禽的流感病毒均可感染猪。
而且,禽流感病毒经过猪体中的基因重组或重排过程,可以产生能感染人的新型流感病毒毒株。
3 AIV理化性质AIV对热敏感,加热到58℃30min,或加热到61℃10min,或煮沸(100℃)2min 以上即可灭活,但病毒对低温抵抗力较强,在有甘油保护的情况下可保持活力1年以上;AIV在微生物环境中可存活1周,在水中可存活1个月,在pH=4.1时,也具有一定的存活能力。
对紫外线敏感,在阳光下40-48h就会使AIV丧失活性,如果用紫外线直接照射,可迅速破坏其传染性。
对消毒剂乙醚、氯仿、丙酮等有机溶剂敏感。
常用消毒剂容易将其灭活,如氧化剂、稀酸、十二烷基硫酸钠、卤素化合物( 如漂白粉、碘剂等)都能迅速破坏其传染能力。
内蒙古民族大学本科生毕业论文4 禽流感的疫苗防控研究4.1 防控研究流感的防控主要从疫苗防疫、药物预防、饲养管理等方面综合进行防治。
流感病毒水平传播效率极高, 其致病力变异极为复杂, 并且对其机制迄今知之甚少, 故禽流感的弱毒疫苗自然成为可望而不可及的奢望。
传统的灭活疫苗具有良好的免疫保护性, 是禽流感防制的主动措施、关键环节和最后防线, 在许多国家禽流感防制中都起到了极其重要的作用。
禽流感灭活苗的使用, 在控制疫情的同时, 也一定程度上增加了疫病监测中区分疫苗免疫与自然感染的难度,全面的综合防疫措施与基因工程疫苗相结合才是我国禽流感防制的发展方向。
4.2 国外现状虽然国外在DNA疫苗、表达AIV血凝素蛋白的新城疫载体疫苗等新型禽流感疫苗研究方面取得了新进展,但是目前国外只有两种疫苗通过了审批并应用于防控实际,即全病毒油佐剂灭活疫苗和重组鸡痘载体禽流感疫苗。
重组鸡痘载体禽流感疫苗在美国通过了审批,在欧盟没有类似的产品,但这种疫苗在美国没有使用,却广泛在墨西哥、危地马拉、萨尔瓦多等国家使用。
从全球范围来看,大多数禽流感免疫预防是用禽流感油佐剂灭活疫苗。
4.3 我国现状我国科研机构针对现行主要流行毒株亚型,研制了多种油乳剂灭活疫苗[1]和新型疫苗,取得了良好的免疫保护效果,受到联合国粮农组织、世界动物卫生组织等国际组织的关注。
目前,农业部批准生产的H5亚型禽流感疫苗就有重组禽流感灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)、禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗(H5亚型)、禽流感灭活疫苗(H5亚型,N28株)、禽流感H5-H9二价灭活疫苗、禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rL-H5株)等5种。
尽管新型疫苗展现了诱人的前景,但是与国外情形类似,目前我国仍主要使用灭活疫苗。
5 疫苗的应用及种类由于了解流感病毒的持续遗传变异是解决流感问题的关键,所以不断地评价病毒的抗原转变对于及时捕捉到可引起人类流感大流行的毒株,并且研制有效疫苗是非常重要的。
理想化的疫苗应具备以下特点:(1)价格低廉、容易接种,对家禽具有高度的安全性;3(2)任何家禽接种都有效,免疫后既能产生体液免疫应答,又能产生细胞免疫应答,并能迅速建立免疫性保护;(3)疫苗生产时对工作人员和环境安全;(4)休药期短或无休药期;但目前,还没有任何一种禽流感疫苗同时具备上述全部特性[2]。
因此,逐步完善疫苗的研究显得尤为重要,现阶段常见的禽流感疫苗有以下几类:5.1 全病毒灭活疫苗禽流感全病毒灭活疫苗是将疫苗株病毒接种于鸡胚尿囊腔中进行增殖,经梯度离心浓缩纯化后,用甲醛或者β-丙内酯灭活处理制得。
Takada 等对5周龄雌性ddY小鼠鼻腔接种用甲醛灭活的流感全病毒疫苗20μL,2~3 周后再免,最后1次免疫后1周,分别检测血清和鼻拭子样品,并同时经鼻腔攻击20倍小鼠半数致死量的病毒,结果表明,该疫苗既可产生中和抗体,又能刺激机体CTL 反应,并能抵御不同亚型流感病毒的攻击。
李明义等[3-4]用禽流感病毒A/Ostrich/Denmark/77420/96(LPAI- H5N2)株及A/Chicken/ Shanghai/1/98(H9N2)株分别接种易感鸡胚,收获感染胚液并超滤浓缩,再用甲醛灭活并加油佐剂混合乳化制成油乳剂灭活疫苗,将其接种4周龄SPF鸡,结果表明,疫苗安全。
禽流感全病毒灭活疫苗具有制备工艺简单、免疫效果及安全性好、免疫持续时间长且不会出现毒力返强和变异的优点,可保护同种亚型AIV的攻击,有效避免禽流感的大暴发或大流行。
但灭活苗本身存在一些缺陷,即影响疫情监测,存在散播病毒的风险,免疫剂量较大,制备成本高等。
其最突出的缺点是不能诱导产生有效的黏膜免疫抗体和细胞免疫应答,因而,无法有效地抑制呼吸道中 AIV 的复制[5]。
5.2 亚单位疫苗亚单位疫苗是提取AIV具有免疫原性的抗原蛋白,加入佐剂而制成的。
这种疫苗安全性好,能刺激机体产生足够的免疫力,但其抗体持续时间短,且成本高。
随着重组 DNA及分子克隆技术的发展,可以将HA基因连接到载体质粒上,然后导入表达系统中,经诱导可获得大量表达的免疫原性蛋白,提取所表达的特定多肽,加入佐剂即可制成基因工程亚单位疫苗,这样可大大降低成本。
刘明[6]构内蒙古民族大学本科生毕业论文建了杆状病毒转移载体,分别表达了H5N1亚型禽流感病毒的HA基因和 NA 基因,用这些表达产物免疫SPF鸡,结果显示,NA+HA 联合免疫组的免疫效果最佳。
Wu 等[7]用酵母表达禽流感A/Northern shorel-er/AL/26/2006(H10N7)株的HA蛋白,然后用该蛋白免疫SPF鸡,可以产生与灭活苗相同效果的HI抗体及中和抗体。
5.3 重组活载体疫苗利用对禽类致病性很弱的痘苗病毒或禽痘病毒作载体,构建含有免疫原性基因的重组病毒,用此重组病毒作疫苗,可在动物体内复制,并不断地表达出免疫原性蛋白,从而诱导禽类产生针对目标病原的免疫保护力,此种疫苗称为重组活载体疫苗。
Boyle等[8]构建了表达H7亚型HA基因的重组痘病毒,接种2-7日龄鸡,分别于接种后第10,21天,用强毒株攻击,致死保护率分别为80%和100%。
获得保护鸡有NP抗体反应,表明重组痘病毒疫苗虽可提供坚强保护,但不能完全阻止攻毒AIV的复制。
Swayne 等[9]研究表明,禽流感重组痘病毒疫苗应避免用于经痘病毒疫苗免疫的鸡群或自然感染野毒痘病毒鸡群,否则,将不能诱导其对禽流感的良好免疫应答。
Li等[10]将高致病性的 H7N1 血凝素基因插入到 HVT,构建了重组病毒,免疫动物产生特异性抗HVT和AIV HA 抗体,对HVT 和AIV 强毒的攻击均能提供良好的保护。
Qiao等[11]构建了能同时表达H5N1亚型HA基因和NA基因的重组禽痘病毒(fowl pox virus,FPV)重组疫苗,攻毒结果显示,该疫苗具有良好的免疫保护性。
高宏博等[12]将AIV A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)的HA基因克隆于真核表达质粒中,构建了转移载体pUAB- gpt- HA,通过同源重组及霉酚酸筛选技术,将HA基因表达盒插入到HVT US10 基因区,构建了一株表达H5亚型AIV HA 基因的重组病毒 HVT(rHVT- US10- HA),经PCR、间接免疫荧光、western blot 及红细胞凝集试验鉴定,重组病毒能稳定表达具有生物学活性的HA蛋白。
重组活载体疫苗兼具死疫苗和活疫苗的优点,克服了常规活疫苗毒力返强的缺点,且免疫效果较理想。