Livin、缺氧诱导因子-1α在结肠癌中的表达及意义

［1 1］
是肿瘤细 胞适应缺氧 环境做出 反应的关 键性介 导细胞 转录基 在多数 恶性肿瘤 组织中
在低氧环境下通 过诱导多种基因表达， 使肿瘤适应相对低氧的微环境［1 0］ ， 促进新 生血管的生 成及肿瘤细 胞内多种
［1 2 ］
� H IF -1 对缺氧更 具有敏 感性�研 究表明 H IF 1 物质表达上调， 为肿瘤的侵袭和转移创造条件 � 都有表达 � ， 本组 实验中， 采用免疫组化的方法对 H IF 1 进行标记， 结果证 实 H IF 1 1 表达明显增多， 1 � 坏死明显的区域和肿瘤浸润的边缘 H IF 这表明 H IF 综上所述， Li vi n和 H IF 1
� �关键词� 结肠肿瘤 ; 凋亡抑制蛋白质类; 缺氧诱导因子 1 ， 亚基 大肠癌是常见的恶性肿瘤之一， 全世界每年大约有 1 0 0 万新发病例， 同时 至少 5 0 万患者死亡［1］� 大肠癌的发病率占西方 国家癌症发病率的第 2 位
［2］
� 它的发生是多步 骤� 多因素参与的过程， 除了原癌基因的激 活， 抑 癌基因的失 活外， 某些凋亡调
2 ， = 1 8. 373 ， P = 0 . 0 00 ) ， 1 膜组织 � 两者之间差异有统计学意义( 结肠 癌中 H IF -
� 之间差异有统计学 意义 ( = 6. 696 ， P = 0. 01 0 ) ， 结 肠 腺 瘤中 H IF 1 义(
2
2
蛋 白 表 达 与正 常 结 肠 黏膜 中 比 较 差异 无 统 计 学意 表达阳性 1 9 例结肠癌组织中， Li vi n有 8 例阳性表达，
3 . 免疫组化方法: 采用免疫组化 S P 法染色， 具体步骤参照说明书进行�以 PBS 缓冲液替代一抗作空白对照， 用已知的肺 癌阳性片作阳性对照�主要步骤简述如下: 常规脱蜡� 水化， 枸橼 酸盐缓冲 液高温高 压抗原修 复， 后用 3 % 过 氧化氢阻 断内源 性过氧化物酶， 再加入一抗 4 素复染， 中性树胶封片� 4. 结果判断标准 : Li vi n � H IF 1 染色阳性信号呈棕黄色细胞颗 粒状， 定位在 细胞的 细胞质 中， 阴 性对照 采用 PBS 代替一 抗�判断方法 均为在镜下观察， 根据棕色反应的阳性强度及面积判断结果 �对每张切 片阳性细胞 的阳性强度 按无着色� 淡黄 � � � 0， 1， 2， 3 分， 30 % 60% ， 60 % 1 00 % 分别打 0 ， 1， 2， 3 分， 色� 棕黄色和棕褐色分别打 着色阳性面积按无 着色， 着色 0 30 % ， 然后根据两项打分之和判断其结果: 0 分为阴性， 3 分为阳性， 其中 5 分者为强阳性 ( 每张 切片选择有 代表性的区 域， 在 400 倍 视野下进行计数， 共计 5 个不重复 40 0 倍视野， 取其平均值以避免随意性) �所有数据均由 2 名 病理医师采 用双盲法( 独立检 测) 进行检测� 5 . 统计学分析 : 所有统计用 S PS S 1 3 . 0 完成， Li vi n � H IF 1 � 计数资料用率( % ) 表示，
［ 6 ］
� 作为一 个新发 现的 IAP 家族
Li vi n rv i vi n类似， 成员， 与 Su 在大多数正常成人组织中不表达或低表达， 但在大多数黑色素细胞系及很多人类恶性肿瘤细胞株 中高表达， 提示该基因可能在肿瘤的发生和发展中起 着重要 作用［7］， 研究发 现， Li vi n 蛋白 在结肠 癌组织 中的表 达高( 70 % ) ， vi n特异的高表达于肿瘤组织中的 特性， 显著高于相应正常结肠组织( 2 0 % ) �Li 在肿瘤的 诊断� 治 疗中具有 潜在的应用 价值， 可能成为一个充满希望的评估癌症复发风险的指标［8］ ， 近来其可能作为 一种癌症靶向治疗的靶点更是受到广泛关注［9］ � H IF 1 实体恶性肿瘤迅速生长过程中形成局部缺氧环境， 因， H IF 1
b
2 1 ( 70. 0 )
a b
1 9( 63. 3 ) 9( 30. 0 ) 3 ( 1 0. 0 )
1 1 ( 36. 7) 6 ( 2 0. 0 )
注: 与结肠腺瘤组比较 ，P < 0. 05 ; 与正常结肠黏膜组比较 ， P < 0. 01
表2
组别 H IF 1 H IF 1 阳性 阴性
Li vi n 与 H IF 1 a 在结肠癌组织中表达的相关性( 例)
［ 3］ 它与肿瘤的发生 � � 发展及复发息息相关 � � � 目前的研究表明缺氧诱导因子1 ( hy p oxi a i n duc i b l ef a c t or1 ， H IF 1 ) 是惟一的特
异性低氧状态下发挥活性的转录因子， 对维持肿瘤细胞的能量 代谢� 细胞增殖 和肿瘤血管 生成具有重 要作用， 与肿瘤 的发生� 发展和转移密切相关 � �本研究应用免疫组织化学染色法 检测 Li vi n 和 H IF 1 意义， 为结肠癌的辅助诊断提供依据� 一� 对象与方法 1 . 研究对象: 收集 2 00 9 年 7 月至 2 01 0 年 7 月内蒙古医学院第三附 属医院 临床资 料完整 的手术切 除和内 镜下所 采集标 � 3 0 例， 本�结肠癌石蜡标本 其中男 1 8 例， 女 1 2 例， 年龄 2 9 86 岁， 平均( 5 6. 2 3 1 2 . 95 ) 岁�所有患 者病理 组织学类 型均为 腺癌�对照组包含结肠腺瘤性息肉与正常结直肠黏膜各 30 例�以上所选患 者经过内 镜形态学及 病理组织学 证实， 并且所有 患者均无家族性腺瘤性息肉病史和结肠癌史�均未长期服用过 N SAIDs � 质子泵抑制剂或糖皮质激素� � 2 . 主要仪器与试剂: 光学显微镜( ol y m pus ， 日本) ， 组织包埋机 ( BM J- ， 常州) ， 载玻片， 北航图 像中心 C m a i s 真彩色病理
控基因及关键性转录调控因子的异常表达也是促进其发展的关键因素�Li vi n是最近发现的 凋亡抑制蛋 白( i n hi b i t ors of a p opt osi s p ro t ei n s， IA Ps ) 家族新成员， 在大多数正常成人组织低表达或不表达 ( 除胎 盘) ， 但在一些 恶性肿瘤中 特异性 高表达， 因此
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蛋 白在结 肠癌组织 中的表 达， 初步探讨 其临床
抗人 Li vi n多克隆抗体( 1 :5 0 ) ， 兔抗人 H IF 1
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差异有统计学意义� � vi n和 H IF 1 蛋白在结肠癌 � 结肠腺瘤和结肠正常黏膜组织 中的表 达( 表 1 ) : Li 主要表 达于肿瘤 细胞的 蛋 白阳性
பைடு நூலகம்
胞质， 呈棕 黄 色， 大多 数 细 胞 呈弥 漫 均 一染 色 ( 图 1 ) �30 例 结 肠癌 组 织 中有 2 1 例 ( 70 . 0 % ) Li vi n 蛋白 阳 性 表 达� 19 例 ( 63. 3% ) H IF 1 vi n蛋白 阳性表 达� 9 例 ( 30. 0 % ) H IF 1 蛋白阳性表达; 3 0 例结肠腺瘤 � 组织中 有 1 1 例 ( 36. 7% ) Li
DO I: 1 0. 3877 /c ma . j. i s sn . 1 6740785 . 2 01 1 . 1 0. 039 作者单位 : 01 401 0 包头， 内蒙古医学院第三附属医院肿瘤内科 通讯作者 : 屈振杰， E m ai l : 42 92 32 432 @ qq. c om
� 30 06 �
中华临床医师杂志 ( 电子版 ) 2 01 1 年 5 月第 5 卷第 1 0 期
C hi nJ C l i n i c i an s( E l ec t ron i cE di t i on )， Ma y 15 ， 2 01 1 ， Vol. 5 ， No. 1 0
表达; 30 例相应正常结肠黏膜组织中有 � 6 例( 2 0 . 0 % ) Li vi n蛋白阳性表达� 仅有 3 例( 1 0. 0 % ) H IF 1 vi n 结肠癌中 Li � 蛋白表达显著高于相应 正常结肠黏膜组织， 两者之间差异有统计学意义 ( 中 � Li vi n蛋白表达显著高于相应结肠腺瘤组织 ， 两者之间差异有统计学意义(
2 2 2
蛋白阳性表达�
=15 .1 52 ， P = 0 . 00 0 ) ， 结肠癌
= 6. 696 ， P = 0. 0 1 0 ) ， 结肠腺瘤中 Li vi n 蛋白表 蛋 白表达显著 高于相应正 常结肠黏 蛋白表达 显著高 于相应 结肠腺 瘤组织， 两者
( = 2. 05 2 ， P = 0. 1 5 2 ) �结 肠癌中 H IF 1 达与正常结肠黏膜中比较差异无统计学意义 �
P值 0. 2 71
� 值 例数 Li vi n阳性 Li vi n阴性 � 19 11 8 7 11 4 0. 2 08
三� 讨论 结肠癌是常见的恶性肿瘤之一�结肠癌的发病率近来有上升的趋势
［ 4］ ［5］ ， IA P 家族是由 C rook 等 首 先发现的 一类新的独
立于 B 型淋巴瘤细胞因子 2 ( Bc l 2 ) 家族的抗凋亡蛋白�凋亡抑制是肿瘤细胞的 一个普遍特性， IA P 家族作为细胞凋亡的调节 剂， 正日益成为人们关注癌症治疗的靶点�Su rv i vi n与 Li vi n是其 中最引 人注目 的两个成 员
中华临床医师杂志 ( 电子版 ) 201 1 年 5 月第 5 卷第 1 0 期
Chi nJC l i n i c i a n s( E l ec t ron i cE di ti on )， M ay 1 5 ， 2 01 1 ， Vol .5 ， No. 1 0