荧光免疫法与免疫层析法检测血清N末端脑钠肽前体的方法学比较及偏倚评估
N末端心房利钠肽前体(NT-proBNP)测定试剂盒(免疫荧光层析法)说明书 新健康成
N末端心房利钠肽前体(NT-proBNP)测定试剂盒（免疫荧光层析法）说明书1. 产品概述本产品是一种针对人体内N末端心房利钠肽前体(NT-proBNP)的测定试剂盒，采用免疫荧光层析法进行测定。
该试剂盒适用于临床医学实验室分析仪器的使用，用于定量测定人体血清或血浆中NT-proBNP的浓度，以协助临床诊断与治疗。
2. 产品原理本试剂盒采用免疫荧光层析法进行测定，利用特定的抗体与目标物NT-proBNP结合形成复合物，通过荧光信号的检测和定量分析，确定样本中目标物的浓度。
3. 试剂组成本试剂盒包含以下组分：•试剂盒盖板（1个）•试剂盒外盒（1个）•标准品（包含不同浓度的NT-proBNP，1套）•样本稀释液（1瓶）•封闭液A（1瓶）•封闭液B（1瓶）•洗涤缓冲液（1瓶）•底物A（1瓶）•底物B（1瓶）•停止液（1瓶）•离心管（适量）•微孔板（96孔）4. 操作步骤步骤1：准备工作1.首先将待测样本，标准品和试剂从冰箱中取出，并使其回至室温。
2.打开试剂盒外盒，检查试剂的完整性和有效期。
3.预热分析仪器至指定温度。
步骤2：标准曲线的制备1.将标准品稀释为不同浓度的工作液。
依次取出标准品管的适量体积，加入稀释液中，充分混合。
2.取出微孔板中的一行作为空白对照，加入适量的稀释液。
3.将制备好的工作液分别加入微孔板中，每个孔加入相同体积的工作液。
4.注意用标签标记好每行的标准品浓度。
步骤3：样本测定1.取出样本离心管，将待测样本加入管中。
2.取出微孔板中的一行作为样本孔，将样本离心管中的样本加入样本孔中。
3.热封微孔板，确保样本充分与试剂反应。
4.将微孔板放入分析仪器中，按照仪器操作说明进行测定。
步骤4：结果分析1.仪器完成测定后，读取测定结果。
2.通过标准曲线，根据测定结果计算出样本中NT-proBNP的浓度。
5. 结果解读对于NT-proBNP的浓度结果，根据临床实验室的参考值范围进行判断和解读。
6. 注意事项•本试剂盒仅适用于专业实验室内使用，禁止非专业人员操作。
荧光免疫层析法对4种药物开展治疗药物监测数据分析
荧光免疫层析法对4种药物开展治疗药物监测数据分析李金银毛士龙（上海市徐汇区中心医院药剂科上海 200031）摘要目的：回顾性分析对4种药物（丙戊酸钠、万古霉素、甲氨蝶呤、地高辛）进行治疗药物监测（TDM）的结果，并比较荧光免疫层析法（FICA）和LC-MS/MS测定丙戊酸钠的差异。
方法：372例患者（519份）的血浆样品应用FICA测定血药浓度、59例（60份）样品同时应用FICA和LC-MS/MS测定丙戊酸钠浓度，统计分析检测结果。
结果：4种药物检测的患者比例依次为6.89%、6.36%、65.39%、15.53%；首次监测TDM在安全有效浓度范围内的患者比例分别为33.9%、13.64%、32.03%、39.13%；对首次监测不在安全有效浓度范围内的患者药师干预被采纳的占比分别为33.34%、5.27%、100%、44.05%。
两种方法测定丙戊酸钠的结果无明显差异。
结论：我院开展TDM还存在一些问题，医生及患者须提升对TDM的认知，临床药师须进一步加强宣教，以实现精准化治疗。
关键词 荧光免疫层析法 LC-MS/MS 治疗药物监测临床药师中图分类号：R917; R969.3 文献标志码：C 文章编号：1006-1533(2023)13-0056-04引用本文李金银, 毛士龙. 荧光免疫层析法对4种药物开展治疗药物监测数据分析[J]. 上海医药, 2023, 44(13): 56-59.Data analysis of the therapeutic drug monitoring of four drugsby fluorescence immunochromatography assayLI Jinyin, MAO Shilong(Department of Pharmacy, Shanghai Xuhui Central Hospital, Shanghai 200031, China) ABSTRACT Objective: To retrospectively analyze the results of therapeutic drug monitoring (TDM) of four drugs including sodium valproate, vancomycin, methotrexate and digoxin, and meanwhile the differences of sodium valproate concentrations determined by fluorescence immunochromatography assay (FICA) and LC-MS/MS were compared. Methods: The blood drug concentrations in the plasma samples from 372 patients were determined by FICA, and sodium valproate concentrations in 60 plasma samples were determined by both FICA and LC-MS/MS, and their results were statistically analyzed. Results: The proportions of patients tested for the 4 drugs in turn were 6.89%, 6.36%, 65.39%, 15.53%. Proportion of patients whose TDM was within the safe and effective concentration range at first determination accounted for 33.9%, 13.64%, 32.03%, 39.13%, respectively. Percentage of pharmacist interventions adopted by physician when TDM was not within the safe and effective concentration range at initial monitoring were 33.34%, 5.27%, 100%, 44.05%, respectively. There were no significant differences in sodium valproate concentration by FICA and LC-MS/MS. Conclusion: There are still some problems in the implement of TDM in our hospital. Doctors and patients should improve their awareness of TDM and clinical pharmacists should further strengthen publicity and education so as to achieve precise treatment.KEY WORDS fluorescence immunochromatography assay; LC-MS/MS; therapeutic drug monitoring; clinical pharmacist治疗药物监测（therapeutic drug monitoring，TDM）是在药代动力学原理的指导下，应用灵敏快速的分析技基金项目：上海市临床药学重点专科项目作者简介：李金银，硕士，主管药师。
氨基末端脑钠肽前体测定试剂盒(荧光免疫法)产品技术要求yuepu
氨基末端脑钠肽前体测定试剂盒（荧光免疫法）组成：每盒包含相应规格检测卡和1份产品二维码（内含校准信息）。
每人份检测卡包括1份氨基末端脑钠肽前体检测卡和1包干燥剂。
氨基末端脑钠肽前体检测卡由PMMA镀膜、反应室（T线包被鼠抗人NT-proBNP单克隆抗体；C线包被羊抗鼠抗体）、荧光微球室（储存荧光微球标记的鼠抗人NT-proBNP单克隆抗体）、回收池、塑料结构支撑层组成。
适用范围：本产品用于体外定量检测人全血、血清、血浆中氨基末端脑钠肽前体含量。
1.1规格卡型1人份/盒、10人份/盒、20人份/盒、50人份/盒。
1.2组成每盒包含相应规格检测卡和1份产品二维码（内含校准信息）。
每人份检测卡包括1份氨基末端脑钠肽前体检测卡和1包干燥剂。
氨基末端脑钠肽前体检测卡由PMMA镀膜、反应室（T线包被鼠抗人NT-proBNP单克隆抗体；C线包被羊抗鼠抗体）、荧光微球室（储存荧光微球标记的鼠抗人NT-proBNP单克隆抗体）、回收池、塑料结构支撑层组成。
2.1物理性状2.1.1外观应整洁完整、无毛刺、无破损、无污染；材料附着牢固；标签字迹清晰，无破损。
2.1.2液体移行速度液体移行速度应不低于10 mm/min（到达Test区应低于2min）。
2.2检出限检出限应不高于30pg/mL。
2.3重复性分别用低、中、高3个浓度的氨基末端脑钠肽前体样本液，测定变异系数（CV）应不大于15%。
2.4批间差用3个批号试剂卡分别检测低、中、高3个浓度的氨基末端脑钠肽前体样本液，变异系数（CV）应不大于15%。
2.5线性在[30,30000]pg/mL线性范围内，相关系数应不低于0.990。
2.6准确度以指定的已上市试剂盒作为比对方法，进行比对试验，相关系数（r）应不小于0.950，斜率应在[0.9,1.1]内。
2.7校准信息溯源性应根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》提供所用校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容，校准信息可溯源至本公司工作校准品，工作校准品由罗氏试剂盒比对赋值。
一种磁微粒化学发光法测定人血中氨基末端脑利钠肽前体的试剂盒[
专利名称：一种磁微粒化学发光法测定人血中氨基末端脑利钠肽前体的试剂盒
专利类型：发明专利
发明人：柳建敏,贺率,汪云峰
申请号：CN202011621615.8
申请日：20201230
公开号：CN112834739A
公开日：
20210525
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明属于免疫化学检测技术领域，具体涉及一种磁微粒化学发光法测定人血中氨基末端脑利钠肽前体的试剂盒及其使用方法。
包括抗FITC抗体包被的磁性微粒、FITC标记的NT‑proBNP捕获单抗、碱性磷酸酶标记的NT‑proBNP检测单抗和NT‑proBNP校准品。
本发明试剂盒采用异硫氰酸荧光素(FITC)‑抗FITC抗体系统，与罗氏NT‑ProBNP试剂相关性良好，在提高分析灵敏度的同时，有效避免了人血清中的生物素干扰，并大大降低了生产成本。
申请人：宁波海壹生物科技有限公司
地址：315040 浙江省宁波市高新区清逸路66号044幢4层东区
国籍：CN
代理机构：宁波市鄞州盛飞专利代理事务所(特殊普通合伙)
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化学发光免疫分析技术和酶联免疫吸附试验在亿型肝炎病毒血清学检验中的应用比较分析
化学发光免疫分析技术和酶联免疫吸附试验在亿型肝炎病毒血清学检验中的应用比较分析乙型肝炎病毒（HBV）感染是全球范围内的重要公共卫生问题，据统计，全球共有约2亿人感染了HBV，且每年有数百万人因乙型肝炎而死亡。
在乙型肝炎病毒感染的诊断和治疗过程中，血清学检验起着至关重要的作用。
目前常用的血清学检验方法包括化学发光免疫分析技术（CLIA）和酶联免疫吸附试验（ELISA），两种方法各有优缺点。
本文将对两种方法在乙型肝炎病毒血清学检验中的应用进行比较分析，以期为临床诊断提供参考。
化学发光免疫分析技术是一种利用化学荧光反应来检测抗原或抗体的方法。
它具有操作简便、灵敏度高、特异性强等优点，被广泛应用于临床诊断。
在乙型肝炎病毒血清学检验中，CLIA方法能够快速、准确地检测HBV相关抗体和抗原，对临床诊断具有重要意义。
通过检测血清中的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb等指标，可以及时发现HBV感染情况，指导临床治疗。
CLIA方法还可以实现自动化操作，减少人为误差，提高检测效率，有利于临床实验室的常规化建设。
CLIA方法也存在一些局限性，例如设备和试剂成本较高，操作需要一定的专业技能，对实验人员的要求较高。
由于其所使用的标记物为化学荧光物质，可能会受到环境因素的影响，导致检测结果的偏差。
在实际应用中需要严格控制实验条件，以确保结果的准确性。
与CLIA相比，酶联免疫吸附试验是一种更为传统的检测方法，它利用酶与抗原或抗体结合后的相关酶底物反应来检测目标物质。
ELISA方法操作简单、成本较低，非常适合于临床实验室进行常规检测。
在乙型肝炎病毒血清学检验中，ELISA方法也被广泛应用于HBV 相关抗体和抗原的检测。
它可以准确、快速地检测血清中的抗体和抗原水平，为乙型肝炎病毒感染的诊断提供重要依据。
与CLIA相比，ELISA方法的灵敏度和特异性较低，容易受到干扰因素的影响，导致假阳性或假阴性结果。
ELISA方法需要大量的手工操作，存在操作复杂、耗时长的缺点，在大规模的临床诊断中可能不够适用。
时间分辨免疫荧光法和放射免疫法测定血清C-肽的偏差评估
！ ！
高载量组 可能 与无效 的抗 病毒 治疗 或产生 耐药 后 病 毒复 活 和未 经抗 病 毒 药 物 干预 病 例 有 关 ， 因 此认 为抗 病毒药 物 的应用 普及 可能影 响 了病毒 载
摘 要： 目的 比较时问分辨免疫荧光法和放射免疫法检测血清 ｃ肽结果的一致性 ， ． 并对其进行偏 差评估 。方 法 依据美 国临床实验室标准化委员会 （ Ｃ Ｌ ） Ｐ 一 Ｎ Ｃ Ｓ Ｅ ９Ａ文 件要求 ， 每天选取 临床样本 ８份 ， 分别用 ２种方 法测定 ２种方法测定结果 的回归方程为 ｉ ０９ ３ Ｘ＋０ ０７２ 相关系 ｅ ．９ ＝ ０ ．２ ， Ｃ肽水平 ≥０ ４ｎ／ 一 ． ｇｍＬ时 ， 时间分辨免疫荧 血清 Ｃ肽 ， 一 连续测定 ５ｄ 。以放射免疫法（ 为对 比方法 ， ） 时间分辨免疫荧光法（，为评价方法 ， １ ） 对测定结果计算 回 归方程 、检验 、 ｔ 配对秩和检验和偏差评估 。结果 数 （）＝０ ９７５ Ｐ＜ ．０ ） 一 ｒ ．８ （ ０ ０ １ 。Ｃ肽含量在 ０４ ０５ １０５ ０ １． ｇｍ ． 、． 、． 、． 、 ０ｎ／ Ｌ时， ０ 时间分辨免疫荧光法相对 于放射免疫 法的偏差分别为 ６ １％ 、．５ 、．２ 、 ０ １ ％、 ０ ４ ％ 。结论 ．０ ４ ７ ％ ２ ０ ％ 一 ．６ 一 ．３
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N末端脑钠肽(NT—proBNP)检测试剂盒(免疫层析法)产品技术要求模板
医疗器械产品技术要求编号：
N末端脑钠肽（NT—proBNP）检测试剂盒
（免疫层析法）
1.产品型号/规格及划分说明
1.1产品型号/规格
20人份/盒。
1.2结构组成
由检测卡、干燥剂和说明书组成；检测卡由鼠抗NT-proBNP单抗、胶体金鼠抗NT-proBNP单抗，羊抗鼠IgG和硝酸纤维素膜等支持物组成。
1.3 适用范围
用于体外定性检测血清中的N末端脑钠肽（NT-proBNP）。
2.性能指标
2.1外观
2.1.1检测卡应无明显划痕、气泡、外观平整，材料附着牢固。
2.1.2检测卡的文字和标记应清晰、准确。
2.2膜条宽度
检测条的宽度应≥2.5mm。
2.3液体移行速度
液体移行速度应不低于 10mm/分钟
2.4灵敏度（最低检出限）
本试剂盒对 NT-proBNP 最低检出限为 200 pg/mL。
2.5检测范围
本试剂盒 NT-proBNP 检测范围为 200 pg/mL～15,000 pg/mL。
2.6特异性
试剂盒与心肌钙蛋白-I(cTn-I)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白（Myoglobin) 均不发生交叉反应。
2.7精密度
2.7.1批内精密度
取同一批号试剂对精密度参考品（NT-proBNP 1000 pg/mL）分别进行 10 次测定，反应结果应一致，且显色度应均一。
2.7.2批间精密度
分别取连续三个批号试剂对精密度参考品（NT-proBNP 1000 pg/mL）分别进行 10 次测定，反应结果应一致，且显色度应均一。
N末端脑钠肽前体测定试剂盒(荧光免疫层析法)产品技术要求深圳市活水床旁诊断部分-N末端脑钠肽前体
医疗器械产品技术要求编号：
2.性能指标
2.1外观
2.1.1试剂盒外观应整洁，文字符号标识清晰，封装无破损，内容物齐全。
2.1.2检测卡的外观应符合下列要求：外观平整、色泽均匀、边缘无毛刺，不能有色斑或污渍。
2.1.3稀释液应澄清透明、无沉淀、无悬浮物、无絮状物、无渗漏。
2.1.4检测卡内的膜条要求：宽度为4.0±0.5mm,长度为67±2mm。
2.2净含量
稀释液瓶装量应≥100μl。
2.3物理检测
样本在检测卡上的移行速度应≥10mm/min。
2.4准确度
分别测定高、中、低三个浓度的NT-proBNP 企业内部参考品，相对偏差不超过±10%。
2.5检出限
检出限应小于30 pg/ml。
2.6线性范围
在线性范围30-30000pg/ml 内，
a）其线性相关系数（r）应不小于0.990；
b）在[30~4000]pg/ml 区间内测定的线性绝对偏差不超过±400 pg/ml，在（4000~30000] pg/ml 区间内测定的线性相对偏差应不超过±10%。
2.7重复性
用同一批次试剂盒分别测定高、中、低三个浓度企业内部参考品，各重复检测10 次，所得结果的批内变异系数（CV）应不大于10%。
2.8批间差
用3 个批号的试剂盒分别测定高、中、低三个浓度的企业参考品，所得结果的批间变异系数（CV）应不大于15%。
时间分辨免疫荧光法和放射免疫法测定血清C-肽的偏差评估分析
时间分辨免疫荧光法和放射免疫法测定血清C-肽的偏差评估分析目的：采用时间分辨免疫荧光法和放射免疫法对健康人和糖尿病患者血清C-肽进行测定，并分析差异。
方法：选取2013-02至2013-06于我院就诊的2型糖尿病患者40例为糖尿病组，选取同时期体检合格对象40例为健康组，其检测所有对象血清C-肽结果：糖尿病组两种方法检测存在统计学差异（p＜0.05）。
以放射免疫检测系统为对比方法(X), 时间分辨检测系统为评价方法(Y)。
健康组直线回归方程Y=2.478＋0.947X，相关系数r=0.947，糖尿病组直线回归方程Y=2.676＋0.914X，相关系数r=0.872。
两组对象批内变异系数均＜10%，批间变异系数均＜15%。
但时间分辨免疫荧光测定糖尿病组C肽批内、批外变异系数均存在统计学差异（p＜0.05）。
结论：放射免疫法试剂有放射性污染，且每次测定均需做标准曲线，所需时间长，不利于自动化检测。
时间分辨免疫荧光法反应测定时间短，操作方便，越来越被临床试验室接受和推广。
标签：时间分辨免疫荧光法；放射免疫法；血清C-肽；糖尿病The evaluation analysis of the deviation between time resolved fluoroimmunoassay and radioimmunoassay in determining serum C-peptide Yang JianAbstract Objective: To determine the serum C-peptide of healthy people and diabetics by time resolved fluoroimmunoassay and radioimmunoassay, and analyze the deviation. Methods: Choosed 40 type 2 diabetes from Feb.2013 to Jun.2013 to be diabetes group and 40 healthy people to be healthy group. Determined the serum C-peptide of these two groups. Results: There were statistical differences between two methods in diabetes group(P＜0.05). To make radioimmunoassay as controlled method(X) and time resolved fluoroimmunoassay as evaluation method(Y), the linear regression equation of healthy group was Y=2.478+0.947X and a correlation coefficient of r=0.947, while the diabetes group was Y=2.676+0.914X and acorrelation coefficient of r=0.872. Conclusion: There agents of radioimmunoassay can make radioactive contamination, and it has to make the standard curve and spend long time in determination, which is not favorable for automatic detection.Key words: time resolved fluoroimmunoassay, radioimmunoassay, serum C-peptide, diabetes血清C肽检测是常用的糖尿病诊断检测方法之一。
N-末端脑钠肽前体测定试剂盒(荧光免疫层析法)产品技术要求zhongjianantai
N-末端脑钠肽前体测定试剂盒（荧光免疫层析法）适用范围：本试剂盒用于体外定量检测人体血清、血浆或全血样本中N-末端脑钠肽前体（NT-proBNP）的含量。
1.1包装规格：20人份/盒，40人份/盒。
1.2主要组成：表1 试剂盒产品组成表2.1 物理检查2.1.1 外观外观平整，材料附着牢固，内容齐全，试剂无杂质，外包装完整无破损，标签清晰可辨。
2.1.2 膜条宽度膜条宽度应满足4.0mm±0.2mm。
2.1.3 液体移行速度液体移行速度应不低于10mm/min。
2.1.4 样本稀释液样本稀释液的净含量应不少于标示值，且其pH值为7.0±0.2。
2.2准确度准确度应符合以下要求之一。
a). 回收率：将已知浓度的高浓度质控品加入到低浓度血清中测定回收率，要求在85%～115%范围内。
b). 比对试验采用与罗氏诊断产品（上海）有限公司的脑利钠肽前体检测试剂盒（电化学发光法）检测的样本进行对比试验，相关系数（r）应不小于0.950，斜率应在[0.9，1.1]内。
2.3线性范围在[56，35000]pg/ml范围内，相关系数（r）应不低于0.990。
2.4 重复性分别检测高、中、低三个浓度的样本，变异系数（CV）应不高于10.0%。
2.5批间差用三个批号试剂盒分别检测高、中、低三个浓度的样本，三个批号试剂盒之间的批间变异系数（CV）应不高于15.0%。
2.6 检出限检出限低于30pg/mL。
2.7校准信息溯源性校准信息所用工作校准品根据GB/T 21415-2008 《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的规定，溯源至企业工作校准品，工作校准品通过已上市产品进行赋值。
2.8稳定性试剂盒在规定的条件下保存至有效期末，取到效期后两个月内试剂盒，检测2.2、2.3、2.4、2.6项，结果应符合要求。
荧光免疫法与免疫层析法检测血清N末端脑钠肽前体的方法学比较及偏倚评估
荧光免疫法与免疫层析法检测血清N末端脑钠肽前体的方法学比较及偏倚评估目的通过mini-VIDAS荧光免疫分析仪和Roche cobas h 232心脏标志物检测仪测定N末端脑钠肽前体的方法比对，探讨两种方法检测结果的偏差是否在允许的范围内，检测结果是否具有可比性。
方法以mini-VIDAS荧光免疫分析仪作为参考仪器，Roche cobas h 232心脏标志物检测仪作为实验仪器，依据美国临床和实验室标准化协会（CLSI）EP9-A2文件的要求设计比对方案，以采集自临床患者的空腹新鲜血清标本作为待测标本，以美国临床实验室修正法规1988（CLIA，88）允许总误差的1/2作为标准，对2台仪器检测结果间偏差进行评估。
结果荧光免疫法与免疫层析法比较，r2>0.95，2台仪器的相关性好，在医学决定水平x=300，x=450，x=900时，免疫层析法的预期相对偏倚分别是29.75%，18.47%，7.18%，在x=300，两种方法存在统计学差异，偏倚不可被临床接受。
结论临床实验室内同一检测项目同时在两套系统检测时，应进行比对实验和偏倚评估，以确保检测结果具有可比性。
标签：N末端脑钠肽前体；方法比对；偏倚评估N末端脑钠肽前体（NT-proBNP）作为一种良好的心脏标志物，在心血管领域应用广泛，特别对急诊呼吸困难患者鉴别原因具有重要意义。
快速免疫分析仪在急诊检验工作中具有无法比拟的优越性，但也必须满足快速、准确、精密等要求[1]。
为确保快速分析仪的性能，医学实验室认可国家标准ISO15189要求检测系统在工作前进行分析评价，证实其能够满足预期用途[2]。
方法学不同的检测系统间在测定患者样品结果上具有可比性，在临床检验工作中是很重要的。
本实验按照临床实验室管理要求和美国临床实验室标准化协会（CLSI）EP9-A2文件的要求[3]，对两台仪器检测NT-proBNP的结果进行比对分析，并判断其临床可接受性，旨在为不同检测仪检测结果的可比性提供依据。
荧光微球免疫层析技术定量检测N 末端脑利钠肽前体方法的确定
·47·荧光微球免疫层析技术定量检测N末端脑利钠肽前体方法的确定周 薇 韩 江 赵秀丽 万振洲通信作者 泰州市第四人民医院检验科 江苏泰州 225300魏赵延 江苏正大天创生物工程有限公司 江苏泰州 225300摘 要：利用免疫层析技术与荧光微球标记技术相结合的方式，依据双抗体夹心原理，制备N末端脑利钠肽前体免疫层析试纸条；并从灵敏度、特异性、精密度、稳定性等方面进行全面的方法学评价。
利用免疫荧光层析法建立N末端脑利钠肽前体试剂盒，并对试剂盒的各项指标进行评价，建立一种能够定量检测血清N末端脑利钠肽前体的荧光微球免疫层析方法，用于评估心力衰竭，并对试纸条进行性能评估。
结果表明，试剂盒的线性范围为30-35000…ng/l，线性相关系数r≥0.9900，检出限不高于30ng/l，重复性检测结果的变异系数CV≤10%，批间差检测结果的变异系数CV≤15%，试剂盒特异性高，有效期大于24个月。
免疫荧光层析法能有效地检测血清中N末端脑利钠肽前体的含量，该方法稳定性好，具有良好的应用前景。
关键词：N末端脑利钠肽前体 定量检测 免疫荧光层析法N末端脑利钠肽前体是心室受到牵张时心室肌细胞合成和分泌的肽，心室首先合成一种由108个氨基酸组成的脑利钠肽前体（proBNP），proBNP在释放到血液之前降解为有活性的脑利钠肽（BNP）和无活性的NT-proBNP，它在多种病理状态下都会升高，尤其是在循环血量增加致室壁张力增高以及NT-proBNP清除减少的情况下。
与BNP相比，NT-proBNP半衰期更长（60-120min），更稳定（常温下血标本可放置72h），操作的重复性好，检测早期和(或)轻度心力衰竭时的敏感性更高。
由于NT-proBNP浓度可反映短暂时间内新合成的而不是贮存的BNP释放，因此更能反映BNP通路的激活。
大量证据表明，血浆NT-proBNP水平随心力衰竭程度的加重而升高。
目前已成为诊断心力衰竭的重要指标之一。
N末端B型钠尿肽原（NT—proBNP）定量检测试剂（免疫荧光层析法）产品技术要求万孚
N末端B型钠尿肽原（NT—proBNP）定量检测试剂（免疫荧光层析法）产品技术要求万孚医疗器械产品技术要求编号：1.产品型号/规格通用包装规格为5人份/盒、25人份/盒、40人份/盒和100人份/盒。
2. 性能指标2.1 外观检查外观应平整，材料附着应牢固，各组份应齐全，卡固定紧密。
2.2 物理检查膜条宽应不小于2.0mm；液体移行速度应不低于10mm/min。
2.3 线性范围取同一批号的试剂分别对五个浓度的N末端B型钠尿肽原参考品进行检测，其检测范围为0pg/mL～22000.0pg/mL，每份参考品重复检测3次，计算相关系数r，其中r值应≥0.99。
2.4 精密度2.4.1 批内精密度随机抽取同一批号的试剂10份，分别对同一浓度的N末端B型钠尿肽原参考品进行检测，其变异系数CV（%）值应≤15%。
2.4.2 批间精密度随机抽取连续三个批号的试剂，每个批号取3份分别对同一浓度的N末端B型钠尿肽原参考品进行检测，其变异系数CV（%）值应≤15%。
2.5 准确度用同一批号试剂分别测定三个水平浓度的N末端B型钠尿肽原参考品，计算样本测定结果均值和相对偏差，其中相对偏差（Bias%）应在±15%内。
2.6 最低检出限取同一批号的试剂10份，对配制参考品基质进行检测，计算样本测定结果均值X 和标准偏差SD ，其中（X +2SD ）≤18pg/mL 。
2.7 分析特异性选择同一浓度的N 末端B 型钠尿肽原参考品分别加入胆固醇、甘油三酯、胆红素，使干扰物最终浓度胆固醇60mg/mL 、甘油三酯40mg/mL 、胆红素2mg/mL ，各干扰样本重复检测3次，计算样本检测结果的均值和相对偏差，其中相对偏差（Bias%）应在±15%内。
3. 检验方法 3.1 外观检查取出试剂，用目测方式观察，结果应符合2.1的规定。
3.2 物理检查用游标卡尺检查测试条宽度或观察窗口宽度，以缓冲液作为待测样品，水平放置，用秒表记录液体移行至测试条吸水纸前端或通过观察窗口所需的时间，结果应符合2.2的规定。
免疫透射比浊法及干化学法测定血清白蛋白方法学比较及偏倚评估
免疫透射比浊法及干化学法测定血清白蛋白方法学比较及偏倚评估【摘要】目的通过评估免疫透射比浊法与干化学法测定ALB的偏倚,探讨两种方法检测ALB结果间的偏差是否在允许的范围,保证检测结果的可比性。
方法依据NCCLS标准化文件EP9-A2 [1],每天取临床样本8份,分别用免疫透射比浊法与干化学法进行双份测定,共测定5 d,去除离群点,计算相关系数及预期偏差,以CLIA’88规定的室间质评(ALB+10%)允许误差的1/2作为方法比较结果系统误差的允许限值,进行偏倚的评估。
结果干化学法与免疫透射比浊法比较,r�2=0.934,在医学决定水平20 g/L,35 g/L,52 g/L时,干化学法的预期相对偏倚分别10.4%,6.8%,3.2%, 在Xc= 20 g/L及Xc=35 g/L时, 两种方法存在统计学差异。
结论以免疫透射比浊法作为比较方法,干化学法测定ALB的结果存在正偏差,测定结果的偏差随着ALB浓度的减低而增大,在低浓度时差异更显著,两者相关性差。
因此,实验室内使用不同分析方法检测同一分析物时,建议对各方法进行方法学比较及偏倚评估,明确方法间的差异,并建立各方法的参考范围,特别是建立不同方法在不同医学决定水平浓度的参考值,以保证检测结果的可比性。
【关键词】血清白蛋白;免疫透射比浊法;干化学; 偏倚Turbidimetric Immunoassay Method and Dry-slide Bromocresol Green Method in(ALB)Serum Albumin Determination:A Methodological Comparison and Bias AssessmentFENG Pin-ning,GAO Ling,YU Xiong-wen,et al.Laboratory Medicine Department of the First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,China【Abstract】 Objective The article compares the bias assessments of turbidimetric immunoassay method and dry-slide bromocresol green method in ALB detection, and discusses whether the bias of the two detection results are within the range permitted, so as to ensure the comparability of the results.Method According to NCCLS standardization document EP9-A2 [1], firstly 8 clinical samples are daily taken and tested duplicates under each method, altogether five days. Next the outlier points are excluded and correlation coefficients and expected deviations are calculated. The value is restricted by 1/2 of the error thatexternal quality assessment allows(ALB+10%)by CLIA’88 as the method comparison result system error, and then it is bias assessed.Results The results of comparison between dry-slide bromocresol green method and turbidimetric immunoassay method are as follows: r�2=0.934,when medical decisions are 20 g/L,35 g/L and 52 g/L,the expected relative deviations of dry-slide bromocresol green method are 10.4%,6.8%,3.2% respectively. When Xc=20 g/L and Xc=35 g/L, there are significant differences between the results of two methods.Conclusion Turbidimetric immunoassay is regarded as the methodology in comparison. Dry-slide bromocresol green method, however, proves positive deviations in the results of ALB determination. Its value of bias increases with the decline of ALB concentration, and it is more apparent when the concentration turns low. These two methods have poor correlation. Therefore, when different analysis methods are utilized in the detection of the same object, it is suggested different methodological comparisons and bias assessments be used in each method to make clear the disparities among them and then establisheach reference range, especially the concentration reference values of different methods in different medical decisions, to insure the comparability of the detection results.【Key words】 (ALB)serum albumin; Turbidimetric immunoassay method; Dry-slide bromocresol green method;Bias作者单位:510080中山大学附属第一医院检验医学部血清白蛋白测定是医院常规的生化检验项目,可作为诊断某些疾病(肾病综合征,肝硬化等)和评估预后的指标,其值的高低也可作为血液透析,肾移植患者生存期等的预测指标[2]。
Getein1600荧光免疫定量分析仪及N-端脑利钠肽前体检测试剂盒性能分析
Getein1600荧光免疫定量分析仪及N-端脑利钠肽前体检测试剂盒性能分析潘练华;王路海;吴杨林;黄淑萱;吴旋;居家东;李炜煊【期刊名称】《国际检验医学杂志》【年(卷),期】2017(038)004【摘要】目的评价Getein 1600荧光免疫定量系统测定血清中N-端脑利钠肽前体(NT-proBNP)的性能分析.方法按照WS/T420-2013原卫生部标准对Getein 1600荧光免疫定量析仪及NT-proBNP检测试剂盒(荧光定量法)精密度、线性进行评价.按照美国临床与实验室标准协会(CLSI)方法学对比.结果高值Q1质控品重复标准差与期间标准差分别为88pg/mL与82pg/mL,低于厂家声称的标准差为263pg/mL,中值Q2质控品重复标准差与期间标准差分别为90pg/mL与96pg/mL,低于厂家声称的标准差为186pg/mL,低值Q3质控品重复标准差与期间标准差分别为33pg/mL与46pg/mL,低于厂家声称的标准差为55pg/mL,高中低质控品精密度满足要求;对NT-proBNP为21212pg/mL与210pg/mL样本按照一定比例进行稀释,稀释后进行线性实验(r=0.999>0.990),理论值与实测值偏差都低于10%,厂家声称的线性可靠;与ROCHEE602进行41例样本方法学比对(r=0.997>0.975),回归方程为Y=0.898 X+55,根据3个年龄段参考值450、900和1800pg/mL,偏移分别为2.02%、-4.09%、-7.14%,低于厂家声称偏移.结论Getein 1600荧光免疫定量分析仪及配套NT-proBNP试剂的精密度、线性、准确度符合临床要求.【总页数】4页(P537-540)【作者】潘练华;王路海;吴杨林;黄淑萱;吴旋;居家东;李炜煊【作者单位】广东省佛山市第一人民医院检验科 528000;基蛋生物科技股份有限公司 ,南京211505;基蛋生物科技股份有限公司 ,南京211505;广东省佛山市第一人民医院检验科 528000;基蛋生物科技股份有限公司 ,南京211505;基蛋生物科技股份有限公司 ,南京211505;广东省佛山市第一人民医院检验科 528000【正文语种】中文【中图分类】A【相关文献】1.荧光微球免疫层析技术定量检测N 末端脑利钠肽前体方法的确定 [J], 周薇;韩江;赵秀丽;万振洲;魏赵延2.超声心动图结合N-端脑利钠肽前体评价妊娠期高血压疾病不同构型左心室功能的临床价值 [J], 寿列军;解左平;金社红;谭乳燕;谢乐燕;袁华3.重组人脑利钠肽对慢性充血性心力衰竭患者心功能及血清脂质运载蛋白-2可溶性糖蛋白130N-末端脑钠肽前体水平的影响 [J], 邵王峰4.血浆N-端脑利钠肽前体超敏C反应蛋白对糖尿病伴冠状动脉粥样硬化性心脏病的诊断分析 [J], 黄英英;林啟新;周玉萍5.同型半胱氨酸与血浆N-末端脑利钠肽前体水平指导原发性高血压危险分层价值[J], 黄颢;潘国刚;邓益斌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
IBT和CLIFT法检测抗dsDNA抗体的效用评估及流程的优化
IBT和CLIFT法检测抗dsDNA抗体的效用评估及流程的优化殷波涛;苏斌涛;岳艳玲【期刊名称】《国际检验医学杂志》【年(卷),期】2017(38)A01【摘要】目的分析免疫印迹法（IBT)和绿蝇短膜虫间接免疫荧光法（CLIFT)在抗dsDNA抗体检测中应用，评估检验效能，优化系统性红斑狼疮（SLE)的临床诊断流程。
方法选取2016年4月至2016年12月住院患者361例，分为SLE组（A 组）、非SLE自身免疫病组（B组）、非自身免疫病组（C组），并选取50例健康体检者作为健康体检组（D组），采用IBT和CLIFT法分别检测抗dsDNA抗体的着色值和滴度，同时采用间接免疫荧光检测抗核抗体均质型（ANA)滴度。
按IBT?法（着色值6-11判为阳性）和IBT②法（着色值6-11判为阳性）进行判读。
结果灵敏度IBT?>CLIFT>IBT?,特异度CLIFT>IBT?>IBT?,阴性预测值CLIFT>IBT?>IBT?,阳性预测值CLIFT>IBT?>IBT?;在SLE中CLIFT法具有更好的诊断效能；A组、C组和D组中IBT法着色值和CLIFT法滴度具有相关性，而在B组中无相关；IBT法与ANA—致性较差，而CLIFT法与ANA具有较好的一致性。
结论IBT①法更适合抗dsDNA抗体的筛查；CLIFT法对SLE的诊断效能明显优于IBT法；SLE中可以根据IBT法着色值大小去推测CLIFT法滴度的可能高低，但IBT法不能直接用于疾病诊断效用的评估和疾病活动的观察。
【总页数】3页(P94-96)【关键词】免疫印迹法;绿蝇短膜虫间接免疫荧光法;抗dsDNA抗体;SLE【作者】殷波涛;苏斌涛;岳艳玲【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科,武汉430030;武汉市第一人民医院检验科,武汉430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸内科,武汉430030【正文语种】中文【中图分类】R593.241【相关文献】1.ELISA法与放免法检测红斑狼疮抗dsDNA抗体的对比研究 [J], 张启飞;张晓俐;周建林;林光华2.酶联免疫吸附法与胶体金免疫层析法检测抗环瓜氨酸肽抗体方法学的比较和性能评估 [J], 瞿国英3.化学发光微粒法检测抗 TP 抗体复检流程探讨 [J], 杨华;杨晓东;饶丽华4.酶联免疫吸附法和间接免疫荧光法检测抗dsDNA抗体方法的比较 [J], 张玲;李慧源;黄新;姜叶灵;陈伟锦;李碧波5.快速抑制性ELISA法检测人血清抗dsDNA抗体及其临床意义 [J], 刘永生;李银涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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荧光免疫法与免疫层析法检测血清N末端脑钠肽前体的方法学比较及偏倚评估
作者：王卓周言言王雅琳佟凤芝
来源：《医学信息》2016年第20期
摘要：目的通过mini-VIDAS荧光免疫分析仪和Roche cobas h 232心脏标志物检测仪测定N末端脑钠肽前体的方法比对，探讨两种方法检测结果的偏差是否在允许的范围内，检测结果是否具有可比性。
方法以mini-VIDAS荧光免疫分析仪作为参考仪器，Roche cobas h 232心脏标志物检测仪作为实验仪器，依据美国临床和实验室标准化协会（CLSI）EP9-A2文件的要求设计比对方案，以采集自临床患者的空腹新鲜血清标本作为待测标本，以美国临床实验室修正法规1988（CLIA，88）允许总误差的1/2作为标准，对2台仪器检测结果间偏差进行评估。
结果荧光免疫法与免疫层析法比较，r2>0.95，2台仪器的相关性好，在医学决定水平x=300，x=450，x=900时，免疫层析法的预期相对偏倚分别是29.75%，18.47%，7.18%，在x=300，两种方法存在统计学差异，偏倚不可被临床接受。
结论临床实验室内同一检测项目同时在两套系统检测时，应进行比对实验和偏倚评估，以确保检测结果具有可比性。
关键词：N末端脑钠肽前体；方法比对；偏倚评估
N末端脑钠肽前体（NT-proBNP）作为一种良好的心脏标志物，在心血管领域应用广泛，特别对急诊呼吸困难患者鉴别原因具有重要意义。
快速免疫分析仪在急诊检验工作中具有无法比拟的优越性，但也必须满足快速、准确、精密等要求[1]。
为确保快速分析仪的性能，医学实验室认可国家标准ISO15189要求检测系统在工作前进行分析评价，证实其能够满足预期用途[2]。
方法学不同的检测系统间在测定患者样品结果上具有可比性，在临床检验工作中是很重要的。
本实验按照临床实验室管理要求和美国临床实验室标准化协会（CLSI）EP9-A2文件的要求[3]，对两台仪器检测NT-proBNP的结果进行比对分析，并判断其临床可接受性，旨在为不同检测仪检测结果的可比性提供依据。
1资料与方法
1.1一般资料
1.1.1仪器与试剂 mini-VIDAS荧光免疫分析仪及配套试剂、校准物。
Roche cobas h 232心脏标志物检测仪及其配套试剂。
1.1.2样本来源样本来自我院2014年6月～12月健康人群或患者40份，无溶血、黄疸、脂浊，标本的浓度分布范围覆盖分析方法的线性范围。
包括高、中、低3个水平。
1.2方法
1.2.1测定方法 Roche cobas h 232心脏标志物检测仪的检测原理是首先运用胶体金免疫层析法进行定性，所用抗体为人N末端脑钠肽前体单克隆抗体和人N末端脑钠肽前体抗体，再利用光反射原理对其进行定量检测。
mini-VIDAS荧光免疫分析仪采用一步夹心免疫法结合终点法荧光检测技术。
1.2.2方法对比实验以mini-VIDAS荧光免疫分析仪作为参比系统（x），以Roche cobas h 232作为试验系统（y），两种检测系统在质控在控的前提下，依据EP9-A2文件，每天随机选取8份标本，先对标本进行随机排列，按1-8编号，每份标本分别用两种方法进行双份测定。
第一次测定1→8，第二次8→1，连续测定5d，记录数据。
对实验所得数据进行分析，计算相关系数r值[4]。
1.2.3离群值的检测按照EP9-A2文件对方法间和方法内的离群值进行检查。
1.2.4参比方法测定范围的检测参比方法测定范围可用相关系数（r2）进行粗略的估算，若r2>0.95，则认为参比方法测定标本的取值范围比较合适。
然后计算回归方程y=bx+a（b为斜率，a为常数项）。
1.2.5可接受性能评价计算方法间的系统误差SE=∣y-x∣ SE%=（SE/x）×100%，以CLIA，88对室间评估的允许误差为判断依据，由方法学比较评估的系统误差（SE%）不大于允许误差的1/2为临床可接受水平，判断不同检测系统间的测定结果是否具有可比性。
1.3统计学处理使用SPSS16.0统计学软件对2种检测系统的数据进行统计分析。
用Excel 2003做离群值检验。
以mini-VIDAS荧光免疫分析仪作为参比系统，另外Roche cobas h 232心脏标志物检测仪与之做相关回归分析，并计算线性回归方程。
2结果
2.1离群值的检验用Excel 2003进行离群值检验，所有检测结果中未出现离群值
2.2两种检测系统的相关性以mini-VIDAS荧光免疫分析仪作为参比系统，Roche cobas h 232心脏标志物检测仪与其相关回归方程为y=0.9589x+101.59，r2=0.992，r2>0.95，说明回归统计的斜率和截距可靠，可以估计不同检测系统间的系统误差，NT-proBNP在两种检测系统检测结果的回归曲线见图1。
2.3不同检测系统检测结果在医学决定水平处可接受性能的比对评价以mini-VIDAS荧光免疫分析仪作为目标检测系统，将不同医学决定水平浓度代入回归方程，用以判断各检测系统的临床可接受性能，见表1。
3讨论
随着检验技术的日新月异，各种大型自动化高效率设备的使用，使检验结果的精确度、准确性及工作效率得到了很大的提高，但一些易携带，操作简单，结果报告快速的小型仪器，因其能满足危重患者抢救时间上的要求，能使患者得到及早的诊断和治疗，也有其存在的必要性。
在实际工作中，由于临床检测需求和检测对象的不同，同一项目采用不同分析仪进行检测时，检测结果之间存在的差异往往被人们忽视，导致检测结果的不确定性，从而给临床医生的结果判断和临床诊治带来干扰[5]，为了消除或减少因仪器不同所引起的结果的差异，实验室建立仪器之间的比对制度，保证实验结果的可比性，实现同一实验室不同检测系统检测结果的可比性与一致性是当前实验室质量管理评审活动的重要内容[6]。
在采用不同分析仪对同一检验项目进行检测时，必须进行检测结果的可比性评估，从而确保检测结果的准确性和一致性，更好的服务于临床[7]。
该实验中，mini VIDAS荧光免疫分析仪采用原装配套试剂，操作人员经过统一培训，该仪器参加辽宁省卫生部临床检验中心的室间值评活动，结果均为优秀，是一可靠的检测系统，作为参照系统，对Roche cobas h 232心脏标志物检测仪检测NT-proBNP作相关性方法比对，两套检测系统均无离群点，重复性较好。
相关与回归分析表明，实验方法与比较方法间的相关系数r2>0.95，说明X的分布范围合适，可以用回归统计的方法分析各检测系统之间的系统误差，将不同医学决定水平值（Xc）代入相应的回归方程，计算出医学决定水平处的系统误差，以方法学比较的系统误差
参考文献：
[1]杨缜，刘秀菊，周道民.急性心肌梗死心肌标志物及其床旁检测技术[J].国际检验医学杂志，2008，29（6）：520-521，524.
[2]徐建新，李福刚.POCT对传统医疗模式带来的新机遇[J].中华检验医学杂志，2007，30（12）：1329-1331.
[3]The National Committee for Clinical Laboratory Standards，EP9-A2 Method comparison and bias estimation using patient samples [S].Wanye：PA.NCCLS.2002.
[4] Clinical and Laboratory Standards Institute. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples [S].Approved Guideline-second edition EP9-A2， CLSI，2010.
[5]迟林，李昊淼，韩秀英.不同血细胞分析仪测定结果可比性分析[J].现代检验医学杂
志.2011.26（4）：100-102.
[6]朱晨光，黄伟华，李明.浅谈实验室管理体系的管理评审控制环节[J].中国卫生检验杂志，2008.18（1）：151-152.
[7]刘晓良.不同生化分析仪测定项目结果的比对试验[J].中国实用医药，2012，7（11）：272-273.
编辑/申磊。