紫外可见分光光度计分析方法

紫外可见分光光度计是一种应用很广的分析仪器。

它的应用领域涉及制药、医疗卫生、化学化工、环保、地质、机械、冶金、石油、食品、生物、材料、计量科学、农业、林业、渔业等领域中的科研、教学等各个方面，用来进行定性分析、纯度检查、结构分析、络合物组成及稳定常数的测定、反应动力学研究等。

因为仪器涉及到光学、电学和结构等，所以它需要在一定的环境中应用。

(1)定量分析
根据琅伯-比尔定律，样品的浓度和吸光度是成正比关系的，浓度越大，吸收值越高，所以分光光度计用的的还是定量分析，定量分析的种类有很多，这里介绍常用的几种定量分析方法：
A、法：法是紫外可见分光光度计诸多分析方法中使用较多的一种方法。

这是一种以琅伯-比尔定律A=£bC为基础的分析方法，某一物质在一定波长下£值是一个常数，石英比色皿的光程是已知的，也是一个常数。

因此，可用紫外可见分光光度计在入max波长处，测定样品溶液的吸光度值A。

然后，根据琅伯比尔定律求出C=A/£b,则可求出该样品溶液的含量或浓度。

B、标准法：在选定的波长处，在相同的测试条件下，分别测试标准样品溶液C标和被测试样品溶液C样的吸光度A标和A样。

然后，按下式求得样品溶液的浓度或含量。

C样二A样/A标XC标
C、标准曲线法
紫外可见分光光度计常用的定量分析方法是标准曲线法。

即先用标准物质配制一定浓度的溶液，再将该溶液配制成一系列的标准溶液。

在一定波长下，测试每个标准溶液的吸光度，以吸光度值为纵坐标，标准溶液对应得浓度为横坐标，绘制标准曲线。

将样品溶液按标准曲线绘制程序测得吸光度值，在标准曲线上查出样品溶液对应的浓度或含量。

A、其它分析方法
除上述几个分析方法外经常使用的分析方法外,还有比吸收系数法、二乘法、解联立方程法和示差分光光度法。

(2)定性分析
如果未知物的紫外吸收光谱的吸收峰波长入max、吸收峰波长入Inin、摩尔吸光系数£max,以及吸收峰的数目、位置、拐点与标准光谱数据完全一致，就可以认为是同一种化合物。

定性分析的主要目的是知道分析样品中是什么物质。

定量分析和定性分析是分光光度计的两大主要功能，特别是定量分析。

其它的分析都应该是从这两大种功能中发展出来的。