犬狂犬病免疫抗体效果评价

综述与专论
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2023.12·0 引言
狂犬病又名“疯犬病”是一种溶血性疾病，由嗜神经病毒引起的人兽共患的急性脑炎或脑膜脑炎性传染病[1-2]。

狂犬病临床特点表现为全身蚁走感、恐水（狂暴狂犬病）、怕光、怕风、恐惧、痉挛或者狂躁、进行性瘫痪、昏迷（麻痹性狂犬病），最后麻痹死亡[3]。

临床症状主要是由于炎症反应引起的脑损伤，大多数情况下，潜伏期一般为2～3个月。

与其他疾病不同的是狂犬病病患一旦出现相应的临床症状，病死率为100%。

该病好发于各类犬、猫、狐、蝙蝠以及被携带狂犬病病毒所咬伤的动物，传染源是感染狂犬病病毒的动物。

感染的动物唾液中含有狂犬病毒，被感染动物咬伤或者被其舔粘膜都会引起病毒的传播，侵袭周围神经组织、脊髓及脑脊髓。

据统计，除南极洲外，全球各地都有狂犬病病例出现，且每年由狂犬病引起死亡的人数达59 000人，大多数分布在亚洲和非洲地区。

蝙蝠是狂犬病病毒的储存宿主，99%的人类病例都是由于犬类引发。

犬接种狂犬病疫苗是切断狂犬病在犬与犬之间及犬与人之间传播的关键点，通过从源头上预防狂犬病的传播，即给犬接种疫苗是一种成本最低、效果最佳、可持续发展的防控疾病措施。

国际上还没有公认的、成功治愈的狂犬病病例。

一旦受到犬等动物咬伤感染该病毒，没有及时得到有效的治疗，就会造成100%的死亡。

为严格控制该病的爆发和流行，渭南市针对犬饲养及狂犬病强制免疫出台一系列政策法律法规，旨在加强犬狂犬病疫苗的免疫接种法规实行。

但犬接种疫苗后，总体的免疫效果如何尚缺乏有力的数据，为摸清接种后
收稿日期：2023-09-15
基金项目：陕西省农业科技创新转化项目(NYKJ-2019-WN001)
作者简介：秦鸽鸽（1988-），女，陕西渭南人，硕士，兽医师，研究方向：动物疫病检测与诊断。

秦鸽鸽，白鸽，庄安宁，等．犬狂犬病免疫抗体效果评价[J]．现代畜牧科技，2023，103（12）：123-125．　doi ：10.19369/ki.2095-9737.2023.12.032．　QIN Gege ，BAI Ge ，ZHUANG Anning ，et al ．Evaluation of the Effect of Canine Rabies Immune Antibody[J]．Modern Animal Husbandry Science & Technology ，2023，103（12）：123-125．
犬狂犬病免疫抗体效果评价
秦鸽鸽1，白鸽1，庄安宁2，王国超1，马宁君1，韦唯1，徐梦迪1，南苹瑶1，吴奇强1*
（1. 陕西省渭南市动物疫病预防控制中心，陕西 渭南 714000；2. 陕西省蒲城县畜牧发展中心，陕西 蒲城 714000）摘要：为了解渭南市犬狂犬病免疫效果，2021—2022年共采集犬免疫血清618份，利用酶联免疫吸附试验的方法，筛选出狂犬病免疫达标犬。

结果显示全市犬免疫抗体平均阳性率为81.88%，犬狂犬病免疫效果总体已达到OIE 公布的控制范围（70%以上），表明加强犬狂犬病强制免疫能有效为犬类狂犬病防控提供有力保护屏障。

关键词：狂犬病；疫苗；免疫；抗体检测
中图分类号：S858.292 文献标识码：B doi：10.19369/ki.2095-9737.2023.12.032
Evaluation of the Effect of Canine Rabies Immune Antibody
QIN Gege 1，BAI Ge 1，ZHUANG Anning 2，WANG Guochao 1，MA Ningjun 1，WEI Wei 1，XU Mengdi 1，
NAN Pingyao 1，WU Qiqiang 1*
（1. Weinan Animal Disease Control Center ，Weinan Shaanxi 714000，China ； 2. Pucheng Animal Husbandry Development Center ，Pucheng Shaanxi 715500，China ）
Abstract ：In order to understand the rabies immunity effect of dogs in Weinan City ，a total of 618 dog immune serum samples were collected from 2021 to 2022 and screened by enzymolinked immunosorbent assay rabies immune standard dog ．The results showed that the average positive rate of canine immune antibodies in the city was 81.88%，and the overall rabies immunity effect of dogs had reached the control range published by OIE （more than 70%）．The results indicated that strengthening rabies immunization could effectively provide a protective barrier for canine rabies prevention and control ．Keywords ：rabies ，vaccinum ，immunity ，antibody detection
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·2023.12
全市犬的狂犬病免疫状况，渭南市于2021—2022年连续2年对全市犬只的狂犬病病毒免疫抗体效果进行抽样调查分析，旨在为渭南市狂犬病的预防接种措施制定和评价免疫接种效果等提供参考依据，也为国内其他省市的狂犬病防控提供参考，建立群防群控体制。

1 主要仪器及试剂
恒温箱、离心机、洗板机、酶标仪等；犬狂犬病病毒抗体ELISA试剂盒购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司。

2 样品来源
2021—2022年，采集渭南市犬只样品618份（均已免疫过3次狂犬病疫苗）。

3 方法
3.1 血清采集
待犬安全保定后，用采血器取后肢静脉血3 mL，放置恒温箱析出血清后，离心并分离出待检血清，放置-20 ℃冷冻保存备用。

3.2 ELISA操作
（1）取出试剂盒和待检血清，室温平衡30 min。

将浓缩洗涤液去离子水20倍稀释保存备用。

（2）样品稀释。

用样品稀释板将待检血清用样品稀释液按1∶100稀释（即取10μL血清加入到1 mL样品稀释液中），放置于微量震荡仪震荡5 min。

（3）加样。

取出所需量的预包被微孔板，阳性对照1孔、阴性对照1孔、临界对照3孔（每孔各加100μL），空白对照1孔，其余每孔依次加入稀释好的样品100μL，置37 ℃培养箱中孵育30 min。

（4）洗板。

甩净孔中液体，拍干，将稀释好的洗涤液注满每孔，静止30 s后甩净、拍干，重复洗涤3次。

（5）加酶。

除空白对照孔，其余孔各加酶标记物50μL，置37 ℃培养箱中孵育30 min。

（6）显色。

重复步骤4，拍干后每孔加显色液A、B各50μL，置37 ℃培养箱中避光显色10 min。

（7）终止。

每孔加入终止液50μL，放置于微量震荡仪震荡混匀。

以空白孔调零，用酶标仪450 nm波长测定OD值。

3.3 结果判定
阴性对照值应≤0.15，临界对照OD值应在0.20～0.80，临界对照OD值平均值/阴性对照OD值平均值≥2.0阳性对照OD值＞临界对照OD值平均值，证明实验成立，否则试验结果无效。

若样品孔OD值≥临界对照OD 值的平均值判为阳性，达到免疫保护性；反之则为阴性。

4 结果
全市检测犬狂犬病免疫血清618份，506份血清犬狂犬病IgG抗体呈阳性，即81.88%犬免疫狂犬病疫苗产生保护性，见表1。

表1 不同区域犬只免疫抗体检测结果
区域检测数（份）阳性数（份）阳性率（%）
12020100.00
22020100.00
3302790.00
4302790.00
5322887.50
6302583.33
735629081.46
8302480.00
9302376.67
10201365.00
1120945.00
合计61850681.88
犬只接种政府招标免费苗还是自费苗，结果显示2种苗抗体免疫阳性率不相上下，即检测国产狂犬病活疫苗免疫血清样品303份，抗体阳性数247份，阳性率81.52%；检测进口狂犬病灭活疫苗免疫血清样品315份，抗体阳性数259份，阳性率82.22%，在狂犬病防控上都能提供有利保障基础，相关数据见表2。

表2 不同疫苗狂犬病IgG抗体检测结果
疫苗类别检测数（份）阳性数（份）阳性率（%）政府招标国产苗30324781.52
自费苗31525982.22合计61850681.88
5 讨论与结论
大约80%的人类狂犬病病例都是来源于农村地区，超过40%的狂犬病死亡病例年龄都不足15岁[3-4]。

在全球范围内，狂犬病每年引起的经济负担超过86亿美元，这一费用都是由发生病例的贫困落后地区相应承担。

可通过以下3种有效措施预防。

一是对狂犬病从业者宣传教育相关专业知识，发生意外第一时间运用合理有效的措施处理伤情，包括狂犬病的预防、犬类狂犬病临床特点以及被咬伤时立刻需要的处理。

二是暴露后的预防（PEP）包括一系列疫苗的接种，在某些情况下，还包括狂犬病免疫球蛋白（RIG）的注射。

及时得当的伤口清理和接种有效的疫苗在预防狂犬病致死是100%有效的[5]。

三是大规模接种狂犬病疫苗已是一种被大家公认的、成本最低、最有效的预防狂犬病的措施[6-7]。

虽然多种动物都携带狂犬病病毒，但人类99%的狂犬病确实都是由于犬类引起的[3]。

消除犬的狂犬病是可持续预防人类狂犬病的关键。

狂犬病实验模型和实际情况数据都表明，维持70%的犬疫苗接种覆盖率足
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2023.12·以阻止狂犬病在犬和犬之间的传播，达到逐步清除狂犬病[3，8]。

本次调查发现，接种狂犬病国产苗和进口苗两种疫苗的免疫效果不相上下，与文中公布的结果一致[9]，因此在疫苗选取上可以选择经济实用的疫苗。

另外，通过调查发现81%以上区域免疫效果达到OIE 公布的防控标准。

11个区域抗体阳性率分布在45%～100%，狂犬病强制免疫抗体阳性率存在明显差异，即在不同区域，狂犬病强制免疫抗体效果存在明显差异，区域10和区域11免疫效果不达标，不具有免疫保护性。

通过调研得知，有的区域对狂犬病免疫重视程度不高，一是疫苗没有严格按要求保存及运输，二是从业人员普遍专业素质不高，对免疫准确位置把握不准，造成区域10和区域11犬免疫失败，影响整体抗体合格率，造成免疫阳性率不达标。

全市犬均已接受3次免疫，说明狂犬病免疫必须加强免疫，才能确保达到防控标准。

一直以来，渭南市有关狂犬病防控免疫抗体效果监测一直处于空白状态，通过本次调查统计分析，不仅填补渭南市狂犬病抗体监测数据的空白，也为以后该市狂犬病综合防控和精准防控提供数据支撑。

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编辑：韩若。