2020-2021学年浙江高三三轮复习生物选考模拟试题选修3现代生物技术专题汇编

（一）2021年4月·杭州二模
回答与转基因雷公藤培育过程有关的问题：
(1)将含______________酶的混合液在55℃水浴锅中活化，0.22μm微孔滤膜____灭菌。

取雷公藤悬浮细胞，加入酵混合液，黑暗条件下______________培养以分离原生质体。

(2)原生质体的活力检测采用台盼蓝染色法(台盼蓝可穿透死细胞的细胞膜，使死细胞中的DNA 着色，但无法进入活细胞内)，原生质体活力的计算方法为：_______________________占该视野下原生质体总数的百分比。

(3)由于原生质体来源于黑暗条件下培养的雷公藤悬浮细胞，因此其细胞中不含____________。

将原生质体与含____________的植物表达载体质粒混合，在黑暗条件下完成转化后，再用激光作扫描光源的显微镜观察，统计发出绿色荧光的原生质体数占观察到的所有原生质体数的百分比，以此确认原生质体的转化效率。

(4)将转化后的原生质体进行培养，重新长出细胞壁，形成胚性细胞。

此时，应该____________培养基中甘露醇浓度，以利于胚性细胞继续培养形成细胞团，然后形成再生植株。

再生植株需去除____________________理并进行锻炼后才能移种大田。

（二）2021年4月·嘉兴二模
植物原生质体分离所需酵的保存要求较高，为了解决这个问题，采用13％CPW洗液冲洗蜗牛消化道，获取含消化酵的混合液，该混合液可直接用于相关实验。

(1)含蜗牛消化醇的混合液能用于去除细胞毫原因是蜗牛是一种_____________动物，它的消化液中含有__________________。

(2)用该混合液处理会对细胞造成一定的伤害，原因是__________________，为减轻对细胞的伤害，需要控制好处理__________。

(3)植物原生质体的分离和培养结合__________________技术，可以克服远源杂交不亲和，从而培养优质的________多倍体植物。

植物原生质体的分离和培养结合__________________—技术，从而实现使外源基因表达和原有基因________________________的作物新品种。

2021年4月·绍兴适应性考试
回答与基因工程和植物克隆有关的问題。

(1)用植物叶片分离原生质体时，要先用70％乙醇和5％次氯酸钠进行_____________处理，再用适宜浓度的甘露醇溶液使细胞处于__________________状态，有利于酶分解细胞壁，减少原生体损伤。

(2)先将目的基因插入农杆菌的T-DNA，接着让__________________和植物原生质体共同培养，可以实现目的基因向原生质体的转移和整合。

再生细胞壁后，在含有__________________的培养基上筛选获得具有抗性的细胞，并通过液体悬浮培养，获得一定数量具有
__________________特征的单细胞，经诱导发生类似受精卵经过卵裂、分化、_______________和形态建成而发育成胚状体，然后再发育成完整植株。

(3)常利用茎尖进行植物克隆，一方面茎尖细胞相较叶肉细胞具有更高的_______________，另一方面，由于________________________，易获得脱毒苗。

2021年4月·湖州丽水衢州三市质检
回答下列与转基因植物培育相关问题：
(1)从基因文库中选择钓取某种抗病蛋白A的基因的方法有：利用核酸探针釆用
_________________技术，使得在适当条件下，该探针与互补的目的基因片段形成双链从而筛选出来；或者将基因文库中的所有基因进行表达，然后利用__________________作为探针采用抗原-抗体杂交技术，找出能与探针特异性结合的表达产物，进而获得与之对应的目的基因。

(2)由于植物细胞壁的存在，重组DNA导入细胞具有一定的难度。

在较高渗透压的甘露醇溶液环境下用__________________处理根尖、叶片等可以获得球形的原生质体。

原生质体的培养需考虑原生质体的__________________、培养基的__________________、渗透压、温度和PH等因素的影响。

(3)将重组DNA用__________________法导入原生质体。

原生质体再生成细胞壁后培养得到的细胞具有__________________细胞的特征，经培养基中成分的诱导，可从单细胞依次到细胞团、球形胚、心形胚和_______________，最后再生出完整的植株。

中国科学院神经科学研究所利用CRISPR-Cas9基因编辑技术（如图所示）和胚胎工程技术构建了一批敲除关键基因BMAL1的生物节律紊乱克隆猴，作为抗失眠治疗研究的动物模型。

CRISPR-Cas9基因编辑系统由向导RNA和Cas9蛋白组成，向导RNA识别并结合靶基因DNA，Cas9蛋白切断双链DNA形成两个末端。

这两个末端通过“断裂修复”重新连接时通常会有个别碱基对的插入或缺失，从而实现基因敲除。

请回答：
（1)基因编辑系统导入猕猴受精卵需要借助技术。

向导RNA识别靶基因DNA时遵循原则，Cas9蛋白切断靶基因DNA形成的两个末端重新连接时所必需的一种酶是_________。

可利用_________技术检测胚胎细胞是否成功敲除了猕猴的BMAL1基因。

（2)利用该技术还可以在染色体DNA上定点插入目的基因，基本过程如下：向细胞内导入基因编辑系统时，同时导入含目的基因的DNA修复模板，修复模板能与切断后形成的末端序列互补配对，并作为合成新链的模板，这样修复后就会在原来DNA上“插入”一个目的基因，此时参与修复的除上述酶以外还有_________酶。

（3)如果对Cas9蛋白进行修饰改变，使它在向导RNA的介导下只能识别结合靶基因的_________部位，但不具备切断DNA的功能，那么就能阻止靶基因开始转录，从而使基因沉默。

（4)这一研究成果表明，我国正式开启了批量标准化构建疾病克隆猴模型的新时代。

克隆猴被用于人类遗传学和生理学研究所具有的突出优点是_________________、_________________。

回答下列与克隆技术有关的问题：
（1）通过组织培养技术，把植物细胞培养_____，通过人工种皮包装得到类似于胚珠发育而成的人工种子，其内含有的人工胚乳能够为人工种子的萌发生长提供所需的物质，因此应含有_____、矿质元素和_____等几类物质。

（2）通过克隆技术培育转基因植株，通常使用____________法将目的基因导入宿主细胞后经组织培养获得转基因植株。

宿主细胞一般要选用具有优良性状、较高的______、全能性表达充分及易被侵染等特点的植物材料。

为获得脱毒苗，可以选取植物的______行组织培养。

（3）通过克隆技术获得动物器官，可以从_____中获取胚胎干细胞，经特定的方法培养后获得所需器官；要使贴壁生长的胚胎干细胞从瓶壁上脱落，可用_____酶处理。

（七）2021年3月·宁波十校联考
紫杉醇是红豆杉属植物产生的一种复杂的次生代谢产物，对多种癌症都有一定的疗效。

初用于研究和临床试验的紫杉醇都是从红豆杉树皮中提取。

从36株60年生大树的树皮中才能提取到约1g紫杉醇，可治疗一个癌症患者。

一些地方通过伐树生产紫杉醇，使野生资源遭受到了极大的破坏，保护其野生资源和扩大药源已成为当前急需解决的矛盾。

(1)科学家发现紫杉醇的抗癌机理是：紫杉醇能和微管蛋白聚合体相互作用，促进微管聚合并使之稳定，阻碍纺锤体的形成，从而阻碍__________________。

(2)利用植物组织培养，让_____________细胞产生紫杉醇是一条理想的途径。

此培养方法的原理是________________。

(3)由于植物细胞壁的存在，植物的__________________________有一定的难度，可用
__________________________处理该细胞，获得球形的原生质体，通过对原生质体的培养，获得能产生紫杉醇的__________________。

(4)在获得原生质体的过程中，常常在____________渗透压溶液中，目的是
_________________________________________________________。

（八）2021年2月·之江教育返校考
草甘麟是一种广谱高效的火生性除草剂，它通过与EPSPS（叶绿体中的一种米）结合，抑制EPSPS 的作用，阻断芳香族氨基酸的合成，从而引起细胞死亡。

为了提高普通棉花对草甘麟的抗性，科学家通过转基因的方法获得转基因抗草甘麟棉花植株。

请回答下列问题；
（1）方法一叶绿体基因工程：科学家通过转基因的方法将某外源EPSPS基因转入棉花植株的叶绿体中，使其产生更多的EPSPS，使得转基因棉花对草甘麟的抗性可达5mmol/L（比野生型棉花高10倍）。

体外扩增EPSPS基因常采用PCR技术，其原理是_________。

将外源基因导入叶绿体需穿过________________膜（具体名称），科研人员为将EPSPS基因导入叶绿体，利用压缩气体产生的动力，将EPSPS基因包裹在钧粉粒子表面成功打入叶绿体中。

EPSPS基因导入成功后，是否赋予了棉花对草甘麟的预期抗性，还需要对转基因棉花进行的鉴定操作是
___________。

（2）方法二细胞核基因工程：获取目的基因，将获取的三个抗草甘鱗基因G10插入质粒，重组质粒的部分结构（箭头表示转录方向）如图所示。

G10插入质
粒后，不能影响质粒的___，将消毒后的棉花胚与含重组质身；
粒的农杆菌在培养基上共培养，目的是_________。

将共同培养后的棉花胚转入含有营养物以及_________的培养基中脱菌、诱导培养和筛选，从而得到转基因抗草甘麟棉花植株。

（3）从生物安全角度分析，叶绿体基因工程与细胞核基因工程相比，安全性更高的原因
是___________
（九）2021年3月·名校协作体试题
回答与基因工程和植物克隆有关的问题：
（1）将野外釆集的某植物叶片经消毒处理后，去除下表皮，再将其置于经__________________处理的较高渗透压的混合酶液中以获得原生质体，去除下表皮的目的是使酶液____________，保证酶解充分。

植物原生质体的获取过程中一般使用__________________（填"相同”或"不同”）浓度的甘露醇溶液。

（2）为培育抗虫的转基因植物，将含抗虫基因的DNA和质粒用____________酶处理后形成重组质粒，将重组质粒导入上述植物原生质体。

原生质体培养过程中，原先__________________
形的原生质体再生细胞壁后形状会明显改变，在液体培养基适宜环境的诱导下分化为
__________________，最后再生出完整的植株。

（3）为了检测抗虫基因是否存在于该转基因植物的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定。

在鉴定时应分别以该植物不同组织细胞中的__________________作为PCR模板。

A.mRNA
B.总RNA
C.DNA
D.mRNA或DNA
答案：（一）（8分，每空1分）
（1）纤维素酶和果胶酶过滤悬浮
（2）未被台盼蓝染色的原生质体
（3）叶绿体绿色荧光蛋白基因
（4）降低根部残留的培养基
(二)(1)植食性纤维素酶和果胶酶
(2)混合液中含有蛋白酶时间
(3)原生质体融合异源转基因表达增强或抑制
(三)(1)消毒质壁分离
(2)含有目的基因的农杆菌抗生素胚性细胞器官发生
(3)全能性茎尖生长点几乎不含病毒
（四）（1）核酸分子杂交抗病蛋白A的单克隆抗体（或抗病蛋白A的抗体）
（2）纤维素酶和果胶酶活力和密度（写出其中一项即得分）营养物质和激素配比
（3）显微注射胚性胚状体
（五）（1）显微注射/显微操作碱基（序列）互补配对
DNA探针/DNA杂交/基因探针/核酸杂交/核酸探针/基因诊断
（2）DNA聚合/DNA合成
（3）启动/RNA聚合酶结合/调控
（4）亲缘关系近减少个体差异的影响
（六）（1）胚状体植物激素糖（蔗糖或葡萄糖）
（2）农杆菌转化遗传稳定性茎尖
（3）（囊胚的）内细胞团胰蛋白
(七)（1）肿瘤细胞的分裂
（2）愈伤组织细胞增殖
（3）组织培养和克隆纤维素酶和果胶酶细胞系
（4）较高使细胞处于微弱的质壁分离状态，这样有利于完整的原生质体的释放，防止原生质体被破坏（提到处于微弱的质壁分离状态即可）
（八）（1）DNA复制（1分）细胞膜、叶绿体内外膜（叶绿体双层膜）（答全给分）（1分）用5mmol/L的草甘麟喷洒转基因棉花植株检测其抗性（1分）（答出浓度才给分）
（2）复制（或正常功能）（1分）通过农杆菌将目的基因导入棉花细胞（1分）一定浓度的草甘麟，植物激素，抗生素（1分）（答全给分）
（3）由于叶绿体基因组不会随花粉扩散，有效避免了基因污染（1分）
（九）（1）过滤灭菌渗透到细胞间隙中/与细胞充分接触不同
（2）限制性核酸内切酶和DNA连接酶球胚状体
（3）C（2分）。