高考生物一轮复习 生物技术实践 专题四 DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取课件(选修1)

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【全优设计】高考生物一轮复习 专题4 DNA和蛋白质技术、植物有效成分的提取课件 新人教选修1

【全优设计】高考生物一轮复习 专题4 DNA和蛋白质技术、植物有效成分的提取课件 新人教选修1
专题4 DNA和蛋白质技术、 植物有效成分的提取
一、DNA的粗提取与鉴定 1.基本原理 (1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度__最__低__; (2)DNA_不___溶于酒精溶液; (3)DNA不被蛋白酶所水解; (4)DNA可被__二__苯__胺___染成蓝色。






,





;而






较 大的 蛋 白 质 无 法 进 入 凝 胶 内 部 通 道 ,只 能
在 外 部 移 动,路 程 较 短 ,移 动 速 度 较 快 ,
先洗脱下来
2.
即时训练3科学家发现家蝇体内存在一种抗
菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力,受到研究者重视。

所用试剂:二苯胺试剂。
DNA的鉴定
处理方法:将试剂与DNA溶液混合后沸水 加热5min。
现象:溶液颜色变蓝。
即时训练1关于DNA粗提取的实验材料的选
择,也经过了多次实验效果的比较,最终选择鸡血做实验材料。请回 答下列问题。
(1)鸡血细胞中红细胞
,家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液

细胞数目较多,可以提供丰富的
解析:玫瑰精油的化学性质稳定,难溶于水,易溶于有机溶剂,能随水蒸 气一同蒸馏。实验操作考查提取玫瑰精油的蒸馏装置的连接。水流 的作用是冷却气流,所以与水蒸气方向相反。温度计测量的是气体 的温度,因此要放在支管下沿。加入碎瓷片的目的是防止暴沸。
考点一 DNA的粗提取与鉴定 1.DNA与蛋白质理化性质的区别 (1)溶解度的区别。

生物一轮总复习 专题4 植物的组织培养技术 DNA和蛋白质技术植物有效成分的提取课件 新人教版选修1

生物一轮总复习 专题4 植物的组织培养技术 DNA和蛋白质技术植物有效成分的提取课件 新人教版选修1

(3)pH、温度和光照等也影响植物组织培养。(
3.实验操作过程[填空] 配制各种母液 (1)制备 MS 固体培养基配制培养基 (2)外植体消毒:
(3)接种:始终在 ____________ 旁进行,对接种工具要 __________灭菌。将菊花茎段插入培养基中时注意______ ____________________。 (4)培养与移栽:在 18 ℃~22 ℃的________中培养,得 到________后进行移栽。
再分化 3√
移栽
270%的酒精 灼烧
0.1%氯化汞
无菌水 试管苗
3酒精灯火焰
不要倒插
4无菌箱
二、1.四分体时期 2.胚状体 愈伤组织
单核期 丛芽 2单核靠边
3.1材料的选择 4.1√ 2×
培养基的组成 3√ 4×
三、1√
2√

四、1.热变性 2.1变性 3延伸
研考点〃破疑难 02
考点高频聚焦 核心响鼓重敲
植物组织培养
1.原理 植物细胞的全能性。 2.高度分化的细胞全能性表达的条件 (1)离体状态。 (2)营养物质:有机营养、无机营养。 (3)植物激素:生长素、细胞分裂素。 (4)无菌、适宜的外界条件。
3.植物组织培养技术和花药离体培养技术的比较
4.植物激素在组织培养过程中的重要作用 生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分 化的关键性激素。其作用及特点为: (1)在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加 强的趋势。
(3)鉴定方法:________法。
回顾教材图表强化知识能力
据花药培养产生花粉植株的两种途径示意图回答问 题:
(1)决定花粉植株产生途径的因素主要是什么?
(2)诱导花粉植株能否成功的主要因素是什么?

高考生物一轮复习 第四讲 DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取课时跟踪检测 新人教版选修1

高考生物一轮复习 第四讲 DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取课时跟踪检测 新人教版选修1

高考生物一轮复习第四讲 DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取课时跟踪检测新人教版选修1(限时:20分钟满分:60分)一、选择题(每小题6分,共30分)1.下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作,其中正确的是( )A.可采集猪血作为实验材料B.用蒸馏水重复洗涤红细胞C.血红蛋白释放后应低速短时间离心D.洗脱液接近色谱柱底端时开始收集流出液解析:为防止细胞吸水涨破,洗涤时要用生理盐水;释放出血红蛋白后,以2 000 r/min 的高速离心;在分离时,要等到红色蛋白质接近色谱柱底端时开始收集流出液。

答案:A2.对“DNA的粗提取和鉴定”实验的叙述,正确的是( )A.利用DNA能溶于酒精溶液,而蛋白质不溶于酒精溶液,可将DNA与蛋白质分离B.利用高温能使蛋白质变性,却对DNA没有影响的特性,可将DNA与蛋白质分离C.在溶有DNA的2 mol/L氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水,轻轻搅拌后过滤,取滤液进行以后的实验D.在DNA滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的作用,可将DNA 与蛋白质分离解析:利用DNA不溶于酒精溶液,蛋白质溶于酒精溶液的特点,可将DNA与蛋白质分离;高温能使蛋白质、DNA变性,蛋白质在60~80℃可变性,而DNA在80℃以上也会变性,所以高温对DNA有影响;在溶有DNA的2 mol/L氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水,轻轻搅拌后过滤,得到DNA黏稠物,用DNA黏稠物进行以后的实验;在DNA滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的专一性作用,可将DNA与蛋白质分离。

答案:D3.有关“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中,不.正确的是( )A.可通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度B.将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较小的杂质C.血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂D.整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构解析:可通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度。

高考生物一轮复习 第四讲 DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取配训练

高考生物一轮复习 第四讲 DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取配训练

藏躲市安详阳光实验学校选修1 第四讲 DNA 和蛋白质技术与植物有效成分的提取一、选择题(每小题5分,共40分)1.下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是( )A.利用DNA溶于酒精,而蛋白质不溶于酒精,可将DNA与蛋白质分离B.利用高温能使蛋白质变性,却对DNA没有影响的特性,可将DNA与蛋白质分离C.在溶有DNA的物质的量浓度为2 mol/L的氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水,轻轻搅拌后过滤,取滤液进行以后的实验D.在DNA滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的作用,可将DNA与蛋白质分离2.下列有关蛋白质提取和分离的说法,错误的是( )A.透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性B.采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来C.离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离D.蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动3.提取玫瑰精油的过程中,油水混合物中要加入氯化钠,不属于其目的的是 ( )A.增大玫瑰油的溶解度B.盐析,使玫瑰油和水分开C.利于玫瑰油的纯化D.利于玫瑰液的回收4.PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,下列有关PCR过程的叙述,不.正确的是( )A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP和四种核糖核苷酸D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高5.在蛋白质的提取和分离实验中,下列对样品处理过程中,正确的是( )A.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐B.洗涤时离心速度过小,时间过短,白细胞等会沉淀,达不到分离的效果C.洗涤过程选用0.1%的生理盐水D.透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质6.下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述,正确的是( )A.提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞B.用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质C.蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNAD.只有蛋白质可以用电泳的方法进行分离纯化7.PCR(多聚酶链式反应)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,如图表示合成过程。

高考生物一轮复习 专题四 DNA、蛋白质技术和植物有效成分的提取 新人教版选修1

高考生物一轮复习 专题四 DNA、蛋白质技术和植物有效成分的提取 新人教版选修1
NaCl
无水 Na2SO4
2.提取橘皮精油的实验 (1)方法:一般采用__压__榨____法。 (2)实验流程
压榨
过滤
3.胡萝卜素的提取 (1)胡萝卜素性质:_不__溶__于___水,微溶于乙醇,易__溶__于____石油醚等 有机溶剂。
(2)提取方法及流程 ①方法:__萃__取____法,石__油__醚____最适宜作萃取剂。 ②实验流程: 胡萝卜→粉碎→__干__燥____→萃取→__过__滤____→浓缩→胡萝卜素。 (3)鉴定方法:_纸__层__析___法。
4.判断下列有关植物有效成分提取叙述的正误。 (1)萃取加热时需安装冷凝回流装置,其目的是防止有机溶剂挥发
( √) (2)蒸馏法的实验原理是利用水将芳香油溶解下来,再把水蒸发
掉,剩余的就是芳香油( × ) (3)在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中,应选择较高的温度以便于充
分干燥( × )
二、识图析图 玫瑰油提取的实验流程示意图:
2.判断下列有关 PCR 技术叙述的正误。 (1)PCR 呈指数扩增 DNA 片段是因为上一轮反应的产物可作为下 轮反应的模板( √ ) (2)PCR 中加入的引物有两种,其作用是使 DNA 聚合酶能够从引 物的 5′端开始连接脱氧核苷酸( × )
3.判断下列有关血红蛋白提取与分离叙述的正误。 (1)蛋白质和 DNA 都可以用电泳的方法进行分离纯化( √ ) (2)电泳法纯化蛋白质时,若分离带电荷相同的蛋白质,则其相对 分子质量越大,电泳速度越快( × )
(2)结果
① PCR 一 般 要 经 历 __三__十____ 多 次 循 环 , 每 次 循 环 可 以 分 为 __变__性____、复性和__延__伸____三步。
②两引物间固定长度的 DNA 序列呈_指__数__式___扩增(即__2_n_____)。

高三生物一轮复习人教版课件选修1第4讲DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取

高三生物一轮复习人教版课件选修1第4讲DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取

2.细胞内DNA复制与PCR技术
细胞内DNA复制 在DNA解旋酶作用下, 解旋 边解旋边复制 不同 点 PCR 80~100 ℃高温解旋,双 链完全分开 Taq DNA聚合酶 DNA或RNA

引物
DNA解旋酶、DNA聚合 酶
RNA
温度
循环 相同 点
体内温和条件
受生物自身控制
高温
30多次
①需提供DNA复制的模板;②四种脱氧核苷酸为原料; ③子链延伸的方向都是从5′端到3′端
选修一
生物技术实践专题
第四讲 DNA和蛋白质技术与植物 有效成分的提取
考点·全线突破 考点一 DNA的粗提取与分离 [关键点击] 1.DNA与蛋白质在NaCl溶液中溶解度
2 mol/L 0.14 mol/L NaCl溶液 NaCl溶液 溶解规律 在酒精溶 液中的溶 解性 析出 NaCl溶液从2 mol/L降低 过程中,溶解 度逐渐增大 对高温 的耐受 性
(3)3次使用纱布的作用:①过滤血细胞破裂液,提取细胞
核物质 (DNA在滤液中 ) ;②过滤 0.14 mol/L NaCl溶液,滤出 DNA(DNA在黏稠物中);③过滤溶有DNA的2 mol/L NaCl 溶液(DNA在滤液中)。 (4)3次使用NaCl溶液的作用:①2 mol/L NaCl溶液,溶解 提取细胞核物质;②0.14 mol/L NaCl溶液,使DNA析出;③ 2 mol/L NaCl溶液,溶解滤取的DNA黏稠物。
D N A
蛋 白 质
溶解
析出
80 ℃以 上才会 变性
不能忍 受60 ℃ ~80 ℃ 的高温
部分发生 盐析沉淀
溶解
溶解
2.鉴定方法
(1)DNA与二苯胺在沸水浴条件下反应呈蓝色; (2)蛋白质与双缩脲试剂常温下反应呈紫色。 3.DNA粗提取实验材料和方法的选择 (1)不同生物的组织中DNA含量不同 在选取材料时,应本着 DNA 含量高、材料易得、便于提 取的原则。

高考一轮生物复习课件(人教版)选修I专题四 DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取

高考一轮生物复习课件(人教版)选修I专题四 DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取

第16页
选修一 专题四
高考调研
高三生物(新课标版)
4.解旋:利用了 DNA 的热变性原理,通过控制温 度来控制双链的解聚与结合。
5.酶:耐高温的 Taq-DNA 聚合酶,高温不会失活。 6.PCR 的条件:一定的缓冲溶液下才能进行,需提 供 DNA 模板、两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的 DNA 聚合酶,同时要控制温度。
第14页
选修一 专题四
高考调研
高三生物(新课标版)
知识点二 PCR 技术的基本操作和应用 准确识记
第15页
选修一 专题四
高考调研
高三生物(新课标版)
一、PCR 相关技术原理与条件 1.PCR:多聚酶链式反应的简称,是一种体外迅速 扩增 DNA 片段的技术。 2.引物:是一小段 RNA 单链或单链 DNA,它能与 DNA 母链的一段碱基序列互补配对。 3.扩增方向:DNA 的合成方向总是从子链的 5′端 向 3′端延伸。
挥发性强
水、过滤
分水解等
的芳香油
问题
第41页
选修一 专题四
高考调研
高三生物(新课标版)
石灰水 通过机 浸泡、 械加压, 漂洗、 压榨出 压榨、 压榨法 果皮中 过滤、 的芳香 静置、
油 再次过 滤
适用于 柑橘、 柠檬等 易焦糊 原料的 提取
生产成 本低, 分离较 易保持 为困难, 原料原 出油率 有的结 相对较 构和功 低
高考调研
高三生物(新课标版)
知识点四 从生物材料中提取某些特定成分 准确识记
第34页
选修一 专题四
高考调研
高三生物(新课标版)
一、植物芳香油的基本知识 1.成分:组成较复杂,主要包括萜类化合物及其衍 生物。 2.特点:具有很强的挥发性,易溶于有机溶剂。 3.应用:玫瑰精油是制作高级香水的主要成分,能 使人产生愉悦感;橘皮精油的主要成分是柠檬烯,具诱 人的橘香味,是食品、化妆品和香水配料的优质原料。

高考生物一轮复习 第四讲 DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取课件 新人教版选修1

高考生物一轮复习 第四讲 DNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取课件 新人教版选修1
第八页,共10页。
答案:(1)磷酸基团 3′端 (2)耐高温的 Taq DNA 聚合酶 选择培养基 (3)变性、复性和延伸 32
(4)
第九页,共10页。
• 谢谢(xiè xie)观看
第十页,共10页。
第四讲 DNA 和蛋白质技术与植物有效成分的提取 基础知识要打牢 [教材知识问题化梳理] 一、1.0.14 mol/L NaCl 酒精 二苯胺 2.DNA 蒸馏水 不同浓度的 NaCl 溶液 酒精 蓝色 二、1.热变性 冷却 2.(1)变性 90℃ (2)复性 55℃左右 引物 (3)延 伸 DNA 聚合酶 三、1.相对分子质量的大小 带电性质 大小、形状 2.透析 用 SDS—聚 丙烯酰胺凝胶电泳 四、1.(1)水蒸气蒸馏 水蒸气蒸馏 NaCl 无水 Na2SO4 (2)压榨 压榨 过滤 2.(1)水 石油醚 (2)石油醚 干燥 过滤 (3)纸层析
第四页,提取动物细胞中的 DNA 和蛋白质可以用蒸馏水涨破细胞,
但是如果用植物细胞来提取 DNA,那么用蒸馏水就无法涨破细胞,所 以应根据细胞的结构特点选择不同的方法破碎细胞(常用的有研磨法、 超声波法、酶解法等)。透析法可以将蛋白质与其他小分子化合物如无 机盐、单糖、双糖、氨基酸等分离,但是不能将蛋白质与 DNA 分开。 蛋白质和 DNA 都是大分子物质,皆可以用电泳的方法进行分离纯化。 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度随 NaCl 溶液浓度的不同而变化,当 NaCl 的物质的量浓度为 0.14 mol/L 时,DNA 的溶解度最低,利用这一原理, 可以使溶解在 NaCl 溶液中的 DNA 析出。
第六页,共10页。
4.选 B 在烘干胡萝卜颗粒时要控制好温度和时间,温度太 高、干燥时间太长,会导致胡萝卜素分解;在浓缩干燥前, 要将萃取液进行过滤,除去不溶物;将滤液用蒸馏装置进 行蒸馏,蒸发掉有机溶剂,留下浓缩的胡萝卜素液;在萃 取过程中,在瓶中安装冷凝回流装置是为了防止加热时有 机溶剂挥发。

高考生物一轮总复习 DNA和蛋白质技术及植物有效成分的提取同步训练

高考生物一轮总复习 DNA和蛋白质技术及植物有效成分的提取同步训练

开躲市安祥阳光实验学校第34讲DNA和蛋白质技术及植物有效成分的提取题组一DNA和蛋白质技术1.某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。

具体步骤如下:材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10 g。

剪碎后分成两组,一组置于20 ℃、另一组置于-20 ℃条件下保存24 h。

DNA粗提取:第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入15 mL研磨液,充分研磨。

用两层纱布过滤,取滤液备用。

第二步:先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液,再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。

第三步:取6支试管,分别加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮状物。

DNA检测:在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂,混合均匀后,置于沸水中加热5 min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表。

((1)该探究性实验课题名称是____________________________________________________。

(2)第二步中“缓缓地”搅拌,这是为了减少______________________。

(3)根据实验结果,得出结论并分析。

①结论1:与20 ℃相比,相同实验材料在-20 ℃条件下保存,DNA的提取量较多。

结论2:____________________________________________________________________ ____。

②针对结论1,请提出合理的解释:______________________________________。

(4)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响极小。

为了进一步提高DNA纯度,依据氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是:__________________________________________________,然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。

高考生物一轮总复习 生物技术实践 专题4、5 DNA和蛋白质技术、植物有效成分的提取课时练 选修1-

高考生物一轮总复习 生物技术实践 专题4、5 DNA和蛋白质技术、植物有效成分的提取课时练 选修1-

专题4、5 DNA和蛋白质技术、植物有效成分的提取1.(2017年某某某某三模)请回答下列与实验室提取芳香油有关的问题:(1)植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、__________和__________。

(2)橘子果实含有芳香油,通常可用________作为材料提取芳香油,而且提取时往往选用新鲜的材料,理由是______________________________________________________。

(3)得到的乳状液加入NaCl并放置一段时间后,芳香油将分布于液体的______层,加入NaCl的作用是___________________________________________________。

(4)从乳状液中分离得到的芳香油中要加入无水Na2SO4,其作用是____________。

2.(2017年某某巴蜀三诊)“树橘柚者,食之则甘,嗅之则香。

”橘子全身都是宝:不仅果肉的营养价值高,药用价值更高,其皮、核、络、叶都是“地道药材”。

请回答下列问题:(1)橘皮精油是一种广谱性的杀虫剂,具有很高的经济价值,常采用__________法提取橘皮精油。

若采取水中蒸馏法提取,橘皮精油的有效成分会发生__________和产生____________的问题。

(2)下图是提取橘皮精油的实验流程示意图:石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→①②③④⑤⑥橘皮油图中①过程处理的作用是____________________________________;③过程一般加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4,其目的是___________________________。

(3)若想利用橘子生产果醋需要用到醋酸菌,醋酸菌的最适生长温度为________,当______________都充足时,醋酸菌可将柑橘汁中的糖分解成醋酸。

3.下图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。

高考生物一轮复习 生物技术实践DNA和蛋白质技术及植物有效成分的提取课时作业

高考生物一轮复习 生物技术实践DNA和蛋白质技术及植物有效成分的提取课时作业

藏躲市安详阳光实验学校DNA和蛋白质技术及植物有效成分的提取一、选择题1.在用水蒸气蒸馏法制取玫瑰乳浊液和提纯过程中,使用无水Na2SO4、NaCl 的作用分别是( )A.分层、吸水B.溶解、吸水C.吸水、分层D.分层、萃取答案:C 解析:在用水蒸气蒸馏法制取玫瑰乳浊液和提纯过程中,使用无水Na2SO4的作用是吸水,使用NaCl的作用是使玫瑰乳浊液油水分层。

2.下列关于血红蛋白提取和分离实验中样品处理步骤的描述,正确的是( )A.红细胞的洗涤:加入蒸馏水,缓慢搅拌,低速短时间离心B.血红蛋白的释放:加入生理盐水和甲苯,置于磁力搅拌器上充分搅拌C.分离血红蛋白:将搅拌好的混合液离心、过滤后,用分液漏斗分离D.透析:将血红蛋白溶液装入透析袋,置于pH为4.0的磷酸缓冲液中透析12 h答案:C 解析:对红细胞进行洗涤时,应加入生理盐水,防止细胞破裂;将血红蛋白从红细胞中释放时,需要加入蒸馏水,以便使红细胞破裂释放出血红蛋白;透析时,应将透析袋置于pH为7.0的磷酸缓冲液中透析12 h。

3.多聚酶链式反应(PCR)技术是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,其简要过程如图所示。

下列关于PCR技术叙述不正确的是( )A.PCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术B.反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板C.PCR技术中以核糖核苷酸为原料,以指数方式扩增D.应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变答案:C 解析:PCR技术是人工合成DNA的方法,原料是脱氧核苷酸而不是核糖核苷酸。

4.下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是( )A.利用DNA溶于冷酒精,而蛋白质不溶于冷酒精的特点,可将DNA与蛋白质分离B.利用高温能使蛋白质变性,却对DNA没有影响的特性,可将DNA与蛋白质分离C.在溶有DNA的物质的量浓度为2 mol/L的氯化钠溶液中缓缓加入蒸馏水,轻轻搅拌后过滤,取滤液进行以后的实验D.在DNA滤液中加入嫩肉粉,通过木瓜蛋白酶的作用,可将DNA与蛋白质分离答案:D 解析:利用DNA不溶于冷酒精,而蛋白质溶于冷酒精的特点,可将DNA和蛋白质分开;温度过高也会影响DNA的结构,如90 ℃时DNA会变性。

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第二步:先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液,再 加入20mL体积分数为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃 棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。
第 三 步 : 取 6 支 试 管 , 分 别 加 入 等 量 的 2mol/L 的 NaCl溶液溶解上述絮状物。
DNA 检 测 : 在 上 述 试 管 中 各 加 入 4mL 二 苯 胺 试 剂,混合均匀后,置于沸水中加热5min,待试管冷却后 比较溶液的颜色深浅,结果如下表。
(5)DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸馏水( √ ) (6)向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可见玻棒上有 白色絮状物( × ) (7)DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后 变蓝( √ )
2.下图为“DNA粗提取和鉴定”实验的相关操 作,请仔细观察并分析①~④操作的目的分别是什么?
①________________ ②________________ ③________________ ④________________ 答案 ①是使鸡血细胞吸水涨破释放出核物质;② 是析出DNA,去除溶于酒精的杂质;③是使DNA溶解 在2mol/LNaCl溶液中;④是稀释NaCl溶液使其浓度接 近0.14mol·L-1,去除溶于低浓度NaCl溶液的杂质。
②针对结论1,请提出合理的解释:________ ______________________ 。
(4)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水 和DNA均不相溶,且对DNA影响极小。为了进一步提 高DNA纯度,依据氯仿的特性,在DNA粗提取第三步 的基础上继续操作的步骤是:________________ ________________________,然后用体积分数为95%的 冷酒精溶液使DNA析出。
↓ DNA的鉴定:在溶有DNA的溶液中加入二苯胺试 剂,___沸__水__中__加__热______5min,溶液变成蓝色
1.正误判断 (1)DNA在不同液中溶解度最低( √ ) (2)DNA 不 溶 于 冷 酒 精 , 可 用 酒 精 进 一 步 提 取 DNA( √ ) (3)DNA与二苯胺溶液反应生成紫色物质( × ) (4)酵母和菜花均可作为提取DNA的材料( √ )
解析 (1)该实验中把不同的材料在不同条件(温度) 下处理,目的是探究不同材料和不同保存温度对DNA提 取量的影响。(2)“缓缓地”搅拌是为了减少DNA断裂。 (3)分析表格可得出结论:①相同材料在-20 ℃条件下 保存,DNA的提取量较多。原因可能是低温抑制了 DNA酶的活性,DNA降解速度慢。②等质量的不同实 验材料,在相同保存温度下,从蒜黄中提取的DNA最 多。(4)依据氯仿的特性,可在第三步得到的溶液中加入 氯仿,使蛋白质变性。
材料保存温度 花菜 辣椒 蒜黄
20℃
++ + +++
-20℃ +++ ++ ++++
注 “+”越多表示蓝色越深)
分析上述实验过程,回答下列问题: (1)该探究性实验课题名称是___________________ ______________________________________________。 (2) 第 二 步 中 “ 缓 缓 地 ” 搅 拌 , 这 是 为 了 减 少 ________________________________________________ ______________。 (3)根据实验结果,得出结论并分析。 ①结论1:与20℃相比,相同实验材料在-20℃条 件下保存,DNA的提取量较多。 结论2:________________________________ 。
专题四 DNA和蛋白质技术 与植物有效成分的提取
[考纲要求] 1.PCR技术的基本操作和应用。 2.蛋白质的提取和分离。 3.从生物材料中提取某些特定的成分。 4.实验:DNA的粗提取与鉴定。
考点突破·核心探究
考点1 DNA的粗提取与鉴定
1.基本原理
0.14mol/L NaCl 酒精
二苯胺 蓝
2.操作过程 材料的选取:选用_D_N__A_含量相对较高的生物组织
↓ 破碎细胞(以鸡血为例):鸡血细胞,加_蒸__馏__水___, 用玻璃棒搅拌,用纱布过滤,收集滤液
↓ 去除杂质:利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶 解度的不同,通过控制__N__a_C_l_溶__液__的__浓__度____去除杂质

DNA析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体 积相等的、冷却的体积分数为____9_5_%__的__酒__精______溶液
DNA不溶于
酒精
95%(体 积分数)
除去杂质 以提纯
DNA
酒精,但是 细胞中的某 些物质可以

溶于酒精
二苯 胺
DNA遇二苯 鉴定剂 胺(沸水浴) △
会变蓝色
柠檬 0.03 酸钠 g/mL
抗凝剂
除去血液中 的钙离子, 防止血液凝

2.DNA粗提取实验材料和方法的选择 (1)不同生物的组织中DNA含量不同 在选取材料时,应本着DNA含量高、材料易得、 便于提取的原则。 (2)材料不同所采用的提取方法不同 ①植物组织:取材→研磨→过滤→沉淀。 ②鸡血:制备鸡血细胞液→提取核DNA→溶解细 胞核内DNA→析出并滤取DNA→DNA再溶解→提取较 纯净的DNA。
1.DNA粗提取与鉴定中不同试剂的用途及原理比

试剂 浓度
用途
原理(“△”为实验 的主要原理)
2mol/L
溶解 DNA在NaCl溶 DNA 液中的溶解度随
NaC 0.14mol/ 析出 溶液浓度的变化
l溶
L
DNA 而改变,溶解度 △

在2 mol/L时最大
2mol/L
鉴定时的 溶剂
、在0.14 mol/L 时最小
【易错警示】 DNA粗提取与鉴定实验的易错点 (1) 本 实 验 不 能 用 哺 乳 动 物 成 熟 红 细 胞 作 实 验 材 料,原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。可选用鸡血 细胞作材料。 (2)实验中两次使用蒸馏水,第一次的目的是使成 熟 的鸡血细 胞涨破放出 DNA , 第 二次的目 的是稀释 NaCl溶液,使DNA从溶液中析出。
1.某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活 动,具体步骤如下:
材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份, 每份10g。剪碎后分成两组,一组置于20℃、另一组置 于-20℃条件下保存24h。
DNA粗提取: 第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入 15mL研磨液,充分研磨。用两层纱布过滤,取滤液备 用。
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