[医学保健]人外周血淋巴细胞微核测定

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（二）固定：加固定液5ml，打匀静置30分钟(或过 夜)。1000rpm离心8分钟，弃去上清液，留 0.5ml固定液，打匀，制成白细胞悬液。
实验步骤
（三）制片：滴白细胞悬液2-3滴于玻片上， 自然 晾干。
（四）染色：用稀释Giemsa染色液5-30分钟，经 蒸馏水轻轻冲洗，再将玻片晾干。
（五）镜检：将染色的玻片先用低药治疗 本病多属实证。根据辨证可分为风寒 、风热 、湿热 ，分别 予以宣 肺利尿 ，凉血 解毒等 疗法。 本病恢 复期脉 证表现 不很明 确，辨 证不易 掌握， 仍以清 热利湿 为主， 佐以养 阴，但 不可温 补。 五、透析治疗 少数发生急性肾功能衰竭而有透析指征 时，应 及时给 予透析 （血液 透析或 腹膜透 析皆可 ）。由 于本病 具有自 愈倾向 ，肾功 能多可 逐渐恢 复，一 般不需 要长期 维持透 析。 ，它有力地推进了临床医学和预防医 学。治 疗和预 防疾病 的有效 （df肺 25s血 液f369血 小板t5172红 血球gdf55m白 血球fd2）手段 在20世 纪才开 始出现 。20世 纪医学 发展的 主要原 因是自 然科学 的进步 。各学 科专业 间交叉 融合， 这形成 现代医 学的特 点之一 。 综合医学
实验步骤
五、注意事项
1. 注意掌握低渗时间，避免低渗过度； 2. 比较与染色体标本制备的异同；
急性肾小球肾炎的的病理改变是肾脏 体积可 较正常 增大， 病变主 要累及 肾小球 。病理 类型为 毛细血 管内增 生性肾 小球肾 炎。光 镜下通 常为弥 漫性肾 小球病 变，以 内皮细 胞及系 膜细胞 增生为 主要表 现，急 性期可 伴有中 性粒细 胞和单 核细胞 浸润。 病变严 重时， 增生和 浸润的 细胞可 压迫毛 细血管 袢使毛 细血管 腔变窄 、甚至 闭塞， 并损害 肾小球 滤过膜 ，可出 现血尿 、蛋白 尿及管 型尿等 ；并使 肾小球 滤过率 下降， 因而对 水和各 种溶质 （包括 含氮代 谢产物 、无机 盐）的 排泄减 少，发 生水钠 潴留， 继而引 起细胞 外液容 量增加 ，因此 临床上 有水肿 、尿少 、全身 循环充 血状态 如呼吸 困难、 肝大、 静脉压 增高等 。肾小 管病变 多不明 显，但 肾间质 可有水 肿及灶 状炎性 细胞浸 润。 急 性 肾 小 球肾 炎治疗 ：本病治疗以休息及对症为主，少数急性肾功能衰竭病例应 予透析 ，待其 自然恢 复。不 宜用激 素及细 胞毒素 药物。 一、一般治疗 肉眼血尿消失、水肿消退及血压恢复正 常前应 卧床休 息。予 低盐（ <3g/d）饮食 ，尤其 有水肿 及高血 压时。 肾功能 正常者 蛋白质 入量应 保持正 常（每 日每公 斤体重1g）， 但氮质 血症时 应限制 蛋白质 摄入， 并予高 质量蛋 白（富 含必需 氨基酸 的动物 蛋白） 。仅明 显少尿 的急性 肾功能 衰竭病 例才限 制液体 入量。 二、治疗感染灶 首选青霉素（过敏者更换为对革兰氏 阳性菌 高度敏 感的大 环内酯 类、头 孢第一 代抗生 素）800万单 位静脉 滴注，10～14天，但 其必需 性现有 争议。 反复发 作的慢 性扁桃 体炎， 待肾炎 病情稳 定后（ 尿蛋白 小于（+ ），尿 沉渣红 细胞少 于10个 /高倍 视野） 可作扁 桃体摘 除，术 前、后 两周需 注射青 霉素。 三、对症治疗 利尿、消肿、降血压。常用噻嗪类利尿 剂（如 双氢氯 噻嗪25mg,每日2～3次）， 必要时 才予利 尿剂如 呋塞米20～60mg/d,注射或分 次口服 。利尿 后高血 压值仍 不满意 时，可 加用钙 通道阻 滞剂如 硝苯啶 20～40mg/d,分次口 服或血 管扩张 药如肼 酞嗪25mg,每日 3次。 但保钾 利尿药 （如氨 苯蝶啶 及安体 舒通） 及血管 紧张素 转化酶 抑制剂 ，少尿 时应慎 用，以 防诱发 高血钾 。
四、实验步骤
（一）常规微核法
1. 采静脉血，肝素抗凝， 60Coγ射线照射血样， 将0.5ml血加入4.5ml RPMI1640完全培养基 中，37℃恒温培养72小时；
2. 收获细胞：打匀培养物，移至刻度离心管中， 1000rpm离心8分钟，弃去上清液，留下沉 淀物。
3．低渗和预固定：加5ml 37℃预温的0.15M Kcl溶 液低渗液，打匀，静置5分钟，再加入新配制的 固定液0.5-1ml，打匀。1000rpm离心8分钟， 弃去上清液，留下褐色沉淀物。
人外周血淋巴细胞 微核测定
南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心
一、实验目的
掌握人外周血淋巴细胞微核 制备与分析技术
二、实验原理
微核实验是细胞遗传学的一种常用方法。70年代 初由Matter和Schnide建立。
微核是染色体损伤的一种表现形式，它是染色体 的无着丝粒断片或细胞分裂后期未纳入子核的落后 染色体在子细胞细胞质中形成的阳性染色质体。辐 射可引起人外周血淋巴细胞微核率升高，在一定剂 量范围内微核率和剂量成线性关系。该法简便易行。 我国已将微核列为放射病的诊断指标之一。
• 1、微核必须位于 细胞质中，与主 核完全分开；
• 2、直径小于主核 的1/3；无折光性； 着色与主核相同 或略浅。
三、实验准备
离心机， 37℃恒温箱，试管架， 10毫升刻度离 心管， 滴管，玻片，吸水纸，酒精灯， 0.15M KCl溶液，新配制的固定液（甲醇，冰醋酸 3:1）,Giemsa原液，磷酸缓冲液（pH 7.4）,香柏 油，二甲苯