IL-18基因转染人膀胱癌T-24细胞及其表达的研究

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) 两 种 包 装 细 胞 通 过 药 物 G 4 1 8 筛选 获 得 表达 I L
24 细 胞
一
18
蛋 白的
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P A 3 17 阳 性 细 PCR
一
胞 克隆 用
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一
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一
清转 染 T
，
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。
18
的 II
一
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，
维普资讯
652
中国 肿瘤临 床
2008
年第 3 5 卷第
11
期
IL
一
18
基 因 转 染 人膀 胱 癌 T 2 4 细 胞 及 其 表 达 的 研 究 术
一
摘要
目 的 ：建 立 表 达
11
一
．
18
基 因的 人 膀胱 癌 细 胞 系 IJ
入 IL
一
一
．
18 ／T
，
18
基 因转 染的人 膀胱 癌细 胞 系 lL
1 8 ／T
一
24
，
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水 平 和 蛋 白 水 平 均 可 获 得 稳 定 表达 )
。
；
并且
一
IL
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，
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24
细 胞的培
养上 清 可 明 显 促 进 小 鼠 脾 细 胞 分 泌
．
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结 论 ：建 立 的 稳 定 表 达
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1 8 ／T
-
一
24 细 胞
既 保
持 了肿 瘤 细 胞 原 有的 免 疫 原
一
性
，
又 具
有分 泌 I L
—
l8
的 功 能 引起 较 强 的 免疫 应 答 反 应
，
一
1 8 ／T
24 细
，、
胞与
L X S N ／T
一
24
，
探 讨 外 源 性 I L 18 基 因 对 T 2 4 细 胞 生 长 及
—
一
其 生 物 学性 状 的 影 响
p ll o t l
-
方 法 ：将 插
，
18
基 因 的 质 粒 应 用 逆 转 录病 毒 载 体
，
—
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感 染 山2 ( e
，
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) 和 P A 3 17 ( a
-
24 细 胞
。
分别 用
一
、
E L IS A 和 24 细 胞
免 疫 组 化 染 色分 析 I L
1 8 ／T
24
细 胞 表 达 11
．
18
的
R NA
和 蛋 白 的 水 平 筛 选 出 高表 达 I I
。
18
的 lL
1 8 ／T
一
克 隆 用 于 下 层 研 究 中 ；用 流 式 细 胞
仪 检 测 转 染前 后 细 胞 的 周 期 变化 及 细 胞 凋 亡
18 T
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情况
；用
E L IS A 法
，
检 测 II
，
1 8 ／T
一
24 细 胞 培
养上 清诱 导 脾 细 胞 分 泌
。
一
． 的 能 力 ；采 用 二 苯 基 溴 化 Y
四
r 氮唑 蓝 ( M _ r ) 比 色 法 测 定 转 染 前 后 细 胞 增 殖 及 黏 附 能 力 的 变 化
一
结 果 ：外 源 性
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E L IS A
24
和 T 24 细 胞 相比 较 其
一
。
生 物 学性 状 无 明 显 差 异 可 进
，
步用 于肿瘤 相关 免疫 基 因治 疗的研 究
lL
～
关键词
逆 转 录病
转染
人
膀胱 癌 细 胞
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1 8 ／T
一
24 细
胞 与 L X S N ／T
一
一
24
和 T 24 比较 细 胞
周 期 及 细 胞 凋 亡 率 无 显 著性 差 异 (P > O 0 5 )
低 但 无 显 著性 差 异 ( P
，
．
IL
一
1 8 ／T
一
胞 的 增 殖 率与
的 IL
一 —
L X S N ／T
，
2 4 和 rr
一
24 细 胞