2018高中生物浙科版浙江参考课件：29 微生物的利用、

-12考点一 考点二 考点三 考点四 自主梳理 核心突破 典例精析
划线分 倒置培养皿,放在 37 ℃恒温培养箱培养 12~24 h 后,可看 离 到划线末端出现不连续的单菌落 培养观 察
在无菌条件下将单菌落用接种环取出,再用划线法接种在 斜面上,37 ℃培养 24 h 后,置于 4 ℃冰箱保存
菌种保 存
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4.大肠杆菌的培养与分离 (1)扩大培养用LB液体培养基,划线分离和涂布分离用固体培养 基。 (2)实验步骤
培养基 对 LB 液体培养基和 LB 固体培养基及培养皿用高压蒸 灭菌 汽灭菌 在酒精灯火焰旁将三角瓶中培养基分别倒入 4 个灭菌培 倒平板 养皿中,水平放置 ,制成平面培养基 将大肠杆菌用灼烧冷却后接种环在无菌条件下接种至三 角瓶中 LB 培养基中,37 ℃摇床振荡培养 12 h 接种 用接种环在有大肠杆菌的三角瓶中蘸菌液一次,在固体平 面培养基上连续划线
仅杀死物 体表面或 内部一部 分微生物 (不包括芽 孢和孢子) 杀死物体 内外所有 的微生物, 包括芽孢 和孢子
强烈的 灭 理化 菌 因素
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(4)无菌操作要求 ①各种器皿必须是无菌的。 ②各种培养基必须是无菌的。 ③菌转移操作的过程必须是无菌的。
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1.大肠杆菌 革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌,属原核生物,能以二分裂方 式快速繁殖,是基因工程中被广泛采用的工具。 2.培养基 (1)成分:碳源、氮源、水、无机盐和生长因子。还需满足不同微 生物生长对pH、特殊营养物质及氧气的要求。 (2)类型 ①按照物理性质分:固体培养基、半固体培养基和液体培养基。 区别在于是否加琼脂和加入琼脂的多少。 ②按照目的用途分:选择培养基、鉴别培养基。 (3)制作牛肉膏蛋白胨固体培养基。 制作牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤:计算→称量→溶化、 调pH→灭菌→倒平板。
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3.无菌技术 (1)获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。应根据实际 情况进行消毒和灭菌。 (2)无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外 来微生物污染外,还能有效避免操作者自身被微生物污染。 (3)消毒与灭菌的比较
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例题为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样 中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题。 (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布 接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样 做的目的是 ; 然后,将1 mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。 据此可得出每升水样中的活菌数为 。 (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通 过 灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划 线的末端开始划线。这样做的目的 是 。
条件 较为温 消 和的物 毒 理或化 学方法
结
果
常见方法 煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药剂消 毒法 紫外线消毒 法 灼烧灭菌 干热灭菌 高压蒸汽灭 菌 121 ℃ 15~30 min
应用范围 一般物品 不耐高温液体 用 70%酒精擦拭双 手 用紫外灯照空间 接种工具 玻璃器皿、金属工 具 培养基及容器
答案
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归纳提升微生物两种常用分离方法比较
划线分离法
涂布分离法
通过接种环在琼脂固体培 将菌液进行一系列的梯度稀释, 养基表面连续划线的操作 , 然后将不同稀释度的菌液分别 将聚集的菌种逐步稀释分 涂布到琼脂固体培养基的表面, 原 散到培养基上。在数次划 进行培养。在稀释度足够高的 理 线后培养 ,可以分离到由一 菌液里 ,聚集在一起的微生物将 个细胞繁殖而来的肉眼可 被分散成单个细胞,从而能在培 见的细胞群体 ,即菌落 养基表面形成单个的菌落 特 方法简单 单菌落更易分开 ,但操作复杂些 点 目 使培养基上形成单个菌繁殖而来的子细胞群体 ——菌落 的
选修
第11单元
生物技术实践 (选修1)
第29讲
微生物的利用、酶的应用
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
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知 识 内 容 加试要求 1.大肠杆菌的培养 和分离 2.分离以尿素为氮 源的微生物 实验与探 3.果汁中的果胶和 究能力 果胶酶 4.α-淀粉酶的固定 化及淀粉水解作用 的检测
考频统计
命
题
趋 势
2016.10 2016.4 2016.10
直接进行考查,或以 生产、生活中有关 实例为情景进行考 查,题型以非选择题 为主,分值可达 7 分 左右。
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大肠杆菌的培养和分离
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[判一判] (1)配制培养基时先灭菌再调pH。( × ) (2)培养基分别装到培养皿再进行灭菌。( × ) (3)划线分离时,除第一划线外,每一次划线的起点都是第一次划 线的末端。( × ) (4)涂布法分离细菌时,只要稀释度足够高,就能在培养基表面形 成单菌落。( √ )
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(3)示意图A和B中, 养后得到的结果。
表示的是用稀释涂布平板法接种培
(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行 静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比 静置培养的细菌生长速度快。分析其原因:振荡培养能提高培养液关闭 (1)检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107 (2)灼烧 将聚集的菌体逐 中 的含量,同时可使菌体与培养液充分接触 ,提高 步稀释以便获得单个菌落 (3)B (4)溶解氧 营养物质 的利用率。