药物定量分析与分析方法验证[可修改版ppt]
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1. 方法特点与适用范围 （1）高灵敏度：最低检出浓度可达10-15~10-12 g/ml。 （2）高专属性：有效分离样品中与待测组分结构相近的有关
药物定量分析与分 析方法验证
第一节 定量分析方法的分类与特点
ChP所收载的关于药物含量、溶出或释放测定的定量分析方 法主要包括：1. 容量分析法，2.光谱分析法，3.色谱分析法
一、容量分析法 是将已知浓度的滴定液（标准物质溶液）由滴定管
滴加到被测药物的溶液中，直至滴定液与被测药物反 应完全（通过适当方法指示），然后根据滴定液的浓 度和被消耗的体积，按化学计
T
m
a b
MA
C 6 H 8 O 6 I 2 C 6 H 6 O 6 2 H I
T
m
a b
M
A
0 .0 5 1 1 7 6 .1 1
8 .8 0 6 (m g / m l)
3. 含量计算 （1）直接法
含 量 （ % ） =VT100% W
T:药典规定的摩尔浓度的滴定度
D50100=2500（ ml) 2
标 示 量 (% )=cxDV100% VB
2）吸收系数法
cx
=
Ax
E1% 1cm
100
含量(%)= cx D 100% W
=
Ax D
E1% 1cm
100
W
100%
标示量(%)=cx DW100% WB
= E11c%mAx10D0W WB100%
通常要求吸光系数大于100，注意仪器的校正和检定。
ChP收载的容量分析法，均给出滴定度。根据称取量W、 消耗体积V、滴定度T，可求。
实际工作与药 典要求存在差 异，需要校正。
校正因子（F） =实 规际 定摩 摩尔 尔浓 浓度 度 T'=FT
含量（%）= VT 100% W
= VTF100% W
（2）间接滴定法
1）生成物滴定法
该法的百分含量计算与直接滴定方法同，只是在计算 滴定度时需考虑被测药物与中间化合物以及中间化合 物与滴定剂三者之间的化学计量关系。
Cx为供试品溶液的浓度; Rx为供试品溶液的荧光强度； CR为对照品溶液的浓度； RXb为供试品溶液试剂空白的荧光强度； Rr为对照品溶液的荧光强度； Rrb为对照品溶液试剂空白的荧光强度。
要求
在0.5~2之间
（二） 色谱分析法
色谱分析法是一种分离分析方法，系根据混合物 中各组分的色谱行为差异，将各组分从混合物中 分离后再（在线、离线）选择性对待组分进行分 析的方法。
2）剩余滴定法
药物+定量过量的滴定液A，用另一滴定液B回滴； 考虑空白实验
含 量 （ % ） = （ V B 0-V B S ） F B T A 1 0 0 % W
• 二、 光谱分析法
（一）紫外-可见分光光度法 1．特点紫外-可见分光光度法是根据物质分子对波 长为200nm～760nm 这一范围的单色光辐射的吸收特性所 建立起来的光谱分析方法。主要特点如下：
（1）灵敏度高，可达10-4g/ml～10-7g/ml ，适于低浓度试 样分析。
（2）准确度高，相对误差为2% ～5%，适于对测定结果的 准确度有较高要求的试样的分析。
（3）仪器价格较低廉，操作简单，易于普及。 （4）专属性较差：通常不受一般杂质的干扰，但对结构相近
的有关物质缺乏选择性。
2．郎伯-比耳定律
单色光辐射穿过被测物质溶液时，在一定浓度范围 内该物质吸收的量与该物质浓度、液层厚度成正比。
A=Ecl
注意：药物分析中，E通常采用百分吸收系
数：
E 1% 1cm
其物理意义为：当待测溶液浓度为每 100ml中含待测药物1g，液层厚度1cm时 的吸光度值
c(g/100m)l
A E1%
1cm
3．仪器校正和检定 （1）波长：允许误差为紫外光区±1nm， 500nm处±2nm. （2）吸光度的准确度 （3）杂散光的检查 （4）对溶剂的要求：使用范围不能小于截止使用波长 （5）测定法：需做空白对照
（1）溶剂：测定前检查空白溶剂的荧光强度。
（2）溶液：ⅰ溶液中待测药物浓度不宜过高；ⅱ溶液中的悬 浮物对光有散射作用；ⅲ溶液中的溶解氧有降低荧光的作 用；ⅳ控制溶液的pH值。
（3）玻璃量器：要求玻璃量器及样品池保持高度洁净。
（4）温度：测定时要求控制温度一致
3．测定法与含量计算
cxF Fxs F F0 0cs R Rxr R Rrxb bcr
（一） 容量分析法的特点与适用范围
1.特点： （1）方法简便易行 （2）方法耐用性高 （3）测定结果准确 （4）方法专属性差
2.适用范围： 化学原料药的含量测定
（二） 容量分析法的计算问题
1． 滴定度
指每1ml规定浓度的滴定液所相当的被测药物的 质量，ChP用mg表示。
2． 滴定度（T）的计算
4．测定方法 1)对照品比较法
cx
Ax AR
CR
Ax AS
CS
含 量 (% )= cx D 100% W
D :供 试 品 溶 液 稀 释 体 积
Cx为供试品溶液的浓度; Ax为供试品溶液的吸光度； CR为对照品溶液的浓度；AR为对照品溶液的吸光度。 D 为稀释倍数。
标示量（%）：制剂含量相当于标示量的百分数
3）计算分光光度法 4）比色法
（二） 荧光分析法
1. 方法特点与适用范围 （1）高灵敏度：较紫外-可见分光光度法高，可达10-12~10-10
g/ml。 （2）荧光自熄灭：浓度太大，溶液会用“自熄灭”作用，要
求在低浓度下进行。 （3）易受干扰：因灵敏度高，干扰因素多，必须做空白试验。
2. 干扰排除
A:被测药物，B：滴定剂
aA bB cC dD
Wa Wb aM A bM B
Wa
Wb bM B
aM
A
nB
a b
M
A
滴定度T
例：用碘量法测定 VitC(176.13） m(I2)=0.05mol/l
m 滴定液的摩尔浓度 （mol/l)
a A b Bc C d D
aMA b WA mBV
标 示 量 (% )=cxD W 100% W B
W 单位制剂的平均装量，如：g/片，g/粒，g/ml, ml/ml B:标示量:单位制剂的标示量（ g/片，g/粒，g/ml, ml/ml ）
异 维 A 胶 囊 2 0 粒 ， 精 密 称 取 V m l 5 m l C H 2 C l2 定 容 5 0 m l量 瓶 移 取 2 m l 定 容 1 0 0 m l 3 6 1 n m 测 A x
药物定量分析与分 析方法验证
第一节 定量分析方法的分类与特点
ChP所收载的关于药物含量、溶出或释放测定的定量分析方 法主要包括：1. 容量分析法，2.光谱分析法，3.色谱分析法
一、容量分析法 是将已知浓度的滴定液（标准物质溶液）由滴定管
滴加到被测药物的溶液中，直至滴定液与被测药物反 应完全（通过适当方法指示），然后根据滴定液的浓 度和被消耗的体积，按化学计
T
m
a b
MA
C 6 H 8 O 6 I 2 C 6 H 6 O 6 2 H I
T
m
a b
M
A
0 .0 5 1 1 7 6 .1 1
8 .8 0 6 (m g / m l)
3. 含量计算 （1）直接法
含 量 （ % ） =VT100% W
T:药典规定的摩尔浓度的滴定度
D50100=2500（ ml) 2
标 示 量 (% )=cxDV100% VB
2）吸收系数法
cx
=
Ax
E1% 1cm
100
含量(%)= cx D 100% W
=
Ax D
E1% 1cm
100
W
100%
标示量(%)=cx DW100% WB
= E11c%mAx10D0W WB100%
通常要求吸光系数大于100，注意仪器的校正和检定。
ChP收载的容量分析法，均给出滴定度。根据称取量W、 消耗体积V、滴定度T，可求。
实际工作与药 典要求存在差 异，需要校正。
校正因子（F） =实 规际 定摩 摩尔 尔浓 浓度 度 T'=FT
含量（%）= VT 100% W
= VTF100% W
（2）间接滴定法
1）生成物滴定法
该法的百分含量计算与直接滴定方法同，只是在计算 滴定度时需考虑被测药物与中间化合物以及中间化合 物与滴定剂三者之间的化学计量关系。
Cx为供试品溶液的浓度; Rx为供试品溶液的荧光强度； CR为对照品溶液的浓度； RXb为供试品溶液试剂空白的荧光强度； Rr为对照品溶液的荧光强度； Rrb为对照品溶液试剂空白的荧光强度。
要求
在0.5~2之间
（二） 色谱分析法
色谱分析法是一种分离分析方法，系根据混合物 中各组分的色谱行为差异，将各组分从混合物中 分离后再（在线、离线）选择性对待组分进行分 析的方法。
2）剩余滴定法
药物+定量过量的滴定液A，用另一滴定液B回滴； 考虑空白实验
含 量 （ % ） = （ V B 0-V B S ） F B T A 1 0 0 % W
• 二、 光谱分析法
（一）紫外-可见分光光度法 1．特点紫外-可见分光光度法是根据物质分子对波 长为200nm～760nm 这一范围的单色光辐射的吸收特性所 建立起来的光谱分析方法。主要特点如下：
（1）灵敏度高，可达10-4g/ml～10-7g/ml ，适于低浓度试 样分析。
（2）准确度高，相对误差为2% ～5%，适于对测定结果的 准确度有较高要求的试样的分析。
（3）仪器价格较低廉，操作简单，易于普及。 （4）专属性较差：通常不受一般杂质的干扰，但对结构相近
的有关物质缺乏选择性。
2．郎伯-比耳定律
单色光辐射穿过被测物质溶液时，在一定浓度范围 内该物质吸收的量与该物质浓度、液层厚度成正比。
A=Ecl
注意：药物分析中，E通常采用百分吸收系
数：
E 1% 1cm
其物理意义为：当待测溶液浓度为每 100ml中含待测药物1g，液层厚度1cm时 的吸光度值
c(g/100m)l
A E1%
1cm
3．仪器校正和检定 （1）波长：允许误差为紫外光区±1nm， 500nm处±2nm. （2）吸光度的准确度 （3）杂散光的检查 （4）对溶剂的要求：使用范围不能小于截止使用波长 （5）测定法：需做空白对照
（1）溶剂：测定前检查空白溶剂的荧光强度。
（2）溶液：ⅰ溶液中待测药物浓度不宜过高；ⅱ溶液中的悬 浮物对光有散射作用；ⅲ溶液中的溶解氧有降低荧光的作 用；ⅳ控制溶液的pH值。
（3）玻璃量器：要求玻璃量器及样品池保持高度洁净。
（4）温度：测定时要求控制温度一致
3．测定法与含量计算
cxF Fxs F F0 0cs R Rxr R Rrxb bcr
（一） 容量分析法的特点与适用范围
1.特点： （1）方法简便易行 （2）方法耐用性高 （3）测定结果准确 （4）方法专属性差
2.适用范围： 化学原料药的含量测定
（二） 容量分析法的计算问题
1． 滴定度
指每1ml规定浓度的滴定液所相当的被测药物的 质量，ChP用mg表示。
2． 滴定度（T）的计算
4．测定方法 1)对照品比较法
cx
Ax AR
CR
Ax AS
CS
含 量 (% )= cx D 100% W
D :供 试 品 溶 液 稀 释 体 积
Cx为供试品溶液的浓度; Ax为供试品溶液的吸光度； CR为对照品溶液的浓度；AR为对照品溶液的吸光度。 D 为稀释倍数。
标示量（%）：制剂含量相当于标示量的百分数
3）计算分光光度法 4）比色法
（二） 荧光分析法
1. 方法特点与适用范围 （1）高灵敏度：较紫外-可见分光光度法高，可达10-12~10-10
g/ml。 （2）荧光自熄灭：浓度太大，溶液会用“自熄灭”作用，要
求在低浓度下进行。 （3）易受干扰：因灵敏度高，干扰因素多，必须做空白试验。
2. 干扰排除
A:被测药物，B：滴定剂
aA bB cC dD
Wa Wb aM A bM B
Wa
Wb bM B
aM
A
nB
a b
M
A
滴定度T
例：用碘量法测定 VitC(176.13） m(I2)=0.05mol/l
m 滴定液的摩尔浓度 （mol/l)
a A b Bc C d D
aMA b WA mBV
标 示 量 (% )=cxD W 100% W B
W 单位制剂的平均装量，如：g/片，g/粒，g/ml, ml/ml B:标示量:单位制剂的标示量（ g/片，g/粒，g/ml, ml/ml ）
异 维 A 胶 囊 2 0 粒 ， 精 密 称 取 V m l 5 m l C H 2 C l2 定 容 5 0 m l量 瓶 移 取 2 m l 定 容 1 0 0 m l 3 6 1 n m 测 A x