高效液相色谱法测定福多司坦原料药的含量

高效液相色谱法测定福多司坦原料药的含量
目的建立福多司坦原料药含量的测定方法。

方法采用高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶柱C18（250 mm×4.6 mm，5mm）为色谱柱，水-甲醇（99.5 ：0.5）为流动相，流速为0.8 mL/min，检测波长：220 nm，温度：30 ℃。

结果福多司坦的线性范围为y=1 575.2x-1 319，r=0.989 242，平均回收率为95.89%（RSD=1.7%）。

结论该法精确可靠，简单方便，建立了HPLC法测定福多司坦原料药中的福多司坦含量的方法。

标签：福多司坦；高效液相色谱法；含量测定
福多司坦为S-（3-羟基丙基）-L-半胱氨酸是无臭，无味的类白色至微黄色结晶或结晶性粉末，由SSP公司和三菱Welfide公司生产的一种新型的祛痰药[1]。

福多司坦结构中有非游离密封的巯基，对局部黏蛋白无活性作用，口服后经代谢产生含有游离巯基的代谢产物而发挥药理作用，因而用药后无明显胃肠道副作用[2]。

实验证明，福多司坦可以改变分泌物的组成和流变学性质，体内代谢物导致支气管分泌物中黏蛋白的二硫键断裂，降低痰液黏度，使受抑制的呼吸功能得到改善；还可以改善和增强抗生素对支气管黏膜的渗透作用，利于呼吸道各种炎症的治疗[3]。

国外临床研究表明与羧甲司坦、乙酰半胱氨酸和氨溴索等同类产品比较，本品对支气管扩张、慢性支气管炎、支气管哮喘、弥漫性支气管炎、尘肺症、肺气肿、肺结核和非典型耐酸杆菌感染症具有很好的疗效[4]。

作为新型作用的去痰剂，该药对气道上皮杯细胞的过量形成起抑制作用，大剂量给药没有发生药物蓄积，肝和肾功能中度障碍[5]。

为了确保该药质量，本研究建立了HPLC 测定福多司坦原料药含量的方法，具有快速、简便、专属性好、结果测定准确、可靠等优点[6]。

1 材料与方法
1.1 仪器
Agilnt1100型高效液相色谱仪；自动进样器；DAD检测器；Agilent Chemstation色谱工作站。

福多司坦对照品（含量（干）99.7%，批号061100040），福多司坦原料药（批号061000030；061000040；061100040）均由河南天方药业股份有限公司提供；甲醇为色谱纯。

1.2 方法
1.2.1 色谱条件色谱柱：DiamonsilTM（钻石）C18 柱（250 mm ×4.6 mm，5 mm）；流动相：水-甲醇（99.5 ：0.5）；流速：0.8 mL/min；检测波长：220 nm；柱温：30 ℃。

1.2.2 对照品溶液的制备取105 ℃干燥至恒重的福多司坦对照品50 mg，精密称定，置10 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，制成福多司坦贮备液。

精密量取贮备液10 mL，溶50 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，制成福多司坦1.0 mg/mL的对照品溶液。

1.2.3 供试溶液的制备精密量取福多司坦原料药100 mg，置100 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即成福多司坦原料药供试品溶液。

2 结果
2.1 系统适应性试验
在前述色谱条件下，分别精密吸取福多司坦对照品溶液，福多司坦原料药供试品溶液20μL进样，色谱图见图1。

福多司坦保留时间为 6.5 min，色谱柱理论塔板数按福多司坦计算不少于3 000。

2.2 线性与范围
精密吸取“2.2项”下福多司坦贮备液适量，用流动相分别稀释成浓度为0.25、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mg/mL，分别精密吸取20μL在“2.2项”下色谱条件下进样。

用测得的福多司坦面积A对浓度C作标准曲线，其直线方程为y=1575.2x-1319，r=0.989 242。

结果表明，浓度在0.25～2.5 mg/mL范围内，峰面积和测定浓度保持良好的线性关系。

2.3 精密度试验
2.3.1 精密度精密吸取含量测定用的福多司坦对照品溶液20μL，照含量测定方法注入高效液相色谱仪，重复进样6次，依法测得峰面积，以峰面积考察其精密度，结果证明精密度试验良好，平均峰面积为3 696.07，RSD=1.4%。

2.3.2 重复性精密称定同一批次的福多司坦原料药6份，配置成1 mg/mL 的溶液，依次进样，平均峰面积为3 614.57，RSD为0.9%。

2.4 稳定性试验
精密吸取同一浓度供试品溶液20μL，室温放置，分别在2，4，6，8，10，12 h测定峰面积，峰面积基本不变，平均峰面积为3 748.46，RSD为1.6%，说明样品稳定性良好。

2.5 加样回收率试验
取已知含量的福多司坦原料药样品9份，分别加入福多司坦原料药对照品相当于福多司坦原料药样品中已知含量的80%，100%，120%，按含量测定的方法，进行回收率测定结果，3种加入量福多司坦原料药的平均回收率为95.89%，RSD
为1.7%。

见表1。

2.6 样品测定
取对照品溶液和供试品溶液，按上述色谱条件进行进样，色谱分析按外标法计算含量，结果见表取福多司坦供试品，精密吸取20μL在上述色谱条件下测定3次，由对照品溶液所得福多司坦原料药的线性关系计算含量的RSD值分别为0.17%、0.09%、0.12%。

3 讨论
3.1 波长的选择
将对照品溶液在200～400 nm处进行紫外扫描，以最大吸收波长220 nm作为该样品检测波长最为合适。

3.2 流动相的选择
本实验考察了不同流动相条件下样品色谱峰的分离情况。

因为本品的极性较大，为使本品与有关物质能获得良好的分离，故考虑尽量增加流动相中水的比例。

故采用水-甲醇（99.5 ：0.5）为流动相。

同时考虑到样品与杂质峰更好的分离，选择流速为0.8 mL/min。

实验证实，选择此流动相简单、方便、快捷。

[参考文献]
[1] 许茜，李杰，王燕，等.高效液相色谱法测定福多司坦口服溶液的含量、有关物质及对其稳定性的初步研究[J].药物分析杂志，2006（10）：1457-1460.
[2] 张军霞，仲平.高效液相色谱法测定福多司坦的含量[J].中国卫生检验杂志，2009，19（6）：1287-1288，1445.
[3] 胡士高.高效液相色谱法测定福多司坦胶囊的有关物质[J].中国实用医药，2007，38（12）：26-27.
[4] 张崭，王玲，屈凌波.福多司坦胶囊的制备及其处方优化[J].河南师范大学学报，2010，36（6）：98-100.
[5] 宋小莉，郑文.高效液相色谱法测定福多司坦片的含量[J].药物分析杂志，2005，25（9）：1143-1144.
[6] 沈敏.反相高效液相色谱法测定福多司坦片的含量[J].齐鲁药事，2005，24（18）：464-465.。